专题基因工程课件

操作环境：操作对象：操作水平：实质：结果：生物体外基因DAN分子水平基因重组新的生物类型或生物产品操作环境：生物体外基因DAN分子水平基因重组新的生物类型或生11.1DNA重组技术的基本工具1.需要基因的剪刀——限制性核酸内切酶。2.需要基因的针线——DNA连接酶。3.需要基因的运输工具——运载体。1.1DNA重组技术的基本工具1.需要基因的剪刀——限制2识别______________________________序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的__________断开。主要是从原核生物中分离纯化出来的一类酶。4000种。1.来源：2.种类：3.作用：5.结果：形成两种末端黏性末端平末端一、限制性核酸内切酶----“剪刀”：双链DNA分子的某种特定的核苷酸磷酸二酯键4.识别的序列：大多由____个核苷酸组成，少数由

4、5或8个核苷酸组成6识别____________________________3限制酶同种限制酶切出的黏性末端相同限制酶同种限制酶切出的黏性末端相同4同种限制酶切出的平末端也相同同种限制酶切出的平末端也相同5-C-A--G-T-T-C-C-AA-G-G-T-T-G-A-C-下列黏性末端是否属于同一种限制酶切割形成的？-C-A--G-T-T-C-C61、种类：2、作用部位：两类E·coliDNA连接酶T4DNA连接酶

磷酸二酯键

DNA连接酶可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来。二、DNA连接酶－－“针线”氢键—自动生成1、种类：两类E·coliDNA连接酶磷酸二酯键7三、基因的运载体2、运载体的种类：（1）质粒质粒是一种裸露的、结构简单、独立于核DNA之外能自我复制的很小的双链环状DNA分子。

（2）噬菌体（3）某些动植物病毒将外源基因送入受体细胞1、运载体的作用：天然质粒能否直接用于基因工程操作中？三、基因的运载体2、运载体的种类：将外源基因送入受体细胞1、8复制原点：能复制并带着插入的目的基因一起复制限制酶切位点：有一至多个种标记基因：用来检测目的基因是否导入受体细胞，将含有目的基因的受体细胞筛选出来。P11以质粒为例，了解运载体的特点天然质粒一般不能直接用于基因工程操作中！！复制原点：能复制并带着插入的目的基因一起复制限制酶切位点：有9以质粒为例，了解运载体的特点1、小型、裸露DNA2、有一个至多个限制酶切割位点3、能在受体细胞内稳定存在并复制4、有标记基因天然质粒一般不能直接用于基因工程操作中！！以质粒为例，了解运载体的特点1、小型、裸露DNA天然质粒一般101.2

基因工程的基本操作程序1、目的基因的获取1.2基因工程的基本操作程序1、目的基因的获取11①、从基因文库中获得1.2

基因工程的基本操作程序1、目的基因的获取②、利用PCR技术扩增目的基因变性复性延伸③、人工合成①、从基因文库中获得1.2基因工程的基本操作程序1、目的121.2

基因工程的基本操作程序2、基因表达载体的构建1、目的基因的获取【点拨】启动子、终止子与起始密码子、终止密码子不同：启动子、终止子在DNA上,在遗传信息转录时起调控作用；而起始密码子、终止密码子在mRNA上,在翻译时起作用,决定翻译的开始和结束。1.2基因工程的基本操作程序2、基因表达载体的构建1、目131.2

基因工程的基本操作程序1、目的基因的获取2、基因表达载体的构建3、将目的基因导入受体细胞转化固定吸管1.2基因工程的基本操作程序1、目的基因的获取2、基因表141.2

基因工程的基本操作程序1、目的基因的获取2、基因表达载体的构建3、将目的基因导入受体细胞转化4、目的基因的检测与鉴定1.2基因工程的基本操作程序1、目的基因的获取2、基因表15杂交带：将待测的DNA样品酶切后，电泳处理，不同大小的片段分离，形成一条条层带（看不见），然后用醋酸纤维膜吸附，通过化学处理，再用放射性探针涂布、洗脱。探针就保留在该片段所在的层带。然后采用放射自显影技术，即含溴化银的乳胶（好像和胶卷显影一个原理）涂布，黑暗摆放，放射性元素衰变放射出的伽马射线使探针存在的层带呈现黑色，这些黑色层带即杂交带。杂交带：将待测的DNA样品酶切后，电泳处理，不同大小的片段分161.2

基因工程的基本操作程序1、目的基因的获取2、基因表达载体的构建3、将目的基因导入受体细胞转化4、目的基因的检测与鉴定1.2基因工程的基本操作程序1、目的基因的获取2、基因表171.2

基因工程的基本操作程序1、目的基因的获取2、基因表达载体的构建3、将目的基因导入受体细胞转化4、目的基因的检测与鉴定如何让一头奶牛产生含有人的生长激素的牛奶，说出相关步骤提取人的生长激素基因——构建人的生长激素基因表达载体——将人的生长激素基因导入奶牛的受精卵——人生长激素基因的检测与鉴定1.2基因工程的基本操作程序1、目的基因的获取2、基因表18【高考警示钟】1.目的基因的插入位点不是随意的基因表达需要启动子与终止子的调控，所以目的基因应插入到启动子与终止子之间的部位。2.基因工程操作过程中只有第三步(将目的基因导入受体细胞)没有碱基互补配对现象第一步存在逆转录法获得DNA，第二步存在黏性末端连接现象，第四步检测存在分子水平杂交方法。【高考警示钟】196.关于现代生物技术相关知识的叙述，正确的是：A、限制酶只能识别并作用于特定的DNA分子，体现了酶的专一性B、基因工程的设计和施工都是在细胞水平上进行的C、用限制酶切割一个DNA分子，获得一个目的基因，同时有两个磷酸二酯键被水解D、在构建基因表达载体的过程中，通常要用同种限制酶切割质粒和目的基因，以得到相同的黏性末端，便于目的基因与运载体的结合√6.关于现代生物技术相关知识的叙述，正确的是：√20专题基因工程课件211.3

基因工程的应用★用转基因动物生产药物乳腺生物反应器★用转基因动物作器官移植供体避免免疫排斥★工程菌生产药物干扰素★基因治疗1.3基因工程的应用★用转基因动物生产药物乳腺生物反应器222.下列关于基因工程应用的叙述，正确的是()A.我国的转基因抗虫棉转入的抗虫基因是Bt毒蛋白基因B.利用乳腺生物反应器能够获得一些重要医药产品，如人的血清白蛋白，这是因为将人的血清白蛋白基因转入了动物的乳腺细胞中C.由大肠杆菌工程菌获得人的干扰素后可直接应用D.为培育成抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体√受精卵糖蛋白无内质网和高尔基体植物细胞都具有全能性2.下列关于基因工程应用的叙述，正确的是()√受精卵糖2310.下列有关基因工程的相关叙述中，正确的是(双选)A.基因治疗就是去除生物体细胞中有缺陷的突变基因B.运载体上抗性基因的存在有利于对运载体是否导入受体细胞进行检测C.在基因工程操作中，必须用同种限制性核酸内切酶切割目的基因和质粒D.转基因技术造成的变异，实质上相当于人为的基因重组，却产生了定向变异基因治疗:将外源正常基因导入靶细胞，以纠正或补偿因基因缺陷和异常引起的疾病，以达到治疗目的标记基因只要目的基因和质粒获得的末端能互补就能连接-C-A--G-T-T-C-C-AA-G-G-T-T-G-A-C-√√10.下列有关基因工程的相关叙述中，正确的是(双选)基因治疗241.4

蛋白质工程的崛起一、蛋白质工程崛起的缘由改造干扰素（半胱氨酸）体外很难保存干扰素（丝氨酸）体外可以保存半年玉米中赖氨酸含量比较低天冬氨酸激酶（352位的苏氨酸）二氢吡啶二羧酸合成酶（104位的天冬酰胺）改造改造天冬氨酸激酶（异亮氨酸）二氢吡啶二羧酸合成酶（异亮氨酸）玉米中赖氨酸含量可提高数倍基因工程只能生产自然界已存在的蛋白质。天然蛋白质的结构和功能符合特定物种生存的需要，却不一定完全符合人类生产和生活的需要。1.4蛋白质工程的崛起一、蛋白质工程崛起的缘由改造干扰素252、蛋白质工程的原理：基因改造2、蛋白质工程的原理：基因改造26【典例训练2】(2011·茂名模拟)下列关于蛋白质工程和基因工程的比较，不合理的是A.基因工程原则上只能生产自然界已存在的蛋白质，而蛋白质工程可以对现有蛋白质进行改造，从而制造一种新的蛋白质B.蛋白质工程是在基因工程的基础上发展起来的，蛋白质工程最终还是要通过基因修饰或基因合成来完成C.当得到可以在-70℃条件下保存半年的干扰素后，在相关酶、氨基酸和适宜的温度、pH条件下，干扰素可以大量自我合成D.基因工程和蛋白质工程产生的变异都是可遗传的√【典例训练2】(2011·茂名模拟)下列关于蛋白质工程和基因27例题.(双选)下列有关蛋白质工程的说法正确的是()A.蛋白质工程也需构建基因表达载体B.通过蛋白质工程改造后的蛋白质有的仍是天然的蛋白质C.蛋白质工程需要限制酶和DNA连接酶D.蛋白质工程是在蛋白质分子水平上改造蛋白质的√√例题.(双选)下列有关蛋白质工程的说法正确的是()√√282.如图表示蛋白质工程的操作过程，下列说法不正确的是()A.蛋白质工程中对蛋白质分子结构的了解是非常关键的工作B.蛋白质工程是完全摆脱基因工程技术的一项全新的生物工程技术C.a、b过程分别是转录、翻译D.蛋白质工程中可能构建出一种全新的基因√2.如图表示蛋白质工程的操作过程，下列说法不正确的是(292.(2011·茂名模拟)科学家为提高玉米中赖氨酸的含量，计划将天冬氨酸激酶的第352位的苏氨酸变成异亮氨酸，将二氢吡啶二羧酸合成酶的第104位的天冬酰胺变成异亮氨酸，变化后就可以使玉米叶片和种子中的游离赖氨酸含量分别提高5倍和2倍，该生物技术为()A.基因工程B.蛋白质工程C.诱变育种D.细胞工程【解析】选B。2.(2011·茂名模拟)科学家为提高玉米中赖氨酸的含量，计30（2011海南生物卷）回答有关基因工程的问题：构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生粘性末端，也可能产生_平__末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生_相同_（相同，不同）粘性末端的限制酶。（2011上海生命科学卷)57．基因工程中使用的限制酶，其特点是:特异性地识别和切割DNA序列（1分）（2011海南生物卷）回答有关基因工程的问题：31利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是提供RNA聚合酶特异性识别结合位点，驱动基因转录。在用表达载体转化大肠杆菌时，常用Ca2+处理大肠杆菌，以利于表达载体进入：为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为DNA—RNA分子杂交。为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成胰岛素原（蛋白质）_，常用抗原-抗体杂交技术。如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的T—DNA_中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的染色体DNA_上。利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及32基因工程基本工具分子手术刀：分子缝合针：分子运输车：限制性核酸内切酶（来源、作用、结果）DNA连接酶（分类、作用）运载体（载体类型、条件）基因操作程序目的基因的获取从基因文库中获取用PCR技术扩增基因组文库cDNA文库原理大致过程基因表达载体的构建构建目的构建零件及作用目的基因导入受体细胞导入植物细胞的方法导入动物细胞的方法导入微生物细胞的方法应用目的基因的检测与鉴定分子水平的检测个体生物学水平的鉴定基因工程基本工具分子手术刀：分子缝合针：分子运输车：限制性核33专题基因工程课件34专题基因工程课件352.限制酶的作用实际上就是使DNA上某些化学键断开，一种能对GAATTC专一识别的限制酶，断开的化学键是()A.G与A之间的键B.G与C之间的键C.A与T之间的键D.磷酸与脱氧核糖之间的键TA12345123452.限制酶的作用实际上就是使DNA上某些化学键断开，一种能对362.(2011·福州模拟)据图所示，有关工具酶功能的叙述不正确的是()A.限制性内切酶可以切断a处，DNA连接酶可以连接a处B.DNA聚合酶可以连接a处C.解旋酶可以使b处解开D.连接c处的酶可以为DNA连接酶2.(2011·福州模拟)据图所示，有关工具酶功能的叙述不正374.(双选)质粒是基因工程中最常用的载体，它存在于许多细菌体内。某细菌质粒上的标记基因如图所示，通过标记基因可以推知外源基因(目的基因)是否转移成功。外源基因插入的位置不同，细菌在培养基上生长情况也不同，图示外源基因在质粒中可插入的位置有a、b、c三点。某同学根据实验现象对其插入的位点进行分析，其中分析正确的是()4.(双选)质粒是基因工程中最常用的载体，它存在于许多细菌体38氨四氨四393.(2010·江苏高考)下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：金榜1803.(2010·江苏高考)下表中列出了几种限制酶识别序列及其401.下列关于基因工程的说法中，正确的是()A.基因工程的设计和施工都是在细胞水平上进行的B.目前基因工程所有的目的基因都是从供体细胞中直接分离得到的C.只要检测出受体细胞中含有目的基因，那么目的基因一定能成功表达D.基因工程能使科学家打破物种界限，定向改造生物性状1.下列关于基因工程的说法中，正确的是()41操作环境：操作对象：操作水平：实质：结果：生物体外基因DAN分子水平基因重组新的生物类型或生物产品操作环境：生物体外基因DAN分子水平基因重组新的生物类型或生421.1DNA重组技术的基本工具1.需要基因的剪刀——限制性核酸内切酶。2.需要基因的针线——DNA连接酶。3.需要基因的运输工具——运载体。1.1DNA重组技术的基本工具1.需要基因的剪刀——限制43识别______________________________序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的__________断开。主要是从原核生物中分离纯化出来的一类酶。4000种。1.来源：2.种类：3.作用：5.结果：形成两种末端黏性末端平末端一、限制性核酸内切酶----“剪刀”：双链DNA分子的某种特定的核苷酸磷酸二酯键4.识别的序列：大多由____个核苷酸组成，少数由

4、5或8个核苷酸组成6识别____________________________44限制酶同种限制酶切出的黏性末端相同限制酶同种限制酶切出的黏性末端相同45同种限制酶切出的平末端也相同同种限制酶切出的平末端也相同46-C-A--G-T-T-C-C-AA-G-G-T-T-G-A-C-下列黏性末端是否属于同一种限制酶切割形成的？-C-A--G-T-T-C-C471、种类：2、作用部位：两类E·coliDNA连接酶T4DNA连接酶

磷酸二酯键

DNA连接酶可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来。二、DNA连接酶－－“针线”氢键—自动生成1、种类：两类E·coliDNA连接酶磷酸二酯键48三、基因的运载体2、运载体的种类：（1）质粒质粒是一种裸露的、结构简单、独立于核DNA之外能自我复制的很小的双链环状DNA分子。

（2）噬菌体（3）某些动植物病毒将外源基因送入受体细胞1、运载体的作用：天然质粒能否直接用于基因工程操作中？三、基因的运载体2、运载体的种类：将外源基因送入受体细胞1、49复制原点：能复制并带着插入的目的基因一起复制限制酶切位点：有一至多个种标记基因：用来检测目的基因是否导入受体细胞，将含有目的基因的受体细胞筛选出来。P11以质粒为例，了解运载体的特点天然质粒一般不能直接用于基因工程操作中！！复制原点：能复制并带着插入的目的基因一起复制限制酶切位点：有50以质粒为例，了解运载体的特点1、小型、裸露DNA2、有一个至多个限制酶切割位点3、能在受体细胞内稳定存在并复制4、有标记基因天然质粒一般不能直接用于基因工程操作中！！以质粒为例，了解运载体的特点1、小型、裸露DNA天然质粒一般511.2

基因工程的基本操作程序1、目的基因的获取1.2基因工程的基本操作程序1、目的基因的获取52①、从基因文库中获得1.2

基因工程的基本操作程序1、目的基因的获取②、利用PCR技术扩增目的基因变性复性延伸③、人工合成①、从基因文库中获得1.2基因工程的基本操作程序1、目的531.2

基因工程的基本操作程序2、基因表达载体的构建1、目的基因的获取【点拨】启动子、终止子与起始密码子、终止密码子不同：启动子、终止子在DNA上,在遗传信息转录时起调控作用；而起始密码子、终止密码子在mRNA上,在翻译时起作用,决定翻译的开始和结束。1.2基因工程的基本操作程序2、基因表达载体的构建1、目541.2

基因工程的基本操作程序1、目的基因的获取2、基因表达载体的构建3、将目的基因导入受体细胞转化固定吸管1.2基因工程的基本操作程序1、目的基因的获取2、基因表551.2

基因工程的基本操作程序1、目的基因的获取2、基因表达载体的构建3、将目的基因导入受体细胞转化4、目的基因的检测与鉴定1.2基因工程的基本操作程序1、目的基因的获取2、基因表56杂交带：将待测的DNA样品酶切后，电泳处理，不同大小的片段分离，形成一条条层带（看不见），然后用醋酸纤维膜吸附，通过化学处理，再用放射性探针涂布、洗脱。探针就保留在该片段所在的层带。然后采用放射自显影技术，即含溴化银的乳胶（好像和胶卷显影一个原理）涂布，黑暗摆放，放射性元素衰变放射出的伽马射线使探针存在的层带呈现黑色，这些黑色层带即杂交带。杂交带：将待测的DNA样品酶切后，电泳处理，不同大小的片段分571.2

基因工程的基本操作程序1、目的基因的获取2、基因表达载体的构建3、将目的基因导入受体细胞转化4、目的基因的检测与鉴定1.2基因工程的基本操作程序1、目的基因的获取2、基因表581.2

基因工程的基本操作程序1、目的基因的获取2、基因表达载体的构建3、将目的基因导入受体细胞转化4、目的基因的检测与鉴定如何让一头奶牛产生含有人的生长激素的牛奶，说出相关步骤提取人的生长激素基因——构建人的生长激素基因表达载体——将人的生长激素基因导入奶牛的受精卵——人生长激素基因的检测与鉴定1.2基因工程的基本操作程序1、目的基因的获取2、基因表59【高考警示钟】1.目的基因的插入位点不是随意的基因表达需要启动子与终止子的调控，所以目的基因应插入到启动子与终止子之间的部位。2.基因工程操作过程中只有第三步(将目的基因导入受体细胞)没有碱基互补配对现象第一步存在逆转录法获得DNA，第二步存在黏性末端连接现象，第四步检测存在分子水平杂交方法。【高考警示钟】606.关于现代生物技术相关知识的叙述，正确的是：A、限制酶只能识别并作用于特定的DNA分子，体现了酶的专一性B、基因工程的设计和施工都是在细胞水平上进行的C、用限制酶切割一个DNA分子，获得一个目的基因，同时有两个磷酸二酯键被水解D、在构建基因表达载体的过程中，通常要用同种限制酶切割质粒和目的基因，以得到相同的黏性末端，便于目的基因与运载体的结合√6.关于现代生物技术相关知识的叙述，正确的是：√61专题基因工程课件621.3

基因工程的应用★用转基因动物生产药物乳腺生物反应器★用转基因动物作器官移植供体避免免疫排斥★工程菌生产药物干扰素★基因治疗1.3基因工程的应用★用转基因动物生产药物乳腺生物反应器632.下列关于基因工程应用的叙述，正确的是()A.我国的转基因抗虫棉转入的抗虫基因是Bt毒蛋白基因B.利用乳腺生物反应器能够获得一些重要医药产品，如人的血清白蛋白，这是因为将人的血清白蛋白基因转入了动物的乳腺细胞中C.由大肠杆菌工程菌获得人的干扰素后可直接应用D.为培育成抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体√受精卵糖蛋白无内质网和高尔基体植物细胞都具有全能性2.下列关于基因工程应用的叙述，正确的是()√受精卵糖6410.下列有关基因工程的相关叙述中，正确的是(双选)A.基因治疗就是去除生物体细胞中有缺陷的突变基因B.运载体上抗性基因的存在有利于对运载体是否导入受体细胞进行检测C.在基因工程操作中，必须用同种限制性核酸内切酶切割目的基因和质粒D.转基因技术造成的变异，实质上相当于人为的基因重组，却产生了定向变异基因治疗:将外源正常基因导入靶细胞，以纠正或补偿因基因缺陷和异常引起的疾病，以达到治疗目的标记基因只要目的基因和质粒获得的末端能互补就能连接-C-A--G-T-T-C-C-AA-G-G-T-T-G-A-C-√√10.下列有关基因工程的相关叙述中，正确的是(双选)基因治疗651.4

蛋白质工程的崛起一、蛋白质工程崛起的缘由改造干扰素（半胱氨酸）体外很难保存干扰素（丝氨酸）体外可以保存半年玉米中赖氨酸含量比较低天冬氨酸激酶（352位的苏氨酸）二氢吡啶二羧酸合成酶（104位的天冬酰胺）改造改造天冬氨酸激酶（异亮氨酸）二氢吡啶二羧酸合成酶（异亮氨酸）玉米中赖氨酸含量可提高数倍基因工程只能生产自然界已存在的蛋白质。天然蛋白质的结构和功能符合特定物种生存的需要，却不一定完全符合人类生产和生活的需要。1.4蛋白质工程的崛起一、蛋白质工程崛起的缘由改造干扰素662、蛋白质工程的原理：基因改造2、蛋白质工程的原理：基因改造67【典例训练2】(2011·茂名模拟)下列关于蛋白质工程和基因工程的比较，不合理的是A.基因工程原则上只能生产自然界已存在的蛋白质，而蛋白质工程可以对现有蛋白质进行改造，从而制造一种新的蛋白质B.蛋白质工程是在基因工程的基础上发展起来的，蛋白质工程最终还是要通过基因修饰或基因合成来完成C.当得到可以在-70℃条件下保存半年的干扰素后，在相关酶、氨基酸和适宜的温度、pH条件下，干扰素可以大量自我合成D.基因工程和蛋白质工程产生的变异都是可遗传的√【典例训练2】(2011·茂名模拟)下列关于蛋白质工程和基因68例题.(双选)下列有关蛋白质工程的说法正确的是()A.蛋白质工程也需构建基因表达载体B.通过蛋白质工程改造后的蛋白质有的仍是天然的蛋白质C.蛋白质工程需要限制酶和DNA连接酶D.蛋白质工程是在蛋白质分子水平上改造蛋白质的√√例题.(双选)下列有关蛋白质工程的说法正确的是()√√692.如图表示蛋白质工程的操作过程，下列说法不正确的是()A.蛋白质工程中对蛋白质分子结构的了解是非常关键的工作B.蛋白质工程是完全摆脱基因工程技术的一项全新的生物工程技术C.a、b过程分别是转录、翻译D.蛋白质工程中可能构建出一种全新的基因√2.如图表示蛋白质工程的操作过程，下列说法不正确的是(702.(2011·茂名模拟)科学家为提高玉米中赖氨酸的含量，计划将天冬氨酸激酶的第352位的苏氨酸变成异亮氨酸，将二氢吡啶二羧酸合成酶的第104位的天冬酰胺变成异亮氨酸，变化后就可以使玉米叶片和种子中的游离赖氨酸含量分别提高5倍和2倍，该生物技术为()A.基因工程B.蛋白质工程C.诱变育种D.细胞工程【解析】选B。2.(2011·茂名模拟)科学家为提高玉米中赖氨酸的含量，计71（2011海南生物卷）回答有关基因工程的问题：构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生粘性末端，也可能产生_平__末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生_相同_（相同，不同）粘性末端的限制酶。（2011上海生命科学卷)57．基因工程中使用的限制酶，其特点是:特异性地识别和切割DNA序列（1分）（2011海南生物卷）回答有关基因工程的问题：72利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是提供RNA聚合酶特异性识别结合位点，驱动基因转录。在用表达载体转化大肠杆菌时，常用Ca2+处理大肠杆菌，以利于表达载体进入：为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为DNA—RNA分子杂交。为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成胰岛素原（蛋白质）_，常用抗原-