病原体在肥达实验与外斐试验、临床应用、检测标本培养及临床意义

病原体在肥达实验与外斐试验、临床应用、检测标本培养及临床意义肥达实验1、病原体——伤寒杆菌（1）沙门菌属，G-杆菌，有鞭毛；释放内毒素致病（2）三种抗原：菌体抗原“O”和鞭毛抗原“H”——抗原性较强，可刺激机体产生相应抗体，有助于诊断表面抗原“Vi”——抗原性不强，但有助于发现带菌者2、病原体——副伤寒杆菌3种病原体：副伤寒甲杆菌、副伤寒乙杆菌、副伤寒丙杆菌每种副伤寒杆菌均有“O”和“H”抗原3、肥达反应

（1）伤寒杆菌凝集试验，Widalreaction（WR）（2）伤寒、副伤寒诊断的参考（3）一种血清凝集反应，用已知的伤寒杆菌O、H抗原和甲、乙、丙型副伤寒杆菌H抗原，测定患者血清中相应抗体（4）“O”抗原为伤寒、副伤寒甲、乙杆菌的共同抗原，三者的鞭毛抗原（“H”、“A”、“B”）不同4、结果判定：“有病无病先看O，是什么菌看H”（1）感染后1周左右出现抗体，3～4周阳性率可达70-80%（2）阳性结果：“O”抗体≥1:80，或有4倍增高者更有意义“H”或其他鞭毛抗体≥1:160，或有4倍增高者更有意义“O”抗体(IgM)-出现早，消失快；“H”抗体(IgG)-出现迟，维持时间长（3）临床意义：（4）其他：假阴性：早期应用抗生素；营养不良者；抗体免疫功能缺陷者；免疫功能尚未完善的幼儿假阳性：其他疾病，如血吸虫，败血症，结核，传染性肝炎，结缔组织病，肿瘤，溃疡性结肠炎等

5、伤寒确诊不能只靠肥达（1）临床：发热+体征+血RT/肥达伤寒临床六大特征：持续发热、相对缓脉、全身中毒症状、玫瑰疹、肝脾肿大、白细胞减少（2）确诊：发热+特异性抗体/病原学，病原学为诊断金标准外斐试验1、病原体——立克次氏体大小介于细菌与病毒之间，呈多形球杆状，Gram染色阴性，Giemsa染色紫色，寄生于真核细胞内，生物特性接近细菌，胞壁的脂多糖层有内毒素样作用2、病原体——变形杆菌（1）G-杆菌，无荚膜，有鞭毛（2）三个菌株：X19，X2，XK（3）三种抗原：菌体抗原“O”，鞭毛抗原“H”，抗原“K”3、外斐反应（1）变形杆菌O抗原凝集反应，Weil-Felixreaction（WFR）（2）变形杆菌用与立克次体有共同菌体抗原，进行非特异性凝集反应，检测病人血清中有无立克次体抗体4、结果判定（1）感染后5～12天出现抗体，至数月后基本消失（2）阳性结果：普氏立克次体：OX19凝集价≥1:160或病程中上升4倍以上，阳性率70-80%莫氏立克次体：OX19凝集价低滴度升高，阳性率70-85%（进一步诊断依赖于补体结合试验和立克次体凝集试验）恙虫病：OXK凝集价≥1:160或早晚期双份血清效价上升4倍以上，最早第4天出现阳性，3-4周达峰5、临床意义其他立克次体病：洛杉矶斑点热、立克次体痘、战壕热、Q热：（—）北亚蜱媒立克次体病：OX19、OX2（+），OXK（—）6、其他假阳性：变形杆菌性泌尿系感染；伤寒；钩端螺旋体病回归热；疟疾；布氏杆菌病；严重肝病；妊娠（轻度升高）肥达试验widaltest

1、正常效价。伤寒沙门菌O抗体<1:80，H抗体<1:160；副伤寒沙门菌H抗体<1:802、动态观察。2份血清，第二次效价增长4倍以上有意义3、O、H抗体的诊断意义O-Ab-IgM（出现早，持续短，难重现）；H-Ab-IgG（出现晚，持续长，易重现）O高H高——很可能是肠热症；O不高H不高——很可能不是肠热症；O不高H高—预防接种或者非特异性免疫反应；O高H不高——感染早期或与其他伤寒沙门菌O抗原有交叉反应的其他沙门菌感染。肥达氏反应是一种凝集反应，1896年由法国医师肥达（Widal）建立并用于临床，故名。用已知的伤寒沙门菌鞭毛（H）、菌体（O）抗原和甲、乙、丙型副伤寒沙门菌H抗原，与待测血清作试管或微孔板凝集试验，以测定血清中有无相应抗体存在，用于辅助诊断伤寒和副伤寒。机体感染伤寒、副伤寒沙门菌后会产生相应抗体，正常人因隐性感染或预防接种，血清中可含有一定量的抗体。一般当H≥1∶160，O≥1∶80，副伤寒凝集价≥1∶80时，才有诊断意义。肥达反应必须动态观察，病程中应每周复查一次，如病人H与O的凝集价均高于参考值或较原凝集价升高4倍以上，则患伤寒的可能性很大。若H凝集价高而O低于正常值，则可能是以往预防接种疫苗的结果或非特异性回忆反应所致。肥达氏试验受影响因素较多，存在一定比例假阴性和假阳性。故对结果的判断要综合分析，肥达试验阴性，亦不能排除患伤寒或副伤寒的可能。肥达氏反应主要是诊断伤寒杆菌的一种方法，其准确性较低，假阳性略高，但其操作方便。替代方法较多：血培养，准确性高，根据报导在病人发病7~10日可达90%的阳性率；酶联免疫、荧光免疫；粪便标本的培养；PCR检测等。伤寒的实验室诊断最经典的方法是肥达反应，已有100多年历史,始终伴随着争议。以往由于条件所限，肥达反应是疑似病例诊断为伤寒的唯一的实验室手段。但肥达反应存在诸多问题，在诊断上不敏感不特异，已表现出显著的局限性，需要改用其他检测方法以克服肥达反应在检测特异性和灵敏度、以及检测时限上存在的问题。比如ELISA方法可以代替肥达反应来监测血清中抗原或抗体，是一种相对既灵敏又特异的诊断方法；还有其他一些商品化的IgM抗体检测试剂盒，包括Tubextest、Typhidot/Typhidot-M、IgMDipstick等，其敏感性和特异性均优于肥达反应。分离培养法是最基本也是诊断伤寒病例的金标准。培养所用的标本可有骨髓、血液、粪便和尿液。由于培养方法受标本采集时机和抗生素应用的影响，阳性率会大大降低，而且培养所需时间较长，因此该方法存在明显不足，但可为预防控制，预测伤寒的流行趋势，菌株的进化关系等提供基础资料。PCR检测标本中的伤寒沙门菌核酸，是最为敏感和特异的诊断方法。但PCR方法容易受污染影响，另外伤寒和甲型副伤寒沙门菌是胞内寄生菌，抗生素的滥用加