酵母菌的培养

回顾复习：（1）酵母菌

酵母菌是单细胞真核生物

酵母菌呼吸方式为兼性厌氧型 酵母菌生殖方式为出芽生殖、孢子生殖探究培养液中酵母菌数量的动态变化

（2）种群数量的变化•

种群数量的变化包括增长、波动、稳定、下降等•

“S”型曲线有一个K值，即环境容纳量。•

种群数量的增长也受到许多环境因素（如温度、培养液的pH、培养液的养分种类和浓度、代谢产物等）的影响。探究培养液中酵母菌数量的动态变化

1．实验目的：（1）尝试建构酵母菌种群增长的数学模型。（2）用数学模型解释种群数量的变化。（3）学会使用血球计数板进行计数。2.实验步骤： 1）培养基的配置 2）培养基灭菌 3）接种 4）酵母菌的培养28℃，连续培养7天 5）抽样检测计数 6）记录并分析结果液体培养基

随机取样，多次计数，取平均值

如何计数？血球计数板构造：实物图正面图纵切面图计数室，2个滴液处深度面积

血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物的一种仪器。一个特制的可在显微镜下观察的玻片大方格中方格小方格计数室平台上有九个大方格的方格网，中间大方格为计数室计数室放大计数室有两种规格：一是分为16个中方格，每中方格中有25个小方格；另一种是分为25个中方格，每中方格有16个小方格。两种都共有400个小方格。计数室计数时用25中格的计数板，要按对角线方位，取左上、左下、右上、右下、中央5个中格(即80小格)的酵母菌数。如果是16中格计数板,则只数四角上的四格酵母菌数（即100小格）。然后求出一个小方格的细胞平均数(N)放大放大对于压在小方格界线上的酵母菌应取相邻两边及顶角计数。c.从试管中吸出培养液进行计数之前，要将试管轻轻震荡几次，用滴管吸取少许，从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的下边缘摘入一小滴（不宜过多，将计数室充满即可），勿使气泡产生，并用吸水纸吸去沟槽中流出的多余菌悬液。5）计数

a.视待测菌悬液浓度，以每小格的菌数可数为度。培养后期的样液稀释后再计数，加无菌水适当稀释，如菌液不浓，可不必稀释。b.取洁净的血球计数板一块，在计数区上盖上一块盖玻片。d.静置片刻（待细胞全部沉降到计数室底部），将血球计数板置载物台上夹稳，先在低倍镜下找到计数区后，再转换高倍镜观察并计数.由于生活细胞的折光率和水的折光率相近，观察时应减弱光照的强度。滴液处

e．一般选取计数室内四个角及中央五个中方格计数，若细胞位于小方格的线上，应遵循“数上线不数下线，数左线不数右线”的原则，以减少误差。f.对于出芽的酵母菌，芽体达到母细胞大小一半时，即可作为两个菌体计算。每个样品计数应重复3次（每次数值不应相差过大，否则应重新操作），取其平均值,求出每一个小格中细胞平均数（N），按公式计算出每ml菌悬液所含酵母菌细胞数量。公式附后g.测数完毕，取下盖玻片，用水将血球计数板冲洗干净，切勿用硬物洗刷或抹擦，以免损坏网格刻度。洗净后自行晾干或用吹风机吹干，放入盒内保存。6）记录实验结果每天同一时间，各组取出本组的试管，用血球计数板计数酵母菌个数，并作记录，连续观察7天。多次测量取平均值。减少误差，力求准确。7）分析实验结果，得出结论a、根据表格平均值作出培养液中酵母菌种群数量7天中的变化曲线。b、酵母菌种群数量随时间呈_____型增长变化。S第4天第6天第1天死亡第7天此法计得的是活菌体和死菌体的总和每隔24小时取样计数。(注意计数时间每天要固定)1、如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应当采取怎样的措施？无菌水稀释后，再用血球计数板计数.2.讨论：血球计数板上的误差应如何减少，力求准确？多次测量取平均值。一个小组取同样的菌液进行计数，取平均值。计算公式：A/5×25×B以一个大方格有25个中方格的计数板为例进行计算：假设五个中方格中总菌数为A，菌液稀释倍数为B，那么，一个大方格中的总菌数（即0.1mm3中的总菌数）为：提示：1ml＝1cm3=1000mm31ml菌液总的总菌数为：＝A/5×25×B×10×1000＝50000A·B（个）如果计数板大方格中有16个中方格，四个中方格中总菌数为A，稀释倍数为B,那么，又该如何计算呢巩固练习在计算酵母菌个数的时候经常用到血球计数板，下列说法正确的是（）A.血球计数板只能对活细菌计数B.血球计数板每个计数室内的容积为1mm3C.血球计数板在滴加样品的时候应该先滴加，后盖盖玻片D.遇酵母出芽，芽体大小达到母细胞的一半时，即作为两个菌体计数0.1mm3？

在探究酵母菌种群数量变化时，酵母菌计数通常采用显微镜下观察并用血球计数板计数的方法。血球计数板（见右图）有16个中方格，每个中方格有25个小方格，小方格的边长为Xmm，加盖盖玻片后的深度为Ymm。若显微镜下观察一个小方格内的酵母菌数为A，则1mL培养液中酵母菌数为（1mL=1000mm3）

A．1000A/X2Y B．300A C．3×103A/X2Y D．AX2Y/1000取小量酵母菌液直接放入血球计数板直接计数,测得的数目是

A.活细胞数

B.死细胞数

C.菌落数

D.细胞总数

直接用血球计数板法无法区分死细胞和活细胞的,计得的是活菌体和死菌体的总和死亡在“探究培养液中酵母菌种群数量的变化”实验中，某同学用显微镜观察计数，统计发现血球计数板的小方格(2mm×2mm)内酵母菌数量的平均值为13个。假设盖玻