药物化学第三章素材教学内容

药物化学第三章素材基本要求

一、熟悉药物中杂质的来源、类别及限量检查方法二、掌握一般杂质检查的原理、方法和计算。三、熟悉特殊杂质检查的方法和原理。返回一、药物的纯度要求1．药物纯度的概念：药物的纯度是指药物的纯净程度，是反映药品质量优劣的重要指标，含有杂质是影响药物纯度的主要因素。

杂质：（forin、impurities）

①有毒副作用的物质②本身无毒副作用，但影响药物的稳定性和疗效的物质

第一节概述例如：度冷丁1948年收入BP，1970年经GC分离鉴定出两种无效异构体（Ⅱ）和（Ⅲ），有时高达20%～30%。目前，ChP、USP、BP均对这些杂质的量加以控制。再如：ASA中除了SA外，还存在乙酰水杨酸酐、乙酰水杨酰水杨酸等SA的衍生物，具有致敏作用，应加以注意。3.药物纯度的评价：

应把药物的性状、理化常数、杂质检查、含量测定等作为一个有联系的整体来评价药物的纯度。2.药物纯度的要求在不断提高二、杂质的来源与种类了解药物中杂质的来源和种类，可制定出检查的项目和方法。杂质的概念：药物中存在的无治疗作用，影响药物的疗效和稳定性，甚至对人体健康有害的物质，称为药物的杂质。（一）杂质的来源两个方面：一是生产过程引入；二是在贮藏过程引入。1.生产过程中引入的杂质主要指药物在合成过程中，未反应的原料、中间体和副产物、试剂、溶剂、催化剂、金属器皿等例如：药用NaCl的Br-、I-、SO42-、K+、Ca2+、Mg2+、Fe3+ASA中的SA；地西泮中的去甲安定；吗啡中的罂粟碱再如制剂中生成的杂质：ASA片、栓剂中SA的检查；盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸和二乙氨基乙醇的检查。

另外，生产过程中残留有机溶剂、酸性或碱性杂质的检查。

药物中无效、低效异构体或晶型的检查例如：无味氯霉素存在A、B晶型，其中B为有效，A为低效。苯甲咪唑有A，B，C三种晶型；20%；40%～60%；90%。

2.贮藏过程引入的杂质主要指外界条件的变化或微生物的作用可能发生的水解、氧化、异构化、晶型转化、聚合等变化，而产生的有关杂质。如：ASA水解生成SA和醋酸；阿托品水解生成莨菪醇和莨菪酸；麻醉乙醚氧化为醛和有毒的过氧化物等。易发生水解反应的结构：酯、内酯、酰胺、酰肼、卤代烃、苷类等易发生氧化反应的结构：醚、醛、酚羟基、芳伯氨基、巯基、亚硝基、双键等（二）杂质的种类与分类

按杂质来源可分为一般杂质和特殊杂质；按性质可分为信号杂质和有害杂质。

一般杂质：在自然界中分布较广泛，在多种药物的生产和贮藏过程中容易引入的杂质。

特殊杂质：在个别药物的生产和贮藏过程中容易引入的杂质。

信号杂质；一般无害，但其含量的多少可以反映出药物的纯度水平，氯化物、硫酸盐等就属于信号杂质。

有害杂质：如重金属、砷盐、氰化物等，对人体有害，在药品标准中必须严格控制。

一般杂质：广存于自然界，多数药物容易引入的杂质。包括氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐、酸、碱、水分、易炭化物、炽灼残渣等。一般杂质其检查方法收载在中国药典的附录中。2.特殊杂质：指某一个或某一类药物的生产或贮藏过程中引入的杂质，如阿司匹林中的游离水杨酸、异烟肼中的游离肼、甾体激素中的其他甾体。特殊杂质检查方法收载在中国药典正文各药品的质量标准中。（三）药物的纯度于化学试剂的纯度药物的纯度主要考虑杂质的生理作用，药品只有两个等级：合格或不合格。

化学试剂有很多等级，如基准试剂、优级纯（GR）、分析纯（AR）、化学纯（CP）、色谱纯、光谱纯。习题1在药物生产过程中引入杂质的途径为：

A.原料不纯或部分未反应完全的原料造成

B.合成过程中产生的中间体或副产物分离不净造成

C.需加入的各种试剂产生吸附，共沉淀生成混晶等造成

D.所用金属器皿及装置等引入杂质

E.由于操作不妥，日光曝晒而使产品发生分解引入杂质

习题2中国药典（2005年版）中规定的一般杂质检查中不包括的项目是

A.硫酸盐检查

B.氯化物检查

C.溶出度检查

D.重金属检查

E.砷盐检查

习题3临床所用药物的纯度与化学品及试剂纯度的主要区别是A.所含杂质的生理效应不同B.所含有效成分的量不同C.所含杂质的绝对量不同D.化学性质及化学反应速度不同E.所含有效成分的生理效应不同三、杂质的限量检查

1．杂质限量的概念药物中所含杂质的最大允许量，叫做杂质限量。通常用百分之几或百万分之几（ppm）来表示。

杂质量≤杂质限量＜杂质量药品合格药品不合格

（1）

对照法限量检查法（LimitTest）特点：不需知道杂质的准确含量（2）

灵敏度法在供试品溶液中加入试剂，在一定反应条件下，不得有正反应出现。特点：不需对照品（3）

比较法含量测定法：测定杂质的绝对含量，如测定吸光度、pH。特点：准确测定杂质的量，不需对照品2、药物的杂质检查法

3．杂质限量计算杂质限量的计算公式：

例1．对乙酰基酚中的氯化物的检查：已知：S=2.0g×25/100；C=10μg/ml；V=5.0ml

求：L=？

解：L=C×V/S×100%=10×5.0/2.0×106×25/100×100%=0.01%

例2．葡萄糖中重金属的检查：已知：S=4.0g；C=10μg/ml；L=5×10-6

求：V=？

解：V=L×S/C=5×10-6×4.0/10×10-6=2.0(ml)

例3．葡萄糖中砷盐的检查：已知：V=2.0ml；C=1μg/ml；L=0.0004%

求：S=？

解：S=C×V/L=1×10-6×2.0/4×10-6=0.5(g)

例4．磷酸可待因中吗啡的检查：已知：V=5.0ml；C=0.02mg/ml；S=0.1g

求：L=？

解：L=C×V/S=5.0×0.02/0.1×1000×100%=0.1%

注意点①单位一致②稀释倍数③表示方法（%，mmp）返回

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练习1

检查某药物中的砷盐，取标准砷溶液2ml（每1ml相当于1g的As）制备标准砷斑，砷盐限量为0.0001％，应取供试品的量为

A.0.20gB.2.0gC．0.020gD.1.0gE.0.10g

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练习2

检查维生素C中的重金属时，若取样量为1.0g，要求含重金属不得过百万分之十，问应吸取标准铅溶液（每1ml＝0.01mg的Pb）多少ml？A.0.2mlB.0.4mlC．2mlD

A.0.2mlB.0.4mlC．2mlD.1mlE.20ml第二节一般杂质的检查方法

一、一般杂质检查规则

《药品检验操作标准》规定：

1.遵循平行操作原则（（1）仪器的配对性如纳氏比色管应配对，刻度线高低相差不超过2mm，砷盐检查时导气管长度及孔的大小要一致（2）对照品与供试品的同步操作（试剂、温度、时间等）第二节一般杂质的检查方法

2.正确的取样及供试品的称量范围≤1g不超过±2%，＞1g不超过±1%3.正确的比色、比浊方法4.检查结果不符合规定或在限度边缘时应对供试管和对照管各复查二份第二节一般杂质的检查方法二、氯化物的检查（无害、信号杂质）1．原理：是利用氯化物在硝酸性溶液中与硝酸银试液作用，生成氯化银的白色浑浊液，与一定量标准氯化钠溶液（10µgCl-

/ml）在相同条件下生成的氯化银混浊比较，以判断供试品中氯化物是否超过限量。Cl-+Ag+AgCl

2．条件：

[Cl-]0.05mg～0.08mg/50ml,即相当于标准氯化钠溶液5ml～8ml时所显浑浊梯度明显。

酸度稀硝酸10ml/50ml。（1）加速AgCl浑浊的形成；（2）产生较好的乳浊；（3）避免弱酸银盐如碳酸银、磷酸银以及氧化银沉淀的形成。温度30～40℃避光要求暗处放置5min后比浊，因氯化银见光易分解

3．干扰的排除

（1）供试品液混浊：

可用含硝酸的蒸馏水洗净滤纸中氯化物后过滤来消除混浊对氯化物检查的干扰。

（2）供试品有色：可采用内消色法，按中国药典附录规定的方法处理。供试品+AgNO3放置10min澄清溶液+标准NaCl+水对照溶液供试品+AgNO3+水供试品溶液暗处放置5min后比较

（2）供试品有色：

也可采用外消色法

外消色法：如高锰酸钾中氯化物的检查，可先加乙醇适量，使其还原褪色后再依法检查。

练习1药物中氯化物杂质检查，是使该杂质在酸性溶液中与硝酸银作用生成氯化物浑浊，所用的稀酸是（B）A.硫酸B.硝酸C.盐酸D.醋酸E.磷酸练习2中国药典（2005年版）规定，检查氯化物杂质时，一般取用标准氯化钠溶液（10µgCl~/ml）5～8ml的原因是（D）A.使检查反应完全B.药物中含氯化物的量均在此范围C.加速反应D.所产生的浊度梯度明显E.避免干扰

练习3若要进行高锰酸钾中氯化物的检查，最佳方法是（D）A.加入一定量氯仿提取后测定B.氧瓶燃烧C.倍量法D.加入一定量乙醇E.以上都不对练习4（多选题）采用硝酸银试液检查氯化物时，加入硝酸使溶液酸化的目的是（ABCDE）A．加速生成氯化银浑浊反应B．消除某些弱酸盐的干扰C．消除碳酸盐干扰D．消除磷酸盐干扰E．避免氧化银沉淀生成练习5（多选题）当采用比浊法检查氯化物杂质时，若药物本身有颜色而干扰检查的话，应该选用的处理方法为（AB）A．内消色法B．外消色法C．比色法D．差示比浊法

E．差示可见分光法

练习6（多选题）下列哪些条件为药物中氯化物检查的必要条件（ABC）A.所用比色管需配套B.稀硝酸酸性下(10ml/50ml)C.避光放置5分钟D.用硝酸银标准溶液做对照E.在白色背景下观察

三、硫酸盐检查法

1．原理

利用SO42-在盐酸酸性溶液中与氯化钡试液作用，生成硫酸钡的白色浑浊液，与一定量标准硫酸钾溶液

（100µgSO42-

/ml）在相同条件下生成的硫酸钡浑浊液比较，以判断供试品中硫酸盐是否超过限量。

SO4-+Ba+BaSO4第二节一般杂质的检查方法

2．条件：[SO42-]0.1mg～0.5mg/50ml,即相当于标准硫酸钾溶液1～5ml时所显浑浊梯度明显。

酸度稀盐酸2ml/50ml。

（1）避免弱酸钡盐如碳酸钡、磷酸钡的形成（2）酸度增加灵敏度下降

3．干扰的排除供试品有色：可采用内消色法。练习题药物中硫酸盐检查时，所用的标准对照液是（D）A.标准氯化钡B.标准醋酸铅溶液C.标准硝酸银溶液D.标准硫酸钾溶液

E.以上都不对

四、铁盐检查法（一）硫氰酸盐法ChP、USP（24）1．原理

Fe3++6SCN-{Fe(SCN)6-]3-

红色配离子与一定量标准铁溶液同法处理所呈的颜色比较，颜色不得更深。

2．条件：[Fe3+]0.01mg～0.05mg/50ml,即相当于标准铁溶液1～5ml时所显色泽梯度明显。酸度稀盐酸4ml/50ml。

HCl

3．干扰的排除（1）当有Fe2+存在时，加过硫酸铵将Fe2+氧化成Fe3+，同时可防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色。

（2）当供试液管与对照溶液管色调不一致，或所呈硫氰酸铁的颜色较浅不便比较时，可分别移入分液漏斗中，加正丁醇或异戊醇提取，分别取提取液比色。（3）某些酸根（Cl~、PO43~、SO42~、枸橼酸根）能与Fe3+形成有色配合物而干扰检查。可适当增加酸度、增加硫氰酸铵的量。(二）巯基醋酸法BP（1998）采用此法

1.原理巯基醋酸还原Fe3+为Fe2+，在氨碱性试液中与Fe2+

作用生成红色配位离子。与标准铁溶液比色。2Fe3++2HSCH2COOH2Fe2++SCH2COOH+2H+

SCH2COOHFe2++2HSCH2COOHFe(SCH2COOH)2+H+Fe(SCH2COOH)2[Fe(SCH2COOH)2]2-+2H2O

红色2OH-2.说明

在加巯基醋酸溶液前，先加20%枸橼酸溶液2ml，使其与铁离形成配位离子，以免在氨碱性溶液中产生氢氧化铁沉淀而产生干扰。（此法灵敏度比较高，但试剂较贵）

练习1中国药典（2005年版）规定铁盐的检查方法为（A）A.硫氰酸盐法B.巯基醋酸法C.普鲁士蓝法D邻二氮菲法E.水杨酸显色法

练习2中国药典（2005年版）规定，硫氰酸铵法检查铁盐时，加入过硫酸按的目的是（AB）

A.使药物中铁盐都转变为Fe3+B.防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色

C.使产生的红色产物颜色更深

D．防止干扰

E．便于观察、比较

练习3某药物（黄色）欲进行铁盐检查，应采用下面哪种方法（E）A.倍量法B.微孔滤膜过滤法C.调色法D.600～700℃炽灼残渣后测定E.以上都不对

练习4中国药典收载的铁盐检查，主要是检查（D）A.FeB.Fe2+C.Fe3+D.Fe2+和Fe3+E.以上都不对四、重金属检查法重金属是指在实验室条件下与S2-作用显色的金属杂质，如银、铅、汞、铜、镉、锡、锑、铋等，由于药品生产过程中遇到铅的机会比较多，铅在体内友易积蓄中毒，故检查时以铅作为代表。

第一法为硫代乙酰胺法（重点讨论）

第二法将供试品在500~600℃炽灼破坏后，再按第一法检查。

第三法检查能溶入碱溶液，而不溶于酸溶液的药物，在碱性条件下用硫化钠作显色剂；第四法微孔滤膜法，使PbS富集于微孔滤膜上，比较供试液和对照液铅斑的颜色，确定重金属是否超过限量。中国药典（2005年版）重金属检查法共收载了四种方法。

1．原理

CH3CSNH2+H2OCH3CONH2+H2S合格＜H2S+Pb2+PbS+2H+

2．条件：[Pb2+]10µg～20µg/27ml,相当于标准铅溶液1～2ml

酸度醋酸盐缓冲液控制pH3.0～3.5显色剂CH3CSNH2（1990）合格＜

标准铅液：10µgPb2+

/mlpH3.5第一法硫代乙酰胺法3．干扰的排除(1)供试品有色：可采用外消色法消除干扰（稀焦糖）(2)供试品有微量Fe3+:在弱酸性溶液中会氧化硫化氢析出硫，产生混浊影响比色，可加Vc或盐酸羟胺使Fe3+氧化成Fe2+而消除干扰。

第二法炽灼残渣法适用于含芳环、杂环以及不溶于水、稀酸、乙醇及碱的有机药物。1.原理对照法500～600℃炽灼后的残渣，经处理后，依一法检查。2.操作方法第三法硫化钠法适用于溶于碱而不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的药物。如磺胺类、巴比妥类。1.原理对照法第四法微孔滤膜法

适用于含2～5g重金属杂质及有色供试液的检查。依一法检查，经微孔滤膜过滤后比较色斑。

练习1重金属检查中，加入硫代乙酰胺时溶液控制最佳的pH值是（B）A.1.5B.3.5C．7.5D.9.5E.11.5练习2微孔滤膜法是用来检查（C）A.氯化物B.砷盐C.重金属D.硫化物E.氰化物练习3中国药典(2005年版)重金属检查法中，所使用的显色剂是（BC）

A.硫化氢试液

B.硫代乙酰胺试液

C.硫化钠试液

D.氰化钾试液E.硫氰酸铵试液练习4葡萄糖中进行重金属检查时，适宜的条件是（C）A.用硫代乙酰胺为标准对照液B.用10ml稀硝酸/50ml酸化C.在pH3.5醋酸盐缓冲溶液中D.用硫化钠为试液E.结果需在黑色背景下观察练习5现有一药物为苯巴比妥，欲进行重金属检查，应采用《中国药典》上收载的重金属检查的哪种方法（C）A.第一法B.第二法C.第三法D.第四法E.以上都不对练习6下面哪些方法为《中国药典》收载的重金属检查方法（ACD）

A.500～600℃炽灼残渣后,按一法操作

B.pH3～3.5条件下，加入硫化氢试液

C.碱性下，加入硫化钠试液

D.按一法操作，结果用微孔滤膜过滤后观察色斑

E.以上都对五、砷盐检查法

《中国药典》采用古蔡法和二乙基二硫代氨基甲酸银法（Ag-DDC）检查药物中的微量的砷盐。（一）古蔡法Gutzeit)

(BP1998也采用此法）

1.原理As3++3Zn+3H+3Zn++AsH3

AsO33-+3Zn+9H+3Zn++3H2O+AsH3

AsO43-+4Zn+11H+4Zn++4H2O+AsH3AsH3+3HgBr23HBr+As(HgBr)3(棕色)2As(HgBr)3+AsH33AsH(HgBr)2(黄色)

As(HgBr)3+AsH33HBr+As2Hg3(棕黑色)

遇HgBr2试纸生成黄色～棕色的砷斑，与2ml标准砷溶液（1µgAs/ml）在相同条件下生成的砷斑比较。采用对照法

2.装置与试剂作用

(1)验砷仪砷化氢发生瓶;中空磨口塞;导气管(2)试剂的作用合格＜①KI-SnCl2的作用：交替还原作用；首先将AsO43-还原成AsO33-，生成的碘再被还原成碘离子。

AsO43-+2I-+2H+

AsO33-+I2+H2O

AsO43-+Sn2++2H+AsO33-+Sn4++H2OI2+Sn2+2I-+Sn4+

4I-+Zn2+[ZnI4]2-

②Zn粒与氯化亚锡作用，在其面上形成Zn-Sn齐，起去极化作用。③Pb(AC)2棉的作用是消除供试品可能含有的少量的硫化物。S2-+2H+H2SH2S+HgBr22HBr+HgS（汞斑）H2S+Pb(AC)2PbS+2HAC

3.干扰的排除（1）供试品为S2-,SO32-,S2O32-等:因在酸中生成H2S,SO2,与HgBr作用生成HgS或Hg，干扰砷斑检查。用硝酸氧化成硫酸盐可消除。（2）供试品为Fe3+能消耗KI，SnCl2

应测定条件，先可加足量KI。（3）含锑药物

锑盐被还原为SbH3与HgBr2试纸作用，产生灰色锑斑，干扰砷斑的检查，可改用Betterdorff法。Betterdorff法的原理氯化亚锡在盐酸中将砷盐还原为棕褐色的胶态砷，与一定量的标准砷溶液同法处理后的颜色比较，以控制供试品中的含砷量。（二）Ag-DDC法(二乙基二硫代氨基甲酸银，USP采用此法)

1.原理：是利用砷化氢与Ag-DDC吡啶溶液作用，使Ag-DDC中的银还原为红色胶态银，以Ag-DDC溶液为空白，于510nm波长处，测定吸光度，供试品溶液的吸光度不得大于标准砷溶液的吸光度。2.试剂的作用：同古蔡法。采用对照法

习题1在药物的杂质检查中，其限量一般不超过百万分之十的是（D）A.氯化物B.硫酸盐C.醋酸盐D.砷盐E.淀粉

习题2在用古蔡法检查砷盐时，导气管中塞入醋酸铅棉花的目的是（C）A.除去I2

B.除去AsH3C.除去H2SD.除去HBrE.除去SbH3

习题3砷盐检查法中，在检砷装置导气管中塞入醋酸铅棉花的作用是（C）A.吸收砷化氢B.吸收溴化氢C.吸收硫化氢D.吸收氯化氢E.吸收锑化氢

习题4古蔡氏法中，SnC12的作用有（ACD）A.使As5+→As3+

B.除去H2SC.除去I2

D.组成锌锡齐E.除去其它杂质

习题5Ag—DDC法检查砷盐的原理为：砷化氢与Ag—DDC吡啶作用，生成的物质是（E）A.砷斑B.锑斑C.胶态砷D.三氧化二砷E.胶态银习题6中国药典（1995年版）收载的古蔡法检查砷盐的基本原理是（BE）

A.与锌、酸作用生成H2S气体

B.与锌、酸作用生成AsH3气体

C.产生的气体遇氯化汞试纸产生砷斑

D.比较供试品砷斑与标准品砷斑的面积大小

E.比较供试品砷斑与标准品砷斑的颜色强度

习题7Chp（2005）检查葡萄糖酸锑钠中的砷盐时，应选用（B）A.古蔡氏法B.白田道夫法C.碘量法D.Ag—DDC法E.契列法

习题8古蔡氏法检砷，药典规定制备标准砷斑时，应取标准砷溶液（C）A.1mlB.5mlC.2mlD.依限量大小决定E.以上都不对

习题9杂质检查中所用的酸是A.稀硝酸B.稀盐酸C.硝酸D.盐酸E.醋酸盐缓冲液1.氯化物检查法（A）2.硫酸盐检查法（B）3.铁盐检查法（B）4.重金属检查法（E）5.砷盐检查法（D）习题10A.硝酸银试液B.氯化钡试液C.硫代乙酰胺试液D.硫化钠试液E.硫氰酸盐试液1.药物中铁盐检查（E）2．磺胺嘧啶中重金属检查（D）3．药物中硫酸盐检查（B）4．葡萄糖中重金属检查（C）5．药物中氯化物检查（A）六、溶液颜色检查法溶液颜色检查法是控制药物中有色杂质量的方法。中国药典（2005年版）收载有三种方法：K2Cr2O7黄、绿1.标准比色液进行比较的方法标准比色液CoCl2橙黄,橙红2.分光光度法CuSO4棕红3.色差计法通过测定供试品与标准比色液或水之间的色差值七、易炭化物检查法是检查药物中遇硫酸易炭化或易氧化而呈色的微量有机杂质。这类杂质多数结构未知，常采用与标准比色液比色的方法进行检查。(标准比色液为CoCl2,K2Cr2O7,CuSO4)

是检查药物中的微量不溶性杂质。常采用与浊度标准液比浊的方法进行检查。浊度标准液制备原理：(CH2)6N4+6H2O6HCHO+4NH3HCHO+H2N-NH2H2C=N-NH2+H2O

甲醛腙白色混浊

不同级号浊度标准液级号0.51234浊度标准原液（ml）2.55.010.030.050.0水（ml）97.595.090.070.050.0八、溶液澄清度检查法九、炽灼残渣检查法(residueonignition)BP称硫酸灰分（sulphatedash)是检查有机药物中混入的各种无机杂质。常采用重量方法进行检查。

残渣及坩埚重—空坩埚重

残渣%=×100%

供试品重十、干燥失重检查法主要检查药物中的水分及其他挥发性的物质。常采用重量方法进行检查。常用的方法有四种：（一）常压恒温干燥法

（二）干燥剂干燥法

（三）

减压干燥法热重分析法（四）热分析法（thermoanalysis)

差示热分析差示扫描量热法1.热重分析法（thermogravimetricanalysis,TGA)

在程序升温下，测量物质的质量与温度的关系，研究物质在加热同时失重的情况下，所发生的质的变化，常用于药物稳定性的研究；贵重和易氧化药物的干燥失重测定。(长春碱)2.差示热分析（differentialthermlanalysis,DTA)

是在程序升温下，测量被测物质和参比物之间的温差与温度关系的一种技术。参比物是一种惰性物质，在加热过程中不发生相变和化学变化。因此温差(△T)只与被测物质的量质变化有关。△T=0被测物未发生吸热或放热反应;△T=-为吸热峰;△T=+为放热峰.测药的溶点

DTA在药物分析中应用尖峰为物理变化药物定性分析宽峰为化学变化估测药物的纯度3.差示扫描量热法(differentialscanningcalorimetry,DSC)是在程序升温下，测量维持样品和参比物的温度相同，系统所需供给样品随温差变化的能量的一种技术。DSC与DTA的不同之

处是记录方式不同，是记录系统供给的能量，吸热供给能量；放热减少供给的能量。在药物分析中应用与DTA相同。DSC-TG常联合用。十一、有机溶剂残留量测定法[ChP(1995)]主要检查药物在生产过程中引入的有害的有机溶剂(如苯、氯仿、二氯甲烷、吡啶、甲苯、环氧乙烷、二氧六环等）。常采用气相色谱法方法进行检查。常用的方法有二种：①直接进样法和②顶空进样法（试用于挥发性大的样品测定）。色谱系统性试验的要求：(1)N＞1000;(2)用内标法测定时，要求R＞1.5;(3)外标法测定时，待测物的峰面积的RSD＜10%。残留有机溶剂测定的方法和限量有机溶剂柱温（℃）内标物测定方法限量（%）二氧六环170吡啶1法0.038吡啶170二氧六环1法0.02苯170甲苯1法或2法0.0002甲苯170苯1法或2法0.089氯方140二氯甲烷1法或2法0.006二氯甲烷1401法或2法0.06环氧乙烷802法0.001返回第三节特殊杂质的检查方法

一、利用药物和杂质在物理性质上的差异（一）臭味及挥发性质的差异例如：黄凡士林中异性有机物检查：本品2.0g,直火加热无辛味。浓过氧化氢中不挥发性杂质检查：10ml水浴蒸干残渣＜15mg（二）颜色差异例如：磺胺嘧啶中有色偶氮苯化合物的检查：取本品2.0g，加NaOH试液10ml，加水25ml，与黄色3号比色液比，

不得更深。（三）溶解行为的差异例如：吡哌酸中碱中不溶物吡哌酸甲酯（I）和（II）检查（四）旋光性质的差异例如：硫酸阿托品中莨菪碱的检查：本品溶液(50mg/ml)α＜-0.4

（五）对光吸收性质的差异1.紫外分光光度法：例如:地蒽酚中二羟基蒽醌的检查再如：苯丙醇中苯丙酮的检查：可利用供试液的吸收度比来控制杂质;纯品苯丙醇A247nm/A258nm=0.59;99.5%时A247nm/A258nm=0.79;

因此规定供试品A247nm/A258nm＜0.79;即所含苯丙酮＜0.5%.2.原子吸收分光光度法：是通过测定药物中所含待测元素原子蒸气，吸收发自光源的该元素特定波长的程度，以求出药物中待测元素的含量。限量检查时：对照品液=供试品+限量-----a

供试品液=------------------

b

符合规定时b＜(a-b);b＞(a-b)不合格。3。红外分光光度法：

主要用于药物中无效或低效晶型检查，如甲苯咪唑中A晶型检查

A晶型C晶型在640cm-1有强吸收吸收很弱在662cm-1吸收很弱有强吸收662cm-1640cm-1662cm-1640cm-1供试品+10%A晶型D2D1

供试品D2D1＜10%

R=D1/D2＞R’=D’1/D’2

4.荧光分析法

3,4-二去氢利血平利血平中氧化产物检查：利血平(无荧光)(I)(黄绿色荧光)3,4,5,6-四去氢利血平(II)(蓝色荧光)(六)吸附或分配性的差异

1.薄层色谱法(TLC)(1)杂质对照品法例如:盐酸左旋咪唑中检查硅胶G2,3-二氢-6-苯基咪唑[2,1-b]噻唑盐苯:甲醇:冰HAC

样品

对招品。·····

(2)高低浓度对比品法例如:盐酸异丙嗪中有关物质的检查硅胶G有多个杂质而且结构不清样品10mg/ml;对照品(1)0.15mg/ml己烷:丙酮:乙胺(2)0.05mg/ml

样品液对(1)(2)

供试液杂质斑点不多于3个;杂质斑点与对照(2)的主斑点比较,不得更深;如有一点超过,应不深于对照液(2)的主斑点.......

....

...2.纸层析法(PC)

常用于极性大的药物的分离、分析，如地高辛中的有关杂质的检查。3.高效液相色谱法(HPLC)（1）峰面积归一化法：L%=∑Ai/(∑Ai+A主）×100%例如：利巴韦林中有关杂质的检查：对照品液(5μg/ml)进样10μl,调灵敏度，使主峰达满量程的20%～25%样品液(0.4mg/ml)进样10μl,杂质∑Ai＜(∑Ai+A主）的1.0%（2）不加校正因子主成分对照法

对照品液为供试品的稀释液进样测得A主

供试品液进样测得∑Ai

其∑Ai＜A主即为合格.

例如:甲硝唑中2-甲基-5-硝基咪唑:对照品液(0.01mg/ml)进样20μl,调灵敏度，使主峰达10%～30%样品液(0.14mg/ml)进样20μl,杂质∑Ai＜A主的1.0%.（3）内标法加校正因子测定供试品中杂质的含量

对照品+内标进样求校正因子（f)=(As/Cs)/(AR/CR)

供试品+内标进样求AX.AS,则杂质浓度CX=f×AX/(AS/CS)

4.气相色谱法(GC)

主要用于药物中挥发性的杂质检查，其检查方法与HPLC法相同。二、利用药物和杂质在化学性上的差异（一）酸碱性的差异

1.规定消耗滴定液体积例如己酸羟孕酮中正己酐、对甲苯磺酸检查：(NaOH0.02mol/L)取本品0.20g+中性乙醇+溴麝香草酚蓝微蓝色＜0.50ml2.pH法例如乙琥胺中2-甲基-2-乙基丁二酸检查：0.01g/mlpH3.0～4.5.3.指示剂法

例如苯巴比妥中苯基丙二酰脲检查：其水溶液不得使甲基橙显红色。（二）氧化还原性的差异例如：NaCl中I-和Br-检查EOCl/2Cl-=+1.3595V＞EOBr/2Br-=+1.065V

＞EOI/2I-=+0.5345V,因此+NaNO2+H2SO4+淀粉显蓝色

再例如：盐酸吗啡中阿朴吗啡的检查：后者可被碘氧化生成水溶性绿色化合物。因此ChP规定：本品50mg+4mlH2O+1dI2+5ml乙醚乙醚层不得显红色；水层不得显绿色。（三）杂质与一定试剂反应产生沉淀例一、间苯二酚中邻苯二酚检查：后者+Pb(Ac)2

白色∴ChP规定：本品0.5g+10mlH2O