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锦灯笼研究现状综述锦灯笼为茄科植物酸浆PhysalisalkekengiL.var.Franchetii(Mast.)Makino的干燥宿萼或带果实的宿萼。主产于东北三省及内蒙地区,秋季果实成熟、宿萼呈红色或橙红色时采收,干燥[1中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国药典第一部[M],北京,化学工业出版社,2010:337-338]。锦灯笼具有清热解毒、利咽、化痰、利尿、疏肝作用。主治肝气不舒、肾炎、肝炎、坏血病、痰热咳嗽等功效。果实有增强免疫,抗炎和抗氧化作用;宿萼有降血脂,抑菌,治疗糖尿病作用。近年来,随着对锦灯笼的化学成分和药理活性研究的逐步深入,发现其活性成分丰富,在抗炎、利尿、抗氧化、降血脂、降血糖和抗肿瘤等方面显示出潜在的药用价值。本文主要对锦灯笼的化学成分、理化分析、药理作用和质量控制等方面进行了综述,以对其进一步开发利用提供参考。中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国药典第一部[M],北京,化学工业出版社,2010:337-338化学成分研究:锦灯笼中化学成分最早由日本学者KawaiM开始研究。酸浆属植物中主要分离的化合物有甾体类(主要为酸浆苦味素类,酸浆新苦味素类)、甾醇类、黄酮类、生物碱、有机酸、类胡萝卜素、无机元素、氨基酸、多糖等。随着目前研究的深入和最新方法的使用,用氯仿、酸乙酯及正丁醇萃取酯及正丁醇萃取后的氯仿层和乙酸乙酯层中的小极性物质大部分已经分离完全而正丁醇层中大极性物质的研究鲜有报道。1.1甾体类:酸浆苦味素类最早由日本学者KawaiM等从酸浆中分离得到,其母核结构为其基本结构为13,14-裂环-16,24-环麦角甾烷,一般具有苦味故命名为酸浆苦味素(physalin)。国内外的学者对酸浆植物整株的研究发现了几十种酸浆苦素类成分:酸浆苦味素A(physalinA)、酸浆苦味素B(physalinB)、酸浆苦味素C(physalinC)、酸浆苦味素D(physalinD)、酸浆苦味素E(physalinE)、酸浆苦味素F(physalinF)、酸浆苦味素G(physalinG)、酸浆苦味素H(physalinH)、酸浆苦味素I(physalinI)、酸浆苦味素J(physalinJ)、酸浆苦味素K(physalinK)、酸浆苦味素L(physalinL)、酸浆苦味素M(physalinM)、酸浆苦味素N(physalinN)、酸浆苦味素O(physalinO)、酸浆苦味素Q(physalinQ)、酸浆苦味素R(physalinR)、酸浆苦味素S(physalinS)、酸浆苦味素T(physalinT)、酸浆苦味素H(physalinH)酸浆苦味素K(physalinK)、酸浆苦味素G(physalinG)、酸浆苦味素U(physalinU)、酸浆苦味素V(physalinV)、酸浆苦味W(physalinW)、异酸浆苦味B(isophysalinB)、异酸浆苦味素G(isophysalinG)酸浆属植物中共分到酸浆苦味素类化合物29个,其中新酸浆苦味素类化合(1991年日本学者KawaiM发现酸浆苦素A(physalinA)经酸水解可以发生二苯乙醇酸重拍,改变酸浆苦味素的母核,故命名为新酸浆苦味素)5个---physalinP、physalinW’、physalinX、4,7-didehydroneophyalinB、2527-diliydro-4,7-didehydro-7-deoxyneoPhysalinA。近年来研究部分已从酸浆植物全株转移到酸浆宿萼为主。赵倩从锦灯笼80%醇提物中分离得到7个酸浆苦素类化合物确定了其中3个化合物的结构为[酸浆苦素D(phyaslinD)、酸浆苦素L(physalinL)、酸浆苦素O(physalinO)]。五个新酸浆苦素类化合物(4,7-二氢新酸浆苦素B(4,7-didehydroneophysalinB)、3β-羟基-2,3-二氢-4,7-二脱氢新酸浆苦素B(3β-hydroxy-2,3-dihydro-4,7-didehydroneophysalinB)、3α-羟基-2,3-二氢-4,7-二脱氢新酸浆苦素B(3α-hydroxy-2,3-dihydro-47-didehydroneophysalin-B)、3a-甲氧基-2,3,25,27-四氢-4,7-二脱氢-7-脱氧新酸浆苦素A(3α-methoxy-2,3,25,27-tetrhaydro-47-didehydro-7-deoxyneophysalinA)、3β-甲氧基-2,3,25,27-四氢-4,7-二脱氢-7-脱氧新酸浆苦素A(3β-methoxy-2,3,2527-tetrahydro-4,7-didehydro-7-deoxyneophysalinA))[赵倩.锦灯笼化学成分的研究[D].沈阳:沈阳药科大学,20052]。张初航从70%乙醇提取液中分得酸浆苦味素A、酸浆苦味素D、酸浆苦味素P、4,7-二去氢-7-脱氧新苦味素L,其中4,7-二去氢-7-脱氧新苦味素L为新的天然产物,之后[张初航.锦灯笼的活性成分能及质量评价研究[D].沈阳:沈阳药科大学,20093]他又对提取物进一步研究分得9个酸浆苦素类化合物,分别是酸浆苦味素A(PhysalinA)、酸浆苦味素B(PhysalinB)、酸浆苦味素D(PhysalinD)、酸浆苦味素E(PhysalinE)、酸浆苦味素O(PhysalinO)、酸浆苦味素P(PhysalinP)、4,7-二脱氢新酸浆苦味素B(4,7-didehydroneophyalinB)、25,27-二氢-4,7-二脱氢-7-去氧新酸浆苦味素A(25,27-dihydro-4,7-didehydro-7-deoxyneophysalinA)[张初航.酸浆中苦味素类化学成分的分离与结构鉴定[N].沈阳药科大学学报,2006(774-775).4]。许枬从锦灯笼95%醇提物的氯仿层分出酸浆苦素A、酸浆苦素B、酸浆苦素O、酸浆苦素L、酸浆苦素M[许枬.酸浆化学成分的研究[J].中草药,2009,40(2):175-178.5]。袁野从70%乙醇提取液中分离出25,27-二脱氢酸浆苦素L、酸浆苦素D[袁野.酸浆化学成分研究[J].中草药,2010,41(12):1939-1942.6]。马哲从70%乙醇提取液中分离得到4,7-二脱氢新酸浆苦素B(4,7-didehydroneophysalinB)、酸浆苦素D(physalinD)、酸浆苦素p(physalinP)[马哲.锦灯笼宿萼化学成分的分离与鉴定[D].大连:辽宁中医药大学,2007.7]。才谦从70%乙醇提取液中氯仿部分经过氯仿-甲醇梯度洗脱得4,7-二脱氢新酸浆苦素B[4,7-didehydroneophysalinB)、酸浆苦素D(physalinD)、酸浆苦素P(physalinP)[才谦.中药锦灯笼化学成分的分离与鉴定[N].沈阳药科大学学报,2009(807-810).8]。李坤等人从锦灯笼果实中分得甾体化合物5个(酸浆素A(alkekengilinA)、酸浆素(alkekengilinB)、酸浆苦味素D(PhysalinD)、酸浆苦味素D(PhysalinD)其中新酸浆苦素类一个4,7-二脱氢新酸浆苦味素B(4,7-didehydroneophyalinB)]。其中酸浆素A(alkekengilinA)、酸浆素(alkekengilinB)为新的天然产物[9李坤.锦灯笼果实的化学成分研究[J].有机化学,2010,30(1):128-191.]。于婷从锦灯笼果实的70%乙醇提取物中分离得4,7-二脱氢新酸浆苦素B,酸浆苦素P,酸浆苦素D。并且首次优化了酸浆苦素P的提取方法和纯化工艺[1于婷.锦灯笼果实的化学成分及纯化工艺研究[D].大连:辽宁中医药大学,2008.0]。林峰从锦灯笼95%乙醇提取物中分离得为酸浆苦素A、酸浆苦素D、酸浆苦素L、酸浆苦素O[1林峰.锦灯笼中酸浆苦素类化学成分的研究[J].现代药物与临床,2011,26(6):469-472.1]通过对其1H-NMR和13C-NMR数据进行较为详细的解析和比文献更为全面的NMR归属,为以后的分析鉴定酸浆苦素类提供了更完善的依据。赵倩.锦灯笼化学成分的研究[D].沈阳:沈阳药科大学,2005张初航.锦灯笼的活性成分能及质量评价研究[D].沈阳:沈阳药科大学,2009张初航.酸浆中苦味素类化学成分的分离与结构鉴定[N].沈阳药科大学学报,2006(774-775).许枬.酸浆化学成分的研究[J].中草药,2009,40(2):175-178.袁野.酸浆化学成分研究[J].中草药,2010,41(12):1939-1942.马哲.锦灯笼宿萼化学成分的分离与鉴定[D].大连:辽宁中医药大学,2007.才谦.中药锦灯笼化学成分的分离与鉴定[N].沈阳药科大学学报,2009(807-810).李坤.锦灯笼果实的化学成分研究[J].有机化学,2010,30(1):128-191.于婷.锦灯笼果实的化学成分及纯化工艺研究[D].大连:辽宁中医药大学,2008.林峰.锦灯笼中酸浆苦素类化学成分的研究[J].现代药物与临床,2011,26(6):469-472.2.2黄酮类成分黄酮类化合物广泛存在于天然产物中,它的生理活性较为广泛,具有明显的抗炎、抗菌、生物抗氧化性、抗衰老、降血脂、治疗心脑血管疾病等作用。锦灯笼果实和宿萼中含有丰富的黄酮类化合物其中木犀草苷为锦灯笼的定量控制成分并被写入最新版药典。赵倩等从宿萼中分离得到木犀草素(luteolin)、商陆素(ombuine)、木犀草素-7,4’-二-O-β-D-葡萄糖苷(luteolin-7,4’-di-O-β-D-glucopyranoside)[2]。邱莉等人从宿萼中分离得到5个黄酮苷类化合物,分别为木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷(luteolin-7-O-β-D-glucopyranoside)、木犀草素-4’-O-β-D-葡萄糖苷(luteolin-4’-O-β-D-glueopyranoside)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(quereetin-3-O-β-D-glucopyranoside)、槲皮素-7,3-二-O-β-D-葡萄糖苷(quereetin-7,3-di-O-β-D-glueopyranoside)、木犀草素7,3’-二-O-β-D-葡萄糖苷(luteolin-7,3’-diO-β-D-glucopyranoside)。其中木犀草素-4’-O-β-D-葡萄糖苷(luteolin-4’-O-β-D-glueopyranoside)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(quereetin-3-O-β-D-glucopyranoside)、木犀草素7,3’-二-O-β-D-葡萄糖苷(luteolin-7,3’-diO-β-D-glucopyranoside)为首次从该属植物中分离出,而槲皮素-7,3-二-O-β-D-葡萄糖苷(quereetin-7,3-di-O-β-D-glueopyranoside)为首次从该植物中分离出的已知化合物[邱莉.酸浆宿萼的黄酮苷类化学成分[N].沈阳药科大学报,2007(744-747).12]。张初航[3]从锦灯笼中分离得到木犀草素(luteolin)、槲皮素(quercetin)、芹菜素(apigenin)、山奈酚(kaemferol)、杨梅皮素(myricetin)、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷(luteolin-7-O-β-D-glueopyranoside)、木犀草素-4’-O-β-D-葡萄糖苷(luteolin-4’-O-β-D-glueopyranoside)、异槲皮苷(isoquereitrin)、4’-甲氧基山奈酚-7-O-β-D-葡萄糖苷(kaemferol-4’-metylether-7-O-β-D-glueoPyranoside)、4’-甲氧基山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(kaemferol-4’-metylether-3-O-β-D-glucopyranoside)。马哲[7]从70%乙醇提取液中分离得到木犀草素(luteolin)、木犀草素-7-葡萄糖(luteolin-7-glucoside)、3’,4’-二甲氧基杨梅皮素(3’,4’-dimethoxymyricetin),其中3’,4’-二甲氧基杨梅皮素(3’,4’-dimethoxymyricetin)。为从该植物中首次分离。才谦[8]从70%乙醇提取液分离得到木犀草素(luteolin)、木犀草素-7-葡萄糖苷(luteolin-7-O-glucoside)、3’,4’-二甲氧基杨梅皮素(3’,4’-dimethoxymyricetin)。许枬[5]等人从锦灯笼提取物氯仿层分离得商陆素、5,4’,5’-三羟基-7,3’-二甲氧基黄酮醇、木犀草素、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷,其中5,4’,5’-三羟基-7,3’-二甲氧基黄酮醇为新化合物,命名为酸浆黄酮醇(physaflavonol)。林峰[11]从95%乙醇提取物中分离得木犀草素、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷。并对其1H-NMR和13C-NMR数据进行较为详细的解析和比文献更为全面的NMR归属,对酸浆中黄酮类化合物的结构测定提供了依据。邱莉.酸浆宿萼的黄酮苷类化学成分[N].沈阳药科大学报,2007(744-747).1.3氨基酸类成分氨基酸是人体必需的营养成分。缺乏氨基酸时,人体正常的生长发育就会受到抑制或导致疾病。研究表明氨基酸除了组成蛋白质外,还有一些特殊药理功能。因此,中草药中的氨基酸往往是治病的主要有效成份或辅助成份。王永辉对锦灯笼果皮、果肉、果汁、果籽中18种氨基酸和7种必须氨基酸的含量的不同及其品质进行了初步测定和探讨[王永辉.锦灯笼不同部位氨基酸的测定与分析[J].氨基酸和生物资源,2009.1(31):81-83.13王永辉.锦灯笼不同部位氨基酸的测定与分析[J].氨基酸和生物资源,2009.1(31):81-83.1.4甾醇类成分酸浆的果实、种子和花萼中均含有甾醇类成分,在张初航[3]的文献综述中提到锦灯笼中的甾醇类物质已报道的有:酸浆甾醇A(PhysanolA)、酸浆甾醇B(PhysanolB)、谷甾醇(β-sitosterol)、豆甾醇(stigmasterol)、14α-甲基-5α-P(11)烯胆甾醇、14α-甲基-胆甾-9烯-3β醇、多种4a-甲基甾醇[主要为禾本昌(gramisterol)和钝叶醇(obtusifoliol)]、多种4-脱甲基甾醇(如胆甾醇、24-乙基胆甾醇等)、多种三萜-3β一元醇(其中环母菠萝烷醇Cycloartanol35%、环木菠萝烯醇cycloartenol27%、羊毛脂-8-烯-3β-醇24%)。陈荣Ph.alkekengivar.franchetii的地上部分中分离得到马尾藻甾醇(saringosterol)[1陈荣.酸浆化学成分及酸浆苦素G的结构订证[J].中国天然药物,2007,5(3):186-189.4]。许枬[5]、才谦[8]、于婷[10]等人多次从锦灯笼中醇提物的乙酸乙酯层中出分离出小极性的豆甾醇和β-谷甾醇。陈荣.酸浆化学成分及酸浆苦素G的结构订证[J].中国天然药物,2007,5(3):186-189.1.5类胡萝卜素类化合物酸浆的果实和宿萼中含有丰富的类胡萝卜素。此类成分一般对温度稳定对光不稳定。惠伯棣用UV-VIS,HPLC对此类成分进行了定性和定量的分析[1惠伯棣.酸浆浆果和宿萼中的类胡箩卜素组成分析[J].中国药学杂志,2006,41(8):583-584.5]。已有的证据表明,这类化合物具有多种防治疾病的功能,例如清除体内的自由基、调节机体的免疫功能和防治肿瘤等。许亮、张初航[3]、马哲[7]等人也都从锦灯笼的宿萼中分离得到得到胡萝卜苷。浆果中类胡箩卜素一般为:玉米黄素、类黄素、β-隐黄质。宿萼中类胡箩卜素一般为:玉米黄素、类黄素、β-隐黄质含量高于果实。惠伯棣.酸浆浆果和宿萼中的类胡箩卜素组成分析[J].中国药学杂志,2006,41(8):583-584.1.6色素程瑛琨对宿萼中色素的提取工艺和稳定性进行了研究。发现色素在酸性条件下稳定,耐糖性一般只对低浓度的Vc稳定。453nm处有最大吸收峰,金属离子Ca2+、Cu2+、Fe2+、Fe3+对色素有破坏作用存放时需注意[16程瑛琨.酸浆宿萼色素的提取工艺及稳定性的研究[J].食品工业科技,2006(12):58-60.]。此外,她还对酸浆苦味素的精制工艺进行了研究,确定HPD100A型大孔树脂在20°C流速1.5mL/min时精制效果最佳[1程瑛琨.大孔树脂法精制酸浆宿萼色素的研究[J].离子交换与吸附,2009,25(5):463-469.7]。程瑛琨.酸浆宿萼色素的提取工艺及稳定性的研究[J].食品工业科技,2006(12):58-60.程瑛琨.大孔树脂法精制酸浆宿萼色素的研究[J].离子交换与吸附,2009,25(5):463-469.1.7无机元素锦灯笼中含丰富的无机元素和微量元素,含量均高于人民平时食用的水果。杨晓虹用ICP-AES法测得结果宿萼中含有15种以上的无极元素。常见元素K>Ca>P>Mg>Na。微量元素排列为Fe>Ba>Zn>Cu>Mn>Sr>B>Cr>Ni>Pb>La>V>Cd>Co。有害重金属元素并未检测出来[18杨晓虹.酸浆宿萼无机元素和氨基酸含量的测定[N].白求恩医科大学学报,2001(27).]。现在也有利用先进的ICP-MS法来测定锦灯笼中的多种无极元素。ICPMS法具有样品需求量少,动态范围要求宽,适用于有机溶剂。ICP-MS和ICP-AES法均属多元素分析技术,可进行同位素测量和快速扫描能力,具有卓越的检出限,干扰少且易于消除。徐保利等对不同分布区锦灯笼无机元素含量进行了检测,确定了不同生长区域对锦灯笼中无机元素含量有很大差别这一结论,为以后的研究打下了基础。杨晓虹.酸浆宿萼无机元素和氨基酸含量的测定[N].白求恩医科大学学报,2001(27).1.8多糖类锦灯笼多糖有免疫增强和抗肿瘤活性,此外锦灯笼多糖还有降低血糖血脂,抗病毒,抗衰老和自由基清除等作用。另有报道证实多糖也可作为传统疫苗佐剂的替代品。近年来多位学者对多糖的提取分离纯化的工艺做了深入的研究,李永刚对锦灯笼茎水溶性多糖(WSP)进行了研究,实验结果显示多糖的有免疫增强作用[19李永刚.锦灯笼果实水溶性多糖免疫增强作用研究[D].沈阳:东北师范大学,2009.]。葛玉认为对酸浆水溶性多糖用酶Sevag法提取效果最好,用大孔树脂LSA-8B纯化除杂效果最好[2葛玉.酸浆果萼水溶性多糖提取工艺的比较[N].东北林业大学学报,2006(5).0]。李永刚.锦灯笼果实水溶性多糖免疫增强作用研究[D].沈阳:东北师范大学,2009.葛玉.酸浆果萼水溶性多糖提取工艺的比较[N].东北林业大学学报,2006(5).1.9其他2.理化分析与工艺优化2.1酸浆苦素类成分酸浆苦素类成分是高度氧化的醉茄内酯类成分,具有明确的抗菌、抗炎和抗肿瘤等活性。酸浆苦味素类成分是锦灯笼的特征性成分,其中酸浆苦素L是锦灯笼的定性成份。但近年来,有关锦灯笼含量测定的研究多以黄酮类化合物为指标,对酸浆苦素类成分的含量研究较少,尤其缺少多指标含量测定方法研究,难以满足其复杂成分的质量控制需要。因此近几年越来越多学者就酸浆苦素类成分建立相应的测定方法。董雪采用HPLC法测定锦灯笼宿萼中酸浆苦素P含量,方法简便易行,重现性、稳定性均较好,为控制锦灯笼药材的质量提供方法并且确定了甲醇-0.025磷酸水为流动相最优[2董雪.HPLC测定锦灯笼宿萼中酸浆苦素P的含量[J].中成药,2009,31(8):1304-1306.1]。施蕊建立RP一HPLC法同时测定酸浆药材中酸浆苦味素A、酸浆苦味素D及木犀草素含量的方法,优化了酸浆苦素的提取方法并提高了提取效率[2施蕊.RP一HPLC测定酸浆药材中3种有效成分的含量[J].药物分析杂志,2008,28(2):260-262.2]。邹兵用新的HPLC方法同时测定锦灯笼中酸浆苦素A、B、L、O,并优化了锦灯笼中酸浆苦味素类成分的提取工艺[2邹兵.HPLC法测定锦灯笼中酸浆苦素类成分的含量[J].中国药房,2011,22(15):1393-1395.3]。董雪.HPLC测定锦灯笼宿萼中酸浆苦素P的含量[J].中成药,2009,31(8):1304-1306.施蕊.RP一HPLC测定酸浆药材中3种有效成分的含量[J].药物分析杂志,2008,28(2):260-262.邹兵.HPLC法测定锦灯笼中酸浆苦素类成分的含量[J].中国药房,2011,22(15):1393-1395.2.2黄酮类成分黄酮类成分为锦灯笼中含量最多的一类成分,其中木犀草苷为锦灯笼含量测定的成分。王晓琳采用HPLC法测定锦灯笼中槲皮素的含量,并优化了酸浆中槲皮素的提取工艺[2王晓林.HPLC法测定锦灯笼宿萼中槲皮素的含量[J].安徽农业科学,2011,39(4):2091-2093.4]。徐保利等优化了锦灯笼果实中总黄酮的提取工艺,实验呈现在乙醇体积分数为60%、料液比1∶30、提取时间30min、提取次数为3次时,平均提取量最高。超声法也可以用于锦灯笼果实中总黄酮的辅助提取,其中料液比对总黄酮提取量的影响最大[2徐保利.锦灯笼果实总黄酮提取工艺[J].中国实验方剂学杂志,2011,17(21):33-35.5]。杨异卉等人建立锦灯笼总黄酮含量的测定方法,并比较不同提取物、不同分离部位黄酮含量的差别,确定总黄酮的最佳提取方法及分离方法,最终根据所得部位的黄酮含量,确定了用75%乙醇提取,大孔吸附树脂富集黄酮类化学成分为佳[杨异卉.锦灯笼宿萼中总黄酮的提取、富集及含量测定[N].哈尔滨医科大学学报,2012(46).26]。管慧洁采用HPLC法对不同产地的锦灯笼药材木樨草苷含量进行了测定,实验结果表明不同生长环境的锦灯笼所含木犀草苷含量存在差异,并与生长环境存在一定关系。此实验对今后锦灯笼药材质量的系统评价及最适宜生长环境的研究奠定基础[27管慧洁.锦灯笼药材木樨草苷含量测定[J].中华中医药学刊,2012,30(2):296-298.]。赵跃刚采用分光光度法以亚硝酸钠-硝酸铝为显色剂测定酸浆不同药用部位中总黄酮的含量酸浆各部分中的总黄酮含量,实验结果为总黄酮的含量鲜萼>宿萼>地上部分>冷冻果实>常温果实。对于合理科学地利用酸浆各部位药材,具有重要的指导作用[2赵跃刚.酸浆不同药用部位中总黄酮的含量测定[J].时珍国医国药,2010,21(11):2781-2782.8]。敬思群用超声波提取法提取酸浆宿萼总黄酮,并优化了宿萼中总黄酮的提取工艺[29敬思群.新疆酸浆宿萼总黄酮含量测定方法的研究[N].新疆大学学报,2007(自然科学版).]并利用可见光及紫外分光光度法测定酸浆宿萼总黄酮含量,优化了测定方法。许亮等人采用HPLC方法测定各地锦灯笼药材中木樨草素的含量,该试验对于中药材锦灯笼的内在质量评价具有一定的意义,并分析了农学和经纬度种植学对锦灯笼中木犀草苷含量的影响[30许亮.锦灯笼配方颗粒中木犀草素的HPLC法含量测定[J].中华中医药学刊,2008,26(3):653-654.]。王晓林.HPLC法测定锦灯笼宿萼中槲皮素的含量[J].安徽农业科学,2011,39(4):2091-2093.徐保利.锦灯笼果实总黄酮提取工艺[J].中国实验方剂学杂志,2011,17(21):33-35.杨异卉.锦灯笼宿萼中总黄酮的提取、富集及含量测定[N].哈尔滨医科大学学报,2012(46).管慧洁.锦灯笼药材木樨草苷含量测定[J].中华中医药学刊,2012,30(2):296-298.赵跃刚.酸浆不同药用部位中总黄酮的含量测定[J].时珍国医国药,2010,21(11):2781-2782.敬思群.新疆酸浆宿萼总黄酮含量测定方法的研究[N].新疆大学学报,2007(自然科学版).许亮.锦灯笼配方颗粒中木犀草素的HPLC法含量测定[J].中华中医药学刊,2008,26(3):653-654.2.3挥发性成分赵倩采用GC-MS联用技术鉴定了16个化学成份,其中脂肪酸类为主要成分。其中辛酸占42.08%十六酸占22.81%[21]。周正辉运用GC-MS法测定锦灯笼根茎挥发油并分析其化学成分。最终鉴定了其中的22个化合物,占挥发油色谱峰总面积的94%。锦灯笼根茎主要成分为n-十六酸、十六酸甲酯、十六酸乙酯、(Z)9-十八碳烯酰胺、6,9-十八碳二烯酸甲酯、8,9-二脱氢-9-甲酰异长叶烯、马铃薯螺二烯酮、(E)11-十六碳烯酸、5-十二烷基-2-呋喃酮、香橙烯-2-氧化物,本研究为锦灯笼根茎资源的进一步开发和利用提供依据[3周正辉.锦灯笼根茎挥发油化学成分GC-MS分析[J].特产研究,2012,69(3):69-71.1]。许亮用GC-MS—PC联用技术对酸浆带果柄的宿存萼和酸浆果实中挥发油进行分析,从锦灯笼(带果柄宿存萼)中分离得到44个化学组份,鉴定了其中30个,占挥发油总量的92.95%,但在果实中未发现有挥发油类成分[3许亮.锦灯笼与兔儿伞两种药材的挥发油成分研究[J].中成药,2007,29(12):1840-1843.2]。周正辉.锦灯笼根茎挥发油化学成分GC-MS分析[J].特产研究,2012,69(3):69-71.许亮.锦灯笼与兔儿伞两种药材的挥发油成分研究[J].中成药,2007,29(12):1840-1843.2.4糖类成分徐保利等用3,5-二硝基水杨酸(DNS)比色法对还原糖含量测定。并且优化了锦灯笼中还原糖的提取工艺[33徐保利.锦灯笼药材中还原糖提取工艺研究[J].中华中医药学刊,2012,30(8):1867-1868.]。敬思群优化了酸浆宿萼多糖的提取工艺,[34敬思群.酸浆宿萼总黄酮和多糖的提取及含量测定[J].食品研究与开发,2008,29(6):82-84]。于开源采用微波辅助提取技术,优化了多糖的提取工艺同时明显的提高了多糖的提取效率[35于开源.微波辅助提取酸浆籽中多糖方法优化[N].黑龙江八一农垦大学学报,2012(5).]。徐保利.锦灯笼药材中还原糖提取工艺研究[J].中华中医药学刊,2012,30(8):1867-1868.敬思群.酸浆宿萼总黄酮和多糖的提取及含量测定[J].食品研究与开发,2008,29(6):82-84于开源.微波辅助提取酸浆籽中多糖方法优化[N].黑龙江八一农垦大学学报,2012(5).2.5其他成分孟庆然优化了回流提取法提取锦灯笼宿萼中皂苷的工艺[36孟庆然.锦灯笼酸浆宿萼皂苷提取工艺的研究[N].山西农业大学学报,2012(4).]。谭乃迪采用正交试验对锦灯笼宿萼总多酚的超声提取工艺条件进行优化[37谭乃迪.锦灯笼宿萼中总多酚超声提取工艺研究[J].安徽农业科学,2011,39(32):19775-19777.]。汪月月等用微薄辅助提取法对锦灯笼中色素的提取工艺进行了优化[38汪月月.酸浆果实色素萃取工艺比较[N].吉林医药学院学报,2009(6).]。孟庆然.锦灯笼酸浆宿萼皂苷提取工艺的研究[N].山西农业大学学报,2012(4).谭乃迪.锦灯笼宿萼中总多酚超声提取工艺研究[J].安徽农业科学,2011,39(32):19775-19777.汪月月.酸浆果实色素萃取工艺比较[N].吉林医药学院学报,2009(6).3.药理作用:�.3.1降血糖和降血脂作用王和平等采用肾上腺和四氧嘧啶诱发水实验性糖尿病的模型,考察并筛选锦灯笼不同部位及其提取物对血糖的作用,确定了锦灯笼的果实的水提醇沉物中的苦瓜昔是其降血糖的有效成分,可用于治疗糖尿病。刘雅丽等研究表明锦灯笼宿萼皂苷(TPS)不仅能明显降低糖尿病小鼠的血糖浓度,而且TPS还能缓解糖尿病小鼠的一些症状,如恢复小鼠体重、减少饮水量等[39刘雅丽.锦灯笼宿萼皂苷降血糖作用研究[N].东北师大学报,2010(自然科学版).]。刘雅丽.锦灯笼宿萼皂苷降血糖作用研究[N].东北师大学报,2010(自然科学版).徐斌等采用高脂饮食大鼠模型,观察不同剂量对高血脂小鼠的降脂作用,结果表明锦灯笼水提取物对高血脂小鼠血清TC、TP有明显的降低作用[40]徐斌.酸浆提取物对高脂膳食大鼠抗氧化作用的影响[J].安徽农业科学,2011,39(30):18471-18474.。徐斌.酸浆提取物对高脂膳食大鼠抗氧化作用的影响[J].安徽农业科学,2011,39(30):18471-18474.�3.2抗病毒作用锦灯笼含木犀草素,木犀草素具有体外抗柯萨奇B3病毒的作用。何丽娜等采用组织培养法,通过CPE观察药物对HELA细胞最大无毒浓度和抗柯萨奇B3病毒浓度。结果表明,木犀草素细胞最大无毒浓度为9.75ug/ml。经不同时间给药,木犀草素在0.30~9.755ug/ml浓度范围内对柯萨奇B3病毒均有显著抑制细胞病变的作用[41]何丽娜,何素冰,杨军.木犀草素体外抗柯萨奇B3病毒作用[J].中国现代应用药学杂志,2000,17(5):362-365.。何丽娜,何素冰,杨军.木犀草素体外抗柯萨奇B3病毒作用[J].中国现代应用药学杂志,2000,17(5):362-365.3.3抗肿瘤作用孔静等通过流式细胞仪检测法分析酸浆醇提物(EEP)对食管癌EC-1.71细胞增殖的影响,结果发现EEP对对食管癌EC-1.71细胞增殖有抑制作用[42]孔静.酸浆醇提物对食管癌EC-1.71细胞增殖的抑制作用[N].江苏大学学报,2011(医学版).。任石涛等通过实验发现不同浓度的酸浆宿萼总皂苷(TPS)对小鼠胃癌细胞(MFC)的增殖的抑制率和细胞凋亡率都随浓度增大而增大,且呈剂量依赖性[43]任石涛.酸浆宿萼总皂苷对小鼠胃癌细胞(MFC)生长的影响[N].山西农业大学学报,2012(自然科学版).。此外锦灯笼中的酸浆苦味素类成分还对HELA癌细胞,人前列腺癌细胞(PC-3)等有较强的活性。孔静.酸浆醇提物对食管癌EC-1.71细胞增殖的抑制作用[N].江苏大学学报,2011(医学版).任石涛.酸浆宿萼总皂苷对小鼠胃癌细胞(MFC)生长的影响[N].山西农业大学学报,2012(自然科学版).3.4心血管系统的作用锦灯笼对心血管系统具有一定的作用其醚溶性成分,初期刺激迷走神经中枢,抑制心脏搏动,开始血压升高,随后血压是一时性下降。本品醚溶性和水溶性成分,对蛙心均有加强收缩作用,能引起微弱血管收缩和血压升高。同时木犀草素对麻醉犬具有明显扩张冠脉血流量及降低冠脉血管阻力的作用。�3.5抗炎作用酸浆中的酸浆苦味素B是锦灯笼的主要抗炎成分,常用于上呼吸道感染。李萍通过观察化学发光及检测H2O2产生,考察酸浆苦味素B对活化多形核中性粒细胞的影响,显示锦灯笼抗炎机理为抑制氧自由基的产生和释放而发挥作用。此外,吕春平等选用锦灯笼宿萼为原料,采用水浸、醇沉、有机溶剂萃取等方法提取并鉴定其主要成分为酸浆苦素类,采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型、蛋清致大鼠足爪肿胀模型为急性炎症模型,大鼠棉球肉芽肿模型为慢性炎症模型,实验结果表明锦灯笼提取物小剂量组与大剂量组均明显减轻二甲苯致小鼠耳肿胀,抑制蛋清所致大鼠足爪肿胀,抑制肉芽肿的形成,且呈剂量相关性。此实验证实了锦灯笼提取物对急性、慢性炎症反应均有抑制作用[44]吕春平.锦灯笼抗炎作用实验研究[J].现代预防科学,2007,34(12):2213-2214.。吕春平.锦灯笼抗炎作用实验研究[J].现代预防科学,2007,34(12):2213-2214.�3.6抗菌作用锦灯笼的提取物对金黄色葡萄球菌、甲型链球菌、乙型链球菌、蜡样芽抱杆菌、枯草芽抱杆菌均有抑制作用,其中有效成分酸浆苦素B和4,7-二去氢新酸浆苦素B有明显的抑菌作用。木犀草素在体外浓度为1:350000时能抑制金黄色葡萄球菌及枯草芽抱杆菌生长。所以,本品临床上常用于急性化脓性扁桃腺炎及咽喉肿痛。此外,含有酸浆苦素B、F、D可抑制结核分支杆菌生长的作用。�3.7避孕作用酸浆果实的水提物注射进母鼠腹腔,母鼠会出现动情间期,血浆中的黄体激素含量下降,子宫磷酸激酶同功酶的活性受到时间依赖性的抑制,植人的卵细胞发育成为蛹的数目降低96%。可见,酸浆果实可以起到避孕作用。�3.8对免疫细胞的作用在脂多糖和干扰素的作用下,巨噬细胞会产生氮氧化物,锦灯笼中特有的酸浆苦素B、F、G能够降低这些氮氧化物产生的量,因而具有免疫调节剂的功能。3.9镇痛作用龚珊等分别用扭体法、热板法、电刺激鼠尾-嘶叫法观察锦灯笼的镇痛作用。实验结果表明挂金灯在灌胃后60min能抑制小鼠的扭体反应,还能显著延长小鼠舔爪的潜伏期和抑制大鼠的嘶叫反应[45]龚珊.挂金灯镇痛作用的实验观察[N].苏州大学学报,2002(医学版).。龚珊.挂金灯镇痛作用的实验观察[N].苏州大学学报,2002(医学版).3.10利尿作用武蕾蕾等采用代谢笼法观察锦灯笼对大鼠的利尿作用。实验结果表明,锦灯笼醇提物对大鼠有明显利尿作用[4武蕾蕾.锦灯笼醇提取物对大鼠的利尿作用研究[N].牡丹江医学院学报,2012(2).6]。武蕾蕾.锦灯笼醇提取物对大鼠的利尿作用研究[N].牡丹江医学院学报,2012(2).3.11兴奋子宫作用酸浆根素(hystonin),可使离体家兔子宫发生紧张性的收缩,这是由于交感神经末梢麻痹所引起,与迷走神经无关。3.12抗氧化作用裴凌鹏等研究了酸浆提取物对D-半乳糖致老大鼠抗氧化能力的影响,与青年对照组相比,模型组血清MDA含量和肝脏匀浆MDA含量均比对照组有显著升高(P<0.01),血液SOD、GSH-Px酶活性比对照组有显著降低(P<0.01),与老龄对照组变化趋势呈现一致;而各提取物处理组血清MDA含量和肝脏匀浆MDA含量均比模型组有显著降低(P<0.01),血液SOD、GSH-Px酶活性比模型组有显著升高(P<0.01)。实验表明摄入适量酸浆提取物可以有效地增强大鼠机体抗氧化能力,从而延缓D-半乳糖诱发的大鼠衰老[47]裴凌鹏.酸浆提取物改善老龄大鼠抗氧化功能的研究[N].北京中医药大学学报,2007(10).。宋春梅等用改进的Nagai法研究酸浆类胡萝卜素对DPPH自由基(DPPH·)的抑制作用,2-脱氧核糖氧化法研究酸浆类胡萝卜素对羟自由基(·OH)的清除能力,并用分光光度法对小鼠红细胞氧化溶血、肝匀浆脂质过氧化和肝线粒体肿胀程度进行研究,实验结果表明酸浆类胡萝卜素具有抗氧化活性[48]宋春梅.酸浆类胡萝卜素的体外抗氧化活性研究[J].时珍国医国药,2011,22(12):2943-2944.。徐斌等发现摄入适量酸浆提取液可以有效地增强大鼠机体抗氧化能力[40]。裴凌鹏.酸浆提取物改善老龄大鼠抗氧化功能的研究[N].北京中医药大学学报,2007(10).宋春梅.酸浆类胡萝卜素的体外抗氧化活性研究[J].时珍国医国药,2011,22(12):2943-2944.质量控制:2010年版中国药典规定,锦灯笼的定性鉴别用TLC法,以酸浆苦味素L为对照品;以三氯甲烷-丙酮-甲醇(25∶1:1)为展开剂;在365nm下有相同颜色的荧光斑点。锦灯笼的定性鉴别用HPLC法,以乙腈-0.2%磷酸溶液(20:80)为流动相;检测波长为350nm时锦灯笼按干燥品计算,含木犀草苷(C21H20O11)不得少于0.10%。近期,赵红丹等从锦灯笼宿萼醇提物中首次分离到了含量较大的4,7-二脱氢新酸浆苦素B,制定锦灯笼药材质量控制方法,为锦灯笼宿萼开发奠定了基础[49]赵红丹.锦灯笼宿萼醇提物中4,7—二脱氢新酸浆苦素B的含量测定[N].辽宁中医药大学学报,2008(4).。此后,马哲等用HPLC法对锦灯笼宿萼药材含量测定进行了研究,发现4,7-二脱氢新酸浆苦素B可以作为锦灯笼宿萼药材的质量控制指标[7]。程雪梅等对锦灯笼药材质量标准进行了优化,用TLC法进行定性鉴别,对照品为酸浆苦素L;用HPLC进行含量测定,对照品为木犀草苷。并将此两种方法作为锦灯笼新的质量标准写入最新版(2010年版)中国药典,提升了锦灯笼的质量标准[50]灯笼药材质量标准研究[J].中国中药杂志,2010,35(16):2013-2105.。董雪等从锦灯笼宿萼中分离得到酸浆苦素P,此成分为锦灯笼中专属性较强的成分,采用HPLC法测定酸浆苦素P的含量,可作为控制锦灯笼药材的质量的方法[21]。王晓林等用HPLC法对锦灯笼中槲皮素的含量进行了测定,并且优化了锦灯笼药材中提取槲皮素的工艺[24]。敬思群等分别用HPLC法和硫酸-苯酚法对锦灯笼宿萼中总黄酮和多糖分别进行了含量测定,并优化了锦灯笼药材中黄酮和多糖的分离和纯化工艺[29]。赵红丹.锦灯笼宿萼醇提物中4,7—二脱氢新酸浆苦素B的含量测定[N].辽宁中医药大学学报,2008(4).灯笼药材质量标准研究[J].中国中药杂志,2010,35(16):2013-2105.此外,张初航建立了HPLC-DAD法同时测定2种酸浆苦味素(酸浆苦味素A和酸浆苦味素D)含量的方法,并测定了20种锦灯笼样品中的这2种成分的含量,结果显示不仅酸浆苦素D为锦灯笼药材中的主要成分,而且酸浆苦素D也是锦灯笼药材中的特征性成分[3]。龙启福等用HPLC法对锦灯笼指纹图谱进行了研究,通过测定7种不同产地的锦灯笼,建立了锦灯笼药材的指纹图谱分析方法。结果表明锦灯笼药材中的12个峰可以作为锦灯笼指纹图谱的分析方法,方法稳定、可靠和重现性好[51]龙启福.锦灯笼高效液相色谱指纹图谱研究[J].中成药,2010,32(2):179-181.。邹兵等用HLPC法同时对锦灯笼中四种有效成分酸浆苦素A、B、L、O进行了含量测定,为其质量控制提供了质量标准。并且优化了锦灯笼中酸浆苦味素类的提取方法[23]。龙启福.锦灯笼高效液相色谱指纹图谱研究[J].中成药,2010,32(2):179-181.锦灯笼中主要成分为酸浆苦味素类和黄酮类主要成分,具有抗菌,抗炎等作用,临床上有广泛的用途。但因锦灯笼在药典中用HPLC以专属性较差的木犀草苷作为对照品对锦灯笼药材进行质量评价,存在很大的缺陷。近期应研究专属性较强的酸浆苦味素类成分对锦灯笼进行定量控制,满足质量控制需要。�5.其他方面:锦灯笼因抗氧化可作为化妆品的主要成分,也可作为水果食用,并且有护肝作用。袁野通过HPLC研究确定东北锦灯笼最佳采收期为八月末这次酸浆苦素含量最高[袁野.锦灯笼药材最佳采收期研究[J].中华中医药学刊,2009,27(12):2674-2676.52]。宋晓民对锦灯笼的食用及药用价值进行了评估,介绍了锦灯笼的人工培育方法[53宋晓民.锦灯笼的开发与利用[J].林业勘察设计,2008(3):91.]。2010年王秀英对酸浆不同品系及不同生育期有效成分进行了分析。张玉珠对锦灯笼的储藏条件和锦灯笼质量的关系进行了考察。对潮湿,光照和高温对锦灯笼中的酸浆苦素类成分含量变化做了研究[5张玉珠.贮藏条件对锦灯笼药材的质量影响[J].中华中医药学刊,2011,29(6):1282-1284.4]。国外文献报道曾有人将酸浆果实和叶作为利尿剂。酸浆喜湿恶燥,栽培时用分根法,最合适在湿润的沙地土壤上种植避免烂根。最新的研究表明锦灯笼中有效成分可通过切断细胞转录的柠檬酸途径,有效的抑制艾滋病细胞的增殖。此外,酸浆经济价值好,营养成分高可作为经济作物种植,也可作为保健食品进行进一步开发,前景非常广阔。袁野.锦灯笼药材最佳采收期研究[J].中华中医药学刊,2009,27(12):2674-2676.宋晓民.锦灯笼的开发与利用[J].林业勘察设计,2008(3):91.张玉珠.贮藏条件对锦灯笼药材的质量影响[J].中华中医药学刊,2011,29(6):1282-1284.参考文献[1]中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国药典第一部[M],北京,化学工业出版社,2010:337-338[2]赵倩.锦灯笼化学成分的研究[D].沈阳:沈阳药科大学,2005[3]张初航.锦灯笼的活性成分能及质量评价研究[D].沈阳:沈阳药科大学,2009[4]张初航.酸浆中苦味素类化学成分的分离与结构鉴定[N].沈阳药科大学学报,2006(774-775).[5]许枬.酸浆化学成分的研究[J].中草药,2009,40(2):175-178.[6]袁野.酸浆化学成分研究[J].中草药,2010,41(12):1939-1942.[7]马哲.锦灯笼宿萼化学成分的分离与鉴定[D].大连:辽宁中医药大学,2007.[8]才谦.中药锦灯笼化学成分的分离与鉴定[N].沈阳药科大学学报,2009(807-810).[9]李坤.锦灯笼果实的化学成分研究[J].有机化学,2010,30(1):128-191.[10]于婷.锦灯笼果实的化学成分及纯化工艺研究[D].大连:辽宁中医药大学,2008.[11]林峰.锦灯笼中酸浆苦素类化学成分的研究[J].现代药物与临床,2011,26(6):469-472[12]邱莉.酸浆宿萼的黄酮苷类化学成分[N].沈阳药科大学报,2007(744-747).[13]王永辉.锦灯笼不同部位氨基酸的测定与分析[J].氨基酸和生物资源,2009.1(31):81-83.[14]陈荣.酸浆化学成分及酸浆苦素G的结构订证[J].中国天然药物,2007,5(3):186-189.[15]惠伯棣.酸浆浆果和宿萼中的类胡箩卜素组成分析[J].中国药学杂志,2006,41(8):583-584.[16]程瑛琨.酸浆宿萼色素的提取工艺及稳定性的研究[J].食品工业科技,2006(12):58-60.[17]程瑛琨.大孔树脂法精制酸浆宿萼色素的研究[J].离子交换与吸附,2009,25(5):463-469.[18]杨晓虹.酸浆宿萼无机元素和氨基酸含量的测定[N].白求恩医科大学学报,2001(27).[1
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