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文档简介
实验一
动物细胞制片技术及减数分裂观察一、实验目的
1、了解动物生殖细胞的形成过程,观察减数分裂过程中染色体的动态变化;
2、学习并掌握制片和染色技术。
二、实验原理
减数分裂是一种特殊方式的细胞分裂,仅在配子形成过程中发生。这一过程的特点:
1、连续进行两次核分裂,而染色体只复制一次,结果形成四个核,每个核只含单倍体数的染色体,即染色体数减少一半,所以称为减数分裂;
2、前期特别长,而且变化复杂,包括同源染色体的配对、交换与分离。整个减数分裂过程可分为下列几个时期:减数第一次分裂
前期Ι
细线期:第一次分裂开始,染色质浓缩为几条细而长的细线。每一条染色体已复制为二个单体,但在显微镜下仍看不出染色体的双重性。(减数I前期-----细线期)偶线期:染色体形态与细线期没有多大差别,同源染色体开始配对(联会),出现联会复合体。(减数Ι前期-----偶线期)粗线期:同源染色体配对完毕,称双价体,每个双价体含有四个染色单体(四分体)。染色体继续变短变粗。(减数Ι前期-----粗线期)双线期:配对的同源染色体开始分开。由于非姊妹染色单体间发生过交换,因此有交叉现象。交叉数减少,交叉向染色体端部移动(交叉端化),染色体螺旋化程度加深。(减数Ι前期----双线期)
浓缩期:又称终变期,仍为n个双价体,染色体变得更短粗。核仁核膜消失。(减数Ι前期-----浓缩期)中期Ι
:各个双价体排列在赤道板上,纺锤体形成,两个同源染色体上的着丝粒逐渐远离。双价体开始分离。染色体仍为2n,每一染色体含有两个染色单体。(减数Ι-----中期)后期Ι:两条同源染色体分开,分别移向两极。每一条染色体有一着丝粒,带着两个染色单体。每一极得到n条染色体。染色体数目减半。(减数Ι-----后期)末期Ι:染色体解旋,又呈丝状,核膜形成,胞质分裂,成为二个子细胞。(减数Ι-----末期)间期:在减数第二次分裂开始以前,两个子细胞进入间期。但有的植物如延龄草和大多数动物不经过末期和间期,直接进入减数第二次分裂的晚前期。(间期)前期
Ⅱ
:染色体缩短变粗,染色体开始清晰起来。每个染色体含有一个着丝粒和纵向排列的两条染色单体。(减数Ⅱ-----前期)中期Ⅱ:染色体排列在赤道面上,每个染色体有一个着丝粒,两条染色单体开始分离。此时细胞的染色体数为n,每条染色体有两条染色单体。(减数Ⅱ-----中期)减数第二次分裂后期Ⅱ:
两条染色单体分离,移向两极,每极含n条染色体。(减数Ⅱ-----后期)末期Ⅱ:
染色体逐渐解螺旋,变为细丝状,核膜重建,核仁重新形成。胞质分裂,各成为两个子细胞。(减数Ⅱ-----末期)
减数分裂模式图
减数分裂结果:
一个细胞经减数分裂形成四个子细胞,每个子细胞中有n个染色体。因为细胞分裂两次,染色体只复制一次。三、实验材料短角斑腿蝗(Catantops
brachycerus)精巢四、实验仪器和试剂
仪器:冰箱,显微镜试剂:Carnoy固定液,1NHCL,70%乙醇,改良苯酚品红染液
五、实验步骤
1、采集蝗虫:
随蝗虫物种的不同,采集时间有变化。
采集方法可用手抓或用网捕捉。如短角斑腿蝗喜温暖,可在十月左右,在晴天阳光下的草地用扫网捕捉。
2、取材固定:
用镊子夹住雄虫尾部,向外拉。可见到一团黄色组织块,这就是蝗虫的精巢。剔除精巢上的其他组织,将其放到Carnoy
固定液中固定1.5-2小时,再放入70%酒精溶液中。
3、剥曲精细管:切取较粗端,约占全长的1/3-1/2(粗端远离输精管,细胞分裂旺盛,细端近输精管,多已经生成精子),弃细端,蒸馏水冲洗,吸干水分。
4、1MHCL解离2-5分钟,蒸馏水多次冲洗(因为HCL影响染色)。
5、将材料放在载片上,滴一滴改良苯酚品红,染15-20分钟。
6、压片:在材料上加盖玻片,吸去多余染液,上覆吸水纸,用拇指压盖玻片。
7、镜下观察。
六.实验结果绘制观察到的减数分裂各时期、尤其是前期Ι各个时期染色体的变化图。
七.实验分析与讨论
1、分析此次实验成败的原因。
2、本次实验有哪些地方可以改进?
八.思考题
1、减数分裂的遗传学意义。
2、减数的机理是什么?
3、交叉和交换的关系。
九.参考文献
1.刘祖洞,江绍慧,《遗传学》,人民教育出版社,北京2.遗传学实验高等教育出版社3.遗传学实验方法和技术高等教育出版社附图减数Ι前期----细线期减数Ι前期----偶线期减数Ι前期----粗线期减数Ι前期----双线期减数Ι前期-----浓缩期(终变期)减数Ι-----中期减数Ι-----后期减数Ι-----末期间期减数Ⅱ-----前期减数Ⅱ-----中期减数Ⅱ-----后期减数Ⅱ-----末期减数Ι前期—细线期偶线期
粗线期双线期
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