Hep-2细胞的传代培养_第1页
Hep-2细胞的传代培养_第2页
Hep-2细胞的传代培养_第3页
Hep-2细胞的传代培养_第4页
Hep-2细胞的传代培养_第5页
已阅读5页，还剩6页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

细胞培养技术（实验篇）安徽医科大学微生物学教研室2007年12月3日合肥实验四Hep-2细胞的传代培养一、原理体外培养的细胞形成单层汇合以后，由于细胞密度过大,生存空间不足而引起营养枯竭，将影响细胞的继续生长，此时需将培养的细胞分散，从容器中取出，以1:2或l:3以上的比率转移到另外的容器中进行培养，即为传代培养。传代培养可获得大量的同种细胞，并维持细胞种的延续,同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间，与细胞世代或倍增不同。在一代中，细胞倍增3～6次。二、材料和试剂1、细胞：Hep-2细胞2、试剂：PBS、VTP、DMEM营养液（含10％小牛血清）3、仪器和器材：倒置显微镜、CO2培养箱、培养瓶、吸管、废液缸等

三、操作方法将长成单层的Hep-2细胞弃去原来的培养液，PBS洗2次。在瓶中加入少许消化液(以液面盖住细胞为宜)，静置3～5分钟。肉眼观察当见到瓶底出现细针孔空隙时终止消化。倒置显微镜下观察消化细胞，若胞质回缩，细胞相互之间不再连接成片，表明此时细胞消化适度。这时应立即将消化液倒掉，加入适量新鲜培养液，吹打，制成细胞悬液。以1：2或1：3进行分装，标记，置37℃培养。四、结果置于37℃培养的细胞，次日开始需逐日进行观察，主要观察：（1）培养物是否被污染（2）细胞生长状况（3）如细胞已生长，则要观察细胞的形态特征Hep-2细胞×100五、注意事项严格的无菌操作适度消化每天观察细胞形态，生长致

人人文库> 全部分类> 教育资料 > 课件下载

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论