血细胞分析仪的应用及形态学复检

血细胞分析仪的应用及形态学复检ProgramofUrbanandRuralCounterpartSupportonClinicalLaboratory

TechnologyStandardDevelopmentandTraining2023/1/11城乡对口支援临床检验技术标准制定及培训主要内容一、血细胞分析仪发展简史二、血细胞分析仪检测原理三、血细胞检验图形及临床应用四、如何保证检验结果的准确性血细胞形态学复检血细胞分析仪性能评价及全面质量管理血液分析产品的发展历程17世纪列文虎克

原始的显微镜

1674年

列文虎克《伦敦皇家学会哲学学报》------

第一篇对红细胞的正式记载1855年

发明了用于计数血细胞的计数板

改良Neubauer

计数板1879年埃尔利希(德国)发明活体染色法2023/1/11一、血细胞分析仪发展简史库尔特原理血细胞是相对不良导体，当其悬浮于电解质溶液中通过检测微孔时，会改变微孔内外原来恒定的电阻，结果产生电脉冲。脉冲的大小代表了通过微孔血细胞的体积大小，脉冲的数量代表了通过微孔血细胞的数量。WallanceH.Coulter20世纪40年代后期，美国人库尔特发明并申请了粒子计数的设计专利。2023/1/11基于Coulter原理的血细胞计数在1953年获得美国发明专利同年和他的兄弟约瑟夫（Joseph）开创了自己的公司，并成功的设计和制造出了可以计数血细胞的专用仪器，然后开始了在这一领域的商业运作华莱士.库尔特约瑟夫.库尔特2023/1/11血细胞分析仪的发展历史

70年代血小板与红细胞同时计数80年代，在8项检测基础上加上红细胞指数、三个直方图的报告，不仅提供是否贫血，且可对贫血的类型和原因进行分析；90年代，将激光、射频、化学染色计数应用于对细胞特性的分析，五分类血液分析仪出现并得到广泛的应用VCS原理激光法原理荧光染色法化学染色法血细胞分析仪的现状血常规检验多参数化

有的仪器可以提供40~50种测量或计算参数，有的甚至还整合了免疫化学参数，如CD3,CD4等以及C反应蛋白水平。多功能合成扩展

已经不仅仅局限在进行常规血细胞分析，近年来它增加了许多扩展的功能。例如将网织红细胞(RET)的计数和分析功能加入其中。

检测速度的提高

增加了自动进样系统，测定速度加快，一般可以达到每小时80~100个样品。血细胞分析仪产品的系列化和流水线化

2023/1/11数字化图像分析或仪器视觉技术进入血细胞形态学检验利用单克隆抗体标记技术提高仪器识别细胞能力同机检测血细胞和血浆内化学或免疫学指标机内“专家诊断系统”的临床应用实现血细胞分析仪与标本前处理仪器、生化分析仪、免疫分析仪更便捷的全自动流水线血细胞分析仪技术展望2023/1/11二、血细胞分析仪的检测原理红细胞、血小板计数原理白细胞分类计数原理血红蛋白检测原理2023/1/11platelets（一）红细胞、血小板计数原理电阻抗法（库尔特原理）2023/1/11红细胞与血小板的检测在同一通道，小红细胞，细胞碎片及血小板自身的聚集等对血小板计数及平均血小板体积的影响较大，血小板直方图能反映这些变化，出现异常血小板直方图，根据图形的变化可了解血小板计数的准确性。（大于右侧阈值考虑为红细胞）（二）白细胞分类计数原理白细胞三分群计数原理白细胞五分类计数原理2023/1/11根据白细胞体积大小，可初步确认细胞分群第一群（30-90fl）：小细胞群，主要分布的是淋巴细胞第二群（90-160fl）：中间细胞群，主要包括单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞，核左移的各阶断幼稚细胞或白血病时白血病细胞第三群（160fl以上）：大细胞群，主要是中性粒细胞白细胞三分群计数原理小细胞群中间细胞群大细胞群2023/1/11仪器测定的细胞大小指加入溶血素后的白细胞大小血浓缩图片：可见中性粒细胞，淋巴细胞，单核细胞，嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞溶血剂处理后的白细胞：白细胞膜缩于细胞核上，只能见大，中，小三群细胞核，淋巴细胞最小，单核细胞次之，分叶核粒细胞最大2023/1/11白细胞三分群计数原理白细胞经特殊溶血素处理后，细胞失水，各群细胞体积分布差异增加。分布范围：35-450fl(256个通道)白细胞可以根据体积大小区分为三个群

三分群血细胞分析仪的缺陷2023/1/11方法学单一，非特异性检测（1）仅分大小，不辨其他特性，相同大小的颗粒易误计数（2）中间细胞包含了多种细胞，和成熟WBC分类有很大差异干扰大，异常标本的处理能力差（1）MID增多:可能是MONO、EOS、BASO、BLAST增多（2）LYM干扰：PLT、NRBC、FWBC（3）PLT干扰：RBC、PLT本身、FWBC等

（4）异常颗粒或信号的干扰三分类结果仅为初步结果，要求我们进行形态学检验白细胞五分类计数原理激光与细胞化学法容量、电导、光散射法电阻抗与射频及特殊染色法多角度偏振光散射法流式细胞术及核酸荧光染色法2023/1/11流式细胞技术、核酸荧光染色技术待测血样稀释成单个细胞悬液，经过核酸荧光染色后，在鞘液的约束下，排成单列通过测量区的细胞在垂直入射的激光束照射和激发下，产生：前向散射光（FSC，主要反映细胞的大小）侧向散射光（SSC，主要反映细胞内容物的复杂度）侧向荧光（SFL，主要反映核酸含量的多少）举例：SysmexXE-2100WBC/BASO通道（白细胞总数和嗜碱性粒细胞计数）SSC（侧向散射光）FSC（前向散射光）酸性溶血素1.红细胞溶解2.嗜碱性细胞固定3.其余白细胞胞质皱缩DIFF通道（白细胞分类和幼稚粒细胞定量）正常散点图异常散点图红细胞溶解，白细胞膜被打孔，荧光染料染色核酸成分射频/直流电技术（RF/DC）电学法：射频RF：(核/胞质比率）直流电DC:细胞体积在IMI通道中，红细胞、血小板溶解成熟白细胞膜磷脂多，也溶解主要检测：原始细胞幼稚粒细胞血小板聚集IMI通道(幼稚髓性细胞和血小板聚集的检测）Ret/PLT-O通道NRBC通道（三）血红蛋白测定的原理—分光光度比色光学比色法原理检测物质为血红蛋白衍生物ISCH推荐使用氰化高铁法（HiCN）吸收峰在540nm氰化血红蛋白含有氰化物月桂酰硫酸钠（SLS）血红蛋白不含氰化物各型号血细胞分析仪必须以HiCN值为标准进行校正2023/1/11血细胞分布直方图一种可以显示细胞分群情况的图形横坐标（“X”轴）表示细胞体积（以fl表示）纵坐标（“Y”轴）表示细胞相对数量三、血细胞检验图形及临床应用2023/1/11白细胞体积分布直方图红细胞体积分布直方图血小板分布直方图（一）白细胞分布直方图及临床应用白细胞正常直方图在35-450fl范围内分析白细胞的体积根据体积大小分为三群：小细胞群、中间细胞群、大细胞群出现异常直方图时，常伴随相应部位的报警信号。2023/1/11小细胞群中间细胞群大细胞群白细胞直方图的临床意义图形变化决定进一步检查的内容

根据图形变化，决定是否进一步镜检，提示在显微镜分类时注意异常细胞的存在白细胞直方图变化无特异性

如中间细胞群可包括大淋巴细胞、原始细胞、幼稚细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性细胞，其中任一细胞增多，均可使直方图产生相似的变化2023/1/11

反映某些人为或病理因素干扰白细胞计数和分类计数※中性粒细胞增多(x400)中性粒细胞峰高、面宽WBCLYM%MXD%NEUT%23.8x109/L8.1%7.9%84.0%StabSegLymMonoEoBaso8%77%7%7%1%0%2023/1/11白细胞分布直方图及临床应用※淋巴细胞增多(x1000)StabSegLymphMonoEoBasoAty-Lym4%20%64%4%5%0%3%WBCLYM%MXD%NEUT%7.9x109/L+64.7%15.8%–19.5%2023/1/11※单核细胞增多(x1000)中部突起StabSegLymphMonoEoBasoAty-Lym8%37%17%36%1%0%1%WBCLYM%MXD%NEUT%7.7x109/LF1*13.2%F2*37.7%49.1%2023/1/11※嗜酸性粒细胞增多(x1000)中部突起StabSegLymphMonoEoBasoMyAty-Lym1%19%20%9%48%1%1%1%WBCLYM%MXD%NEUT%4.3x109/L18.3%+62.2%–19.5%2023/1/11慢性淋巴细胞性白血病酷似正常淋巴细胞增多在60fL处出现明显尖峰，中间细胞群和大细胞群波谷消失骨髓免疫分型确诊为B淋巴细胞白血病2023/1/11慢性粒细胞性白血病白细胞三分群消失，出现单一曲线，主峰位于175fL提示出现大量中性和中性幼稚细胞，分类没有结果2023/1/11常见报警信息报警提示直方图异常区域原因R1淋巴细胞左侧区域血小板聚集/巨大血小板/疟原虫/有核红细胞/不溶解红细胞/异常淋巴细胞R2淋巴和单个核细胞之间异常淋巴细胞/原幼细胞/浆细胞/嗜酸性粒细胞/嗜碱性粒细胞R3单个核和粒细胞间未成熟粒细胞/嗜酸性粒细胞/异常细胞R4粒细胞右侧区域粒细胞增多症RM多区异常以上多种原因引起R1R2R4R3ALAMAG2023/1/11报警信息的功能提高血细胞分类结果的准确性用于筛选血常规的异常白细胞分类结果对于疑似血液病患者，无论仪器是否有报警信号，均应作涂片复检2023/1/11白细胞计数和分群的注意事项溶血剂处理后的白细胞直方图变化

溶血剂处理后的白细胞体积与其自然体积不完全一致，电阻抗法白细胞直方图并不能代表其自然状况，但可以用于判断白细胞各亚群的分布情况，作为血涂片显微镜检查前的“初筛”，对病理标本必须经显微镜检查确认。血细胞分析仪必须使用配套试剂

不同血细胞分析仪所采用的稀释液及溶血剂成分不完全相同，对白细胞膜的作用程度不同，同一份血液标本在不同仪器的直方图形状有所不同，所以各型号仪器确定白细胞“分群”的区分界限设置点也不同。不同血细胞分析仪的直方图不同

不同厂家不同型号仪器的白细胞直方图是不完全相同的，但各类仪器电阻抗法白细胞直方图的病理变化趋势是一致的。2023/1/11红细胞正常直方图（二）红细胞分布直方图及临床应用36-360fl范围内分析红细胞在直方图上反映的是生理状态下的红细胞大小在典型的红细胞直方图可以分两个群相关参数：MCV、RDW红细胞体积发生变化时直方图可左移或右移或出现双峰2023/1/11红细胞主群大细胞群fl相对数量缺铁性贫血治疗前：波峰左移，峰底变宽缺铁性贫血治疗后：双峰，峰底变宽2023/1/11不同类型贫血时，红细胞体积的变化使红细胞体积分布图形发生变化，结合其他参数对鉴别诊断颇有价值。红细胞分布直方图的临床意义峰左移双峰小细胞不均一性贫血轻型β-珠蛋白生成障碍性贫血：波峰左移，峰底基本不变2023/1/11峰左移小细胞均一性贫血巨幼细胞性贫血：波峰右移，峰底变宽巨幼细胞性贫血治疗后：可有双峰，峰底变宽2023/1/11峰右移双峰大细胞不均一性贫血红细胞计数的注意事项含有白细胞因素,但可以忽略红细胞：白细胞约为750：1病理情况下易产生误差白细胞增加明显贫血严重2023/1/11（三）血小板分布直方图及临床应用血小板正常直方图2023/1/112-30fl范围内分析血小板正常呈左偏态分布，主要集中在2-15fl相关参数：PLT,MPV,PCT,PDW血小板直方图的临床意义2023/1/11异常血小板直方图大血小板小红细胞聚集的血小板干扰a.正常血小板直方图；b.大血小板直方图；c.小血小板直方图；d、e.聚集的血小板直方图；f.小红细胞干扰的血细胞直方图1/11/2023大血小板出现大血小板的血样，PLT直方图分布较宽，显示出大血小板。2023/1/11小红细胞干扰血小板计数特征：直方图右侧曲线最低点不与X轴重合，然后又高高抬起，该标本红细胞直方图左移，峰底变宽，血涂片上见较多小红细胞。2023/1/11小红细胞血小板聚集WBC直方图PLT直方图血图片检查所示，几十个血小板凝集在一起的血样。WBC直方图Ghost区和小细胞区域之间的鉴别线与直方图的交点很高（箭头所示）同时有WL报警信号。PLT直方图也提示有大颗粒存在。因此无法测得正确血小板数目，需重新采血2023/1/11

四、如何保证结果的准确性？（一）排除病理性误差干扰因素（二）血细胞形态学复检（三）试剂的合理使用及仪器的规范使用（四）性能评价与质量管理2023/1/11常见误差因素分析白细胞计数的干扰因素

假性白细胞减少或增多红细胞计数干扰因素

假性红细胞减少或增多血小板计数干扰因素

假性血小板减少或增多2023/1/11（一）排除病理性误差干扰因素白细胞计数的干扰因素白细胞聚集所致假性白细胞减少红细胞溶血不良所致假性白细胞增多有核红细胞所致假性白细胞增多2023/1/11红细胞溶血不良---假性白细胞增多处理方法

形态学镜检2023/1/11典型的红细胞溶血不良干扰直方图在WBC直方图上，WBC低鉴别线与直方图曲线交点的位置异常高。同时有WL报警信号，“*”表示WBC数据不可信。这种现象在肝疾病患者血中多见。白细胞直方图2023/1/11红细胞溶血不良的病因和发病机制发病机制脂类代谢异常红细胞膜表面与外周血脂类结合形成脂质颗粒保护膜红细胞膜表面结构异常正常浓度的溶血素无法破坏红细胞膜表面病因肝功能低下(肝硬化、肝癌晚期、胆道堵塞)高脂血症高胆固醇制剂输液治疗过程中异常血红蛋白症(Hgb-S症、Hgb-C症)2023/1/11有核红细胞的干扰---假性白细胞增多WBC：56.1X109/L2023/1/11如何排除NRBC对白细胞检测的干扰形态学镜检高端仪器2023/1/11有核红细胞增多的原因血液学疾病：急性髓细胞白血病急性红白血病急性淋巴细胞白血病慢性粒细胞白血病慢性淋巴细胞白血病多发性骨髓瘤骨髓增生异常综合征恶性淋巴瘤骨髓转移癌骨髓纤维化原发性血小板增多症血液非肿瘤性疾病

缺铁性贫血巨幼细胞贫血溶血性贫血增生性贫血再生障碍性贫血原发性血小板减少性紫癜感染性疾病原发性脾亢

2023/1/11红细胞计数的干扰因素红细胞冷凝集所致假性红细胞减少巨大血小板所致假性红细胞增多2023/1/11红细胞凝集---假性红细胞减少RBCHGBHCTMCVMCHMCHCRDW2.231440.249111.764.65780.254×1012/Lg/LfLpgg/L处理方法：1.加温至37OC2.离心洗涤红细胞（用等量稀释液置换血浆或上清液）2023/1/11红细胞冷凝集---假性红细胞减少冷凝集素综合症在31℃以下自身红细胞抗原发生可逆性凝集病因白血病、恶性淋巴瘤或全身性红斑狼疮肺炎支原体属感染传染性单核细胞增多症血吸虫病、丝虫病、疟疾肝硬化、非典型性肺炎2023/1/11血小板计数的干扰因素假性血小板减少样品采集环节中的血小板聚集EDTA诱导的血小板聚集血小板卫星现象巨大血小板假性血小板增多红、白细胞碎片小红细胞2023/1/11PLT:51×109/LEDTA诱导血小板聚集---假性血小板减少2023/1/11EDTA诱导血小板聚集---假性血小板减少发病率0.07%~0.11%诱因健康人自身免疫病、慢性炎症、病毒或细菌感染肿瘤潜在的误诊风险高预防性血小板输血的医学决定水平血小板计数为20×109/L误诊为ITP或TTP2023/1/11EDTA诱导血小板聚集的发病机制血小板糖膜改变，血小板膜内隐匿性抗原暴露血浆中自身抗体与隐匿性抗原形成复合物激活细胞膜中的磷酯酶血小板膜水解并释放血小板活性物质AA、ADP、5-TH、胶原、凝血酶原等血小板纤维蛋白原受体被活化血小板与纤维蛋白原受体结合后聚集成团出现血小板假性减少2023/1/11EDTA诱导血小板聚集的处理方法光学显微镜直接镜检采用血小板稀释液进行预稀释瑞氏染色更换抗凝剂重新抽血检测枸橼酸钠肝素钠巨大血小板---假性血小板减少PLT-I32[10^9/L]PLT-O54[10^9/L]2023/1/11巨大血小板的处理办法五分类血细胞分析仪人工计数形态学确认同血小板聚集2023/1/11红、白细胞碎片的干扰---假性血小板增多PLT-I16[10^9/L]PLT-O6[10^9/L]2023/1/11红、白细胞碎片产生的原因红细胞碎片弥散性血管内凝血微血管病性溶血性贫血心源性溶血性贫血其它化学中毒、肾功能衰竭血栓性血小板减少性紫癜和化疗白细胞碎片AML、淋巴瘤、严重感染、化疗2023/1/11如何制定形态学复检规则（一）以国际实验血液学发表的“41条”规则为依据LabHematol2005,11:83中华检验医学杂志2008,31:752复检的绝对条件报警提示未成熟细胞原始细胞有核红细胞仪器分群结果异常确诊为或疑似血液恶性肿瘤者复检的可调节条件血细胞计数超出参考范围（二）血细胞形态学复检2023/1/11如何制定形态学复检规则（二）涂片镜检阳性判断标准国际血液学复检专家组LabHematol2005,11:83中国血液学复检专家组中华检验医学杂志2008,31:752涂片镜检要求由2名人员进行双盲检测计数结果均值形态结果任何1名人员发现阳性即判断为镜检阳性统计学分析2023/1/11如何制定形态学复检规则（三）阳性率假阳性率阴性率假阴性率符合率复检率14.23%23.71%59.61%2.45%73.84%37.94%①首先参考“41条”规则②降低复检率从降低假阳性率入手不能单纯追求复检率降低③控制漏诊率在临床可接受水平（<5%）防止降低假阳性率导致的假阴性率即漏诊率升高④不能改变复检的绝对条件2023/1/11病例1——单核细胞增多男，23岁感冒9天WBCNEUTLYMPHMONOEOBASO&6.62【109/L】&3.82【109/L】57.7【%】&1.25【109/L】18.9-【%】1.24+【109/L】18.7+【%】0.02*【109/L】0.3*【%】0.06*【109/L】0.9*【%】分析仪测定结果：报警提示：MonocytosisImmatureGran?LeftShift?复检规则：24.怀疑性报警:不成熟粒细胞？34.左移报警？DIFF散点图上，单核细胞区域内可出现许多绿点（红色箭头示），提示单核细胞增多。散点分布在中性粒细胞区域上方（绿色箭头示），提示出现幼稚粒细胞。IMI散点图上的红点也证实这一结果。2023/1/11StabSegLymphMonoEoBasoMyeloMetaAty-Lym5.5【%】48.5【%】23.5【%】17.5【%】0.0【%】0.0【%】3.5【%】0.5【%】1.0【%】涂片镜检分类结果：单核细胞2023/1/11核左移中幼粒2023/1/11病例2——嗜酸性粒细胞增多女，20岁荨麻疹WBCPLTPDWMPVP-LCRPCTNEUTLYMPHMONOEOBASO28.67*【109/L】249*【109/L】10.8*【fl】10.0*【fl】24.5*【%】0.25*【%】2.19*【109/L】2.58*【109/L】0.39+【109/L】23.44*【109/L】0.07*【109/L】分析仪测定结果：报警提示：EosinophiliaLeukocytosisPLTClumps?DIFF散点图上，嗜酸性粒细胞区域内可出现许多红点点（红色箭头示），提示嗜酸性粒细胞增多。复检规则：20.嗜酸粒细胞绝对计数：>2.0X109/L26.WBC结果不可信报警：*30.PLT聚集报警？2023/1/11StabSegLymphMonoEoBasoPLTClumps(+)0.0【%】8.5【%】11.5【%】1.0【%】78.5【%】0.5【%】涂片镜检分类结果：嗜酸性粒细胞血小板凝集2023/1/11嗜酸性杆状核粒细胞嗜酸性晚幼粒细胞2023/1/11病例3——ALL（L1）女，15岁患者自觉食欲减退，8月初发热，约2天后退热。8月15日就诊入院。急性淋巴细胞白血病（L1）WBCNEUTLYMPHMONOEOBASO&194.4@【109/L】----【109/L】----【%】----【109/L】----【%】----【109/L】----【%】0.20*【109/L】0.1*【%】----【109/L】----【%】分析仪测定结果：DIFF散点图上，散点分布在淋巴细胞和单核细胞区域形成单个集落（红色箭头示），提示出现原始细胞。散点分布于侧向荧光强度高的区域，提示出现异型淋巴细胞（绿色箭头示）。在IMI散点图上，可见红点，提示出现原始细胞。在NRBC散点图上，可见粉红点(蓝色箭头示），为NRBC。2023/1/11病例3——ALL（L1）报警提示：WBCAbn

ScattergramLeukocytosisImmatureGran?LeftShit?Blasts?AnemiaStabSegLymphMonoEoBasoBlastAty-Ly0.5【%】0.5【%】4.5【%】0.5【%】0.0【%】0.0【%】93.0【%】1.0【%】涂片镜检分类结果：原始淋巴细胞第一型（L1）原始和幼稚淋巴细胞以小细胞（直径＜12um为主，染色质较粗，结构较一致，核仁少而小，不清楚，胞浆少，轻或中度嗜碱性。2023/1/11复检规则：2.WBC超出界值16.无白细胞分类计数结果24.怀疑性报警:不成熟粒细胞？34.左移报警？37.原始细胞报警？异型淋巴细胞2023/1/11过氧化物酶染色（阴性）过氧化物酶染色（粒细胞阳性）

（三）试剂的合理使用及仪器的规范使用试剂的合理使用（直接影响脉冲大小）尽可能使用配套试剂仪器的规范使用避免堵孔2023/1/11采血时混入纤维丝采血不畅有小凝块蛋白沉淀未及时清洗标本未加盖落入灰尘水分蒸发形成结晶堵孔原因不用棉花球擦拭确保采血顺利及时清洗仪器注意工作环境/样本加盖去除结晶预防方法避免堵孔（四）血细胞分析仪性能评价及质量管理质量管理分析前质量管理分析中质量管理分析后质量管理2023/1/11分析前的质量管理做好操作人员上岗前的培训。按照仪器说明书的要求，选择合适的仪器安装环境。做好仪器的鉴定和校正。

-----血细胞分析仪性能验证做好仪器的管理工作。标本的采集和运送。注意受检者生理状态对实验结果的影响。2023/1/11血细胞分析仪性能验证内容精密度携带污染率线性范围可比性白细胞分类的鉴定性能评价

血细胞分析仪安装后或每次维修后，必须按照ICSH公布的血细胞分析仪评价指标对分析仪的技术性能进行测试与评价，这对充分发挥血细胞分析仪的正常作用、为临床提供准确检验信息起重要作用。2023/1/11精密度实验方案根据NCCLSEP15-A文件取低、中、高三个水平的新鲜血，连续重复测定11次，弃掉第1次结果采用后面10个结果计算CV，SD要求CV符合卫生部临检中心规定参数WBCRBCHGBHCTMCVPLT判定标准CV≤3.00%1.50%1.50%1.50%1.50%4.00%2023/1/11精密度实例分析参数WBCRBCHGBHCTMCVPLT单位ⅹ109/L1012/Lg/LL/LfLⅹ109/L13.803.118631.267.813523.823.088631.367.312733.773.118630.867.212943.873.088731.166.912953.943.078630.966.713063.843.108731.066.713073.693.138731.066.513383.943.138830.966.512993.913.158831.066.2130103.853.168831.266.1135MEAN3.843.1186.931.066.8130.7SD0.0780.0300.8760.1580.5242.710CV2.04%0.98%1.01%0.51%0.78%2.07%标准CV≤3.0%1.5%1.5%1.5%1.5%4.0%结论合格合格合格合格合格合格不合格考虑血量是否充足、混匀；标本是否新鲜合格；试剂和仪器是否稳定携带污染率实验方案取高浓度血液样本，混合均匀后连续测定三次，测定值分别为H1、H2、H3再取低浓度血液样本，连续测定3次，测定值分别为L1、L2、L3按公式计算携带污染率携带污染率=（L1－L3）/（H3－L3）×100%要求CV符合卫生部临检中心规定参数WBCRBCHGBHCTPLT要求1.0%1.0%1.0%1.0%1.0%2023/1/11携带污染率实例分析试验材料新鲜血

参数WBCRBCHGBHCTPLT单位ⅹ109/Lⅹ1012/Lg/LL/Lⅹ109/LH116.265.3517449.6499H216.575.3117449.3506H315.975.3617449.7503L12.832.295717.558L22.962.315717.762L32.922.295717.562携带污染率-0.67%0.00%0.00%0.00%-0.91%要求1.0%1.0%1.0%1.0%1.0%结论合格合格合格合格合格不合格在排除上述影响因素后，考虑仪器本身问题可能性大2023/1/11线性范围实验方案选取一份接近预期上限的高值全血样本（H）分别按100%、80%、60%、40%、20%的比例进行稀释，每个稀释度重复测定3次，计算均值将实测值与理论值作比较（偏离应小于10%），计算y=ax+b，验证线性范围要求a值在1±0.05范围内相关系数r≥0.9752023/1/11线性范围实例分析稀释度第一次第二次第三