盐酸普鲁卡因课件

第七章芳香胺类药物的分析

第七章芳香胺类药物的分析

1

芳胺类药物指氨基直接与苯环相连。

芳胺类:酰胺类、对氨基苯甲酸酯类芳烃胺类药物指氨基在烃基侧链上苯乙胺类、苯丙胺类药物芳胺类药物指氨基直接与苯环相连。芳胺类:酰胺类、对2第一节芳胺类药物的分析一、对氨基苯甲酸酯类具有对氨基苯甲酸酯基本结构具有游离的芳伯氨基。1．结构特点：第一节芳胺类药物的分析具有对氨基苯甲酸酯基本结构1．结3代表药物有：

盐酸普鲁卡因苯佐卡因盐酸丁卡因代表药物有：盐酸普鲁卡因苯佐卡因盐酸丁卡因42．性质：①

芳伯氨基特性具有芳伯氨基，可发生重氮化—偶合反应；可与芳醛发生缩合反应，易氧化变色。②

水解特性具有酯键，易发生水解。水解的快慢受光线、温度或碱性条件影响。

2．性质：①

芳伯氨基特性②

水解特性5

③

弱碱性脂烃胺侧链为叔胺氮原子，故具有弱碱性；可与生物碱沉淀剂发生沉淀反应；可在非水溶剂中被滴定④

紫外吸收具有苯环结构，有紫外吸收⑤红外吸收盐酸普鲁卡因课件61.结构特点：

苯胺酰基衍生物，酰胺基邻位或对位有取代基。二、酰胺类1.结构特点：苯胺酰基衍生物，酰胺基邻位二、酰7代表药物有：

对乙酰氨基酚盐酸利多卡因代表药物有：对乙酰氨基酚盐酸利多卡因82．性质：利多卡因，酰胺基邻位上有两个甲基，有很大空间位阻，水解较为困难。（利多卡因在80%的硫酸溶液中加热才能水解）①

水解后可发生重氮化反应具有酰胺结构—共性。水解成芳伯氨基，发生重氮化偶合反应。2．性质：利多卡因，酰胺基邻位上有两个甲基，有很大空间位阻，9②

水解产物易酯化：酯键或酰胺键易水解③

与FeCl3反应具有酚羟基或水解后能产生酚羟基，可与FeCl3作用呈色。④

碱性利多卡因侧链中具有叔氨N原子，显弱碱性，能与酸成盐，且能与生物碱沉淀试剂或重金属离子反应。②

水解产物易酯化：酯键或酰胺键易水解③

与FeCl310三、鉴别反应1、重氮化-偶合反应具有芳伯氨基药物，如盐酸普鲁卡因等，在酸性溶液中与NaNO2发生重氮化反应，再与碱性-萘酚偶合产生红色偶氮化合物。三、鉴别反应11

直接反应：苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸普鲁卡因胺间接反应：对乙酰氨基酚、醋氨苯砜利多卡因和布比卡因由于空间位阻很难发生此反应。直接反应：苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸普间接反应：对乙12盐酸普鲁卡因课件13盐酸普鲁卡因课件14盐酸丁卡因（芳香第二胺结构）与NaNO2作用生成乳白色N-亚硝基化合物沉淀。盐酸丁卡因（芳香第二胺结构）与NaNO2作15

2、三氯化铁反应具有酚羟基（如对乙酰氨基酚），可与FeCl3作用显蓝紫色。

3、与重金属离子的反应具有烃胺侧链，与生物碱沉淀试剂反应.根据沉淀颜色或测定沉淀熔点进行鉴别。

2、三氯化铁反应3、与重金属离子的反应16(1)．与铜离子的反应(2)．与钴盐反应(1)．与铜离子的反应(2)．与钴盐反应17盐酸普鲁卡因课件18（3）羟肟酸铁的反应具有芳酰胺结构，被H2O2氧化成羟肟酸，羟肟酸与FeCl3反应生成紫红色羟肟酸铁，随即变为暗棕色至棕黑色。如盐酸普鲁卡因胺。具有酰胺结构的药物羟肟酸羟肟酸铁（3）羟肟酸铁的反应具有芳酰胺结构，被H2O2氧化成羟19（4）与汞离子反应（4）与汞离子反应20盐酸普鲁卡因的鉴别

4、水解产物反应盐酸普鲁卡因+NaOH普鲁卡因油状物对氨基苯甲酸钠+二乙氨基乙醇（使湿润的红色石蕊试纸变兰色）对氨基苯甲酸钠+HCl对氨基苯甲酸（白色）盐酸普鲁卡因的鉴别4、水解产物反应盐酸普鲁卡因+Na21盐酸普鲁卡因课件22苯佐卡因的水解反应苯佐卡因的水解反应235、制备衍生物测熔点三硝基苯酚衍生物

盐酸利多卡因ChP（2005）[鉴别]取本品0.2g，加水20ml溶解。（1）取溶液10ml，加三硝基苯酚试液10ml，即生成沉淀；滤过，沉淀用水洗涤后，干燥，依法测定（附录ⅥC），熔点为228～232℃，熔融时同时分解。盐酸布比卡因ChP（2005）5、制备衍生物测熔点三硝基苯酚衍生物盐酸利多卡因24利多卡因和布比卡因利多卡因和布比卡因25硫氰酸盐衍生物

盐酸丁卡因ChP（2005）[鉴别]（1）取本品约0.1g，加5%醋酸钠溶液10ml溶解后，加25%硫氰酸铵溶液1ml，即析出白色结晶；滤过，结晶用水洗涤，在80℃干燥，依法测定（附录ⅥC），熔点约为131℃。硫氰酸盐衍生物盐酸丁卡因ChP（2005266、UV盐酸布比卡因ChP（2005）[鉴别]（2）取本品，精密称定，按干燥品计算，加0.01mol/L盐酸溶液制成每1ml中含0.40mg的溶液，照分光光度法（附录ⅣA）测定，在263nm与271nm的波长处有最大吸收；其吸收度分别为0.53－0.58与0.43－0.48。6、UV盐酸布比卡因ChP（2005）277、红外吸收光谱法利用化合物结构中特殊基团的振动和转动等红外活性振动产生的红外吸收峰对药物进行鉴别的方法。要求能够对IR图中的cm-1（σ）进行正确的归属。7、红外吸收光谱法利用化合物结构中特殊基团的振动和28四、特殊杂质检查1、对乙酰氨基酚杂质检查

对乙酰氨基酚中除检查酸度、氯化物、硫酸盐、重金属、水分、炽灼残渣等一般杂质外，还需要检查：乙醇溶液的澄清度与颜色、有关物质（对氯乙酰苯胺）、对氨基酚等特殊杂质。四、特殊杂质检查29对乙酰氨基酚以对硝基氯苯为原料合成。对乙酰氨基酚以对硝基氯苯为原料合成。30(1)．乙醇溶液的澄清度与颜色对乙酰氨基酚易溶于乙醇中，如乙醇液不澄清或有颜色，则说明有杂质存在。生产工艺用铁粉作还原剂，如带入成品，则导致对乙酰氨基酚乙醇溶液产生浑浊。中间体对氨基酚有色氧化物在乙醇中显橙红色或棕色。(1)．乙醇溶液的澄清度与颜色31（2）有关物质（对氯乙酰苯胺）副反应副副反应对硝基氯苯为原料合成对乙酰氨基酚时，如发生这样的副反应就能够引入对氯乙酰苯胺。副反应（2）有关物质（对氯乙酰苯胺）副反应副副反应对硝基氯苯为原32TLC法①

样品液②

对照液对氯乙酰苯胺乙醚溶液（50g/ml）③

分离系统硅胶GF254氯仿-丙酮-甲苯（13∶5∶2）TLC法②

对照液③

分离系统33⑥

限量:④点样量样品液：200l点于硅胶GF254薄层板上对照液：40l⑤

判断在254nm波长紫外灯下观察，供试品与对照品主斑点Rf值相同的斑点比较,不得超过其大小与颜色。⑥

限量:④点样量⑤

判断34(3)．对氨基酚制备中乙酰化不完全或贮存不当发生水解都能引入对氨基酚☆检查原理：对氨基酚在碱性条件下，与亚硝基铁氰化钠作用，生成蓝色络合物，与对照液比较判断对氨基酚的限量。(3)．对氨基酚35四、含量测定（一）亚硝酸钠滴定法1.

原理具有芳伯氨基药物，在酸性条件下与NaNO2反应生成重氮盐，根据消耗NaNO2量，计算出含量。潜在芳伯氨基药物，如芳酰氨基、硝基等，可先水解或还原，得芳伯氨基后，再进行测定。四、含量测定36盐酸普鲁卡因课件372.

操作中的主要条件＊重氮化反应属于分子反应＊滴定液NaNO2及反应生成的重氮盐都不稳定＊反应速度受多种因素影响2.

操作中的主要条件38第一步反应速度比较慢，而后两步反应速度则比较快。（1）．加入溴化钾加快反应速度重氮化反应机制：第一步反应速度比较慢，而后两步反应速度则比较快。（1）．加入39a.当苯环上特别是氨基邻位或对位上有吸电基时,如吸电基通过诱导效应使氨基上电子云密度降低，从而碱性降低，游离芳伯胺浓度增大，所以反应速度就快。等可使氨基的碱性降低，重氮化反应速度加快。a.当苯环上特别是氨基邻位或对位上有吸电基时,如吸40b.

当在苯环上有供电基时，则使反应速度降低。如等。供电基能使氨基碱性增强，这样氨基成盐的机会就增大，游离芳伯胺的浓度就减小，所以反应速度就慢。b.

当在苯环上有供电基时，则使反应速度降低。如41（2）．反应速度与酸及酸度的关系a.酸的种类重氮化反应在HBr、HCl、H2SO4中反应速度是HBr＞HCl＞H2SO4

K1比K2大300倍（2）．反应速度与酸及酸度的关系K1比K2大300倍42用HBr时，生成NOBr量大，反应速度快。但HBr价格贵，用盐酸代替，为加快反应速度，需加入KBr（催化剂）。产生HBr与HNO2反应，可生成大量NOBr，加快反应速度。用HBr时，生成NOBr量大，反应速度快。产生43b.

盐酸的用量理论上:芳胺∶盐酸＝1∶1mol

实际上:芳胺∶盐酸＝1∶2.5~6mol原因：＊强酸性可加速反应＊重氮盐在酸性下稳定＊酸性下避免副反应发生。

b.

盐酸的用量原因：44

如盐酸量增加，则反应向左进行。如盐酸浓度太大，反到会使游离芳伯氨的量减小（成盐），而影响重氮化反应速度，使反应速度减慢。如酸度不足则没反应的芳胺与生成的重氮盐产生偶氮氨基化合物，而影响测定结果。如盐酸量增加，则反应向左进行。如酸度不足则没反应的芳45（3）反应速度与滴定时温度的关系一般，温度升高反应速度加快。但重氮化反应所生成的重氮盐不稳定，温度升高重氮盐分解速度也加快。另外，温度高时，滴定液亚硝酸钠也容易分解逸失，而影响测定结果。所以，重氮化反应应在低温条件下进行。（3）反应速度与滴定时温度的关系46中国药典规定：在30C以下，把滴定管尖端插入液面下进行滴定。在滴定时一边搅拌一边加入大部分标准溶液。到近终点时把滴定管提出液面，用水冲洗后再继续滴定至终点。标准溶液在液面下加入，可避免HNO2挥发。中国药典规定：在30C以下，把滴定管尖端插入液面下47（4）反应速度与滴定速度的关系

重氮化反应属分子反应，反应速度比较慢，滴定速度不能过快。尤其是近终点时，更要慢慢地滴定。近终点时，游离芳伯胺浓度非常低，反应速度就更慢了。所以，每加一滴标准液后，要搅拌1~5分钟后再判断终点。（4）反应速度与滴定速度的关系48

3.指示终点的方法(1)用停滴定法溶液检流计

终点前：无过量无电流HNO2

终点时：有过量有电流（使指针偏离零

HNO2永停在某一位置）(2)外指示剂法

用KI-淀粉指示剂指示终点的原理：

2NaO2+2KI+4HCl

2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2OGVVR1R2+V3.指示终点的方法GVVR1R2+V49（二）非水溶液滴定法

脂烃胺侧链，具弱碱性（三）紫外分光光度法

对乙酰氨基酚在0.4％氢氧化钠溶液中，于257nm波长处有最大吸收，其紫外吸收光谱特征，可用于其原料及其制剂的含量测定。（二）非水溶液滴定法

脂烃胺侧链，具弱碱性（三）50对乙酰氨基酚的含量测定：取本品42mg，精密称定，置250ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液50ml溶解后，加水至刻度，摇匀，精密量取5ml，置100ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液10ml，加水至刻度，摇匀。在1cm的吸收池中，照分光光度法在257nm的波长处测定吸收度为0.572。按C8H9NO2的吸收系数为715计算。求对乙酰氨基酚的百分含量？对乙酰氨基酚的含量测定：取本品42mg，精密称定，置2551（四）HPLC法

盐酸普鲁卡因注射液可同时测定盐酸普鲁卡因及其降解产物对氨基苯甲酸；离子抑制色谱法外标法定量（五）体内药物分析高效毛细管电泳法测定血浆中普鲁卡因、利多卡因、丁卡因和布比卡因（四）HPLC法52高效毛细管电泳测定几种局麻药电泳分析条件：40mmol/l的H3PO4-TrisbufferpH=5.0毛细管：59cm×70μm柱温：18℃压力进样：3Kpa×5s工作电压：20KV检测波长：220nm高效毛细管电泳测定几种局麻药电泳分析条件：53分析样品的处理：血浆→碱化→乙醚：二氯甲烷萃取→离心→挥干有机溶剂→缓冲溶液溶解残渣→进样分析分析样品的处理：54第二节苯乙胺类药物分析一．结构特点具有烃胺侧链，属于芳烃胺类药物。多数在苯环上有1~2个羟基取代基。第二节苯乙胺类药物分析具有烃胺侧链，属于芳烃胺类药物。多55代表药物肾上腺素去甲肾上腺素代表药物肾上腺素去甲肾上腺素56二．性质：1.

易被氧化邻苯二酚或苯酚结构，可与重金属离子络和呈色；易被氧化呈色。3.

具有旋光性具有手性碳原子，具有光学活性。2.

显碱性具有烃胺侧链（仲氨），显弱碱性。能与酸成盐。二．性质：3.

具有旋光性2.

显碱性57三．鉴别试验1、三氯化铁反应(酚羟基)：在0.1mol/L盐酸中与Fe3+显翠绿色，加氨试液后，显紫色或紫红色2、甲醛-硫酸反应

本类药物与甲醛硫酸反应生成具有醌式结构的有色物质三．鉴别试验583、氧化反应

4、紫外分光光度法与红外分光光度法5、与亚硝基铁氰化钠的反应（Rimini试验）脂肪伯氨基＋亚硝基铁氰化钠＋丙酮＋碳酸氢钠→红紫色6、双缩脲反应：氨基醇结构与硫酸铜的反应

盐酸麻黄碱+硫酸铜→蓝紫色+乙醚3、氧化反应

5、与亚硝基铁氰化钠的反应（Rimini试验）59三、肾上腺素中酮体的检查三、肾上腺素中酮体的检查60四、含量测定（一）

非水溶液滴定法

利用本类药物分子中侧链脂烃胺的碱性。溶剂：冰醋酸－醋酐指示剂：结晶紫；滴定剂：高氯酸；终点判断：显蓝绿色注意：氢卤酸盐需用醋酸汞消除干扰。含氨基的药物如果需加入醋酐，应在加入冰HAc溶解放冷后再加醋酐，防止氨基被乙酰化。四、含量测定61盐酸普鲁卡因课件62（二）、溴量法：以盐酸去氧肾上腺素为例。1）原理：

Br2+2KI→2KBr+I2I2+

2Na2S2O3→2NaI+Na2S4O62)操作要点①游离溴及碘极易挥散，操作过程中防逸失②不能加入太过量的溴液，以防酚羟基氧化或溴化。一般以过量2％为宜。③平行条件作空白，校正操作中溴及碘挥发。（二）、溴量法：以盐酸去氧肾上腺素为例。63（三）提取中和法1．基本原理利用药物盐的形式可溶于水,游离药物不溶于水而溶于有机溶剂的性质进行提取，然后进行滴定的方法。（三）提取中和法64

4、紫外分光光度法与比色法5、高效液相色谱法6、体内药物分析4、紫外分光光度法与比色法65

第三节苯丙胺类药物的分析一、苯丙胺类药物的基本结构与典型性质马来酸依那普利西拉普利第三节苯丙胺类药物的分析马来酸依那普利西拉普利66二、主要性质1、酸碱两性：仲胺和羧基2、具某些氨基酸特性：茚三酮反应3、光学活性：旋光性4、水解：二、主要性质1、酸碱两性：仲胺和羧基67三、鉴别

熔点测定高锰酸钾反应：加硫酸溶解遇高锰酸钾，红色消失溴-间苯二酚：加溴水颜色消失后，溴代液与间苯二酚反应显红棕色。羟肟酸铁反应

旋光法：比旋光度紫外与红外

三、鉴别68三、特殊杂质检查

马来酸依那普利中有关物质的检查

西拉普利中有关物质的检查

残留溶剂的测定四、含量测定酸碱滴定法：仲胺氮和两个羧基非水滴定法、水溶液中的测定、醇-水溶液中的滴定高效液相色谱法体内药物分析

三、特殊杂质检查69第七章芳香胺类药物的分析

第七章芳香胺类药物的分析

70

芳胺类药物指氨基直接与苯环相连。

芳胺类:酰胺类、对氨基苯甲酸酯类芳烃胺类药物指氨基在烃基侧链上苯乙胺类、苯丙胺类药物芳胺类药物指氨基直接与苯环相连。芳胺类:酰胺类、对71第一节芳胺类药物的分析一、对氨基苯甲酸酯类具有对氨基苯甲酸酯基本结构具有游离的芳伯氨基。1．结构特点：第一节芳胺类药物的分析具有对氨基苯甲酸酯基本结构1．结72代表药物有：

盐酸普鲁卡因苯佐卡因盐酸丁卡因代表药物有：盐酸普鲁卡因苯佐卡因盐酸丁卡因732．性质：①

芳伯氨基特性具有芳伯氨基，可发生重氮化—偶合反应；可与芳醛发生缩合反应，易氧化变色。②

水解特性具有酯键，易发生水解。水解的快慢受光线、温度或碱性条件影响。

2．性质：①

芳伯氨基特性②

水解特性74

③

弱碱性脂烃胺侧链为叔胺氮原子，故具有弱碱性；可与生物碱沉淀剂发生沉淀反应；可在非水溶剂中被滴定④

紫外吸收具有苯环结构，有紫外吸收⑤红外吸收盐酸普鲁卡因课件751.结构特点：

苯胺酰基衍生物，酰胺基邻位或对位有取代基。二、酰胺类1.结构特点：苯胺酰基衍生物，酰胺基邻位二、酰76代表药物有：

对乙酰氨基酚盐酸利多卡因代表药物有：对乙酰氨基酚盐酸利多卡因772．性质：利多卡因，酰胺基邻位上有两个甲基，有很大空间位阻，水解较为困难。（利多卡因在80%的硫酸溶液中加热才能水解）①

水解后可发生重氮化反应具有酰胺结构—共性。水解成芳伯氨基，发生重氮化偶合反应。2．性质：利多卡因，酰胺基邻位上有两个甲基，有很大空间位阻，78②

水解产物易酯化：酯键或酰胺键易水解③

与FeCl3反应具有酚羟基或水解后能产生酚羟基，可与FeCl3作用呈色。④

碱性利多卡因侧链中具有叔氨N原子，显弱碱性，能与酸成盐，且能与生物碱沉淀试剂或重金属离子反应。②

水解产物易酯化：酯键或酰胺键易水解③

与FeCl379三、鉴别反应1、重氮化-偶合反应具有芳伯氨基药物，如盐酸普鲁卡因等，在酸性溶液中与NaNO2发生重氮化反应，再与碱性-萘酚偶合产生红色偶氮化合物。三、鉴别反应80

直接反应：苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸普鲁卡因胺间接反应：对乙酰氨基酚、醋氨苯砜利多卡因和布比卡因由于空间位阻很难发生此反应。直接反应：苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸普间接反应：对乙81盐酸普鲁卡因课件82盐酸普鲁卡因课件83盐酸丁卡因（芳香第二胺结构）与NaNO2作用生成乳白色N-亚硝基化合物沉淀。盐酸丁卡因（芳香第二胺结构）与NaNO2作84

2、三氯化铁反应具有酚羟基（如对乙酰氨基酚），可与FeCl3作用显蓝紫色。

3、与重金属离子的反应具有烃胺侧链，与生物碱沉淀试剂反应.根据沉淀颜色或测定沉淀熔点进行鉴别。

2、三氯化铁反应3、与重金属离子的反应85(1)．与铜离子的反应(2)．与钴盐反应(1)．与铜离子的反应(2)．与钴盐反应86盐酸普鲁卡因课件87（3）羟肟酸铁的反应具有芳酰胺结构，被H2O2氧化成羟肟酸，羟肟酸与FeCl3反应生成紫红色羟肟酸铁，随即变为暗棕色至棕黑色。如盐酸普鲁卡因胺。具有酰胺结构的药物羟肟酸羟肟酸铁（3）羟肟酸铁的反应具有芳酰胺结构，被H2O2氧化成羟88（4）与汞离子反应（4）与汞离子反应89盐酸普鲁卡因的鉴别

4、水解产物反应盐酸普鲁卡因+NaOH普鲁卡因油状物对氨基苯甲酸钠+二乙氨基乙醇（使湿润的红色石蕊试纸变兰色）对氨基苯甲酸钠+HCl对氨基苯甲酸（白色）盐酸普鲁卡因的鉴别4、水解产物反应盐酸普鲁卡因+Na90盐酸普鲁卡因课件91苯佐卡因的水解反应苯佐卡因的水解反应925、制备衍生物测熔点三硝基苯酚衍生物

盐酸利多卡因ChP（2005）[鉴别]取本品0.2g，加水20ml溶解。（1）取溶液10ml，加三硝基苯酚试液10ml，即生成沉淀；滤过，沉淀用水洗涤后，干燥，依法测定（附录ⅥC），熔点为228～232℃，熔融时同时分解。盐酸布比卡因ChP（2005）5、制备衍生物测熔点三硝基苯酚衍生物盐酸利多卡因93利多卡因和布比卡因利多卡因和布比卡因94硫氰酸盐衍生物

盐酸丁卡因ChP（2005）[鉴别]（1）取本品约0.1g，加5%醋酸钠溶液10ml溶解后，加25%硫氰酸铵溶液1ml，即析出白色结晶；滤过，结晶用水洗涤，在80℃干燥，依法测定（附录ⅥC），熔点约为131℃。硫氰酸盐衍生物盐酸丁卡因ChP（2005956、UV盐酸布比卡因ChP（2005）[鉴别]（2）取本品，精密称定，按干燥品计算，加0.01mol/L盐酸溶液制成每1ml中含0.40mg的溶液，照分光光度法（附录ⅣA）测定，在263nm与271nm的波长处有最大吸收；其吸收度分别为0.53－0.58与0.43－0.48。6、UV盐酸布比卡因ChP（2005）967、红外吸收光谱法利用化合物结构中特殊基团的振动和转动等红外活性振动产生的红外吸收峰对药物进行鉴别的方法。要求能够对IR图中的cm-1（σ）进行正确的归属。7、红外吸收光谱法利用化合物结构中特殊基团的振动和97四、特殊杂质检查1、对乙酰氨基酚杂质检查

对乙酰氨基酚中除检查酸度、氯化物、硫酸盐、重金属、水分、炽灼残渣等一般杂质外，还需要检查：乙醇溶液的澄清度与颜色、有关物质（对氯乙酰苯胺）、对氨基酚等特殊杂质。四、特殊杂质检查98对乙酰氨基酚以对硝基氯苯为原料合成。对乙酰氨基酚以对硝基氯苯为原料合成。99(1)．乙醇溶液的澄清度与颜色对乙酰氨基酚易溶于乙醇中，如乙醇液不澄清或有颜色，则说明有杂质存在。生产工艺用铁粉作还原剂，如带入成品，则导致对乙酰氨基酚乙醇溶液产生浑浊。中间体对氨基酚有色氧化物在乙醇中显橙红色或棕色。(1)．乙醇溶液的澄清度与颜色100（2）有关物质（对氯乙酰苯胺）副反应副副反应对硝基氯苯为原料合成对乙酰氨基酚时，如发生这样的副反应就能够引入对氯乙酰苯胺。副反应（2）有关物质（对氯乙酰苯胺）副反应副副反应对硝基氯苯为原101TLC法①

样品液②

对照液对氯乙酰苯胺乙醚溶液（50g/ml）③

分离系统硅胶GF254氯仿-丙酮-甲苯（13∶5∶2）TLC法②

对照液③

分离系统102⑥

限量:④点样量样品液：200l点于硅胶GF254薄层板上对照液：40l⑤

判断在254nm波长紫外灯下观察，供试品与对照品主斑点Rf值相同的斑点比较,不得超过其大小与颜色。⑥

限量:④点样量⑤

判断103(3)．对氨基酚制备中乙酰化不完全或贮存不当发生水解都能引入对氨基酚☆检查原理：对氨基酚在碱性条件下，与亚硝基铁氰化钠作用，生成蓝色络合物，与对照液比较判断对氨基酚的限量。(3)．对氨基酚104四、含量测定（一）亚硝酸钠滴定法1.

原理具有芳伯氨基药物，在酸性条件下与NaNO2反应生成重氮盐，根据消耗NaNO2量，计算出含量。潜在芳伯氨基药物，如芳酰氨基、硝基等，可先水解或还原，得芳伯氨基后，再进行测定。四、含量测定105盐酸普鲁卡因课件1062.

操作中的主要条件＊重氮化反应属于分子反应＊滴定液NaNO2及反应生成的重氮盐都不稳定＊反应速度受多种因素影响2.

操作中的主要条件107第一步反应速度比较慢，而后两步反应速度则比较快。（1）．加入溴化钾加快反应速度重氮化反应机制：第一步反应速度比较慢，而后两步反应速度则比较快。（1）．加入108a.当苯环上特别是氨基邻位或对位上有吸电基时,如吸电基通过诱导效应使氨基上电子云密度降低，从而碱性降低，游离芳伯胺浓度增大，所以反应速度就快。等可使氨基的碱性降低，重氮化反应速度加快。a.当苯环上特别是氨基邻位或对位上有吸电基时,如吸109b.

当在苯环上有供电基时，则使反应速度降低。如等。供电基能使氨基碱性增强，这样氨基成盐的机会就增大，游离芳伯胺的浓度就减小，所以反应速度就慢。b.

当在苯环上有供电基时，则使反应速度降低。如110（2）．反应速度与酸及酸度的关系a.酸的种类重氮化反应在HBr、HCl、H2SO4中反应速度是HBr＞HCl＞H2SO4

K1比K2大300倍（2）．反应速度与酸及酸度的关系K1比K2大300倍111用HBr时，生成NOBr量大，反应速度快。但HBr价格贵，用盐酸代替，为加快反应速度，需加入KBr（催化剂）。产生HBr与HNO2反应，可生成大量NOBr，加快反应速度。用HBr时，生成NOBr量大，反应速度快。产生112b.

盐酸的用量理论上:芳胺∶盐酸＝1∶1mol

实际上:芳胺∶盐酸＝1∶2.5~6mol原因：＊强酸性可加速反应＊重氮盐在酸性下稳定＊酸性下避免副反应发生。

b.

盐酸的用量原因：113

如盐酸量增加，则反应向左进行。如盐酸浓度太大，反到会使游离芳伯氨的量减小（成盐），而影响重氮化反应速度，使反应速度减慢。如酸度不足则没反应的芳胺与生成的重氮盐产生偶氮氨基化合物，而影响测定结果。如盐酸量增加，则反应向左进行。如酸度不足则没反应的芳114（3）反应速度与滴定时温度的关系一般，温度升高反应速度加快。但重氮化反应所生成的重氮盐不稳定，温度升高重氮盐分解速度也加快。另外，温度高时，滴定液亚硝酸钠也容易分解逸失，而影响测定结果。所以，重氮化反应应在低温条件下进行。（3）反应速度与滴定时温度的关系115中国药典规定：在30C以下，把滴定管尖端插入液面下进行滴定。在滴定时一边搅拌一边加入大部分标准溶液。到近终点时把滴定管提出液面，用水冲洗后再继续滴定至终点。标准溶液在液面下加入，可避免HNO2挥发。中国药典规定：在30C以下，把滴定管尖端插入液面下116（4）反应速度与滴定速度的关系

重氮化反应属分子反应，反应速度比较慢，滴定速度不能过快。尤其是近终点时，更要慢慢地滴定。近终点时，游离芳伯胺浓度非常低，反应速度就更慢了。所以，每加一滴标准液后，要搅拌1~5分钟后再判断终点。（4）反应速度与滴定速度的关系117

3.指示终点的方法(1)用停滴定法溶液检流计

终点前：无过量无电流HNO2

终点时：有过量有电流（使指针偏离零

HNO2永停在某一位置）(2)外指示剂法

用KI-淀粉指示剂指示终点的原理：

2NaO2+2KI+4HCl

2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2OGVVR1R2+V3.指示终点的方法GVVR1R2+V118（二）非水溶液滴定法

脂烃胺侧链，具弱碱性（三）紫外分光光度法

对乙酰氨基酚在0.4％氢氧化钠溶液中，于257nm波长处有最大吸收，其紫外吸收光谱特征，可用于其原料及其制剂的含量测定。（二）非水溶液滴定法

脂烃胺侧链，具弱碱性（三）119对乙酰氨基酚的含量测定：取本品42mg，精密称定，置250ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液50ml溶解后，加水至刻度，摇匀，精密量取5ml，置100ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液10ml，加水至刻度，摇匀。在1cm的吸收池中，照分光光度法在257nm的波长处测定吸收度为0.572。按C8H9NO2的吸收系数为715计算。求对乙酰氨基酚的百分含量？对乙酰氨基酚的含量测定：取本品42mg，精密称定，置25120（四）HPLC法

盐酸普鲁卡因注射液可同时测定盐酸普鲁卡因及其降解产物对氨基苯甲酸；离子抑制色谱法外标法定量（五）体内药物分析高效毛细管电泳法测定血浆中普鲁卡因、利多卡因、丁卡因和布比卡因（四）HPLC法121高效毛细管电泳测定几种局麻药电泳分析条件：40mmol/l的H3PO4-TrisbufferpH=5.0毛细管：59cm×70μm柱温：18℃压力进样：3Kpa×5s工作电压：20KV检测波长：220nm高效毛细管电泳测定几种局麻药电泳分析条件：122分析样品的处理：血浆→碱化→乙醚：二氯甲烷萃取→离心→挥干有机溶剂→缓冲溶液溶解残渣→进样分析分析样品的处理：123第二节苯乙胺类药物分析一．结构特点具有烃胺侧链，属于芳烃胺类药物。多数在苯环上有1~2个羟基取代基。第二节苯乙胺类药物分析具有烃胺