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文档简介
生物选修1酶的应用、蛋白质提取和分离、植物有效成分的提取倒计时1天专题酶的研究与应用1.
是分解果胶的一类酶的总称,包括
、
和
。2.
可以瓦解植物的
及
,使
的果汁里的
分解成
,而使果汁变得
。因此,可以用
和
来判断果胶酶的活性。3.设置
实验可以探究它们对酶活性的影响。果胶酶多聚半乳糖醛酸酶果胶酯酶果胶酶果胶分解酶细胞壁胞间层浑浊果胶可溶性的半乳糖醛酸澄清出汁率澄清度温度梯度、pH梯度4.果胶酶活性的实验观测方法:一是反应相同时间后,反应液过滤相同时间,用量筒测量
,
;二是反应相同时间后,通过
。5.
的酶制剂有四类:
(最广泛)、淀粉酶和纤维素酶。6.
能将
转化成
。该酶固定化后的优点:
。7.固定化技术包括:(1)
→用多孔性载体(海藻酸钠)固定
;(2)
→用于固定酶。出汁率果汁量越多,酶活性越高比较果汁的澄清度来比较酶活性的高低碱性蛋白酶和脂肪酶加酶洗衣粉葡萄糖异构酶葡萄糖果糖能与反应物接触,也能与产物分离,还可以被反复利用,降低成本包埋法细胞化学结合法与物理吸附法8.固定化酵母细胞的方法:包埋剂
与
混合均匀后,用注射器滴加到凝固剂
溶液中形成
。9.制备凝胶珠时,(1)海藻酸钠浓度过低,
;(2)CaCl2浓度过低,制得的凝胶珠过软,呈椭形;(3)CaCl2浓度过高,制得的凝胶珠过硬,
。海藻酸钠酵母菌细胞凝胶珠
CaCl2
酵母菌细胞会暴露在表面,固定效果差不利于溶液(底物)进入凝胶内部发酵专题蛋白质技术血红蛋白的提取和分离1.血红蛋白的提取和分离一般分为四步:样品处理→
→
→纯度鉴定。2.第一步
的注意事项(1)洗涤红细胞(用
洗涤的目的是
)→①柠檬酸钠的作用是防止
;②低速短时离心的作用是
;粗分离样品处理生理盐水去除杂蛋白血液凝固防止白细胞和淋巴细胞沉淀纯化③缓慢搅拌的目的是
;④洗涤干净的标志是
。(2)释放血红蛋白→①蒸馏水的作用是
;②加入甲苯的作用是
;③置于磁力搅拌器上充分搅拌10min的目的是
。(3)
血红蛋白溶液→①2000r/min离心10min,从上到下第三层红色透明液为血红蛋白溶液;②滤纸过滤除去脂溶性沉淀层;③分液漏斗内静置,分出下层红色透明液。防止红细胞破裂离心后上清液中没有黄色溶解红细胞的细胞膜加速红细胞的破裂使红细胞大量吸水破裂分离3.第二步
的注意事项(1)透析膜是
,蛋白质是大分子,它不能透过透析膜,而小分子物质可以自由通过透析膜与周围的缓冲溶液进行溶质交换,进入透析液中。(2)1mL血红蛋白溶液装入透析袋中,再置于
中透析12h。(3)磷酸缓冲液的作用:
。4.第三步
的注意事项(1)纯化方法:
,又称为
。粗分离半透膜磷酸缓冲液调节pH,避免pH变化引起蛋白质结构改变凝胶色谱法分配色谱法纯化(2)原理:
。(3)纯化的步骤:①凝胶色谱柱的制作;②凝胶色谱柱的填装;③样品的加入和洗脱。注意:色谱柱装填时
,因为
;色谱柱制作成功的标志是
。5.第四步
的注意事项纯度鉴定方法:
。根据被分离物质的蛋白质相对分子质量的大小,利用微小的多孔球体凝胶分子来进行分离。分子量较小的蛋白质进入凝胶内部,路程长、移动速度慢;分子量较大的蛋白质在凝胶外移动,路程短、移动速度快色谱柱中不能有气泡气泡会扰乱蛋白质的洗脱次序红色区带均匀一致地向下移动纯度鉴定
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法专题植物有效成分的提取1.玫瑰精油(易挥发)——
;橘皮精油——
;胡萝卜素(橘黄色,不溶于水,易溶于石油醚)——
。2.采用哪种方法提取,取决于提取物的属性。如有效成分易挥发,化学性质稳定,不易水解,则选用蒸馏法。3.水蒸气蒸馏法的原理:利用
将挥发性较强的植物芳香油携带出来,形成
,冷却后,混合物又重新分出
和
。4.蒸馏的
会影响提取物的品质,若蒸馏
,则产品
。
水蒸气蒸馏法压榨法萃取法水蒸气油水混合物油层水层温度和时间温度高、时间短品质差5.柑橘和柠檬在水中蒸馏会导致原料焦糊和效成分水解等问题。
6.水蒸气蒸馏得到的油水混合物中加
NaCl有利于油水分层
;加无水NaS
吸水。
7.压榨橘皮时先用石灰水浸泡(分解果胶,防止橘皮滑脱)可
提高出;;NaHCO3和Na2SO4可使橘皮油易于与水分离。
8.β-胡萝卜素可氧化成维生素A,缺乏维生素A可引起疾病,如夜盲症、干皮症和幼儿生长发育不良。
9.β-胡萝卜素的提取方法:一是从植物中提取,二是从岩藻中获得,三是微生物发酵生产。
柑橘和柠檬原料焦糊有效成分水解NaCl有利于油水分层无水Na2SO4
石灰水浸泡提高出油率夜盲症、干皮症和幼儿生长发育不良岩藻10.萃取剂的特点:较高沸点;充分溶解胡萝卜素;不与水混溶(所以不能用酒精作为萃取剂)。
11.萃取时,原料颗粒小,萃取时间长,萃取温度高
,则萃取效果相对较好。
12.萃取的效率主要取决于萃取剂的性质和使用量。
13.萃取时应水浴加热
是为了防止有机溶剂燃烧、爆炸;回流冷凝装置可以防止有机溶剂挥发。
14.胡萝卜素的鉴定方法:纸层析法。
15.萃取胡萝卜素的步骤:胡萝卜→粉碎
→干燥
→萃取
→过滤
→浓缩
→胡萝卜素。较高沸点;充分溶解胡萝卜素;不与水混溶原料颗粒小,萃取时间长,萃取温度高萃取剂的性质和使用量水浴加热回流冷凝装置纸层析法粉碎干燥萃取过滤浓缩这部分的题型多为实验题。实验题的答题模板:一审“实验目的”,找出自变量和因变量。二析“实验原理”。三辨“材料用具”,依据所给材料,消去已用材料,分析选用未用材料。四套“实验步骤”,①材料分组(对照原则);②材料处理(单一变量原则);③观察记录。五述“实验结果、结论”,依据原理写出实验结果,实验结论照抄实验目的。
加酶洗衣粉A加酶洗衣粉B加酶洗衣粉C无酶洗衣粉(对照)血渍++++++++油渍++++++++【例】加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉。某同学通过实验比较了几种洗衣粉的去渍效果(“+”越多表示去渍效果越好),实验结果见下表。根据实验结果回答下列问题:(1)加酶洗衣粉A中添加的酶是
;加酶洗衣粉B中添加的酶是
;加酶洗衣粉C中添加的酶是
。
蛋白酶脂肪酶蛋白酶和脂肪酶(2)表中不宜用于洗涤蚕丝织物的洗衣粉有
,原因是
。
(3)相对于无酶洗衣粉,加酶洗衣粉去渍效果好的原因是
。
(4)关于酶的应用,除上面提到的加酶洗衣粉外,固定化酶也在生产实践中得到应用,如固定化葡萄糖异构酶已经用于高果糖浆生产。固定化酶技术是指
。固定化酶在生产实践中应用的优点是
(答出1点即可)。加酶洗衣粉A和加酶洗衣粉C蚕丝织物的主要成分是蛋白质,会被蛋白酶催化水解酶可以将大分子有机物分解为小分子有机物,小分子有机物易溶于水,从而将污渍与洗涤物分开利用物理或化学方法将酶固定在一定空间内的技术固定在载体上的酶可以被反复利用,可降低生产成本(或产物容易分离,可提高产品的产量和质量,或固定化酶稳定性好,可持续发挥作用)1.甘薯俗称“红薯”,它含有丰富的糖、蛋白质和膳食纤维。民间常用甘薯酿酒,从而提高其经济价值。请回答下列问题:(1)为提高甘薯的利用率,在工业化生产时,可加入果胶酶和淀粉酶,其中果胶酶可将果胶分解为
。
(2)利用酵母菌发酵甘薯汁,常需要将温度控制在
。(3)为了提高酵母菌的利用率,研究人员对酵母菌进行了固定化,过程如下:酵母细胞活化→
→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母细胞混合→固定化酵母细胞。
答案半乳糖醛酸18~25℃配制CaCl2溶液海藻酸钠溶化时,最好采用
的方法。上述固定酵母细胞的方法称为
法。活化是指
。
(4)普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱,现通过基因工程方法得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种。以淀粉为原料,用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵一段时间后,接种
菌的发酵罐需要先排气,其原因是
。小火间断加热包埋让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态答案解析工程酵母工程酵母菌利用淀粉的能力更强,产生CO2的速率更快2.姜黄素是传统的药食两用植物,姜黄素类化合物具有抗肿瘤活性,临床应用十分广泛。β-胡萝卜素是一种色泽鲜艳、对人体有益的天然色素类食品添加剂。请回答下列有关姜黄素和胡萝卜素提取的问题:(1)姜黄素微溶于水,可溶于乙醇、丙酮和氯仿等。从新鲜黄姜中提取姜黄素时常用的方法是
法,其原理是植物芳香油易溶于
。提取时要注意溶剂的性质和
,以提高萃取效率。
(2)提取姜黄素的过程中应该避免直接用明火加热,而要采用
,这是因为
。
萃取答案有机溶剂使用量水浴加热有机溶剂都是易燃物,直接使用明火加热容易引起燃烧、爆炸(3)从胡萝卜中提取胡萝卜素时常用萃取法。以下为提取胡萝卜素的实验流程:胡萝卜→粉碎→A→萃取→B→浓缩→胡萝卜素。其中,B过程叫
,其作用是
。(4)下图的胡萝卜素的结果示意图中,A、B、C、D四点中,属于提取样品的样点是
。B和C过滤除去萃取液中的不溶物3.鸭梨醋饮属于绿色健康饮品,既保存了鸭梨中的多种氨基酸、维生素、
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