20 生物化学实验-磷钨酸-镁沉淀法测定血清高密度脂蛋白胆固醇含量_第1页
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文档简介

磷钨酸-镁沉淀法测定血清高密度脂蛋白胆固醇含量【目的】作方法。．了解测定血清高密度脂蛋白胆固醇含量的临床意义。【原理】成的难易程度与脂蛋白分子中蛋白质/脂类的比例有关，比值愈小、脂类含量CM、VLDLLDLHDL显色法与同样处理过胆固醇标准液进行比色后，求得血清中HDL-ch的含量。【器材】．722型分光光度计．离心机和离心管．中号试管．刻度吸量管．微量移液器【试剂】．磷钨酸钠-镁溶液4g溶于50ml1mol/LNaOH16ml100ml，调至pH为7.6。取此液40ml2mol/LMgCl210ml100ml。．邻苯二甲醛溶液（1）（0.1g/dl称取邻苯二甲醛100mg溶于100ml置棕色瓶内保存。（2）（5mg/dl取储存液50ml20ml1000ml。置棕色瓶内。．浓硫酸（A·R）．生理盐水．胆固醇标准液（40mg/dl）称取胆固醇40mg溶于100ml冰乙酸中。【操作】．HDL的分离1支（9×70mm），加入0.2ml0.05ml磷钨酸钠-镁溶102500r/min离心10CMLDLVLDLHDL。．HDL-ch含量的测定取试管3支，标明空白管、标准管及测定管，按下表操作。试剂（ml）空白管标准管测定管含HDL的上清液--0.05胆固醇标准液-0．05-生理盐水0．05--邻苯二甲醛溶液2．52．52．5浓硫酸1．51．51．5将各管液混匀后，于550nm波长处，以空白管调0，进行比色，分别读取并记录各管吸光度值。【计算】血清HDL-ch（mg/dl）＝血清HDL-ch（mmol/L）＝正常值：45～90mg/dl或1.17～2.33mmol/L【注意事项】．加浓硫酸时需将试管斜置，沿管壁加入，注意安全。145～90mg/dl或1.17～2.33mmol/L。【思考题】1．磷钨酸-

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