检验项目标准操作规程_第1页
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文档简介

检验标本的采集一、标本的正确采集标本采集必须符合2个条件,即必须满足检测结果正确性的各项要求和检测结果必须能真实地反映检验对象当前病情,避免干扰因素的存在。二、标本的贮存标本采集后尽快送至实验室,若不能及时送检,已采集的标本要按检验规定的贮存条件,如室温、冰浴、温浴或防腐贮存,将标本直立置于稳定、干燥、避光、密闭的环境中,避免振摇,以免标本遗洒或溶血影响检测结果。三、标本的运送必须保证运送后标本所分析的结果与刚采集标本后分析的结果一致。四、标本的签收临床工作人员从口才采集标本并将标本从临床运送到实验室及实验室人员接收临床标本,均应按标准化要求进行,做到认真核对,包括标本来源、标本属性、检查项目、标本采集和运送是否合乎要求等,标本送出人员和标本接收人员都要做认真的记录并签字存档。五、标本的处理1、实验室接收标本后应及时正确地予以处理,否则会影响检测结果的准确性。2、如果取血后未尽快转送或分离血清、血浆,血清与血块簪时间接触可发生变化。3、实验室接收标本后处理应注意事项:(1)、时间:实验室接收标本后应尽快予以分类和离心。①、促凝标本应尽早处理,可在采血5-15分钟后离心;②抗凝标本可采血后立即离心;③非抗凝(无促凝)标本采血30-60分钟后离心;④抗凝全血标本(全血细胞分析、ESR等)不需要离心。(2)、温度:一般标本为室温(最好是22-25℃)放置;冷藏标本(对温度依赖性分析物)应保持在2-8(3)、采血管放置:应管口(盖管塞)向上,保持垂直立位放置。(4)、采血管必须封口:管塞移去后会使血PH改变,影响检测结果,封口可以减少污染、蒸发、喷洒和溢出等。六、分析前的可变因素1、生物因素:可引起所检测物质在体内的变化,此种变化与检测方法无关,分为可变的和固定的生物因素。2、干扰因素:在收集和分析标本过程中,干扰因素常导致分析结果与被测物真实浓度不符。七、标本采集的基本原则遵照医嘱采集各种标本均应按医嘱执行。凡对检验申请单有疑问,应核实清楚后再执行。1、充分准备(1)采集标本前,应明确检验项目、检验目的及注意事项并向病人作耐心解释,以取得合作。(2).应根据检验目的选择适当容器,容器外必须贴上标签,注明病人姓名、科室、床号、检查目的、送检时间等。2、严格查对(1).采集前应认真查对医嘱,核对申请项目、病人姓名、床号等。(2).采集完毕及送检前应重复查对。3、正确采集采集标本既要保证及时,又须保证采集量准确,这样才能保证送检标本的质量。4、及时送检标本采集后应及时送检,特殊标本还应注明采集时间。八、标本采集方法(一)、静脉血液采集1.目的抽取静脉血标本以做各项检验。2.适用范围适用于本科做生化、免疫、血常规等项目所需血液标本的采集。3.物品准备:止血带、一次性垫巾、无菌棉签、复合碘消毒液、一次性采血针、负压真空管(数量和种类根据要求选取后检查灭菌日期、有效期及有无漏气)、试管架、编号笔、口罩。4.检验申请单填写要求:4.1检验申请单用钢笔填写,使用正楷字,字迹清楚,填写完整。4.2填写内容包括:受检者姓名、性别、年龄、临床诊断、送检标本、检验项目、标本采集年月日时、申请医生及采样者签名。5.操作步骤:5.1查对检验申请单、受检者姓名及是否已按医嘱准备,向受检者解释操作目的,以取得合作。在采血管上贴好与检验申请单相对应的标签。5.2选择血管,常用肘窝静脉、肘正中静脉、前臂内侧静脉,小儿可采用颈外静脉、大隐静脉。5.3在穿刺部位肢体下放一次性垫巾、止血带。5.4用复合碘棉签消毒穿刺部位。5.5在静脉穿刺部位上方4-7厘米处扎止血带,嘱受检者握紧拳头,使静脉充盈显露。5.6穿刺:推荐使用真空采血技术。摘掉静脉穿刺针上的保护套,进行静脉穿刺,穿刺成功后,用贴好标签的负压真空管采集静脉血,松开止血带,受检者松拳,用棉签压住进针处,拔出针头,嘱采血对象按压2-3分钟。5.7为受检者整理衣袖。5.8采血完毕后,产生的医疗垃圾按规定分类处理。6.注意事项6.1采血前应核对好姓名和检验项目,明确标本要求。6.2抗凝管收集血标本后,立即将试管轻轻颠倒5~6次,使血液与抗凝剂充分混匀。6.3一般生化、免疫检验用干燥非抗凝管收集标本,采样量3-5ml。若检验项目较多,应适当增加采样量。6.4血常规检验用EDTAK2抗凝管收集标本,采样量0.5-1毫升。6.5凝血四项、血红蛋白电泳、3P试验用枸橼酸钠(0.2ml)抗凝管收集标本,采样量必须准确,为1.8ml。血沉用枸橼酸钠0.4ml抗凝,抽血1.6ml。6.6高铁血红蛋白还原试验(G6PD)以枸橼酸钠0.2ml抗凝,另加入葡萄糖20mg,抽静脉血1.8ml,混匀。6.7糖化血红蛋白测定需用肝素管抗凝。6.8血液粘度测定需同时抽取血常规、血沉和肝素抗凝血(5ml)三份样本。6.9餐后,血糖、血脂可增加而影响测定结果,故一般应空腹抽血。有些食物成分:高蛋白、高脂及饮食可引起血中蛋白、血脂、尿酸增高;香蕉、咖啡等可引起尿中儿茶酚胺代谢产物的测定等。6.10药物影响:如异菸肼、庆大毒素、氨芐青毒素可使谷丙转氨酶活性增高、咖啡因可使胆红素增加。因此,建议检查前几天就停止使用有干扰的药物,且申请单最好能注明近期用药情况。7.标本运输及实验前存放:低温条件2-8℃1小时内分离出血清,室温放置不超过4小时,4℃8.附加检验项目申请:8.1标本采集送出后需附加检验项目的,其申请应在标本采集当天上午11点30分以前电话通知实验室。8.2附加检验项目申请为本检验科目录外项目的需提前一天与检验科联系,以便联系其它实验室进行检测。9.其它:如分析失败,将对同一原始样本进行检验。如仍不能发出报告者,分析原因并告知受检者重新采样检验。(二)、末梢血采集1.目的采集末梢血标本以做门诊血常规检验。2.适用范围适用于门诊检验科做血常规等项目所需血液标本的采集。3.物品准备:一次性采血针、75%酒精、无菌棉球、0.5毫升离心管(EDTAK2抗凝管)、试管架、编号笔、微型震荡器、口罩。4.检验申请单填写要求:4.1检验申请单用钢笔填写,使用正楷字,字迹清楚,填写完整。4.2填写内容包括:受检者姓名、性别、年龄、化验单编号、临床诊断、送检标本、检验项目、标本采集标本年月日时、申请医生及采样者签名。5.操作步骤:5.1查对检验申请单、受检者姓名及是否已按医嘱准备,向受检者解释操作目的,以取得合作。5.2常用选择无名指,先用酒精棉球消毒,然后用一次性采血针穿刺,让血液自然流出,用消毒棉球轻拭去第一滴后,将血液收集在0.5毫升离心管(EDTAK2抗凝管),约0.2-0.3毫升。5.3用干棉球压住穿刺部位,嘱采血对象按压2-3分钟。5.4在微型震荡器混匀。马上送检。6.注意事项6.1采血前应核对好姓名和检验项目,明确标本要求。6.2血常规用EDTAK2抗凝管收集血标本后,在微型震荡器混匀,使血液与抗凝剂充分混匀。6.3除特殊情况外,不要在耳垂采血。婴幼儿可自拇指或足跟两侧采血。烧伤患者可根据情况选用皮肤完整的肢体末端。采血部位应无炎症或水肿。末梢采血不可用力挤压。7.标本运输及实验前存放:立即送检,如需保存,可置2-8℃8.其它:如分析失败,将对同一原始样本进行检验。如仍不能发出报告者,分析原因并告知受检者重新采样检验。(三)尿液标本采集1.目的采集尿液标本以做尿液常规、生化检验。2.适用范围适用于本科做尿液常规、生化项目所需尿液标本的采集。3.物品准备:专用一次性尿杯、编号笔。4.检验申请单填写要求:4.1检验申请单用钢笔填写,使用正楷字,字迹清楚,填写完整。4.2填写内容包括:受检者姓名、性别、年龄、化验单编号、临床诊断、送检标本、检验项目、标本采集标本年月日时、申请医生及采样者签名。5.操作步骤:5.1查对检验申请单、姓名,向受检者解释操作目的,以取得合作。5.2发一次性尿杯一个给受检者,嘱受检者留取新鲜尿立即送检,以清晨第一次中间段尿为宜。5.3受检者按要求自己用一次性尿杯留取半杯尿标本交检验科编号待检。6.注意事项6.1根据采集时间,可分为晨尿、随机尿、空腹尿、餐后尿、计时尿(2h、3h、12h、24h)等。一般定性分析测定,可在任意时间留取标本。常规定性分析,多采用晨尿。计时尿多用于肾功能和有形成分排出率的估计。许多定量分析需收集24小时尿液。微生物检验的标本应取尿道排出的中段尿并立即送检。一般尿液检查应留取新鲜尿液置清净、干燥容器中立即送检。(静脉滴注大剂量青霉素、VitC时可影响尿蛋白、尿糖及尿隐血结果,应尽量避免)。6.2特殊检验如尿妊娠试验、尿糖定性试验一般应取空腹晨尿送检。6.3标本应避免污染。一般定性分析标本,应在留取后马上检测。若需保存、或收集24小时尿液,原则上应首选0~4℃a.甲苯(或二甲苯):较常用,如24h尿糖定量、尿蛋白定量测定。100ml尿液中加1ml。不能制止尿液中已有细菌的繁殖。b.氯仿:防腐效果较甲苯好。可能干扰尿沉渣镜检。c.盐酸:分析测定甾体激素及其衍生物或儿茶酚胺以及含氮物质时常选用。100ml尿液中加1ml,或24小时尿液中10-15ml。d.甲醛:100ml尿液中加0.5ml。用于24h尿无机离子定量及艾迪氏计数测定可干扰尿糖测定和干化学法的白细胞测定。7.其它:如分析失败,将对同一原始样本进行检验。如仍不能发出报告者,分析原因并告知受检者重新采样检验。九、标本正确采集的医学意义(一)取样技术引起的分析前变异姿势、静脉加压的持续时间、最后一次进食、体力付出、诊断方法、血样采集时间、溶血、输液、外源性污染等。1、姿势从仰卧位到直立位的过程中.大约有8%的体内水由血管中进入间质组织中。患者由直立位转为坐位或仰卧位后,抽血测得的蛋白质、蛋白质结合物、细胞比至少让患者仰卧10分钟后抽血所测定的结果要高3%~8%。对于一些参数,由上述原因所导致的影响要比分析不精确的影响还要大.例如血红蛋白、红细胞计数、白细胞计数、红细胞压积、总蛋白、胆固醇、白蛋白、免疫球蛋白和钙离子。这种改变在有水肿的患者中比在健康人中更明显。人体直立、手臂下垂时的血液浓度比保持手臂于心房水平要高。由于体内循环的改变,由仰卧位到直立位可以导致去甲肾上腺素、醛固酮和肾素水平的升高两倍以上。2、静脉加压的持续时间静脉加压和体位从水平位变为垂直位有相同的效应。所有的高分子物质增高,如10分钟的加压时间可使总蛋白升高20%。最多2分钟的短期加压几乎不引起什么变化。如对水肿患者的手臂加压,血液浓度的问题将非常突出。3、最后一次进食进食可引起血中葡萄糖、磷酸盐和胆红素的增加,ALT和钾离子明显增高和尿酸、蛋白质、钙离子、胆固醇中到轻度增高。脂肪摄入的程度决定了甘油三脂的水平。O’Lewis阳性血型的人在进食脂肪餐后可呈现碱性磷酸酶明显升高。在实际诊断为目的时,低脂肪的简单早餐对许多血液成分的浓度无明显影响。而另一方面,如果要评估脂肪代谢,就必须坚持12小时禁食葡萄糖耐量试验前,要求连续几天摄入高碳水化合物。4、体力付出体液临时性的从血管内流入间质中,致使血液中蛋白质、蛋白质结合物和血细胞浓度升高。经过几个小时的运动,尤其是对未经训练过的个体,由于体力所致的细胞损伤导致肌肉组织中的酶如AST、LD、CK的浓度升高。5、诊断方法诊断方法对临床实验室结果有许多影响。在采血样之前按摩前列腺可引起酸性磷酸酶的升高.在糖耐量试验中,钾、磷和镁离子浓度升高。肌肉注射一些药物如苯二氮卓类、度冷丁、喷他左辛、氯丙嗪、利多卡因、苯巴比妥、异丙嗪,可引起CK和肌红蛋白的升高。外科手术可引起急性时相蛋白浓度的升高,从而导致红细胞沉降率加快。6、血样采集时间在每日的不同时间,铁浓度都有明显的变化,在下午的变化最大;而皮质醇、肾上腺素和去甲肾上腺素在早晨的变化最大;肾素、醛固酮、生长激素和甲状旁腺素在晚上的变化最大。7、溶血长时间过度的加压可使血管内溶血,用注射器采血时用力过大或不正确的穿刺吸入静脉周围血导致血管外溶血。溶血可致钾离子浓度升高和LD、ALT、AST和酸性磷酸酶活力的升高。如血红蛋白浓度超过0.2g/L肉眼即可见到溶血。8、输液不可在输液同时及同侧取血样检测。(二)需要考虑的生物因素1、性别许多实验室检测都列出了不同性别的参考值。对一些被测物,性别间的差异可能是由于体重、体表面积和肌肉重量的不同而导致的。下列试验在男性中所测得的结果比在女性中所测得的高:GGT、甘油三酯、尿酸、肌酐、氨、CK、AST、ALP、铁、尿素、胆固醇。2、种族就酶的参考值来说,种族不会导致明显的差异。就一些底物如胆固醇、甘油三酯、尿酸来说,不同社会经济阶层的饮食习惯不同所导致的差异要比种族不同所导致的差异大。在血型的频率分布上,种族差异起着很重要的作用,同样,种族差异在一些血浆蛋白表型和它们蛋白质浓度之间的关系中也起一定的作用,如结合珠蛋白和a1一抗胰蛋白酶。3、年龄和老化钙、磷酸盐、总蛋白和白蛋白水平下降.而葡萄糖、尿素、胆固醇的浓度和LD活性增高。单克隆丙种球蛋白病发病率上升和肌酸清除率的下降都是与年龄相关的改变。肌酸、ALP、GGT的升高和男性中年龄相关性尿酸的增高仍没有被明确的证实。与成人相比,儿童期的酶活性较高,而铁、铜和免疫球蛋白的浓度较低。4、生物节律个体的不规则的血液成分在1天内的变化必须与人体的生理节律相鉴别。后者是24h内有规律的反复出现的特定现象。时区改变时.常常出现生物节律的改变.如穿越经线。机体需要6~8h去适应新的时区。并不是所有的人都出现昼夜节律和生物节律的改变。这些改变常伴有暂时性的血液成分的改变(如在早晨常有几分钟的皮质醇的改变)或血液成分在较长时间内发生变动。个体间的变化、生理节律和长期的变动只在纵向检测时有意义。在横向检测中,因为有参考值范围,所以这些改变没什么意义。5、体重肥胖的男性有较高浓度的尿酸、胆固醇、LD、胰岛素、餐后葡萄糖、AST、肌酐、总蛋白和尿酸。磷酸盐在男性和女性肥胖者中较低,而钙离子只在女性肥胖者中较低。6、酒精饮酒几分钟后.AST会轻度升高.3h后达到最大,但仍在不饮酒的参考范围内。一段时间后,GGT轻度增高.对别的酶的影响很难检测到。饮酒后,甚至是少量的饮酒后,在一些个体中可以检测到甘油三酯持续几个小时或几天的大量增高。慢性饮酒可显示持续性的GGT水平升高。7、紧张儿茶酚胺和17一羟皮质类甾醇的产生增加。皮质醇、肾素、醛固酮和生长激素的血浆水平升高。促甲状腺激素和催乳素的血浆水平也可能增加。8、卧床休息肾脏排泄钠、钙、氯化物、磷酸盐和氨增加.ALP的血浆水平升高。9、外科手术对血细胞计数和血清中酶活性和底物浓度的影响取决于所患的疾病和手术类型。通常,手术后的第一个24h内会发生下列改变:血红蛋白浓度下降、白细胞增多、红细胞沉降率升高,像C反应蛋白等急性时相蛋白增加、暂时性的中度高胆红素血症和尿素增高。CK水平明显升高,尤其是在腹部或胸腔手术时,其水平在最高参考限值的3~10倍.胆囊切除术后,经常可见到中度转氨酶升高,但在别的外科手术中,很少见到转氦酶的升高。10、电离辐射电离辐射治疗,由于肿瘤组织的溶解,常可导致血小板和白细胞的下降,尿酸升高至1785umoI/L(30mg/d1)。11、怀孕ALP、胆固醇、甘油三酯、铜、血浆铜蓝蛋白、运铁蛋白、白细胞计数、孕酮、雌二醇、雌三醇和催乳素升高。随怀孕而上升的人绒毛膜促性腺激素(hCG)和甲胎蛋白。铁、镁、钙、总蛋白、白蛋白、胆碱酯酶、血红蛋白、红细胞压积和红细胞计数下降。12、口服避孕药(OC)服用OC后,血清中的酶在一定周期内升高,然后降低。任何升高都保持在正常值范围内。甲状腺素结合球蛋白和血浆铜蓝蛋白在女性分别升高44%和70%。(三)、影响检验结果的因素在临床医疗工作中.临床医生面对尿沉渣报告中极少量的红血球,会针对导尿或女性患者与男性患者,给予不同的解读。但是对未怀疑的疾病,检验室居然出现阳性报告,临床医师绝不能掉以轻心,简单认定检验报告有误,应小心求证以得到正确的解释。另外尚有一些饮食、生理现象、标本处置不当、药物因素,也会造成判读的偏差。本节主要就影响检验结果的疾病外因素予以简单介绍。1、饮食因素(1)、必须空腹(通常指禁食8~10小时,其间只允许喝白开水)的检验项目如:GLu、脂类(LipidProfile)、铁(FE)、总铁结合力(TIBC)、转肽酶(GTT)、胆汁酸(BileAcid)、胰岛素(1nsulin)等。其它血清学检验如需血清澄清最好空腹:如各种病毒抗体等。(2)、空腹超过48小时可能会造成胆红素(BIL)两倍以上的增加,而Glu、白蛋白(ALB)、补体(ComplementC3)及转铁蛋白(Transferrin)下降。(3)、餐后立即抽血,造成高K低P,混浊的血清其BlL、LDH、TP增高,有可能造成UA、BUN降低。(4)、高蛋白饮食者,其BUN、尿酸(Urate)高而高嘌呤(Purines)食物影响的当然就是Urate增高。(5)、口服避孕药使T4(RlA)、TG、ALT、FE、GGT升高,ALB低等.可影响的检验报告据称有100多项。(6)、酒精可导致检验结果立即上升的有:UA、乳酸(Lactate);嗜酒者的影响如:GGT、ALT、TG,成瘾者甚至影响其它如:BlL、AST、ALP。2、生理因素(1)、怀孕造成甲胎蛋白(AFP)、AMY、胆固醇(CHOL)、甘油三酯(TG)偏高,BUN、NA、ALB偏低。(2)、剧烈运动后,CK、CREA、BUN、UA、WBC、K+、BlL、LACT、高密度脂蛋白胆固醇(HDL—C)会升高。运动员的LDH、BUN较高。长期的运动促使HDL—C、Lactate等升高。(3)、采血部位、姿势和止血带的使用①、采血时要避开水肿、破损部位,应“一针见血”,防止组织损伤,外源性凝血因子进入针管;如果采血过慢或不顺利,可能激活凝血系统.使凝血因子活性增高、血小板假性减低。输液病人应在输液装置的对侧胳膊采血,避免血液被稀释。决不能在输液装置的近心端采血。②、姿势的影响结果。卧姿、坐姿或站姿,由于造成静脉承受压力不同,会造成影响(站姿较高)如:TP、ALB、CA、HCT、ALT、FE、CHOL及尿中儿茶酚胺(Catecholamines)。测血中Catecholamines时,采血前一周,应避免抽烟,食用如核桃、香蕉及肾上腺素类(epinephrine—like)药物;保持平静勿使其受压力、兴奋等情绪变化.仰卧三十分钟后抽血。③、对于血色素、白细胞计数、红细胞计数、红细胞比积等检验指标来说.卧位采血与坐、立位采血结果有区别。正常人直立位时血浆总量比卧位减少12%左右,血液中以上成分不能通过血管壁转移到间质中去,使其血浆含量升高5%~15%。④、止血带压迫时间不能过长,最长不超过1分钟。压迫时间过长,可引起纤溶活性增强,血小板释放及某些凝血因子活性增强,影响实验结果。⑤、肥胖人士除了GLU、CHOL、UA普遍偏高外,肥胖男性尚会有CREA、TP、HtGB、AST偏高及P偏低的现象,而肥胖女性则有CA偏低的情形。3、时辰影响因素(1)、皮质醇(Cortisol)在睡眠时浓度会增加,因此上下午所测之值可能有明显差异,最好于上下午各采血一次,其它如尿钾(可造成5倍之改变)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)。(2)、促甲状腺素(TSH)在每日不同时辰,其浓度也会出现若干变化。(3)、Transferrin高值出现于4PM--8PM。(4)、WBC及LYM早晨较高,嗜酸粒细胞(EOS)下午较低。(5)、TG、P、BUN、HCT的高值出现于下午BIL反之。(6)、性别、昼夜节律、季节、海拔高度对试验结果的影响:如晨6点左右皮质醇值达最高峰,随后逐渐降低,午夜最低。4、样本处置不当(1)、溶血:LDH、HBDH、BlL、AST、CK、CKMB、AST、MG、ACP、K偏高。其它影响较小的,诸如凝血因子、蛋白质分析、ALP、FE、P。等在交叉配血试验中血样溶血严重干扰对结果的判断。红细胞膜完整性被破坏会严重影响实验结果的项目主要有:LDH、K+、Hb、ACP;有值得注意的影响的项目主要有:Fe、ALT、T4;有轻微影响或不太受影响的项目主要有:TP、ALB、ALP、.AST、TBIL、WBC、APTT、TT、Cr、Urea、UA、P、Mg、Ca。(2)、未分离血清过久:K+、LDH、FE、AST(可能)偏高,GLU、ALP(可能)偏低。(3)、日晒:WBC、PLT、ESR偏高,BlL偏低。(4)、禁止从静脉注射处、套管处取血,严重影响GLU、电解质及凝血因子报告之准确性。(5)、绑止血带时间及握拳会影响电解质、LacticAcid、PC02、pH。(6)、微血管穿刺样本可用于血细胞分析、电解质及一般生化检验,但有可能挤入组织液造成不准确的结果。5、药物因素(1)、抗生泰药物青霉素类和磺胺类药物能增高血液中尿酸浓度,常误报作“痛风阳性”。磺胺类抑制肠内细菌繁殖,使尿胆素不能还原为尿胆原,无法得出尿胆原的正确结果。(2)、镇痛消炎药物阿斯匹林、氨基比林等会使尿中胆红素检测值升高;吗啡、杜冷丁和消炎痛、布洛芬等,可导致检验中淀粉酶和脂肪酶含量明显升高,在用药后4小时内影响最大,24小时后消失。(3)、抗癌药物绝大多数抗癌药物对人体造血系统有抑制和毒害作用,可导致血液中红细胞、白细胞、血小板和血红蛋白数量的减少(少数药物可使血细胞异常升高),肝功能改变,有的使血脂值升高。其中甲氨蝶啶抑制骨髓,且损害肾功能;硫唑嘌呤损害肝功能,出现黄疸;阿糖胞苷使谷丙、谷草转氨酶异常升高。(4)、激素类药物雌激素类药物能影响人体中血脂的正常含量,使葡萄糖耐量试验减低,并可引起血小板和红细胞量的减少。盐皮质素易致水、钠潴留和低钾血症。肾上腺素减少钙、磷的吸收,且排出量增加,故血钙、血磷偏低,另外可明显升高血糖值。(5)、利尿药物临床上常用的为双氢克尿噻、速尿、三氯噻嗪和利尿酸等。典型的临床反应为:低血钾、低血容量和低血氯,长期应用后可见高氮质血症和高尿酸血症。(6)、抗糖尿病药胰岛素使用后可出现低血糖症,这已为大家所熟知。其它抗糖尿病药(如D60、氯磺丙脲等),可损害肝功能,使谷丙、谷草转氨酶升高,出现黄疸,血细胞减少等。(7)抗癫痫药如苯妥英钠因抑制叶酸的吸收,常见巨细胞性贫血。因轻度抑制骨髓,故使血细胞(尤其是白细胞和血小板)减少,偶有再生障碍性贫血的报道。卡马西平可致粒细胞、血小板减少,长期应用损害肝功能。(8)、使检验标本着色的药物主要为药物使尿液染色,从而干扰比色测定和荧光分析的测定结果。如服利福平后尿呈橙红色;服维生素B2、黄连素等使尿呈黄色;服苯琥珀后尿呈桔红色;服氨苯喋啶后使尿呈绿蓝色,并有蓝色荧光。许多药物对大便的色泽也产生影响。为了最大限度地避免和清除“药物干扰检测”这一现象,临床医师、检验医师和药师必须结合不同给药途径给药后的药物代谢动力学,判定检验结果时要综合考虑给药途径、药物的血药浓度水平、药物的半衰期、排泄途径和清除率等。许多药物对检验结果的干扰,常与血药浓度呈正相关,故检验取样应尽量避开血药高峰期。当然,疾病条件许可时,应提早几天停药,以完全排除药物对检测影响,但这并不是每个病人都能做到的。血常规及URIT-3010血球仪使用操作程序一、目的规范血细胞分析仪检测试验,确保结果准确性和重复性。二、原理由于血细胞的非传导性质,电解质溶液中悬浮的血细胞在通过检测小孔时会引起小孔的电阻变化,这种进行血细胞计数和体积测量的方法称为电阻抗法或库尔特原理。三、仪器的运行坏境1. 仪器应安装在平稳干燥的地方。2. 安装于不受高温、潮湿、灰尘、阳光直射等可能对仪器产生不良影响的地方。3. 仪器应避免受到强烈的震动或冲击。4. 不要安装化学药品的保管场所或产生气体的地方。5. 温度18-30℃,最佳23℃,空调冷却能力必须约为172kal/小时,相对湿度50%~-85%,电压200V6. 避免强光照射及辐射源辐射。四、授权操作者经实验室上岗培训合格的各级检验人员五、工作前检查1. 将质控品从冰箱中取出,放置20分钟,恢复至室温待用。2. 开启仪器执行自动清洗并进行空白测量。3. 检查试剂并将废液处理。六、试剂装载程序试剂不足时准备好相应的新试剂,确认其在使用期限内装载。七、操作程序1、开机前的准备(1)、确认各电气、外接管路连接正确无误,各试剂瓶内试剂充分够用。(2)、检查仪器外部液路导管是否有打折或脱落;废液桶内的废液是否已满。2、开机启动开启主机后面板电源开关,仪器进入自检。3、空白测试(1)、放置清洁的试管于采样针下,在血细胞分析窗口,点击“排液”,仪器排出稀释液到试管中。(2)、在血细胞分析窗口,选择“资料”,在弹出的“资料编辑”对话框中将样本编号改为“0”(3)、将盛有稀释液的试管放于采样针下,应确保采样针轻触试管底部。(4)、按仪器前面板的计数键,待听到“滴”的一声后,方可移走试管。仪器开始计数测量。(5)、计数完成后,显示屏上显示出空白测试结果,空白测试结果可接受范围见:参数数值单位WBC≤0.2109∕LRBC≤0.021012∕LHGB≤1g∕LPLT≤10109∕L注:序号0是仪器空白测试的专用序号,在给临床的血液样本编号时请勿输入此序号。4、血样的采集(1)、静脉血的采集:采用静脉穿刺采取静脉血,注入含有抗凝剂的干净采血管,轻摇5次。(2)、末梢血的采集:从指端穿刺采集,采用20ul定量采血管。5、血样计数、分析1、预稀释方式:将空试管置于采样针下,点击“排液”,仪器排出稀释液到试管中,将20ul采血管内的血样迅速注入准备好的盛有稀释液的试管中,轻轻摇匀;将盛有血样的试管置于采样针下,按仪器面板前的计数键,指示灯变成橙色,听到蜂鸣器发出清脆的“滴”声后,移走试管。仪器开始自动分析样本。2、全血方式:轻轻摇动试管使血样混匀后,将试管置于采样针下,按计数键,指示灯变成橙色,等到“滴”声后,移走试管。仪器开始自动分析样本。6、打印样本分析完成后,按打印键打印,或设为自动打印。7、关机(1)、选择“关机”菜单,按“确认”键,屏幕弹出关机窗口;(2)、移动光标到“确认”,按“确认”键关闭系统;(3)、仪器开始对液路进行清洗、保养。(4)、关机程序运行完毕后,仪器屏幕会显示“谢谢使用,现在请关闭电源”的提示,此时关闭仪器后面板的电源开关;(5)、清理工作台并处理废液。8、仪器维护保养(1)、日维护:擦拭分析仪台面、检查试剂、检查废液桶、检查管路(2)、月维护:清洗废液桶、润滑电机轴、润滑采样导向杆(3)、不定期维护:灼烧、排堵、清洗、清洁采样针八、仪器校准频率1.投入使用前,必须校准,合格后方可使用。2.更换仪器的部件,移动位置。3.若检测结果有漂移时需对仪器进行校准。4.每半年至少进行一次仪器校准。九、标本处理1.全血标本检测后,室温保存1天。2.稀释模式标本检测后不用保存。3.超过保存期的血标本,装入黄色塑料袋,有专人统一回收处理。4.有约定的按约定执行。十、故障处理指引在一般情况下,故障的排除应遵循如下三个步骤进行:故障确认故障分类故障排除十一、参数分析1. 白细胞指数检测在35~450fl范围内将血细胞分为三群。正常白细胞直方图的左侧峰又高又陡,跨越35~93fl,定为淋巴细胞峰(小细胞群),以成熟小淋巴细胞为主。最右侧峰又低又宽,跨越160~450fl,定为中性粒细胞峰(大细胞群)以中性粒细胞为主,包括杆状核细胞和晚幼粒细胞,左右两峰之间较平坦区,定为单个核细胞区(中间细胞群)主意以单核细胞为主,也含有嗜酸、嗜碱性粒细胞及白血病细胞等。(1) 白细胞计数的可接受性能为±15%。(2) 样本必须在6小时内测定完毕。(3) 对特别异常的结果须用手工计数复检,手工计数应用高精度的微量吸管,加液器计数盘等。(4) 常见问题报警处理:①细胞计数问题,应采用手工计数法;②三分群鉴别线报警,应确认血涂片标本。(5) 直方图上白细胞计数值的异常信息。①当出现RBC溶血不全时,在白细胞直方图上,WBC低鉴别线与直方图曲线的交点位置异常高,可通过血样稀释、或用稀释液对血样中的血浆进行置换(清洗细胞)或用较强烈的溶血剂的仪器进行测定;②当出现白细胞凝聚时,直方图上可见三峰分布混乱,在超出250fl的区域也有颗粒存在可以引起白细胞计数假性减低。可将血样加温,用生理盐水等清洗,消除白细胞凝聚;③当出现有核红细胞的影响时,红细胞与小细胞之间的低谷位置上升,并有报警,有核红细胞几乎全部被当做白细胞计数。可以引起白细胞计数假性增高,因此须按下式进行校正:校正白细胞计数值=仪器白细胞检测值×100/(100+有核红细胞数),有核红细胞数;100个白细胞中的有核红细胞数;④当出现血小板聚集时,可使白细胞假性增高,应重新采血测定。(6) 冷凝集现象、检出纤维蛋白均可使白细胞计数值产生正误差;小淋巴细胞可使白细胞计数产生负误差;不恰当的溶血剂作用可使白细胞计数值产生正的或负的误差。(7) 开展室内质控和参加室间质评。2..红细胞指数检测红细胞直方图:仪器在体积为36~360fl范围内分析红细胞,横坐标表示红细胞体积,纵坐标表示不同体积红细胞出现的频率。正常红细胞主要分布在50~200fl范围内,直方图上,可见两个细胞群从30~125fl区域有一个几乎两侧对称、较狭窄的正态分布曲线,主峰右侧约分布在125~200fl区域的细胞,为大红细胞和网织红细胞。红细胞的体积发生变化,直方图峰可左移或右移,或出现双峰。(1) 红细胞计数的可接受性能为±6%。(2) 对特别异常的结果须用手工计数复检,手工计数应用高精度的微量吸管,加液器计数盘等。(3) 红细胞在一天内有波动,上午7时为高峰,随后下降。(4) 采血部位不同结果有影响,静脉血比末梢血的结果低10~15%。(5) 开展室内质控和参加室间质评。(6) 异常信息与处理方法:①出现破碎的红细胞,大血小板增多,血小板聚集。处理方法:手工计数,确认血涂片;②受冷球蛋白、破碎红细胞,白血病细胞的血比质碎片等干扰。处理方法:将标本加温后后再捡,手工法、确认血涂片标本;③受冷凝集素的干扰,有白细胞混入。处理方法:将标本加温后后再捡,确认血涂片标本;④红细胞有很明显的大小不均。处理方法:确认血涂片标本;⑤贫血治疗时及受输血的影响,出现多群红细。处理方法:确认血涂片标本。(7) 直方图显示红细胞计数值的异常信息。①当出现有核红细胞时,红细胞直方图RDW增大,须作血涂片检查确认;②当RDW增大提示有多种大小的红细胞出现。须与RBC直方图做相关分析,RBC直方图显示分布较宽;③当RBC直方图显示以小细胞性红细胞为主,同时有大小不一的红细胞,须作涂片检查(检查畸形红细胞)④当RBC、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW显示异常值时,同时直方图上也能观察到一低峰,此时应考虑为冷凝集样本,可先涂片确认是否冷凝集样本,如果是将样本加温,凝块消失后重新测定。(8) 分裂细胞、凝集现象可使红细胞计数值产生误差;巨血小板可使红细胞计数产生正误差;仪器运行异常可使红细胞计数产生正误差和负误差。十二、危急值(警告值)HGB<50或>250g/LRBC≤2.5×1012/LWBC:成人:<2.0×109/L或>50×109/LPLT<30×109/L或>600×109/L十三、医学决定水平HGB轻度:正常下限~91g/L中度:90~60g/L重度:60~31g/L极重度:≤30g/LRBC1. 高于6.8×1012L,应采取治疗措施。2. 低于3.5×1012L,为诊断贫血界限,应寻找病因。3. 低于1.5×1012L,应考虑输血。WBC1. <0.5×109/L,检验对象有高度易感性,采取相应的预防性治疗及预防感染措施。2. <3.0×109/L,为白细胞减少症,应在做其他实验,如白细胞分类计数、外周血涂片等并询问用药史。3. <11×109/L,为白细胞增多此时做白细胞分类计数有助于分析病因和分型,如果需要应查找感染源。4. <30×109/L,应进行白细胞分类计数、外周血涂片并进行骨髓检查。十四、血细胞分析仪质量管理1. 分析前的质量控制⑴. 首先要做好操作人员上岗前的培训,提高专业人员的素质。⑵. 仪器的鉴定:新安装的仪器、或每次维修后必须对仪器的技术性能进行测试和评价,这对保证检验质量将起到重要作用。按照国际血液学标准委员会(ICSH)公布的评价方案,对仪器测试标本的总变异性、精密度、污染携带率、线性范围、可比性和准确性进行测试、评价,并详细记录备查。⑶. 平时严格执行仪器操作规程,做好仪器的校准和保养。⑷. 血细胞分析仪均要求使用抗凝静脉血来检测,检测时间应限定在4小时之内,血涂片也应在4小时内完成,抗凝剂为EDTA-K2。⑸. 注意受检者生理状态对实验结果的影响,避免由于生理状态不同引起的偏差。⑹. 对送检的标本必须按接受标准逐一检查,遇有出现溶血、凝集、量不足等不合格标本必须拒收。2. 分析中的质量控制⑴. 了解试剂与血细胞分析仪计数和白细胞分类的关系。尽可能选择原装配套试剂。⑵. 注意环境温度应在18~25℃,低于15℃或高于⑶. 注意测定前抗凝血标本必须充分混匀;注意仪器运行中半堵孔现象及时有效的排赌和保养。⑷. 做好室内质控。每月打印一次质控图,对于失控的,必须有失控记录。注意冷球蛋白,红细胞冷凝集素和高脂血症等病理因素对仪器检测结果的影响。⑸. 复检标准。血细胞分析仪是以体积大小来进行分类的,而非形态学分类因此它是一种过筛手段,因而不能代替手工计数和分类,本实验室白细胞低于3.0×109/L或高于30×109/L,应进行手工计数和分类⑹. 分析实验结果个参数之间的关系:实验结果的各项参数之间有内在的联系,比如RBC、HCT与MCV;HB、RBC与MCH之间,又如RDW与涂片的红细胞形态变化之间都有明显的相关关系。另外还可以分析实验结果与临床资料的相关关系,相关检查对于实验中出现的未预料的结果,是否可以从临床角度加以解释,或是否与其他实验有关的分析均十分重要,如Hb过高或过低,是否可用输血、大量失水或出血、溶血来解释。此外,MCHC的高或低与瑞特氏染色的血片上红细胞中的血红蛋白量是否一致;白细胞与血小板计数值十分与血片上白细胞、血小板公布情况相一致等相互参照,对保证质量均有重要价值。3. 分析后的质量控制⑴. 做好回顾性质量控制,有效控制本室的精密度,保证日间、批间检测结果的一致性;⑵. 注意标本中出现的异常结果,及时与临床资料进行相关分析,及时与临床联系直接了解情况,及时复查;⑶. 经常听取临床医师的意见,及时纠正潜在引起偏差的趋势,不断的改进工作,提高检验质量;⑷. 积极的参加地方和卫生部临检中心举办的室间质评活动,及时了解自己的检测水平;⑸. 定期征求临床医护人员对本室的评价:临床医生对实验结果的评价也是质量控制的重要环节,临床一生最熟悉患者的病情变化和疾病的发展过程,实验数据是否符合临床也是衡量结果正确与否的重要依据之一,因此实验室要经常听取临床医生的意见,不断的改进工作。十五、生物安全防护1. 如操作中不慎洒落血液,要及时对污染台面消毒处理。2. 操做前一定要做好自身防护(穿白大衣,带口罩、白帽、胶皮手套)。3. 测定的比色液必须除毒处理,严禁与酸性溶液混合产生毒气,造成吸入性伤害。十六、废液处理测定的废液和84消毒液按1000毫升:40毫升的比例浸泡过夜,次日弃去。尿常规操作规程及URIT-500B使用规程检验目的对泌尿系统疾病、肝胆疾病、糖尿病等疾病进行辅助诊断与疗效观察,对安全用药进行监护,以及评估健康状态。测定方法以及体系干化学试带法:包括优利特-300尿液分析仪和配套试剂带;干化学试带法可检测的项目有:蛋白质、葡萄糖、酮体、隐血、胆红素、尿胆原、亚硝酸盐、比重、ph值、空白等。检测原理及干扰因素尿液分析仪检测原理:尿中相对的化学成分使尿多联试带上各种含特殊试剂的模块发生颜色变化,颜色得深浅与尿中相应物质的浓度成正比;将多联试带置于尿液分析仪比色进样槽,各模块一次受到仪器光源照射并产生不同的反射光,仪器接受不同强度的光信号后将其转为相应的电信号,再经微处理器由下列公式计算得出各测试项目的反射率,然后与标准曲线比较后校正为测定值,最后以定性或半定量方式自动打印出结果。用于对尿液进行定性和半定量检测。葡萄糖检测(1).原理:尿糖形成的原因和机制为:当血糖的浓度大于8.8mmol/L时,肾小球滤过的葡萄糖量超过肾小管重吸收能力即可出现糖尿。葡萄糖在氧化酶的作用下生成葡萄糖酸和过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶的作用下释放新生态氧,在还原碘化钾,发生颜色的变化。(2)干扰因素;本实验对葡萄糖的检测是特异的,大量维生素c可使实验出现假阴性结果;高比重性碱性尿,亦可造成糖检测出偏低,是低浓度的尿糖成阴性。2..胆红素检测原理:直接胆红素在酸性条件下雨二氯苯胺重氮盐偶联,生成偶氮染料。干扰因素:标本必须新鲜,以免胆红素在阳光照射下成为胆绿素;尿胆原在氧化成尿胆素。②尿液中含高浓度维生素C和亚硝酸盐时,抑制偶氮反应使尿胆红素呈假阴性。当患者接受大量的氯丙嗪治疗或尿中含有盐酸苯偶氮吡啶的代谢产生时,可呈假阳性。③尿液中一些内源物质如胆色素原、吲哚、胆红素等可使尿胆原检查结果出现阳性,一些药物也可产色干扰实验。④正常人尿胆原排出理每天波动很大,夜间和上午量少,午后则迅速增加,在午后2-4时达最高峰;同时尿胆原的清除率与尿PH相关,PH5.0时,清除率为2ml/min;Ph8.0时增加至25ml/min,因此有学者倡用预先给予患者服用碳酸氨钠,以碱化尿液慢集午后2-4时尿(2小时排出量)进行测定,以提高检出率。3.酮体检测原理:检测尿酮体的膜块中主要含有亚硝基铁氰化钠,或与尿液中的乙酰乙酸、丙酮产生紫色反应。其对乙酰乙酸的敏感性为50-100mg/L对丙酮则为400-700mg/L,不与β-羟丁酸起反应。干扰因素:①由于尿酮体中的丙酮和乙酰乙酸都具有挥发性,乙酰乙酸更易受热分解成丙酮;尿液被细菌污染后,酮体消失,因此尿液必须新鲜,及时送检,以免因酮体的挥发或分解出现假阴性结果或结果偏低;②干学法与酮体酚法灵敏度存在差异:酮体酚法对乙酰乙酸与丙酮的敏感性分别为80mg/L和100mg/L。不如试带法敏感,故同一病理标本两面种方法可能出现结果的差异,分析结果时应特别注意;③不同病因引起的酮症,酮体的成分不同,即使一病人不同病程也可有差异,例如在糖尿病酮症酸中毒早期病命名中,主要酮体成分β羟丁酸,很少或缺乏乙酰乙酸,此时测得结果可导致对总酮体量估计不足。在糖尿病酮症酸中毒症状缓解之后,β-羟丁酸转变为乙酰乙酸,反而使乙酰乙酸含量比初始急性期增高,易对病情估计过重。因此检验人员必须注意病程发展,与临床医生共同分析实验结果。4.比重检测原理:膜块中主要含有多聚电解质(甲乙烯酸酰马不酐)、酸碱指示剂及缓冲物,这是采用酸指示剂法,其原理是根据经过多聚电解质的PH改变与尿液离子浓度相关原理。试剂条中的多聚电解质含有随尿标本中离大浓度则解离的酸性基团,离子越多,酸性基团解离子越多,而使膜块中的PH改变,这种改变可由膜块中的酸碱性指示剂的颜色变化显示出来,进而换算成尿液的比密值。干扰因素:当尿中含有蛋白质(1g/L~7.5g/L)时可使比重读数偏高。5.潜血检测原理:块中主要含有过氧化氢茄香素或过氧化氢烯钴和色原(如邻甲联苯胺)两种物质。其原理为尿液中红细胞内的血红蛋白或其破坏释放出的血红蛋白均具有过氧化氢酶样活性,可使过氧化氢茄香素或过氧化氢烯钴分解出[0],后者能氧化有关色原(如邻甲联苯胺)使之呈色。干扰因素:(1).干化学即可与完整的红细胞反应,又能测定尿中的游离血红蛋白,造成仪器法与镜检法有差异。(2).尿中含有的易热酶、肌红蛋白或菌尿可引起假阳性反应;(3).大量维生素c可干扰试验,是结果呈假阴性。6.酸碱度原理:采用酸碱指示法干扰因素:尿ph受饮食种类影响很大,如进食蛋白质较多ph值下降,进食蔬菜多时ph常大于6.的,当进食后使增加,呈碱性。如饥饿、运动、出汗等生理活动,体内酸性代谢产物可使ph降低,药物、不同疾病的也影响尿液ph值。细菌繁殖尿可影响ph值呈碱性。7.蛋白质检测原理:本法利用指示剂的蛋白质误差原理干扰因素;(1).对于高度缓冲的碱性尿,有可能的到假阳性结果(2).如果尿样被铵类化合物及某些防腐剂或清洗剂污染也会导致假阴性。(3)病人服用奎宁和磺胺嘧啶等药物引起的强碱性尿时,会使干化学法出现假阳性结果而磺基水杨酸法出南假阴性结果.可用稀乙酸将尿液PH调5-7,再行实验,借以区别是否由于强碱性尿而导致假阳性.(4)研究证明几十种药物可使尿蛋白检查出现假阳性,有学者对用大剂量青霉素患者给药前后进行了尿蛋白的检测,结果表明:滴注250万单位组2小时\320万单位3组小时,480万单位组5小时可能对磺基水杨酸法产生假阳性,对干化学法产生假阴性。(5)不同测定方法对病人尿液内不同种类蛋白质检测的敏感不同,双缩脲定量可以对白蛋白,球蛋白显赤似的敏感性,而干化学测量球蛋白的敏感性仅是白蛋白的1/100-1/50。因此对于肾病患者特别是在疾病发展过种中需在系统观察尿蛋白含量的病例应使用磺基水杨酸法(或加热乙酸法)定性和双缩脲法进行定量试验。(6)标本内含有其它分泌物(如生殖系统分泌物)或含有较多细胞成分时,可引起假阳性。NCCLS建议以磺基水杨权法作为干化学检测尿蛋白的参比方法8.尿胆原检测原理:尿胆原在强酸性条件下,与重氮盐偶联生成紫红色染料。。干扰因素:(1).尿液中一些内源性物质如胆色素原、吲哚、胆红素等可使尿胆原检查结果出现假阳性;(2)一些药物(如吩噻嗪)也可干扰试验。9.亚硝酸盐检测原理:采用亚硝酸盐还原法。亚硝酸盐与芳香族氨基磺胺发生重氮反应,生成重氮化合物,二重氮化合物与四氢笨并喹啉3-酚偶联,生成红色偶氮染料。干扰因素:尿路感染的细菌是否含有硝酸盐还原酶;食物中是否含有硝酸盐;尿液标本是否在膀胱停留4小时以上。符合以上三个条件此实验的检出率为80%,反之结果可能为阴性结果。标本放置过久或污染细菌可呈假阳性。10.白细胞检测原理:采用白细胞酯酶法。吡咯酚酯在中性粒细胞中酯酶的水解作用下,产生游离酚与苯基重氮盐偶联,生成紫红色偶氮染料。干扰因素:(1)尿液标本必须新鲜,留尿后应立即测定,以免白细胞破坏,导致干化学法与镜检法人为的实验误差;(2)此法只能测中性粒细胞,不与单核细胞、淋巴细胞反应,在肾移植病人发生排异反应时,尿中的以淋巴细胞为主的或其它病因引起的单核细胞尿时会产生阴性结果;(3)尿液中污染甲醛或含有高浓度胆红素或使用某些药物时,可产生假阳性;尿蛋白>5g/L或尿液中含有大剂量先锋霉素等药物时,可使结果偏低或出现假性结果。(4)试条中的试剂主要和白蛋白发生反应对球蛋白的反应灵敏度不高,应注意。(5)肉眼可见的血尿也可能出现假阳性反应由于尿液分析仪白细胞检测与显微镜下计数实验原理截然不同,其报告方式也是两种不同的概念,很难找出两者的对应关系,迄今还没有一种直接的换算方式,因此仪器法白细胞检查只是一个筛选试验,绝不可代替显微镜检查。11.抗坏血酸检测原理:采用还原法。抗坏血酸具有1,2-烯二醇还原性基团,在碱性条件中,将氧化态蓝色的2,6二氯酚靛酚染料还原为无色的2,6二氯二对酚胺。干扰因素:当尿中含有氧化剂时(如高锰酸钾,次氯酸盐等)会影响本实验的灵敏度。标本要求标本来源:清晨第一次尿液或随机尿液,留取中段尿。不可接受逇标本:超过2小时,没有按规定使用洁净、干燥的容器以及低于10ml的尿液。标本的保存:应在2小时内对尿液进行检验。设备和试剂设备:URIT-500B尿机试剂。与尿液配套的尿11G.3.质控品。阴性和阳性,2个水平。检测步骤1、仪器的使用1)、一般使用:开启仪器电源开关,仪器进入自检状态,开始初始化,显示屏显示主界面。如设置正确,仪器可开始测试。如果测试出现故障结果,在主界面会显示“故障表”键,按此键,可列出最近出现故障结果表明的序号,便于重新检测这些序号的样本。2)、仪器设置选择:按“设置”键,进入设置菜单,可以对“时间”、“初始化”、“系统”、“打印”、“串口”、“升级”进行设置。按“查阅”键,进入查阅菜单,可以查询测试的历史记录。按“序号”键,输入标本序号。按“试纸”键,用循环键可进行14G、13G、11G、10G试纸的选择。按“进纸”键,打印纸向前进一行。按“关于”键,显示有关生产商的信息。按“返回”键,返回上一级菜单。2、仪器的校验使用人员要经常用随机附带的11G标准试纸条对仪器进行校验检查,标准试纸条共两条,日常使用一条,另一条作为保存备用。确保仪器处于主界面且使用尿试纸项为11G,用标准试纸条进行检测后,将检测的打印结果与标准盒上的标准值相比较,如果相符则说明仪器正常,表示可以使用;如果不符,可用另外一条标准试纸条再重复检测一次;如仍不符,需查找故障原因并排除故障后再使用。3、常规尿液测试1)、将待测的尿试纸条完全浸入示经离心的待测尿液中,在尿液容器壁缓慢抽出,用吸水纸除去多余尿液,但不可吸得太干。2)、把尿试纸条旋转在固定平台上,位于拨动杆的右边附近,试纸面向上。3)、放置的尿试纸条被检测到后,拨动杆开始启动,将尿试纸条送到移动台板上,再由移动台板将尿试纸条关到扫描检测区,检测头检测后由移动台板推到废料盒。4)、尿试纸条被测试结束后,显示屏显示测试结果,同时打印机打印出测试结果。5)、如果测试过程中发生问题,可按暂停键暂停当前检测。当故障排除后,按开始键重新开始检测。注:检测尿液标本必须,仪器测试和镜检同时进行,不能省略镜检步骤。结果报告将仪器打印的原始小票贴于相应的申请单上检查无误后,并将镜检结果写在申请单上,发出报告。有疑难问题必须向科主任汇报。注意事项不的使用过期或变质的试剂条;试剂的变质会影响反应区的颜色变浅或变深。试剂条必须在原瓶中保存取出试纸后立即盖严瓶盖。不的移去包装内的干燥剂,每条试纸只能使用一次。为保护试剂的反应活性必须隔绝周围环境中的潮气、光和热。不要触摸试剂条的反应区,避免阳光直射。对检验结果有疑问,与预期结果不一致时,请查找原因;仪器状态,试纸条的有效期、质控品的状态人员操作等,纠正后,室内质控合格方可检测临床标本。用过的试剂条按实验室生物危害性材料处理方法进行处理。质量控制分析前的质量控制正确留取标本,并在规定的时间内送检,避免阳光直射。避免标本污染(含有强氧化剂如漂白粉)出现假阳性和假阴性(如含有维生素C);标本久置葡萄糖被细菌分解或细胞酶分解,引起假阴性。了解检验对象可能影响化学检测的进食及使用药物的情况。尿样的保存:尿样收集后应在2小时内完成检测,否则选用适当的防腐剂并冷藏保存。注意准确有效的标记尿标本。分析中的质量控制用尿液质控品监控仪器的工作状态;严格、规范正确的实验操作;应使用与尿液分析仪配套的专用试带,注意试带的效期,注意防潮避免变色后干扰试验。分析后的质量控制分析结果的相关性,如有不符应及时复检,如下表所示化学分析结果镜检结果可能原因潜血阴性多量RBC药物或其他干扰物质潜血阳性不见或少量RBCRBC破碎WBC阴性多量WBC药物干扰或慢性炎症WBC阳性不见或少量WBC其他物质干扰出现假阳性蛋白质阴性WBC/RBC/管型增多其他物质干扰出现假阴性化学分析亚硝酸盐为阳性,而尿蛋白和白细胞检测均为阴性,可能因摄食含有硝酸盐丰富的食物有关而造成的假阳性。糖尿病检验对象尿糖检测阴性,而维生素c含量很高,会出现假阴性。检测结果又异议时应了解检验对象可能影响尿化学检测的进食和用药情况。综合考虑检验对象的病史;特别是肾脏疾病检验对象,尿蛋白定性应当用磺基水杨酸法。如尿化学分析结果与镜检不一致,应进一步查明原因。参考范围的认可:尿干化学分析仪检测白细胞、红细胞出现“假阴性”时,应以镜检结果为准;但当“假阳性”时,仪器的结果可能正确。这种情况见于①白细胞:当尿在膀胱贮存时间长,白细胞破坏,中性粒细胞酯酶释放到尿中,导致仪器分析(+),镜检反而(-);②红细胞:肾病检验对象尿中红细胞常被破坏而析出血红蛋白或尿中有高活性不耐热的触酶时均可导致仪器分析(+),镜检却为(—)。尿液煮沸冷却后在测试可排除不耐热的触酶造成的假阳性。其他情况要结合临床实践,不能一概否定或肯定仪器结果,更不能随便改变仪器的灵敏度。生物参考区间及临床意义1.1、尿糖(U—Glu)

正常参考值:阴性

临床意义:a、生理性糖尿为一过性糖尿,是暂时性的,排除生理因素后恢复正常。主要有三种:①饮食性糖尿,即在短时间内服用大量糖类,引起血糖浓度过大;②应急性糖尿,在脑外伤、脑血管意外、情绪激动、剧烈运动周期性四肢麻痹等情况下,延脑糖中枢受刺激,使肾上腺激素或胰岛素分泌异常,可出现暂时性的糖尿;③妊娠中后期多可见糖尿。b、病理性糖尿也可分为三种:①真性糖尿,既胰岛素的分泌量相对或绝对不足,使血糖浓度超过肾糖阈尿糖检查不仅可以诊断糖尿病,还可以指导临床医生决定胰岛素的用量、判断疗效;②肾性糖尿,即肾小管对葡萄糖的重吸收功能减退,新生儿的近曲小管功能未完善也能出现糖尿;③其他糖尿,如生长激素过多(肢端肥大症)、甲状腺激素过多(甲亢)、肾上腺激素过多(嗜铬细胞瘤)、皮质醇(Cushing综合症)、胰高血糖素等都可使血糖浓度高过肾糖阈而出现糖尿;另外,肥胖病、高血压也可能出现糖尿。2、尿酮体(U-Ket)

正常参考值:阴性

临床意义:阳性a、糖尿病酮症酸中毒。糖利用减少,脂肪分解产生过量酮体,尿酮体的检查对未控制或治疗不当的糖尿病出现酸中毒或昏迷的诊断很有价值,可以与低血糖、心脑疾病酸中毒或高血糖渗透性糖尿病昏迷相区别。b、感染性疾病(如肺炎、伤寒、败血症、结核等发热期),严重呕吐、腹泻,长期饥饿、禁食,全身麻醉后等都可能出现酮尿。另外妇女孕期因妊娠反应呕吐多、进食少,体脂肪代谢明显增多,也能出现酮尿。c、氯仿、乙醚麻醉后、磷中毒等情况也能出现酮尿。d、服用双胍类降糖药如降糖灵后,由于药物抑制细胞呼吸,也可能出现酮尿。注意事项:a、由于尿酮体中的丙酮和乙酰乙酸都是挥发性物质;乙酰乙酸受热易分解成丙酮;尿液被细菌污染后,酮体消失,因此,尿样必须新鲜,检测应该及时,以免测试结果偏低或出现假阴性。b、干化学法测定酮体时对乙酰乙酸的敏感度约是丙酮的7~10倍,因此,与其他的检测方法存在一定的差别3、尿胆原(URO或UBG)

正常参考值:弱阳性。

临床意义:阳性,见于溶血性黄疽、肝病等。阴性,见于梗阻性黄疽。4、尿比重(SG)

正常参考值:1-5岁‘1.010-1.014;5-8岁,1.010-1.019;8-14岁,1.010-1.025;14岁以上至成人,1.002-1.030

临床意义:增高‘见于急性肾炎、糖尿病、高热、呕吐、腹泻及心力衰竭等。降低,见于慢性肾炎、慢性肾盂肾炎、急慢性肾功衰竭及尿崩症等。

5、尿蛋白(R-PRO)

正常参考值:阴性。

临床意义:阳性‘见于各种急慢性肾小球肾炎、急性肾盂肾炎、多发性骨髓瘤、肾移植术后等。此外,药物,汞、铺等中毒引起肾小管上皮细胞损伤也可见阳性。

6、红细胞(U—BLO)

正常参考值:显微镜法‘阴性或<2个/HP。仪器法‘阴性。

临床意义:阳性或增多‘见于泌尿系统结石、感染、肿瘤、急慢性肾炎、血小板减少性紫癌、血友病等。7、尿白细胞(U—LEU)

正常参考值:<5个/HP。

临床意义:增高:见于急‘吐肾炎、肾盂肾炎、膀肮炎、尿道炎、尿道结核等。

8、尿酸碱度(U—pH)

正常参考值:4.5—8.0,均值为6.5。

临床意义:降低‘见于酸中毒、痛风、糖尿病、发烧、白血病等。此外,—田氯化铵等药物时也可降低。增高‘见于碱中毒、输血后、严重呕吐、膀肮炎等。

9、尿胆红素(U-BIL)

正常参考值:阴性。

临床意义:阳性,见于胆石症、胆道肿瘤、胆道蛔虫、胰头癌等引起的梗阻性黄疸和肝癌、肝硬化、急慢性肝炎、肝细胞坏死等导致的肝细胞性黄疽。

10、尿亚硝酸盐(NIT)

正常参考值:阴性。

临床意义:阳性,见于由大肠埃希菌引起的尿道炎、膀肮炎、肾盂肾炎等。十一、评价优点:标本用量少。检测速度快、检测项目多;准确性,重复性好。适用于普查。缺点:不同的厂家试带成分不同,成色各异,检测灵敏度和特异性也不同,用注意批间差异。不能替代对病理性尿标本的显微镜检查,特别是管形、结晶、上皮细胞、淋巴细胞、单核细胞等其他有形物质;尿蛋白试带以检测清蛋白为主,对球蛋白不敏感,故不适用于肾病患者;易受多种药物或其他外源性物质或人为因素等因素的干扰,引起检测结果的错误,出现假阳性或假阴性,应对结果加以综合分析。十二、标本处理尿液废弃物用“84”浸泡一小时后倒入下水道。比例为960ml尿液+40ml“84”原液。【尿沉渣显微镜检查】一、目的检测尿液中的有形成分以弥补尿液物理、化学检查不足造成漏检,辅助泌尿系统疾病。显微镜检查法又可分为未离心直接镜检法、自然沉降镜检法、离心镜检法、染色镜检法,此处介绍离心镜检法。二.操作步骤取刻度离心管,导入混合后的新鲜尿液10ml,1500r/min离心5分钟;离心后弃去上层清夜,取混匀尿沉渣约0.02ml滴在载玻片上,加盖玻片镜下观察。参考区间①细胞成分:每高倍视野所见的最低至最高值。红细胞0-3/HP;白细胞0-5/HP。②管型(透明)全片0-1/LP。③尿结晶和非晶形盐类数量以每一高倍视野+、2+、3+、4+报告。三.注意事项(1)操作中严格按照操作规程进行操作。(2)应准备干净、干燥尿杯,在一般情况下,由患者自己留取中段尿。(3)尿液标本必须新鲜,从排出到检测应在2小时内完成否则会导致尿化学成分及有形物质的改变。(4)见到各种上皮细胞也应报告,报告方式参照白细胞。。阴道分泌物常规检查一.目的:阴道分泌物是女性生殖系统分泌的液体,通过检查,可诊断女性生殖系统炎症、肿瘤,以及雌激素水平的判断。二.实验原理本实验是利用阴道分泌物的生理盐水涂片在显微镜下观察分泌物中是否有阴道毛滴虫、念珠菌等并根据所含白细胞(或脓细胞)、上皮细胞、杂菌的多少,把其清洁度分成Ⅰ~Ⅳ度。三.标本采集3.1标本采集前病人准备:在采集标本前24小时内应无性交、无盆浴、无阴道灌洗、近期内未服用激素类药物。3.2标本种类:阴道分泌物3.3标本要求:用无菌棉拭子从阴道后穹隆处取分泌物;所用窥阴器不可用润滑剂,只能用少量无菌等渗盐水润湿。四.标本储存:取材后应立刻检查,避免因放置时间太久影响滴虫的活动性或虫体受到破坏使检查结果受到影响。五.标本运输:一般室温运输,如冬季气温较低应注意标本的保温运输。六.标本拒收标准:无盐水干结标本。七、操作步骤1、将采集标本的拭子直接涂在滴有盐水的载玻片上,保证涂抹均匀。2、用低倍镜观察有无阴道毛滴虫、念珠菌菌丝等。3、再用高倍镜观察白细胞、上皮细胞、杆菌、球菌的多少,并寻找有无念珠菌菌体及其孢子。八.结果判断与分析1、阴道涂片清洁度的判定如下:清洁度杆菌球菌上皮细胞白(脓)细胞Ⅰ多—满视野0~5/HPⅡ少少1/2视野5~15/HPⅢ少多少15~30/HPⅣ—大量—大于30/HP2、阴道毛滴虫呈梨形,比白细胞大2倍,顶端有鞭毛4根,在25~42℃3、在高倍镜下见卵圆形孢子或假菌丝与出芽细胞相连接,成链状及分枝状。九.临床意义1、清洁度在Ⅰ~Ⅱ内视为正常,Ⅲ、Ⅳ度为异常,多数为阴道炎。可发现阴道念珠菌、阴道滴虫等病原体。单纯不清洁度增高而不见滴虫、念珠菌者,可见于非特异性阴道炎。2、找到阴道滴虫是滴虫性阴道炎的诊断依据。3、找到阴道念珠菌是诊断念珠菌性阴道炎的诊断依据。十.操作性能:快速简便,适合门诊开展。十一.方法局限性:结果判断会受经验不足的主观因素影响。十二.注意事项:1、采集标本方法要正确,标本量要多,并及时送检。2、霉菌阴性时不能完全排除感染,仅凭镜检也不能确定为何种霉菌感染,需做霉菌培养鉴定。血型血清学检测【ABO血型鉴定】目的:为准确鉴定ABO血型要求:要求全科人员熟练掌握原理及操作,对有疑问的结果能够做出解释及妥善解决。原理:根据红细胞上有无A抗原和/或B抗原,将血型分为A型、B型、O型和AB型四种。可利用红细胞凝集试验,通过正、反定型准确鉴定ABO血型。正定型是用已知抗A和抗B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原和/或B抗原;反定型是用已知的A型红细胞和B型红细胞来测定血清中有无相应的抗A和/或抗B。反定型中使用O细胞是为了检测抗A、抗B以外的不规则抗体。4.试剂和材料4.1A、抗B分型血清,效价1:4.22%~5%A、B、O标准红细胞。4.3受检者血样5.方法.(试管法)5.1取洁净小试管2支,分别标明抗A、抗B,分别滴加抗A、抗B分型血清1滴于试管底部,再分别加入受检者2%~5%红细胞1滴,混合。5.2另取洁净小试管3支,标明AC、BC、OC,各加入受检者血清2滴于试管底部,再分别加入A、B和O型2%~5%标准红细胞1滴,混匀。5.3以1000g离心15秒,将试管轻轻摇动,使沉于管底的红细胞浮起,以肉眼观察有无凝集或溶血现象。观察结果时既要看有无凝集,更要注意凝集强度,这将有助于A、B亚型、类B、或CisAB的发现。★6.结果判断:血型抗A血清抗B血清A细胞B细胞O细胞A+--+-B-++--O--++-AB++---7.正反定型不一致的原因:有技术问题或红细胞和血清本身问题,常见者有以下数种:71分型血清效价太低,亲和力不强。7.2红细胞悬液浓度过高或过低,抗原抗体比例不适当(出现前带或后带现象),使反应不明显误判为阴性反应7.3受检者红细胞上抗原位点过少(如亚型)或抗原性减弱(见于白血病或恶性肿瘤)以及类B或CisAB等。7.4受检者血清蛋白紊乱(高球蛋白血病)或实验时温度过高,常引起红细胞呈缗钱状排列。7.5受检者血清中缺乏应有的抗A或抗B抗体,如丙种球蛋白缺乏症。7.6各种原因引起的红细胞溶解,误判为不凝集。7.7由细菌污染或遗传因素引起,多凝集和全凝集,往往是正反定型不符的原因。7.8血清中有以外抗体,如自身抗I,常干扰定型。7.9老年人血清中抗体水平大幅度下降。如发现ABO正反定型不一致,首先要重复做试验一次(必须用试管法),严格执行操作规程,使用质量合格的试剂以及细心观察和解释试验结果,就可以解决问题,对一些疑难问题必须进一步研究。【RH(D)血型鉴定】[原理]红细胞与抗D抗体发生凝集反应表明该细胞有D抗原,反之,无凝集现象表明试验的红细胞缺少正常强度的D抗原。[试剂组成]抗D试剂广谱抗人球蛋白[试剂保存和稳定性]存放2—8℃[标本收集和制备]无菌操作收集血液标本,收集后尽可能立即进行实验。如果不能立即实验,应将样品贮存于2-8C。收集在ACD、CPD、CPD-2A液中的血液标本,不超过21天仍可进行实验,但是加EDTA、肝素和凝集的血液标本,实验应在2天内进行。[操作步骤]1盐水试管法1.1正常D抗原表型检测1.1.1取一只干净玻璃试管,加1滴抗D试剂。1.1.2加1滴3%—5%红细胞生理盐水悬液。1.1.3混匀后,200Xg离心1分钟或1000Xg离心20秒。1.1.4轻轻振荡,悬浮沉积细胞,肉眼观察凝集反应。1.1.5若观察无凝集反应,混匀后37℃水浴151.1.6200Xg离心1分钟或1000Xg离心20秒。1.1.7轻轻振荡,悬浮沉积细胞,肉眼观察凝集反应。若结果仍为阴性,需要时则从如下步骤进行弱D表型检测实验。1.2弱D表型抗原检测1.2.1操作步骤与上述盐水试管法相同。如果先前已进行了盐水试管法实验,同一试管可直接用弱D表型检测实验。1.2.2混匀后,37℃水浴151.2.3用干净的等渗盐水洗涤细胞至少4次,洗涤后充分将盐水弃掉。1.2.4加2体积广谱抗人球蛋白于细胞试管中。1.2.5轻轻混匀,500Xg低速离心15秒。2玻片法:2.1干净玻片上加1滴抗D。2.2再加入1滴全血(40%-50%HCT)。2.3用干净涂棒,将试剂和血液充分混匀。2.4在一个照亮的观察箱上方轻轻前后倾斜玻片,观察凝集反应。并在显微镜下镜检证实。[结果判断]阳性表明所测的红细胞带有D抗原。阴性表明所测的红细胞缺少正常强度的D抗原,这种情况下,对于病人可以可靠地定型为Rh(D)阴性,但是,对于献血员应经过间接抗人球蛋白试验确定是否存在弱D表型。[质量控制与附注]抗D诊断试剂开封后,及时贴上开封时间标签,在效期内使用。由于人红细胞的D抗原往往表现较弱,故必要时进行显微镜镜检,以免错判结果,特别是阴性结果时。Rh血型鉴定应严格控制温度与时间,因Rh抗原、抗体集反应凝块比较脆弱,观察反应结果时,应轻轻侧动试管,不可用力振摇。对于结果可疑的,必须洗涤红细胞后重新检验。其它附注参见ABO血型鉴定。血清葡萄糖检测(氧化酶法)一、检测目的规范血清葡萄糖(GLU)检测实验,确保检测结果的准确性和重复性。二、实验原理葡萄糖氧化酶将葡萄糖氧化为葡萄糖酸,并成成过氧化氢。过氧化物酶在色原性氧受体存在时将过氧化氢分解喂水和氧,并使色原性氧受体4-氨基安替比林(4-AAP)和酚去氢缩合为红色醌类化合物,即Trinder反应。在500nm处测得的吸光度与葡萄糖含量成正比。GOD葡萄糖+O2→葡萄糖酸+H2O2PODH2O2+4-AAP+酚→红色醌类化合物+H2O三、标本采集1、血糖测定一般可以采用血清或血浆。2、采血后应及时送检,立即离心,分离出血清或血浆。否则标本置室温中,全血中葡萄糖将被分解代谢,大约每小时降低5%-7%。3、如果采血后不能迅速分离出血清或血浆,必须使用含氟化物的抗凝管,以抑制血细胞(主要是白细胞)对葡萄糖的酵解,保证测定结果的准确。4、建议使用带分离胶的真空采血管,并及时准确分离血清,可防止血细胞对葡萄糖的酵解。四、测定方法(一)、测试申请:1、申请单个样本时:输入样本编号;批量申请样本时:输入起始样本编再输入批量的个数。2、选择样本盘号、杯位号、样本类型;3、如果是急诊测试,选中急诊单选框,否则不选中;4、在测定项目选择区点击需要测定的项目,或者在组合项目选择区,点组合设定的组合。点击按钮“申请”即可。(二)、开始:选择欲开始测试的类型和范围,确定后开始测试。(三)、结果查看:1、查看当前结果:①、在左边的样本编号列表区,选择一个需要查看结果的样本编号;②、在右边下部的结果显示区,可以直接显示选中编号所有测试的结果如果某项目的测试还未完成,则该项目的结果区显示为空;③、选中一个已经有结果的项目后,点击按钮“反应曲线”,可以查看结果的反应曲线和反应数据;2、输入病人信息:①、在左边的样本编号列表区,选择一个需要输入病人信息的样本编号;②、在右边上部的信息输入区,输入各相关信息,点击右边按钮“保存”;③、切换到下一个样本编号,重复步骤1和2,完成下一个编号的信息入。3、结果打印:①、欲打印所有结果,点击单选框“所有样本”,再点击按钮“打印”可;②、欲打印当前选中编号的结果,点击单选框“当前选择样本”,再点按钮“打印”即可;③、欲打印指定编号的结果,点击单选框“选择样本”,在后面激活的入框中直接输入指定编号,再点击按钮“打印”即可。五、生物参考区间:3.9-6.1mmol/L六、临床意义1.生理性高血糖可见于餐后或高糖饮食.情绪紧张肾上腺分泌增加等。病理性高血糖(1)糖尿病患者。(2)内分泌腺功能障碍:甲状腺功能亢进,肾上腺皮质及髓质功能亢进等。升高血糖的激素增多引起的高血糖,现已归入特异性糖尿病中。(3)颅内压增高:颅内压增高刺激血糖中枢,如颅外伤.颅内出血.脑膜炎等。(4)脱水引起的高血糖:如呕吐.腹泻和高热等也可使血糖轻度增高。生理性低血糖见于长期饥饿和剧烈运动后

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