《生物制药专业论文报告【5300字】》

慢性阻塞性肺疾病（AECOPD）简称慢阻肺，是一种常见的、可以预防和治疗的异质性疾病，基本特征是持续呼吸症状和气流受限，通常由于暴露于某些有毒颗粒或气体环境引起的气道和/或肺泡异常所导致。根据世界卫生组织（WHO）2018年的统计可知，死于COPD的总人数为317万，占2018年死亡总人数的5%，其中，超过90%的死亡病例主要来源于中低收入国家。在我国，慢阻肺的疾病防治工作形势也非常严峻。考虑到COPD的发生主要可由多种危险因素共同引起，除了内源性的遗传因素外，吸烟、生物燃料烟雾、大气污染、职业暴露等危险因素是主要影响COPD的外在原因。而维生素D（vitaminD）作为一种脂溶性类固醇衍生物，可以通过紫外线照射皮肤而得到，因此，维生素D又被称为阳光维生素。在实验室中，维生素D主要是通过其与维生素D受体（VitaminDReceptor，VDR）相互结合从而在人体内发挥其生物作用。其中，维生素D的主要的生理作用为促进钙、磷的吸收作用，并调节甲状旁腺激素（PTH）对钙的重吸收及释放，维持人体钙、磷的平衡状态，通过抑制NF-κB和p38MAPK通路，从而在COPD患者中发挥其抗炎作用。因此，COPD作为呼吸系统常见的慢性疾病之一，且常合并感染状态出现，这使得维生素D在COPD的防治中成为一种可行性选择。本研究通过病例对照试验来研究维生素D与COPD相关性，为COPD患者是否可用维生素D干预治疗提供依据。1材料与方法1.1研究对象1.1.1AECOPD组研究对象选取2019年10月-2021年1月于实习医院呼吸与危重症二科就诊的慢性阻塞性肺疾病急性加重期（AECOPD）住院患者，严格遵照研究纳入标准及排除标准，共纳入患者75例，其中男性患者42例，女性患者33例，平均年龄71.41±10.01岁。纳入标准：1）所有患者诊断及分级必须符合慢性阻塞性肺疾病全球倡议2019（GOLD2019）标准；2）所有患者处于慢性阻塞性肺疾病急性加重期；3）患者近半年内未服用维生素D补充剂，无明显影响维生素正常代谢的药物使用史，如苯巴比妥、苯妥英钠等，无激素使用史；4）肝功能、肾功能正常，无自身活动受限；5）获得患者知情同意。排除标准：1）患有其他严重慢性呼吸系统疾病者；2）患有其他明确影响维生素D水平的疾病，如甲状旁腺相关性疾病、糖尿病、自身免疫性疾病及肿瘤等；3）不能独立完成慢阻肺患者自评量表（CAT评分）的测定；4）患者及家属不同意者。1.1.2非COPD组选取同时间段于实习医院住院的非COPD患者，按照纳入标准及排除标准，共纳入30例患者，其中男性18例，女性12例，平均年龄67.2±7.53岁。入选标准：1）无慢性咳嗽、咳痰、气短史；2）患者近半年内未服用维生素D补充剂，无明显影响维生素正常代谢的药物使用史；3）无严重的心肝肾等功能不全，无自身活动受限。排除标准：1）近1月出现上呼吸道感染症状的患者；2）患有呼吸系统慢性疾病及患有急、慢性支气管等病史的患者；3）患有明确影响维生素D水平的其他疾病；4）患者及家属不同意者。1.2研究方法及标本处理收集患者一般资料，包括：年龄、性别、体重指数（BMI）、吸烟史、种族、危险因素接触史、有无合并症及类型及AECOPD组患者过去1年内急性加重的次数等一般情况。1.2.1收集患者生化检查资料（1）中性粒细胞比率（N%）COPD组患者空腹晨起后由专业护士抽取外周血样本3ml，送至我院检验科，统一使用美国贝克曼血常规流水线仪器进行血液标本的检测，并记录结果。（2）血清25羟维生素D（25（OH）D）25（OH）D是维生素D在人体内的主要储存形式，临床上常用检测25（OH）D水平用来评估人体内维生素D水平。纳入研究的所有患者在晨起空腹状态下由护士抽取外周静脉血5ml送至我院检验科，使用离心机分离被检血清，当日不能检测的血清标本保存于-80℃超低温下冰冻保存，尽快检测结果。所有标本全部采用罗氏COBASe601全自动电化学发光免疫分析仪检测指标，并由专业检验人员完成操作。（3）超敏C反应蛋白（hs-CRP）、白介素-6（IL-6）、白介素-8（IL-8）于晨起空腹状态抽取AECOPD组患者外周静脉血液标本10ml，送于我院检验科，由专业检验人员行离心处理，并检测hs-CRP、IL-6、IL-8，记录结果。1.2.2肺功能检测AECOPD组的患者经入院治疗平稳后行肺功能检查，检测时患者处于安静状态，若活动后需休息30分钟，给予吸入支气管扩张剂，进行肺功能测试，此操作于肺功能室由专业技师完成。操作重复3次，留取最大值作为结果。记录第一秒用力呼气容积占预计值百分比（FEV1/预计值%）以及第一秒用力呼气容积占用力肺活量的百分比（FEV1/FVC%）。1.2.3量表评测在取得患者的知情同意的情况下，并在入院后患者病情平稳的状态下，由接受过专业培训的调查员向患者以统一且简单易懂的语言向患者解释量表，由患者根据自身状况自行评测量表，由调查人员统计量表得分并记录。COPD评估测试呼吸（CAT）问卷，共包括以下8个内容：咳嗽、咳痰、胸闷、气喘、活动能力、情绪、睡眠、精力。CAT问卷满分为40分，0-10分为轻微影响，10-20分为中等影响，21-30分为严重影响，30-40分为非常严重影响。1.3统计学处理建立病例数据资料库，所有的数据均运用统计分析软件SPSS21.0进行统计分析。将符合正态分布的计量资料均以均数标准差（（x±S）表示，比较两组正态分布的计量资料时采用t检验，多组定量资料间的比较采用单因素方差分析。计数资料比较采用卡方检验Fisher检验，评估不同变量之间的相关性时采用Pearson相关性分析，并绘制相关图形。所有检验均采用双侧检验，检验水准α=0.05，即p<0.05表示数据差异具有统计学意义。2结果2.1AECOPD组和非COPD组一般资料比较本研究累计纳入105名住院患者，其中，AECOPD组共75例，平均年龄71.41±10.08岁，平均体重指数24.91±2.53kg/m2；其中，男性患者42例，女性患者33例；吸烟患者42例，非吸烟患者32例；非COPD组患者共30例，患者平均年龄67.20±7.66岁，平均体重指数25.38±2.39kg/m2；，其中，男性患者16例，女性患者14例；吸烟患者18例，非吸烟患者12例。对两组间患者的性别、年龄、是否吸烟、体重指数分别进行比较，分析结果显示，AECOPD组与非COPD组患者在年龄、性别、是否吸烟、体重指数等方面的差异均无统计学意义（P＞0.05），提示两组之间具有可比性，见下表2-1。表2-1AECOPD组与非COPD组一般资料比较AECOPD组非COPD组（²/t值P值年龄71.41±10.0769.20±7.662.0620.062性别0.140.708男4218女3312吸烟史0.1390.709吸烟4216不吸烟3314BMI24.91±2.5325.38±2.392.0620.0622.2AECOPD组和非COPD组维生素D缺乏患病率比较AECOPD组共纳入75例患者，其中，维生素D缺乏患者为60例，患病率为80%；非COPD患者中维生素D缺乏的人数是14例，患病率为46.6%，两组相比较差异有统计学意义（P<0.01），可以认为AECOPD患者维生素D缺乏患病率高于非COPD组，见下表2-2。表2-2COPD组与非COPD组维生素D缺乏患病率比较组别维生素D缺乏维生素D不缺乏患病率AECOPD组601580.0%非COPD组141746.6%x²18.377P值<0.0012.3不同血清25（OH）D浓度水平的一般临床资料比较本研究AECOPD组共纳入患者75例，其中，男性患者42例，女性患者33例，平均年龄71.41±10.08岁。按照血清25（OH）D浓度分为四组：维生素D正常组3例、维生素D不足组12例、维生素D缺乏组12例、维生素D极度缺乏组38例，对四组间性别、吸烟史进行Fisher精确检验，对四组BMI、年龄进行单因素方差分析，结果显示四组间性别构成、是否吸烟、BMI、年龄差异均无统计学意义（P＞0.05）。见表2-3。表2-3不同血清25（OH）D浓度水平的AECOPD患者一般临床资料比较组别正常不足缺乏极度缺乏F值P值性别0.160男071520女35718吸烟史0.184吸烟071521非吸烟35717BMI25.27±0.6126.21±2.2824.81±2.5224.54±2.641.3700.259年龄69.67±2.0875.2±7.5269.4±11.0971.47±10.440.8830.4542.4不同血清25（OH）D浓度水平的肺功能、CAT评分比较对不同血清25（OH）D浓度水平的四组AECOPD患者的肺功能（FEV1%pred、FEV1/FVC）进行单因素方差分析进行比较，结果显示四组间患者肺功能指标FEV1%pred差异有统计学意义（P＜0.05）；四组间患者FEV1/FVC差异无统计学意义（P>0.05）。表2-4不同血清25（OH）D浓度水平的AECOPD患者肺功能及CAT评分比较正常不足缺乏极度缺乏F值P值FEV1%pred65.33±5.0357.50±15.8056.13±17.1847.84±11.763.20.028FEV1/FVC68.42±0.5257.44±9.4958.54±9.4154.83±9.422.4080.074CAT评分15.33±5.0320.58±5.8223.86±7.42127.18±8.743.8480.013此外，四组间患者CAT评分差异有统计学意义（P＜0.05）。结果如表2-4所示。进一步对AECOPD组患者血清25（OH）D浓度水平与FEV1%pred、CAT评分进行pearson相关性分析，其中，AECOPD组患者维生素D水平与FEV1%pred呈正相关，Pearson相关系数r=0.377，P=0.001，有统计学意义，提示血清25（OH）D浓度水平与COPD患者肺功能相关，25（OH）D水平越低，FEV1%pred越低；AECOPD组患者血清25（OH）D水平CAT评分呈负相关，Pearson相关系数r=-0.377，P=0.001，结果有统计学意义，提示AECOPD患者血清25（OH）D水平与生活质量相关，血清25（OH）D水平约低，CAT评分约高，疾病对生活质量影响越大。相关性分析结果散点图见图2-1、图2-2。图2-1AECOPD组患者维生素D与FEV1%pred相关性分析散点图图2-2AECOPD组患者维生素D与CAT评分相关性分析散点图2.5不同血清25（OH）D浓度水平的既往1年内急性加重次数比较对不同血清25（OH）D浓度水平的四组AECOPD患者间的1年内急性加重次数进行比较，其结果显示差异无统计学意义（P>0.05）。结果如2-5所示。表2-5不同血清25（OH）D浓度水平的AECOPD患者1年内急性加重次数比较正常组不足组缺乏组极度缺乏P值1年内急性加重次数1±01±01.32±0.651.39±0.640.1792.6不同血清25（OH）D浓度水平的炎症指标的比较对不同血清25（OH）D浓度水平的四组AECOPD患者的炎症指标N%、hs-CRP、IL-6、IL-8进行单因素方差分析，结果提示，各组间N%、hs-CRP、IL-6、IL-8差异均有统计学意义（P＜0.05）。结果见表2-6。进一步行对AECOPD组血清25（OH）D与有统计学意义的炎症指标进行pearson相关性分析，结果见表2-7。结果显示AECOPD患者血清25（OH）D浓度水平与N%呈负相关，Pearson相关系数r=-0.245，P=0.034，有统计学意义，提示血清25（OH）D浓度水平与AECOPD患者N%相关，25（OH）D水平越低，N%水平越高，见图2-3；AECOPD患者血清25（OH）D浓度水平与hs-CRP呈负相关，Pearson相关系数r=-0.357，P=0.002，有统计学意义，提示血清25（OH）D浓度水平与AECOPD患者hs-CRP相关，25（OH）D水平越低，hs-CRP水平越高，见图2-4；AECOPD患者血清25（OH）D浓度水平与IL-6呈负相关，Pearson相关系数r=-0.369，P=0.001，有统计学意义，提示血清25（OH）D浓度水平与AECOPD患者IL-6相关，25（OH）D水平越低，IL-6水平越高，见图2-5；AECOPD患者血清25（OH）D浓度水平与IL-8无相关性，Pearson相关系数r=-0.178，P=0.126，提示无统计学意义。表2-6不同血清25（OH）D浓度水平的AECOPD患者与N%、hs-CRP、IL-6、IL-8关系组别A组B组C组D组F值P值N%0.75±0.10.68±0.10.65±0.10.77±0.15.0240.003hsCRP1.49±1.53.07±2.910.59±14.416.81±17.93.1860.029IL-62.03±0.16.00±4.811.52±14.320.83±18.94.0310.01IL-85.67±1.212.11±6.06.04±3.115.53±10.96.4170.001表2-7COPD患者25（OH）D与N%、hs-CRP、IL-6、IL-8相关性指标25（OH）D（ng/ml）N%hs-CRPIL-6IL-8r值-0.245-0.357-0.369-0.178P值0.0340.0020.0010.126图2-3AECOPD组患者维生素D与粒细胞相关性分析散点图图2-4AECOPD组患者维生素D与hs-CRP相关性分析散点图图2-5AECOPD组患者维生素D与IL-6相关性分析散点图3讨论本研究共纳入AECOPD组患者75例，其中，维生素D缺乏的人数为60例，患病率为80%；非COPD患者中维生素D缺乏的人数是14例，患病率为46.6%，两组相比较差异有统计学意义，可以认为AECOPD患者维生素D缺乏的患病率高于非COPD组。探究AECOPD患者更容易缺乏维生素D的主要可能原因为以下几点：（1）COPD患者因患病是肺功能较差，活动能力下降，且西安地区冬季寒冷、空气质量较差，导致患者外出活动的时间减少，接受日照不足；（2）COPD患者多为老年人，老年人皮肤色素沉着、皮肤老化，致使皮肤经紫外线辐射转化维生素D的效力降低；（3）COPD患者常合并多种并发症存在，常导致肝肾功能的下降，导致维生素D在体内的合成减少。本研究发现FEV1/预计值（%）与VitD存在正相关（r=0.377p=0.001），与目前其他研究结果一致，这提示维生素D缺乏可以影响COPD患者肺功能的分级。此外，本研究采用CAT评分评估患者生活质量，结果提示患者血清维生素D水平与CAT评分呈负相关，提示维生素D的缺乏对COPD患者生活质量有负面影响。有证据表明，老年人的血清维生素D水平与下肢肌力呈正相关。维生素D缺乏对CAT评分的影响可能与其影响COPD患者肺功能、骨骼肌肌力等多方面因素有关。而对于补充维生素D是否可以提高患者生活质量仍需进一步研究证实。并且，在本研究中结果显示，维生素D与1年内急性加重次数无统计学差异