第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析wydps

本章内容第一节结构与性质第二节鉴别试验第三节特殊杂质的检查第四节含量测定第五节体内药物分析（自学）中间连接功能基亲水性胺基酯键——对氨基苯甲酸酯类它是一类能在用药部位局部可逆性地阻断感觉神经冲动发生与传导的药物。局麻药物局麻药物的化学结构亲脂性芳香环概述酰胺键——酰苯胺类第一节结构与性质一、对氨基苯甲酸酯类药物的结构与典型药物芳胺类药物分为两类芳伯氨基被酰化芳伯氨基未被取代1、基本结构与典型药物对氨基苯甲酸酯母体2.典型药物苯佐卡因(benzocaine)盐酸普鲁卡因(procainehydrochloride)盐酸氯普鲁卡因(chloroprocainehydrochloride)苯环没有羟基取代，中枢作用加强α位有烃基，

α-C为手性C盐酸丁卡因(tetracainehydrochloride).盐酸普鲁卡因胺与盐酸普鲁卡因的化学结构仅存在羧酸酯与酰胺的差异,化学性质与本类药物很相似,因此一并讨论酰胺类二、酰苯胺类药物的基本结构与典型药物（一）本类药物均系苯胺的酰基衍生物，其结构共性是具有芳酰氨基，结构通式为：NHCO酰化盐酸布比卡因盐酸利多卡因盐酸罗哌卡因盐酸妥卡尼对乙酰氨基酚（扑热息痛）醋氨苯砜三、理化性质1.芳伯氨基特性：重氮化－偶合反应；芳醛缩合成Schiff碱；易氧化变色等。盐酸丁卡因无此特性。2.水解特性：分子结构中的酯键或酰胺键易水解，除盐酸丁卡因外水产物为对丁基苯甲酸外，上述均为对氨基苯甲酸。3.弱碱性：除苯佐卡因外，其余均含有叔胺氮的侧链，故具有弱碱性。4.与金属离子发生沉淀反应：利多卡因和布比卡因酰氨基上氮可与Cu2+,Co2+生成有色配位化合物沉淀。5.吸收光谱特性：对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类药物分子结构中均含有苯环及相应的取代基与脂肪胺侧链，具有特征的紫外吸收光谱和红外光谱行为。6.其它特性：因结构中有芳伯氨基或同时具有脂烃胺侧链，其游离碱多为碱型油状液体或低熔点固体，难溶于水，可溶于有机溶剂。其盐酸盐则易溶于水，难溶于有机溶剂。第二节鉴别试验(identification)一、重氮-偶合反应分子结构中含有芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物，均可发生此反应。Ar-NH2HClNaNO2重氮盐OH--萘酚橙黄~猩红色生成偶氮染料

直接反应：苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸普鲁卡因胺、对氨基水杨酸钠等间接反应：对乙酰氨基酚、非那西丁、醋氨苯砜、贝诺酯

但盐酸利多卡因、盐酸布比卡因由于它们的空间位阻效应，很难发生重氮化-偶合反应。1.苯佐卡因和盐酸普鲁卡因ChP（2010）[鉴别]（1）本品显芳香第一胺类的鉴别反应（附录Ⅲ）取供试品约50mg，加稀盐酸1m1，必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性β-萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙黄到猩红色沉淀。

丁卡因虽无芳伯氨基，但分子中的芳香仲胺在酸性溶液中可与NaNO2反应生成N－亚硝基化合物的乳白色沉淀。

1.与铜和钴离子反应：（芳酰氨的特征）

利多卡因与硫酸铜生成蓝紫色配位化合物，该有色物质溶入氯仿显黄色；与氯化钴生成亮绿色细小钴盐沉淀。二、与金属离子反应2.羟肟酸铁盐反应基于普鲁卡因胺分子中的

芳酰胺结构。芳酰胺羟肟酸3.与汞离子反应盐酸利多卡因+H2NO3+Hg(NO3)2黄色对氨基苯甲酸酯＋H2NO3+Hg(NO3)2红色或橙黄色三、水解反应1.盐酸普鲁卡因的鉴别

盐酸普鲁卡因+NaOH普鲁卡因油状物对氨基苯甲酸钠+二乙氨基乙醇（使湿润的红色石蕊试纸变兰色）对氨基苯甲酸钠+HCl对氨基苯甲酸（白色）（白色沉淀）2.苯佐卡因的鉴别

苯佐卡因+NaOH乙醇乙醇+I2

+NaOHCHI3（碘仿臭气，黄色沉淀）四、制备衍生物测定熔点

1.三硝基苯酚衍生物的制备：盐酸利多卡因和盐酸布比卡因黄色沉淀黄色沉淀

2.硫氰酸盐衍生物的制备：盐酸丁卡因

强酸制弱酸五、与亚硝基铁氰化钠反应(Rimini试验)

重酒石酸间羟胺的脂肪伯氨基重酒石酸间羟胺水溶解亚硝基铁氰化钠试液丙酮(无甲醛)数滴，碳酸氢钠少量△红紫色Rimini反应例子六、UV1.在λmax处测定供试液的吸光度。

例如：盐酸布比卡因在0.01mol/L%盐酸中于λmax=263nm和λmax=271nm测定最大吸收，其吸光度分别为0.53～0.58与0.43～0.48

2.在规定的浓度测定λmax

例如：醋氨苯砜5μg/ml;在λmax=256nm;284nm处有最大吸收。

盐酸普鲁卡因ChP（2010）

盐酸普鲁卡因胺[鉴别]（3）本品的红外光吸收图谱与对照的图谱一致。见书P244七、IR第三节特殊杂质检查

(Detectionofspecificimpurities)一、盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查怎样检查？采用HPLC进行检查。杂质来源：水解产生、脱羧、氧化流动相：磷酸二氢钾-甲醇=68:32检测波长：279nm二、盐酸利多卡因注射液中2,6-二甲基苯胺的检查采用HPLC进行检查。三、盐酸罗哌卡因光学纯度的检查盐酸罗哌卡因有两种对映体，一个是R构型，一个是S构型。其中R-盐酸罗哌卡因对心脏毒性大，要限制其含量，其限量是0.5%。采用CE进行检查。毛细管电泳系统组成单元1.分离通道毛细管；2.分离驱动力高压直流电源；3.毛细管控温装置；4.检测器及工作站。毛细管电泳分离原理

对于带同类电荷的分离对象，因其具有不同荷质比而被分离。可以用下图进行说明（电渗流反向的动态图）：毛细管电泳分离原理在本药品中因为左旋和右旋的迁移时间不一样而被分离采用了手性固定性第四节含量测定(Assay)一、亚硝酸钠滴定法Ar-NH2;Ar-NHCOR;Ar-NO2均可采用此法。即：具游离芳伯氨基的药物可用本法直接测定。具潜在芳伯氨基的药物，如具酰胺基药物（对乙酰氨基酚等）经水解，芳香族硝基化合物（如无味氯霉素）经还原，也可用本法测定。

Ch.P2010中的苯佐卡因、盐酸普鲁卡因和盐酸普鲁卡因胺及其制剂可直接采用本法；醋氨苯砜及注射液水解后用本法。还原1.原理：芳伯氨基或水解后生成芳伯氨基的药物，在酸性溶液中与亚硝酸钠定量发生重氮化反应，生成重氨盐。用永停滴定法指示终点。Ar-NHCOR+H2OAr-NH2+RCOOHH+Ar-NH2+NaNO2+2HClAr-N2+Cl-+NaCl+2H2O测定主要条件：(1)加KBr增加反应速度重氮化的反应历程为：NaNO2+HClHNO2+NaClHNO2+HClNOCl+H2OKHCl氯化亚硝酰Ar-NH2Ar-NH-NONO+Cl-慢快Ar-N=N-NO快Ar-N2+Cl-加入KBr后：KBr+HClHBr+KClHNO2+HBrNOBr+H2OKHBr∵KHBr比KHCl大300倍∴生成NOBr量大得多∴加快反应速度溴化亚硝酰若供试溶液中仅有盐酸，则生成NOClHNO2+HClNOCl+H2O氯化亚硝酰KHCl

(2)加过量HCl加速反应：

①重氮化速度加快；

②重氮盐在酸性介质中稳定；

③防止生成氨基偶氮化合物。

Ar-N2+Cl-+H2N-ArAr-N=N-NH-Ar+HCl

一般摩尔比为Ar-NH2:HCl=1:2.5~6。(3)室温条件下滴定:

温度高反应速度快；每升高10℃加快2.5倍但太高,可使Ar-N2+Cl-+H2OAr-OH+N2+HCl(4)滴定管尖端插入液面下滴定3.指示终点的方法(实验装置见书P250)

(1)永停滴定法溶液检流计

终点前：无过量无电流HNO2

终点时：有过量有电流（使指针偏离零

HNO2永停在某一位置）

(2)外指示剂法用KI-淀粉指示剂指示终点的原理：2NaO2+2KI+4HCl2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2OVV（3）内指示剂法

中性红不可逆指示剂（3）内指示剂法

中性红不可逆指示剂(4)电位法何所谓永停滴定法

永停滴定法又称死停滴定法（dead-stoptitration）(死停终点法)，是把两个相同的铂电极（或者其他金属电极）插入滴定溶液中，在两个电极之间外加一小电压,观察滴定过程中通过两个电极间的电流突变，根据电流的变化情况确定滴定终点。

它是氧化还原滴定和电位分析的完美结合。永停滴定法装置简单，准确度高，确定终点方法简便。价钱便宜、量又足，我们一直都用它永停滴定法的特点永停滴定法的原理

若溶液中同时存在某氧化还原对的氧化型及其对应的还原型物质，在此溶液中插入铂电极，按照Nernst方程式，铂电极将反映出I2/I-电对的电极电位。CompanyLogo铂铂（10~200mV）I2I-铂铂

像I2/I-这样的电对，于双铂电极构成电池，给一很小的外加电压时就能发生电解反应，称为可逆电对。若溶液的电对是S4O62-/S2O32-

,同样插入两支铂电极，同样给一很小的外加电压，但并没有电解反应发生，这种电对叫做不可逆电对。只有当两个铂电极之间的外加电压很大时，由于发生其他电极反应才发生电解。电对的分类1.不可逆滴定可逆2.可逆滴定不可逆3.不可逆滴定不可逆CompanyLogo铂铂（10~15mV）铂铂Na2S2O3

I2

在等当点前溶液中存在I2及I-离子，有电流通过两极，等当点后溶液中只有S4O62-/S2O32-及I-，无电解反应发生，电流降到最低点并停滞不动。滴定过程中的电流变化如图所示。不可逆滴定可逆不可逆滴定可逆(1)、（2）发生电解，则有电流通过。电流的大小取决于浓度低的那个形态，当氧化型和还原型的浓度相等时，电流最大。CompanyLogo铂铂Na2S2O3铂铂I2在等当点前溶液中只有S4O62-/S2O32-不可逆电对,虽然有外加电压，电极上也不能发生电解反应。达到等当点并稍过量一点I2后，因溶液中存在I2/I-可逆电对的两者，电极上发生电解反应，有电流通过电极，电流计发生偏转，说明达到终点。过等当点后随着I2浓度的逐渐增加，电解点列也逐渐增大。滴定过程中的电流变化情况如图所示。（10~15mV）可逆滴定不可逆CompanyLogo铂铂Fe2+铂铂

继续加入Ge4+离子，Fe2+离子浓度逐渐下降；电流也逐渐下降；达到终点时电流降至最低点。加入过量的Ge4+离子时，由于溶液中共存有Ge4+和Ge3+这一可逆电对，电流又开始上升。Ge4+（10~15mV）不可逆滴定不可逆开始滴定前溶液中只有Fe2+离子，因无Fe3+离子存在，阴极上不可能有还原反应发生，所以无电解反应发生，无电流通过。当Ge4+离子不断滴入时，Fe3+离子不断增加，因Fe3+/Fe2+可逆，电流不断增加；当[Fe2+]=[Fe3+]时，电流达最大值；二、非水滴定法(non-aqueoustitrimetry)弱碱性高氯酸非水滴定注：滴定前滴加醋酸汞溶液，以除去氢卤酸的干扰指示剂：结晶紫指示剂：萘酚苯甲醇盐酸丁卡因盐酸利多卡因侧链烃胺的叔胺氮侧链哌啶环的叔胺氮盐酸布比卡因盐酸丁卡因－加醋酐以突出终点盐酸布比卡因的含量测定：取本品约0.2g，精密称定，加冰醋酸20ml与醋酐20ml溶解后，照电位滴定法，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定，并将滴定的结果用空白实验校正。每1ml高氯酸滴定液（0.1mol/L）相当于32.49mg的C18H28N2O.HCl.滴定时反应过程如下：含量计算公式：三、紫外分光光度法1.对盐酸丁卡因的含量测定

根据朗伯比尔定律计算其含量。（P250-251,盐酸丁卡因的含量测定）四、HPLC此法主要用于盐酸普鲁卡因注射液的测定。因该注射液中常含有降解产物对氨基苯甲酸；可以苯甲酸为内标同时测定两者的含量，该法简单准确。色谱条件：色谱柱为μBondapakC18300mm×4mm

流动相为甲醇－1％HAc(40:60);UV检测器250nm.掌握苯乙胺类药物的结构性质；主要苯乙胺类药物的鉴别、检查和含量测定的原理和特点。熟悉主要苯乙胺类药物杂质的结构、危害、检查方法与含量限度。课后小结541.ChP（2010）亚硝酸钠滴定法测定对氨基水杨酸钠的含量时，指示滴定终点的方法为（）A.自身指示终点法B.电位法指示终点C.永停滴定法D.氧化还原指示剂法E.酸碱指示剂法

552.以下那种药物中应检查对氨基苯甲酸（）A.盐酸普鲁卡因B.盐酸普鲁卡因胺C.注射用盐酸普鲁卡因D.盐酸普鲁卡因胺片E.盐酸普鲁卡因注射液

563．下列药物中不能用亚硝酸钠滴定法测定含量者（）A.乙酰水杨酸B.对氨基水杨酸钠C.对乙酰氨基酚D.普鲁卡因E.苯佐卡因

574.亚硝酸钠滴定法中，加KBr的作用是（）A.添加BrB.生成NO+·Br

C.生成HBrD.生成Br2E.抑制反应进行

5．中国药典所收载的亚硝酸钠滴定法中指示终点的方法为（）A.电位法B.永停法C.外指示剂法D.内指示剂法E.自身指示剂法

596.盐酸普鲁卡因胺常用的鉴别反应有（）A.重氮化—偶合反应B.羟肟酸铁盐反应C.氧化反应D.磺化反应E.碘化反应

607．采用亚硝酸钠法测定含量的药物有（）A.苯巴比妥B.盐酸丁卡因C.苯佐卡因D.盐酸普鲁卡因E.盐酸去氧肾上腺素

618．亚硝酸钠滴定法中，可用于指示终点的方法有（）A.自身指示剂法B.内指示剂法C.永停法D.外指示剂法E.电位法

629.盐酸普鲁卡因采用亚硝酸钠滴定法测定含量时的反应条件是（）A.强酸B.加入适量溴化钾C.室温（10～30℃）下滴定D.滴定管尖端深入液面E.永停法指示终点

练习与思考[A型题]1．盐酸普鲁卡因注射液中检查的特殊杂质是A.水杨醛B.间氨基酚C.水杨酸D.对氨基苯甲酸E.氨基酚2．对乙酰氨基酚中检查的特殊杂质是A.水杨醛B.