3第三章 科研程序与步骤

第三章科研程序与步骤第一节科研程序与准备选定科研课题与准备，其程序需要经过提出问题一文献检索一建立假说一确定方案一确定选题题目一开题报告的过程。一、提出问题提出问题是科研选题的始动环节，具有重要的战略意义和指导作用。事物的本质是通过现象表现出来的，必须通过对现象的观察、分析、综合才能获得对本质的认识。提出问题时，只有符合辩证唯物论的认识论这一基本观点，才能符合客观实际，才有可能认识疾病的发生和发展规律，才可能研究防治疾病的有效措施。一般说来，提出问题比解决问题更困难，这是科研的起点或闪光点。历史上许多伟大的科学家常在百思不得其解中出现了“火花”和闪念。例如，波特见到扫烟囱的工人的阴囊上皮癌多发，联想到是否与职业有关，因此调查了职业情况，提出煤炭不完全燃烧可以致癌的假说，最后研究发现了致癌的罪魁祸首。许多伟大的划时代的发现，都是从初次意念、提出假说开始的。在日常临床、科研、教学和读书过程中，可以碰到很多问题，其实这就是选题的土壤，但真正提出一个有意义的科研选题却也不那么容易例如：在中医舌诊研究中，经常遇到的一个问题就是检查舌质、舌苔的客观化问题。能否进行舌色量化检查呢？曾有人尝试过比色板和拍摄照片分析方法，但都不能定量。偶然看到一条新闻报道：我国研制成功了纺织品印染的色差式色度计，可以进行颜色的定量计量检查。那么能否用这台仪器进行舌色的定量检查呢？实际这就是根据类推联想产生的思想火花，也可称为初始意念。初始意念具有突发性、偶然性和瞬间性，一闪即逝，研究者要善于捕捉、善于联想、善于比较，否则就会与成功失之交臂，因为“机遇只偏爱那种有准备的头脑”。初始意念发生是偶然的，但它又是在有意识地反复思考、充分酝酿的基础上突然迸发出来的。研究者要培养自己敏锐的观察能力和勤于思索的习惯.善于发现问题，提出问题。二、文献检索初始意念往往是研究者的一个粗浅和局限的认识，其是否具有创新性，在这个方向上前人或其他人是否曾做过研究，如何把初始意念深化进而建立工作假说，这些问题必须通过查阅文献来解决。查阅文献、收集信息是选题的重要环节，而且贯穿于课题研究的全过程。我们可以带着问题查阅有关文献，以便在理论上能对自己所提出的问题进行合理而充分的解释，也可以从文献中了解到拟选课题的研究现状和进展、已解决的问题、尚存在的问题、争论的焦点及今后研究动向和发展趋势。要整理分析出目前存在的关键问题、解决问题的方法和前景，尽可能使课题研究过程少走弯路，避免重复。在阅读文献中要注意作者如何建立工作假说、采取什么类型的试验设计和技术路线、有无值得借鉴之处、试验数据和结论能否支持假说等关键问题，以便为自己建立工作假说和试验设计提供充分的理论基础和试验资料。通过查新掌握信息，及时修改完善自己的选题，使之更加先进。三、建立假说围绕初始意念，经过文献检索后，在理论上对所研究的问题进行合理而充分的解释，这种确立有待证实的理论认识就叫做建立假说。建立科学假说是选题的核心与灵魂，假说的正确与否从根本上决定科研工作的成败，假说水平的高低决定着科研成果水平的高低。科学假说的建立一般要符合如下原则：①自然科学的基本原理；②基于以往的科学资料；③具有个人的初步实践经验体会；④可被重复验证。假说一经提出，应当进行小范围内的现场调查或实验室研究，再次查阅文献与有关资料，并关注他人是如何建立其假说、确立技术路线、设计新的试验方法，再根据试验结果修正或推翻原有假说，进一步提出和完善新的假说。力求科学假说符合“思路新、起点高、意义大”的基本原则。工作假说的建立需要运用形式逻辑和辩证逻辑进行类比、归纳和演绎推理。所建立的假说要具有科学性、推测性、系统性和验证性。四、 确定方案确定方案即选择试验方案，包括选择处理因素、受试对象和效应指标，以便证实假说的正确与否。确定方案要注意两个问题：（1） 紧紧围绕假说内容，不要盲目追求“高、精、尖”力求用简便的手段证实较高的科学假说内容。（2） 构思合理、巧妙，选择试验手段要从科学逻辑上考虑和推敲，使观察的试验内容真正反映假说内容，效应指标与处理因素之间有实际性联系，有充分理由说明指标能真正反映效应。例如，劳威首次用双蛙心灌注证明迷走神经末梢分泌神经递质，设计简单，构思巧妙，且又证实了重大理论问题一神经递质的存在。五、 确定选题题目题目也就是课题的名称，往往是一个含义明确的短语。一个好的题目，不仅可知其研究的目的、内容和主要方法，而且还可以透过题目看出其假设的科学性。作者在对所研究问题的理论、内容及方法经过全面细致的思考并反复酝酿后拟定。字数虽然不多，但却是反映研究内容的画龙点睛之笔。题目的内容应该能直接或间接地反映出研究因素、研究对象及试验效应这三个主要环节及它们之间的联系。初搞科研的同志在立题时最常见的问题是题目过大，或是笼统模糊，甚至文题不符。例如，“中西医疗法对结石病的疗效观察”一题就不符合鲜明、具体、确切的要求，因为它存在着一些令人不解的问题，使人阅后得不出个明确的概念。“中西医疗法”指的是什么疗法？用什么药物？“结石病”是指哪个部位的结石病？是患者还是试验动物的？“疗效”指的是止痛、排石还是结石溶解？这些问题都说不清楚。若根据具体试验设计把上述题目改为“金钱草煎剂对肾结石患者排石效果的初步观察”或“金钱草浸膏对大鼠尿路结石溶解作用的试验研究”之类，比原来的题目要更好一些。在拟定某些（不是全部）科研课题名称时，可适当考虑采用下列形式，即“处理因素+受试对象+预期效应”。其中，处理因素、受试对象和预期效应称为组成课题的三要素。上述所修改题目中的“金钱草煎剂（或浸膏）”为“处理因素”，“肾结石患者（或大鼠）”为“受试对象”，“排石效果（或溶石作用）”即为“预期效应”。又如以下几个例子：①“肺癌手术治疗的远期疗效”中，受试对象为“肺癌，”施加因素为“手术治疗”，试验效应为“远期疗效”②“左心房心动过速一例报告”中，对象为“左心房”，效应为“心动过速”，在字面上看不出施加因素，但心动过速的病因是多样的、复杂的，有些目前尚不明了，但肯定是客观存在的一一其中必然孕育有施加因素;③“辽宁省肺吸虫病的流行病学调查”三个因素均有，即调查对象为“人群”，施加因素为自然界存在的病原体“肺吸虫”，效应为“发病情况’，。选题名称的确定应充分考虑以下几点：简明一个好的题目应当简单明了，不繁赘冗长，一般题目控制在20〜25个字之内。在初步确定题目后，要反复推敲，试着删掉多余的词，如“关于、“探索”、“分析”等则为常见且可删除的词。具体即明确清晰，不抽象笼统。题目能具体反映出研究的内容、方法、水平以及创新点和独特之处，用较少文字反映出丰富的含义。立题愈具体、明确，说明研究者的思维愈清楚。题目的假说愈集中，试验对象、使用方法手段和所采取的指标之间的联系和因果关系愈明确，预期的效果就愈可信，回答的问题就愈深刻。但选题、命题不能过大。如“消化道肿瘤的研究”，消化道从口腔、食管、十二指肠、小肠、大肠到肛门，还有包括胰腺、肝脏等消化腺，不可能全部研究，况且每种肿瘤的病因、发病机制、症状、体征、病理变化、诊断、治疗、预后转归、预防措施等均有不同，不可能面面俱到地研究，所以题目要准确、具体、精炼，有专指性。文题主要是由一个名词或若干个并列的名词加上必要的修饰词构成的名词词组，避免使用不熟悉的缩写、符号和化学结构式等。一般要符合如下基本要求：①具体概括研究课题的内容，包括“处理因素+受试对象+效果反映”；②含蓄地体现假说的内容；③附加限定成分，如“初步研究'、“探讨”等；④用动名词结尾，用以表达课题研究的性质、特点，如“临床观察”、“试验研究”等。例如，“柴胡和柴胡皂苷促胰腺腺泡酶分泌的细胞信号传导机制”，这个题目就很具体、清楚。新颖即创新性，是所研究的新理论、新技术及新方法等创新之处及特点，应尽可能在题目上体现出来，读后使人留下深刻印象。例如，“急性心肌梗死舌象观察”若改为“急性心肌梗死动态舌象观察”，“动态”就体现出了本项研究的特点和新颖之处。醒目文字精湛传神、引人人胜，使人读后产生要立刻读下去的欲望。例如，“松果体在冬季对性腺的调节”，这个题目就比较醒目。一般应确定几个题目，反复比较后选取一个比较贴切的，再进行修订。在试验完成后还要进行一番思考，题目还可以进一步修改完善。六、开题报告在完成文献综述、建立工作假说后，应当围绕这一假说进行科学构思和试验设计，提出初步研究计划，完成开题报告并进行开题论证。请相关的专家进行评议，集体参与选题报告会，能够集思广益，综合不同的学术观点和思路，丰富立题论据与方法，修改和补充立题时的不足之处，完善设计；也能克服个人知识面相对狭窄、专业相对局限和有限的调研之间的矛盾，以利于发现问题，甚或否定选题或推倒重来。总之，开题可以做到集思广益和事半功倍的效果，故应高度重视，特别注意倾听不同学术观点与思路的意见，并予以充分考虑。开题报告内容包括：课题的意义、立题依据、国内外有关进展、完成课题的技术路线与关键、方法及指标选择、预试验情况、预期成果、安排与进度、存在的问题与解决方法。开题报告写作要点是选题的需求性和可行性。需求性包括该项研究对经济建设和社会进步的价值，是否具有较高的学术价值和应用价值，在研究方法上有无创新。可行性强调是否具备了科研工作的基本条件，是否具备了足够数量的、符合标准的研究对象，研究方法是否能够为患者所接受等。第二节科研设计与试验一、科研设计的基本要素（一） 受试对象受试对象是被试验的客体，即医学研究中被施加处理因素的试验对象，主要是人、动物和微生物等。受试对象可以是正常状态，也可以是病理状态。（二） 处理因素选择处理因素的适宜数目具体试验可以是逐个因素地进行，即单因素设计；也可以是多个因素联合进行，即多因素设计（如正交设计）。前者操作简便，易于控制，结果一目了然；后者效率高，省时、省事、省钱。选择处理因素的适宜强度处理因素的强度指处理因素的大小、强弱和轻重。具体选择时，处理强度要适宜，既要防止过强，严重伤害受试对象，使试验无法继续进行，又要防止过弱而观察不到应有的效应。处理因素施加方法的标准化要对处理因素的性质、施加方法进行最适化，并制订出有关规章制度加以固定，在试验中严格执行，不得轻易变更，以保证试验的一致性和结果的可靠性。（三） 效应指标效应指标是鉴定试验的方法与尺度，即反映处理因素施加于受试对象后所引起变化的情况，可分为计数指标、计量指标和等级指标。计数指标只能回答“是”与“否、'“有效”与“无效”等问题。计量指标是指可以用度、量、衡来测量的指标。等级指标是介于上述二者之间的一种半定量指标，如“痊愈V“显效”、“好转”、“无效”等。指标选择要注意以下几点.八、、：指标的数目根据证实科学假说的需要，应选择适宜的指标数目。要抓住主要矛盾，指标过多、繁琐、重复会增加工作量，指标过少则不能充分证明问题。指标应具备的条件必须与证实科学假说密切关联，并能反映出施加处理因素后引起的效应，即指标的有效性，这是最基本的。此外，效应指标还应注意其客观性、精确性、灵敏性和特异性等。主观指标的客观性一是要尽量消除受试对象心理因素的干扰，可采用双盲法、安慰剂等；二是尽量消除指标判断者主观因素的影响，可采用双盲法、交叉判定等;二是对于等级指标，需要对各个等级订出明确的判定标准，以减少主观因素的影响。指标的标准化应事先规定好指标观测的规范性，如观测方法、标准、记录方法和格式等。二、科学研究设计科学研究包括科研设计、科学试验、分析试验结果并得出结论三个部分。其中科研设计是最重要的。选定一个起点高、设计周密、指标合理、科学性强而又切实可行的实施方案是取得高水平研究成果的关键。研究方案必须缜密完善，其设计应围绕着研究问题，抓住问题的根本，具体清晰地描述。切记内容不能太庞杂，缺乏重点、新的思路和研究方法的使用，特别是创新之处，应具体写。对创新部分或已有研究手段的变动，要详细描述并说明变动原因，或采用这种新方法的理由和优势。对于研究中可能遇到的困难，应有充分的准备，并制订相应的对策。（一） 选择合适的研究对象在科研设计中，受试对象的选择在医学试验中是十分重要的。选择合适就可能得到预期结果。如选择不当，则可能导致研究无法进行。受试对象通常选择动物和人体两种。在人体试验中应注意选择相应的易感人群。病例选择宜拟定严格的标准，排除非处理因素的影响，保证试验结果的可靠性。试验工作应先做动物试验后再到人体。动物的选择应根据研究内容充分考虑动物的种类特点、品系、年龄、解剖和生物学特点等，忽视这些环节可能导致试验失败。例如，进行肿瘤细胞接种，选择普通的品系可能较难成功，而选择先天性免疫缺陷的裸鼠则比较容易成功。再如，一位学者判断煤焦油可能有致皮肤癌的作用，他的试验对象选择了大鼠，结果一无所获，而日本的博士选用了兔子作为研究的对象，用煤焦油涂在兔子的耳朵上，结果在兔子耳朵上诱导出肿瘤。因此，我们在选择研究试验对象时务必多阅读有关文献，根据不同研究对象的特点精心选择.避免不必要的人力、物力的浪费。（二） 注重统计学设计选择合适的样本足够的样本含量可以验证试验的重复性。在估计样本含量时要避免两种倾向：①片面追求增大观察例数，结果造成人力和时间的浪费；过分追求数量，对研究结果造成不良影响。②在科研设计中，忽视应当保证足够样本含量的重要性。样本含量太小，检验效能偏低，导致总体中本来存在的差异未能检验出来，出现了非真实阴性结果。样本的选择应根据研究类型的不同、研究对象的变异性、假阳性或假阴性错误的概率、数据资料的类型及数据处理方法的选用来确定样本的不同含量。遵循对照、随机和重复的原则严格的对照是科学研究结果准确性的保证。试验组和对照组除了要观察的因素外，其他条件也应尽可能相同才有完全的可比性，才能排除影响因素而得出正确结论，即对照组的设立必须符合一致（齐、同）的条件。分组应遵循“随机化”的原则，使每一个研究对象都具有同样的机会被分到试验组和对照组中，从而缩小抽样误差。严格避免研究者主观臆断而导致研究结果的不可靠性。除用随机抽样减少误差外，重复试验是保证试验结果可靠的另一种基本方法。只有重复试验，才有把握得出可靠而正确的结论。最大限度地控制误差在医学科研中，如果对各种因素处理不当会影响试验效果，产生种种误差，有自然误差，也有人为误差。要想有效地控制试验误差，除必须遵循随机化、均衡化和重复性的原则外，还应坚持被试因素的一致性，如同一被试药物的性质、纯度必须一致，试剂的配制、贮放时间、温差也应基本相同。选择受试对象时要考虑年龄、性别、生活习惯等因素影响，最大限度地控制误差，以保证研究处理因素发挥真正的效应。三、试验设计的对照原则（一）对照的意义对照，即设立条件相同及诊断一致的一组对象，接受某种与试验组不一样的试验措施，目的是和试验组的结果进行对照性的比较，以证明两组间结果的差异。这种用以对照性比较的一组研究对象，称为对照组（controlgroup）0该组对象除不接受被研究的某项疗法（或干预措施）外，其他方面的试验条件与观察指标和效应标准等都应与试验组相同，即研究的基线情况应一致，才具有可比性。因此，设立对照组的目的是为了抵消非试验因素的干扰和影响，比较两组或两组以上干预措施的效果，避免偏倚或系统误差，使结论具有可比性、更可靠和更具有说服力。例如，“美托洛尔（metoprolol）与安慰剂随机双盲治疗急性心肌梗死”的研究，用随机化的方法将合格的研究对象分为用美托洛尔治疗组和安慰剂对照组。目的是观察比较两组患者第一次心肌梗死后的心率、血压及心律失常的情况。由于采用了随机分配的方法，使得非试验因素（如年龄、性别、平均体重、平均身高等指标）在两组均无明显差异，具有可比性，增强了说服力。对照的意义在于鉴别处理因素与非处理因素的差异，消除和减少试验误差。在确定接受处理因素的试验组时，要同时设立不施加处理因素的对照组。因为只有设立了对照，才能消除非处理因素对试验结果的影响，从而把处理因素的效应充分显示出来，这是控制各种混杂因素造成系统误差的基本措施。例如，二十世纪二三十年代，结核病的金制剂疗法流行了15年之久，印度名医为此发表了数以百计的论文，并曾作为定论编入医学教材。但在沿用15年后，由于采用了有对照的临床试验，才对它做出否定的评价。试验结论在于科学的比较。对照是比较的基础，没有对照就不能说明处理因素与试验效应的关系。如某药物治疗胃溃疡，如果没有对照，就不能区别是药物的作用还是自然痊愈或是心理调节的作用。以人为受试对象时常用对照的形式。以动物为受试对象时可不考虑心理作用的影响和医德的问题，但试验操作过程应尽量与试验组保持一致。对照的目的：①排除自然变异和非处理因素对观测结果的影响；②通过对照取得效应指标数据的客观变化，以揭示处理因素施加于受试对象后所引起的真实效应；③通过对照还可找出综合因素中的主要有效因素，验证试验方法的可行性，修正试验数据，找出试验的最佳条件，分析试验中可能存在的问题或找出差错的原因等。试验研究的目的是验证研究假设是否正确，只有经过比较才能鉴别其真伪。设立对照是比较的基础，没有对照很难说明研究假设是否正确。设立对照也是控制试验过程中非试验因素的影响和偏倚的一种有力措施。其正确的方法是将适宜纳入的研究对象随机地分入试验组和对照组并保证受试对象间具有可比性，即对照组中的观察对象除了试验因素不同以外，试验过程中的试验条件和辅助措施都应相同，这样有利于反映出所比较的总体之间存在的真实差异。临床研究设立对照的意义主要有：①可控制非研究因素影响和偏倚，以确定观察组和对照组的差异是否来自研究因素；②可确定临床研究中副反应的发生率。选择对照时应注意对照组与观察组间的均衡性。（二）对照原则的内容对照应遵循的原则（1） 保持组间一致性，包括观测对象、试验条件、操作或观测方式、时间选择等，确保试验和对照组间有可比性。（2） 消除心理影响的差别。要采取使组间心理影响一致的措施，如安慰剂、双盲法的应用等。（3） 组间例数要均衡。对照组的例数一般应与试验组相当，使组间合并误差最小。（4） 要谨慎选择自身前后对照。只有在被观测的评价指标随时间先后变化稳定且受试对象不受时间性条件因素影响的情况下，方可采用。对照的均衡原则的意义设立对照满足“均衡”原则才能显示对照的作用。对照均衡的原则是指在设立对照时除给予的处理因素不同外，其他对试验效应有影响的因素（非处理因素）尽量均衡一致。这种一致性愈强，就愈能显示出试验的处理因素，从而减少非处理因素对结果的影响。例如，研究改良法测定胃液中唾液酸类酶蛋白的效量时，要求受试者的健康状况相同，采集标本的方法与时间一致，不同的只是一组用改良法测定，另一组（对照组）用原法测定，这样的测定结果才有可比性。对照的均衡原则的方法在试验研究中，要对非处理因素严加控制。在动物试验中，常把对照组和各试验组的非试验条件（如动物的种属、品系、窝别、体重等）保持基本一致。在临床研究中，要求患者的病种、病期、病程、年龄等保持基本一致。总之，在研究过程中，施加的处理因素和非处理因素都要达到均衡性和齐同性，以便更好地避免主观偏差，减少误差，提高试验的精确性和可靠性。常用的均衡方法有交叉均衡和分层均衡。前者是设立试验组和对照组，使两组的非处理因素均衡、齐同，以抵消非处理因素的影响。后者是用分层方法使各处理组中的非处理因素得到均衡。它是将非处理因素按不同水平分为若干个单位组，然后每个单位组内安排处理因素。例如，用A、B、C、D共四种处理方法观察受试者皮肤温度的变化。试验可以按每天试一种方法，每种方法八名受试者，共做四天试验。这样做，每天实验室温度的变化及室外温度的变化都会对皮肤温度有影响。如果我们改为每天都试四种方法，每种方法仅两名受试者，也做四天试验。这样做使每种处理方法的八名受试者都在不同时间的室温和室外温度影响下进行试验，使外界温度的影响得到均衡。4.临床试验对照方法的选择应依据不同的设计方案而定。与其他研究不同，出于伦理考虑，在肿瘤临床试验时对照组一般不用安慰剂。根据研究的目的，试验组给予被试的新疗法，而对照组可用标准疗法或另一种治疗手段，以比较新疗法与标准疗法疗效的差别。（三）对照的形式对照有多种形式，可根据试验研究的目的及内容加以选择，详见第六章。四、试验设计的随机化原则（一） 随机化的意义随机化是临床科研的基本原则之一。对照组和试验组除处理因素不同外，其他非处理因素最好是完全一致、均衡。试验中能使二者趋于一致或均衡的主要手段是随机化。“随机”不等于“随便”，随机化是指在抽样研究中总体中每个单元（个体）都有相等机会被研究者抽取为样本。在试验研究中，每一个受试对象被分人对照组还是试验组，完全由机遇所决定，而不是由研究者主观按某种倾向决定。只有按随机化原则分组，才能使每一个对象都有同等的可能性进入试验组或对照组。在全部试验中，凡可能影响结果的一切顺序因素应一律加以随机化，否则显著性检验便是无意义的。随机的意义有三点：①随机可以消除选择性偏倚。也就是说，可以消除由于选择研究对象不当而使研究结果偏离了真实情况的偏差。②随机可以增加观察组和对照组之间的可比性。③随机研究经统计学处理可以得到可靠、真实的结果。（二） 随机化原则的内容试验设计中必须贯彻随机化原则，这样可以实现均衡齐同。临床试验的目的是要阐明处理因素作用于受试对象后所产生的效应。例如，影响肿瘤患者预后的因素很多，包括患者的性别、年龄、肿瘤类型、病理分型、免疫状态等，通过随机手段决定患者是人选到治疗组或是对照组，可将这些影响因素均衡地分配到治疗组和对照组，从而最大限度地消除选择偏倚对研究的影响。随机不仅可平衡已知的影响疾病预后的因素，更重要的还可平衡未知的预后影响因素。随机化的目的：①尽量使抽取的样本能够代表总体，缩小误差;②各组之间样本尽量一致，消除或缩小组间差异；③使试验资料符合数理统计处理的要求。随机化的适用条件：①用于试验对象的分组；②用于施加于各组的处理因素的操作顺序；③对凡能影响试验结果的非试验因素和条件，也都要注意随机化，以保证组间的均衡性和齐同性，避免偏差。（三） 随机化方法的两种形式随机抽样指的是被研究的对象从被研究的目标人群中，借助于随机抽样的方法，使目标人群中的每一个个体都有同样的机会被选择作为研究对象。随机分组将随机抽样的样本应用随机化分组的方法，使其都有同等的机会进入“试验组”或“对照组”，接受相应的试验处理。这样就能使组间的已知或未知的影响因素达到基本一致的水平，减少偏倚因素的干扰，增强组间的可比性。（四）随机化的方法下面主要介绍简单随机法，包括抛硬币、抽签、掷骰子、查随机数字表等。抛硬币取1枚硬币任意抛掷，根据硬币落下时向上的是正面或背面决定该样本分配到试验组或对照组。具体做法是研究者先将被研究的各观察单位编号，然后抛硬币，假如事先设定正面向上者代表试验组（A组），而背面向上者则代表对照组（B组），如此反复抛掷，根据抛币的正、背面将对象分别纳入相应的组内。这种方法比较麻烦，在临床试验中已少用。掷骰子掷骰子与抛钱币的情况差不多。负责随机化分配的研究者可以事先预定分组条件，比如掷出骰子的1、2、3点作为试验组，而将4、5、6点作为对照组。抽签按纳入研究的合格对象的数量（n），从1到n进行顺序编号，然后将它们放入一个贴有封条的盒子内，事先规定好（如奇数为试验组，偶数为对照组）。按纳入研究的对象总数逐个抽签，对号归组，最终两组数量必然相等。注意已抽出的签不应再放回盒子内，避免重复。这种抽签的盒子也可用信封代替，称密闭信封法。查随机数字表在简单随机法中，最好是用随机数字表分组。随机数字表中的全部数字无论从行、列或斜向等顺序都呈随机状态。具体方法是：先将纳入试验的合格对象依先后顺序编号，再将随机数字表中的任意行或列作为起点，得到一个随机数，依次取其表中的系列数字，与纳入的研究对象编号配对，并列出样本的随机分配表格。假设随机表的奇数代表试验组（A组），偶数代表对照组（B组），其组间分配的机遇大致相等。五、 试验设计的重复原则重复，是指按科研设计确定的研究对象的例数或试验次数要达到一定的数量。重复是消除非研究因素影响的一项重要手段。只有多次重复的试验才能显示试验的一致性和稳定性，并提高试验结果的可靠性和真实性。同时，也只有可重复和多次试验，其结果才具有可检验性和真理性。一次性或少量的试验，或者是别人无法重复的试验，很难证明试验结果是稳定的、客观存在的现象与规律。重复的一个意思是指重复试验，另一个意思是指样本含量大小。样本含量是指观察例数的多少，习惯上也叫做样本大小。在试验设计时，要考虑样本含量问题。样本含量过少，会使研究结果不够稳定和不够可靠。样本含量过多，又会增加实际工作中的困难，对条件的严格控制也不易做到，并且会造成不必要的浪费。六、 试验设计的盲法原则在医学研究中，如果试验的研究者或（和）研究对象不知道研究对象的分组情况，不知道研究对象接受的是试验措施还是对照措施，这种试验称为盲法试验。使用盲法的目的是为了避免研究者或（和）研究对象的人为主观因素对研究结果的影响，以保证研究结果的真实性。贯彻盲法的原则，就是要克服临床试验中潜在的、主观的、暗示性的因素所造成的各种偏倚，做到实事求是地报告结果。1.单盲法（singleblindmethod）受试者不知道试验分组情况而研究者知道，即受试者不知道自己接受的是处理因素还是安慰剂或安慰措施，这样可避免受试者知道自己的治疗情况所产生的报告偏倚，但不能避免试验者主观因素所引起的偏倚。2.双盲法(doubleblindmethod)研究者和受试者都不知道试验分组情况，即他们均不知道处理因素和安慰剂或安慰措施是如何分配的，从而消除他们主观和心理因素给试验带来的偏倚和干扰。双盲法是比较好的方法，在试验研究中常用。3.三盲法(tripleblindmethod)是双盲法的扩展，即受试对象、研究人员和资料分析人员均不知道受试对象的分组和处理情况。这种方法在理论上可以减少资料分析上的偏差，但在分析时减弱了对整个研究工作的全局了解，对研究的安全性要求较高，在执行时也较严密，难度较大。盲法是避免主观偏倚的最有效手段，对于临床前新药评价也非常有用，尤其是涉及凭主观判断有效性和安全性的计分指标或半定量指标(如病理学描述)。对于试验期较长的试验，研究者也易不自觉地偏爱某组对象，长期积累可能造成明显效应。采用盲法可以消除上述影响。七、试验设计方法试验设计是医学科学研究中很重要的一环，是科研课题的实施方案与总体设计，包括研究的具体内容、采用的材料和方法、研究指标、进度安排与预期结果的具体考虑。试验设计的好坏直接关系到科研工作的科学性、先进性与合理性，关系到科研工作的成败。试验设计要求做到科学性、严密性、合理性和高效性，需要积极的科学思维活动，需查阅大量文献或进行现场调查，搜集科学资料；有时还要先进行预试验或可行性调查试验，使试验设计建立在科学可靠的基础上。试验设计包括专业设计和统计设计，前者是根据专业知识确定试验的对象，所用的药品和试剂、标本的采集与储存、手术方案及观察指标等；后者则是依据统计学的原理确定样本的大小分组的多少、分组方法及设计方案，以确保资料的可靠性，保证统计分析的准确性。良好的设计是顺利进行试验和统计的先决条件，是使试验研究取得预期结果的重要保证。(一)试验的类型与基本要素试验的类型预备试验：在进行正式试验前，为确证试验操作方法或获得某些基础数据，常需进行小规模的模拟试验，称为预试验。包括以下几种：①导向性试验，是一种小规模试验，目的是对假说进行初步检验，确定是否有必要做大规模的验证试验；②观测性试验，目的是搜集试验所需要的数据，如均数、变异程度、组间差异程度等数据，为试验设计提供必要的资料；③筛选性试验，即用大量观察对象做初步简单试验。目的是寻求需进一步试验的指标，这种方法十分简单而迅速，药物筛选常用这种试验。决定性试验：进行分项试验或大型正式试验之前，常需做一个决定性试验。它和预试验不同，是一个总括性、关键性试验，用以检验假说的正确性。如果假说是正确的，便可以开始大型正式试验；反之，应停止一切试验。如要对某种药物进行不同成分、不同剂量的试验，首先应进行该药有效性的决定性试验，然后再进行正式试验。正式试验：如果实验室已经具备试验条件，或文献提供了详尽的数据和方法，可直接进行正式试验。正式试验必须有明确的目的和良好的试验设计。试验的基本要素试验的基本要素包括处理因素、试验对象和试验效应三个部分。如观察某避孕药的效果，避孕药是处理因素，已婚育龄妇女为受试对象，其妊娠结局则是试验效应。处理因素：一般是指主动施加于受试对象的某种外部干预。试验目的就是阐明某些处理因素作用于受试对象的效应。有时处理因素也可以是客观存在的，如“观察培养基在空气中的污染程度与季节的关系”，“季节”就是该试验的处理因素，但“季节”这个因素却不是人为施加的，而是客观存在的。此外，受试对象本身的某些特点（如性别、年龄等）也可以成为因素，如研究冠心病的患病率，性别、年龄、体重就成为所要分析的因素。因此，试验工作首先要确定试验的处理因素。1） 处理因素的数目与水平：处理因素可以是一个或多个，即单因素或多因素。同一因素可根据不同强度分为几个水平。如要观察某药物对慢性支气管炎的疗效，选择患者的病期、年龄、性别以及所用药物的剂量、给药途径都应该一致。那么，这个试验就是一个处理和一个水平，叫做单因素试验。观察某药物三种不同剂量的效果，即为单因素二水平。若同时观察这种药物的两种给药方式和三种不同剂量的效果，称为两因素多水平。一项试验有多方面的因素，我们不可能把所知的一切因素都放在一次或几次试验中。不要试图在试验中解决多个问题，应抓住主要因素。因素愈多，需要的观察对象也愈多，会使试验条件难以控制。单因素试验虽简单明显，但处理过于单一，试验效率过低，不易提高研究的深度和广度，使研究结论受到一定限制。多因素间常存在“交互作用”，如两种药共用可发生药效的协同作用或拮抗作用。因此，在设计时还要考虑施加于受试对象的效应。2） 处理因素的标准化：就是保证处理因素在整个试验中保持不变，按同一标准执行。如果一种药物在试验的不同时期使用的批号不同，或手术开始阶段不熟练到后期才熟练，这样实际上相当于因素不是同一个而当成同一个因素去对待，得出的结果显然是不准确的，甚至是错误的。因此，在试验设计时应制订出保证标准化的措施。处理药品不仅要确定药品名称、性质、成分，而且还应说明它的批号、出厂日期和保存方法。如果是手术，就要规定操作的具体方法。3） 搜索非处理因素：寻找出非处理因素加以控制，可减少混杂效应。例如，服用避孕药物妇女的职业、文化程度等是否相同或相近都将会影响她们的生育观、服药的自觉性及妊娠结局。因此，在确定处理因素的同时，应根据专业知识与试验条件找出非处理因素，以便加以控制。确定处理因素要注意以下几点：第一，要抓住试验中的主要因素。任何一项试验都是由各方面因素所组成的，我们不能把所知的一切因素都放在一次试验中。应根据研究目的确定几个主要的、带有关键性的因素。研究目的是指研究者欲通过试验所要回答的问题，研究目的不可太多，以免分散主题。问题较多时要分清主要问题和次要问题，试验设计围绕主要问题进行，并兼顾次要问题。第二，要找出非处理因素。非处理因素可能会影响试验结果，产生混杂效应。例如，观察两种降压药治疗原发性高血压病患者的试验，非处理因素可能有年龄、性别等，若两种降压药组的年龄、性别构成不同，可能影响降压药疗效的比较。因此，在对研究对象进行分组时，使非处理因素在两组间达到平衡，才能消除它们的干扰作用。第共，处理因素应当标准化。（2） 试验对象：又称受试对象，指研究者施加处理的对象，可以是人或动物。试验对象要符合试验目的。例如，患者必须无并发症，动物必须纯种、健康等。如果同质性不好，研究的结论就受到怀疑。所选试验动物对处理因素敏感，如研究呕吐现象，一般用猫作为试验对象，因其呕吐机制与人类最接近；试验动物应变异小、稳定，最好用同胎动物，要有普遍意义或接近人类的反应。（3） 试验效应：是处理因素作用于受试对象的反应，是研究结果的最终体现，也是试验研究的核心内容，它通过试验指标来表达。如果指标选择不当，未能准确地反映处理因素的作用，那么获得的研究结果就缺乏科学性。因此，选择好试验指标是关系研究成败的重要环节。选择的依据是：客观性、特异性、灵敏性和精确性。1）客观性：观察指标有主观指标与客观指标之分。主观指标是由患者回答或医师判断来描述观察结果；客观指标是借助仪器等进行测量和检验来反映观察结果。主观指标易受心理影响，如“疼痛”这个指标就很难量化。因此，应尽量选用客观的、定量的指标。2） 特异性：选择的指标应能反映处理因素的效应本质。特异性.高的指标最易揭示处理因不易受混杂因素干扰，减少假阳性率。例如，甲胎蛋白AFP）是诊断原发性肝癌较特异的指标。3） 灵敏性：指标的灵敏性是增强试验效应的一个重要方面。在试验中，应当选择对处理因素反应较为灵敏的指标，使处理因素的效应能较好地显示出来。如测定某种有毒金属物质在人体各脏器中的分布，可用原子吸收分光光度计等敏感性较高的仪器测出。4） 精确性：包括准确度和精密度两部分。准确度是指观测值与真实值的接近程度，用回收率来表示：回收率=加标后实测量一原有量/加标量。回收率愈接近100%，说明准确度愈高；反之，其准确度愈低。它主要受系统误差影响。精密度是指重复观察时观测值与其均值的接近程度，用标准差或变异系数表示，它反映随机误差的大小。如果一个指标有几种测定方法，在设计时应选择准确度和精密度都高的方法。（二）试验误差和偏倚的控制试验误差及其控制（1）试验误差：就是实测值与真实值之差，样本统计量与总体参数之差。试验研究是通过分析差异来说明或分析试验结果的。然而，在试验中常会出现各种各样的误差，如不加以控制，就不能突出研究本身所寻求的差异。按误差的来源可分为自然误差和人为误差。按误差的可控性可分为容易控制的误差和不易控制的误差。误差在试验中的一些具体表现如下。1） 抽样误差：由于样本本身存在差异而造成的一种误差。因为受试对象总是具有个体差异，抽取的样本只能是总体的一小部分，所以样本与总体之间及各次抽取的样本之间不可能完全一致而造成抽样误差。在试验中，抽样误差对试验结果有较大的影响.减小抽样误差的方法在于抽样时遵循随机化原则并适当地增加观察例数。一般来说，样本愈大，抽样误差就愈小。在例数相同的情况下，计数资料的抽样误差较计量资料的大。2） 感官误差：是由于视觉、嗅觉和触觉等感官判定某项指标时引起的误差，如目测比色来判定某物质的含量可能出现误差。3） 条件误差：是由于试验条件不同而引起的误差。这种误差可由试验组与对照组的组间条件不同所造成。仪器设置、季节及饲养动物条件等非处理因素控制不善就会造成非处理因素与处理因素的交叉，以致无法判定结果的差异是来自何种因素。若试验组处于有利条件时，容易出现假阳性错误；若试验组处于不利条件时，容易出现假阴性错误。所以，应保持试验条件的恒定。临床试验中若采用历史对照，就要警惕条件误差，因为既往试验条件控制是否严格很值得去认真考虑。4） 分配误差：它是由分组所引起的误差。5） 非均匀性误差：是由于抽样不均匀发生的误差。按照抽样理论，对于每个观察对象均应进行随机抽样。如不严格遵守这一原则，就会使结果出现偏差。例如，进行两种药物的临床疗效观察，选取门诊与住院患者作为受试对象，任意分配至甲、乙两组，甲组门诊患者偏多，乙组住院患者偏多。观察结果为甲组优于乙组，此时很难判断究竟是甲组效果良好，还是乙组由于病情偏重而影响了其疗效。非均匀性误差可以采用分层抽样法加以控制。分层原理在于将性质相同的对象分为同一层。一组样本可以分为数层，然后对每一层进行随机抽样。这里可将门诊组分为一层，住院患者分为另一层，分别进行随机抽样。6） 顺序误差：指由于试验时不改变顺序，总是按着一个固定的顺序进行而引起的误差。如抓取A、B、C共三组不同病型的动物测量某些生理指标的变化，每次总按A、B、C顺序进行，若操作者的抓取手法由重到轻，最终结果的差异就很难区分是因病型不同引起的还是手法轻重不同引起的。7） 过失误差：主要是由下列情况引起的。①试验设计时考虑不周；②试验者主观片面；③试验者粗心大意。例如：分组不合理，主观地选择受试对象，试验组与对照组的条件不均衡；在试验时试管放置的顺序颠倒，编号涂抹不清，记录遗漏或错误，不按操作规程。所以，试验者必须有一个科学严谨的作风。8） 估计误差：对观察结果进行分析和评价时所产生的误差，是研究者心理上和（或）技术上的原因所引起的。多出现在试验中研究者非常关心试验组的结果，特别关心结果是否和原设计的预期结果一致的情况下。在估计试验结果时，尽管试验中可能出现许多缺陷，但研究者千方百计地维护这个结果。如果结果不符合愿望，尽管试验是比较严密的，也要设法寻找问题加以否定。技术上的估计误差也是大量存在的，如观测X线片时第一次结果和第二、三次比较不一致。其原因有：①技术不过硬、不纯熟；②标准不明确或内容复杂；③数量大，速度快，易发生偏差。9） 系统误差（systematicerror）：指在一定试验条件下，由于某种原因使得观测值出现偏差，这种偏差有一定倾向性。例如，表现为恒定偏大或偏小，或周期性变化。系统误差是一种恒定误差，它的观测值不是分散在真值的两侧而是带有方向性和系统性，系统误差的大小和方向在同一试验条件下是基本恒定的。因此，只有改变试验条件，才能发现系统误差。10） 随机误差（randomerror）：又称为偶然误差，由一系列有关试验因素的微小随机波动引起的方向不定又可相互抵偿的误差，是排除了系统误差后仍然存在的误差。这种误差决定了测量结果的精密度。抽样误差属随机误差。在一次测定中，随机误差的大小与方向不可预言。在大量重复进行的测量中，随机误差的出现或大或小，或正或负，有一定统计规律性。（2）误差的控制：避免和控制误差是试验设计时应考虑的一个主要问题，下面是几种控制误差的主要方法。1） 随机化：试验的抽样与分组必须随机化。2） 均衡化：使试验组与对照组的非处理因素均衡一致。例如，饲养室有阳面和阴面，试验组和对照组的动物就不应一组一直放在阳面，另一组一直放在阴面，需要定期轮换位置。3） 交叉的原则：是一个较为有效的方法，和均衡化是同一性质的。如对甲、乙两组动物做同一针刺，一名操作者承担不了两组动物而需要用两人，这时就不能每人承担一组，而是应该两人各自针刺甲组的一半和乙组的一半，交叉进行操作。4） 重复试验：可加大样本含量并增加样本可靠性。测定某个指标时，最少取两个平行样，如测定兔血液无机磷含量，除了做空白对照管、标准管外，还需做样本平行测定管，将所测数据平均后作为无机磷含量。如两个平行的测定管得出的数据误差超过5%时，则应重新测定一次，直至误差在5%以内为止。偏倚及其控制偏倚是由某些非研究因素干扰所形成的歪曲了处理因素真实效应的偏差，实际是一种系统误差。偏倚只能控制而不可避免。偏倚可分为选择性偏倚、测量性偏倚和混杂偏倚。（1）选择性偏倚：是由于纳入观察对象的方法不正确而产生的偏倚。例如，选入试验组和对照组病例的病情、年龄差异悬殊，影响了试验结果。防止选择性偏倚的方法：①拟定明确的、可操作性强的研究对象选择标准；②正确设立对照，贯彻随机化原则；③结合研究对象的特征分层研究；④选择影响结果的非研究因素，将研究对象划分三层，然后再在各层中抽取对象，按规定的样本含量分配到各试验组。分层方法可有效控制偏倚，但分层愈多，供选择的对象需要量就愈大。例如，研究某种药物对慢性胃炎的疗效，可以根据胃镜检查的结果明确诊断，以轻、中、重型进行分层并按照各层的比例分配入各试验组（如规定轻型40%，中型40%，重型20%），这样可以增强各组的可比性，也可对轻、中、重型分别进行比较。（2）测量性偏倚：是观察或测量而造成的偏倚。常见的情况有：①对照组的对象接受了处理因素的沾染，与试验结果差值缩小；②试验组除接受处理因素外，还接受其他有效措施，扩大了试验组结果与对照组的差值。防止测量性偏倚的方法有：①贯彻盲法原则；②采取单盲法、双盲法、三盲法，可明显减少偏倚。定期检查研究计划的实施，培训研究人员，核对结果记录。做好研究对象参与研究的思想工作和心理咨询，注重医德，保证研究中有良好的应急措施、护理条件和相应辅助治疗，争取研究对象积极配合。确保自始至终参与研究，并同意在试验中按规定接受处理措施。进行试验前，研究者和试验对象应签订合同。（3） 混杂偏倚：观察结果时，由于与研究因素同时并存的非试验因素的作用影响到观察的结果，造成混杂因素的偏倚，称混杂偏倚。例如，许多研究表明血清三酰甘油含量与冠心病危险性相关，即三酰甘油含量愈高，冠心病危险性愈大。有的医师以此筛选危险人群，认为三酰甘油是冠心病的独立病因，降低三酰甘油将有助于预防冠心病。但冠心病还与其他因素有关，特别是血清中高含量胆固醇和低含量高密度脂蛋白，它们常与冠心病同时发生。1） 沾染：对照组的试验对象接受试验组的处理措施，提高了对照组的有效率，其结果是造成了试验组和对照组间差异缩小的假象。2） 干扰：试验组从试验外接受了对试验因素有效的药物或措施，提高了试验组的有效率，扩大了试验组和对照组之间的差异。3） 依从（compliance）和非依从（noncompliance）：受试对象对于干预措施及试验过程的执行程度称依从性。受试对象可能因为药物的副作用而退出试验。未按照研究人员的规定方案执行称为非依从性，会影响试验结果，使处理因素的效应不能充分显示。4） 失访：受试对象在试验过程中由于各种原因退出试验称为失访。在试验中，部分受试对象可能由于对处理措施不满意等原因而退出试验。失去这些受试对象的信息可影响研究结果，导致过高地估计治疗效果。必须控制失访率不高于20%。5） 检查和诊断结果不一致：若这种重复检查的不一致率过高，将会影响到研究结果。因此，有必要对检查结果的一致性进行分析评价，可用kappa检验。6） 观察记录的失误：设计时应明确规定记录的方式、时间及记录的人员，并制订经常定期检查记录的制度。（4） 控制偏倚的其他方法：1） 检查试验对象的依从情况，可采取以下措施：统计实际服药片占应服药片之比，了解依从性的情况，观察药物的副作用以估计依从性的高低。如口服铁剂后大便变黑等，检查这些现象是否发生作为判断受试者依从性的参考。测定患者体内药物浓度，也可通过患者的尿、血、排泄物中的药浓度来考查依从性，并将测定结果反馈给受试对象以提高依从性。加强健康教育亦可提高依从性。2） 定期检查研究记录，保证其完整准确。一旦发现错误和遗漏应及时纠正和补充，以免在总结时造成不可弥补的损失。3） 对试验方法、诊断标准、重复判断的一致性应在试验前做出估计。对可能出现不一致的检查方法（如放射科医师阅读X线片的结果等），应先做预试验以估计判断的一致性。若发现不一致率很高，应对参与研究的人员进行培训以统一认识。（三）试验设计的分类和特点设计是提高试验质量的保证，可按对研究对象是否干预分为调查研究设计和试验研究设计。调查研究设计旨在客观地描述研究总体。未加干预措施，目的在于了解某一事物的实际情况（如疾病的危害程度），为防治疾病提供依据，属于调查研究设计。试验研究设计是指研究者根据研究目的主动加以干预措施并总结结果，回答研究假设提出的问题。根据研究对象的不同分为两类，即试验研究和临床试验。试验研究：是以动物或标本为研究对象，在研究过程中可以主动地加以干预措施。临床试验：以人为研究对象，不可能任意采取严格的控制措施，且人有思想，存在着心理活动和社会活动。研究者必须进行周密认真的设计，采取措施控制误差和偏倚.保证研究结果不受干扰。第三节结果分析处理与总结一、统计分析的步骤在实际工作中，必须根据医学研究目的与资料性质并结合专业知识恰当地运用统计方法才能得出正确的、符合实际的结论。在区分了研究资料的反应变量和解释变量的基础上，数据的统计分析主要回答两个问题：一是反应变量的差异是否可归因于分组因素或对比因素，二是多个反应变量之间是否存在某种联系。因此，医学科研数据统计分析大致分以下四个步骤：1.数据整理主要进行数据质量的检查和考察数据分布及变量转换等，观察数据是否符合特定统计方法所要求的条件。例如，计算平均数、标准差要求数据基本上呈正态分布，方差分析要求各组方差的差别不宜过大等。统计描述按分组因素或控制因素分组计算反应变量的基本统计量，如均数、百分率、标准差、标准误等，得出资料的大致轮廓和进一步分析方向。结果的表达方式主要是统计图或统计表。统计推断用特定统计方法做详细分析，如均数间的差异比较进行t检验或方差分析、反应变量间的相关性计算相关矩阵、反应变量与解释变量的依存关系拟合各类模型等。各种检验得到的P值是下结论的主要依据。得出结论将各种分析结果简单明了地表达出来，为专业上的分析讨论提供统计学背景。有条件的话，前三个步骤应在计算机上借助统计软件完成。另外，以上四个步骤只是一种粗略的划分方法，对有些资料，统计描述即可得出较为明确的结论。对于随机分组的试验设计资料或随机抽样的调查资料，一般可根据资料性质和分析目的找到对应的统计方法。但对于对比性资料的分析，往往需要同时用多种统计方法进行处理或拟合复杂的统计模型。二、资料的综合分析【案例】某研究生设计了一项课题，为探明氟斑牙患者牙齿黑度值与牙齿光密度值间的相互关系，以及牙齿光密度值与氟斑牙病情之间的关系，测定了不同程度Dean’s分级的氟斑牙患者的牙齿光密度值和者牙齿黑度值，并用同样方法测定了部分正常人的牙齿光密度值作为对照。表3—1和表3—2是测量结果的一部分。下面简要介绍统计处理的一般程序及统计方法的选择。表3—1三组不同人员牙齿光密度值(280nm)测定结果组别 牙齿光密度值 定性结果阳性阴性

160.0915149.6964160.1731190.9667197.6989193.3774193.9444198.6756193.415159.642165.433161.3824190.6879190.8515182.9857189.5919179.0079184.0665正常人组161.0053197.7335194.2535155.904203.4544190.5912132159.7219191.1978192.4568158.4114192.0098189.5579150.1357160.6989163.237162.8018170.5764.143.9029140.986136.0606153.4958168.6941170.9094151.2704139.8105193.6966153.4726轻度氟斑牙组162.8258156.9636160.4218140.0599194.8388152.7021183.1017147.6255137.2064191.3791148.4191182.78861022169.9767141.667114.4684190.9382152.2843187.8291188.07183.7138182.4304155.9753167.6896146.1344166.7572125.0947136.8498159.1377169.4678151.5316164.2624180.0861重度氟斑牙组135.8251155.9684166.0384140.7154165.2243184.5412 921180.4719156.773164.8879140.5204157.9748131.4671178.7918159.8645162.7754136.6802158.1101125.7178表3—2 10例氟斑牙患者牙齿黑度值与牙齿光密度（280nm）值间的关系病例号牙齿黑度值牙齿光密度值病例号牙齿黑度值牙齿光密度值184.9417182.43046101.9394151.5316282.1982176.84987110.1612140.52043107.3745166.7754871.5274184.54124111.0971164.26249122.2979131.46715114.0618146.134410132.2114125.7178了解研究目的、资料搜集情况、数据意义并整理分析要解决的问题无论动物试验、临床观察或现场调查，应当明确目的、周密设计、精心操作、认真记录，务必使获得的原始资料完整、准确、真实、可靠。即使是为他人整理分析资料，也首先必须把这些问题搞清楚才能做出正确的、符合要求的分析。若发现某些资料不全或有可疑数值，应及时查明原因，加以改进，必要时补做试验或重新调查。本例研究目的已如上述。所观察的患者诊断都是明确的，标本采集、数据测定都是在实验室进行的，仪器性能稳定，操作者技术熟练，资料是可靠的。统计分析的主要目的在于比较正常人、轻度氟斑牙患者、重度氟斑牙患者牙齿的光密度值之间有无显著差异，从而考虑牙齿的光密度值指标能否作为氟斑牙诊断的一个辅助指标。此外，对氟斑牙患者牙齿黑度值与牙齿光密度值间作相关分析，找出它们间有无直线关系。区分资料类型要分清所得到的资料哪部分是计量资料，哪部分是计数资料或等级资料，然后分别采用不同的