VASH-VEGF-CD31通路对肺腺癌血管生成课件

VASH-VEGF-CD31通路对肺腺癌血管生成作用的研究开题报告VASH-VEGF-CD31通路对肺腺癌血管生成作用的研究开1VASH-VEGF-CD31通路对肺腺癌血管生成课件2VASH-VEGF-CD31通路对肺腺癌血管生成课件3提纲4国内外研究现状及意义17研究内容及实验方案243拟解决的问题可行性分析创新性56计划进度、预期结果经费落实情况及使用计划2023/1/1提纲4国内外研究现状及意义17研究内容及实验方案243拟解4国内外研究现状及意义51.肺癌是临床常见的恶性肿瘤，其发病率及死亡率居各种癌症之首，发病机制尚不完全清楚。2.肺癌丰富且形态多样的新生血管在其快速生长和侵袭转移中发挥重要作用。3.针对抗血管生成，寻找新的靶点成为研究的热点。2023/1/1国内外研究现状及意义51.肺癌是临床常见的恶性肿瘤，其发病率5血管生成6正常正常微血管结构高度有序，由内皮细胞构成管腔，周细胞趋附并覆盖内皮细胞管道外面，血管结构完整稳定。肿瘤在肿瘤血管中，周细胞形态异常，功能不足，连接松散甚至缺如，周细胞对内皮细胞作用减弱，导致血管扩张和渗。2023/1/1血管生成6正常正常微血管结构高度有序，由内皮细胞构成管腔，周6血管生成72023/1/1血管生成72022/12/277肿瘤血管生成的调节因子82023/1/1肿瘤血管生成的调节因子82022/12/278VASH(Vasohibin,血管新生抑制蛋白)2004年WatanabeDNA微阵分析实验发现血管内皮生长因子诱导人的脐静脉内皮细胞基因表达谱VASH-1与VASH-2，两者52.5%的同源氨基酸序列方法诱导剂分类2023/1/1VASH(Vasohibin,血管新生抑制蛋白)20049VASH-1，位于人染色体14q24.3，由365个氨基酸组成，在C末端有一簇碱性氨基酸，但此序列中缺乏经典的内质网分泌信号序列，也不与内质网标记蛋白共定位，为非传统的蛋白主要由血管内皮细胞分泌。VASH-2，位于染色体1q32.3上，由355个氨基酸组成。在内皮细胞上表达很低，目前研究显示主要由坏死边缘区的单核细胞分泌。

VASH2023/1/1VASH-1，位于人染VASH-2，位于VASH2022/110VASH作用VASH-1的作用：通过血管内皮生长因子和纤维细胞生长因子的负反馈作用，抑制血管生成。VASH-2的作用，实验表明：具有促血管生成的作用，是否与血管内皮生长因子有关，说法不一，具体机制不详。2023/1/1VASH作用VASH-1的作用：通过血管内皮生长因子和纤维细11VASH在肿瘤血管生成中最新的报道王启志（2012.4）

肝癌中研究表明：VASH-1与血管内皮因子A（VascularendothelialgrowthfactorA,VEGF-A）、CD34具有相关性，与肝癌侵袭、转移密切相关。王志娜等（2013.7）对肝癌组织采用免疫组化的方法，结果表明：VASH-1与缺氧因子1α（hypoxiainduciblefactor1alpha，HIF-1α）在病变组织中两者的表达成正相关，HIF-α能够诱导VEGF的分泌。122023/1/1VASH在肿瘤血管生成中最新的报道王启志（2012.4）12VASH在肿瘤血管生成中最新的报道YazdaniS等（2013.8）

研究表明：肺癌中vasohibin-1/CD31-阳性率代表新生血管在肺癌中的地位，但没有组织病理性的差异性，但血管成熟程度鳞癌低于腺癌，考虑可能是在抗血管生成治疗中，鳞癌副作用较多的原因。KoyanagiT等（2013.12）

研究表明：肝癌中的VASH-2过表达时，核因子（Nuclearfactorkb，NF-kB）上调。KoyanagiT等在对卵巢癌研究中限制VASH-2表达，有助于血管的正常化。132023/1/1VASH在肿瘤血管生成中最新的报道132022/12/2713川芎嗪川芎嗪（tetramehtylpyrazine，TMP）是从中药川芎中分离出来的一种生物碱，即四甲基吡嗪。随着研究的不断深入，在抗肿瘤方面有新的突破。研究显示：1.在不同的肿瘤部位，抗肿瘤血管生成的机制不同，比如：肺癌-环氧化酶2（Cyclooxygenase-2，COX-2）、大肠癌-缺氧因子1α（hypoxiainduciblefactor1alpha，HIF-1α）；2.具有直接杀伤癌细胞的作用。川芎嗪与VASH家族关系有待进一步研究。142023/1/1川芎嗪川芎嗪（tetramehtylpyrazine，TMP14顺铂

顺铂属细胞周期非特异性药物，具有细胞毒性，可抑制癌细胞的DNA复制过程，并损伤其细胞膜上结构，有较强的广谱抗癌作用。临床用于卵巢癌、前列腺癌、睾丸癌、肺癌、鼻咽癌、食道癌等多种实体肿瘤均能显示疗效。两者联合是否通过作用于VASH具有协同抗肿瘤作用。152023/1/1顺铂顺铂属细胞周期非特异性药物，具有细胞毒性，可抑制癌细15研究意义通过对肺癌组织中VASH在血管生成中的作用，有助于深入了解此肿瘤的发生发展机制。可作为早期预测血管转移的参考指标，同时也为预防肿瘤提供理论依据。川芎嗪与顺铂的联合作用于VASH-VEGF-CD31通路，有助于指导临床用药。NO1NO2NO32023/1/1研究意义通过对肺癌组织中VASH在血管生成中的作用，有16研究内容及方案研究内容：本实验通过使用LLC(LewisLungCell)注射C57BL/6小鼠，建立肺腺移植瘤癌模型，空白对照组与腹腔注射用药组，脱颈处死，取出瘤组织，采用透射电镜、免疫组化、蛋白印迹技术，观察药物作用前后肿瘤细胞形态学的改变，检测VASH-1、HIF-α、VEGF、CD31及其VASH-2、NF-kB、VEGF、CD31在肺癌模型中的表达情况。172023/1/1研究内容及方案研究内容：本实验通过使用LLC(LewisL17细胞培养，建立肺腺癌移植瘤模型待肿瘤直径8mm左右，分成空白对照组与腹腔用药组，2周空白对照组腹腔注射用药4组生理盐水组川芎嗪组顺铂组川芎嗪+顺铂组脱颈处死，取出瘤组织，标本制备整理数据，统计分析，撰写论文免疫组化蛋白印迹透射电镜2023/1/1细胞培养，建立肺腺癌移植瘤模型待肿瘤直径8mm左右，分成空白18技术路线检测VASH-VEGF-CD31通路在肺腺癌血管生成中的作用川芎嗪对以上通路的作用川芎嗪联合顺铂协同对以上通路的作用2023/1/1技术路线检测VASH-VEGF-CD31通路在肺腺癌血管生成19拟解决的问题3免疫组化染色过程中怎样选用最佳的抗原修复方法和抗原修复液最大程度地暴露抗原决定簇、恢复抗原性。2

蛋白印迹技术浓缩标本使目的蛋白信号最大化，转膜、洗膜、封闭的时间。1各种样品标本的制备2023/1/1拟解决的问题3免疫组化染色过程中怎样选用最佳的抗原修复方法和20

VASH在肺癌及其它肿瘤中有报道实验中心有条件、有技术支持查阅文献，了解国内外现状可行性分析前期发表肿瘤血管生成论文数篇成功建立肺腺癌移植瘤模型2023/1/1VASH在肺癌及其它肿瘤中有报道实验中心有条件、有技21创新性VASH家族在肺腺癌各自调节血管生成的初步研究川芎嗪对VASH家族影响川芎嗪联合顺铂对VASH家族的影响国内关于VASH家族在肿瘤血管中作用报道相对较少2023/1/1创新性VASH家族在肺腺癌各川芎嗪对川芎嗪联合顺铂对国内关于22计划进度与预期进展计划进度2013年3月-2013年10月查找文献。2013年11月-2014年2月完成预实验。2014年3月-2014年7月完成实验。2014年8月-2014年10月整理数据，撰写论文。预期进展2013年3月-2013年10月查阅国内外相关文献，了解国内外最新研究现状。2013年11月-2014年2月完成预实验，掌握相关技术方法。2014年3月-2014年7月完成实验。2014年8月-2014年10月整理数据，撰写论文。232023/1/1计划进度与预期进展计划进度232022/12/2723实验图片2023/1/1实验图片2022/12/27242023/1/12022/12/2725实验图像262023/1/1实验图像262022/12/2726实验图像2023/1/1实验图像2022/12/2727四组小鼠腹腔注射用药后体重变化情况2023/1/1四组小鼠腹腔注射用药后体重变化情况2022/12/2728四组小鼠腹腔注射用药后肿瘤体积变化情况2023/1/1四组小鼠腹腔注射用药后肿瘤体积变化情况2022/12/2729预期结果预期发表论文1-2篇预期理论结果：1.阐述VASH-1与VASH-2在肺腺癌中血管生成的可能机制。2.川芎嗪对VASH血管生成通路的影响，间接对VASH起作用，证明通路的正确性。3.川芎嗪联合顺铂协同对VASH作用。302023/1/1预期结果预期发表论文1-2篇302022/12/2730实验经费经费来源：导师经费落实情况：已落实使用计划：Lewis细胞株600元

C57BL/6小鼠2400元四季青胎牛血清2200元抗体10000元其它2000元312023/1/1实验经费经费来源：导师经费312022/12/2731欢迎各位专家和老师提出宝贵意见！322023/1/1欢迎各位专家和老师提出宝贵意见！322022/12/2732VASH-VEGF-CD31通路对肺腺癌血管生成作用的研究开题报告VASH-VEGF-CD31通路对肺腺癌血管生成作用的研究开33VASH-VEGF-CD31通路对肺腺癌血管生成课件34VASH-VEGF-CD31通路对肺腺癌血管生成课件35提纲36国内外研究现状及意义17研究内容及实验方案243拟解决的问题可行性分析创新性56计划进度、预期结果经费落实情况及使用计划2023/1/1提纲4国内外研究现状及意义17研究内容及实验方案243拟解36国内外研究现状及意义371.肺癌是临床常见的恶性肿瘤，其发病率及死亡率居各种癌症之首，发病机制尚不完全清楚。2.肺癌丰富且形态多样的新生血管在其快速生长和侵袭转移中发挥重要作用。3.针对抗血管生成，寻找新的靶点成为研究的热点。2023/1/1国内外研究现状及意义51.肺癌是临床常见的恶性肿瘤，其发病率37血管生成38正常正常微血管结构高度有序，由内皮细胞构成管腔，周细胞趋附并覆盖内皮细胞管道外面，血管结构完整稳定。肿瘤在肿瘤血管中，周细胞形态异常，功能不足，连接松散甚至缺如，周细胞对内皮细胞作用减弱，导致血管扩张和渗。2023/1/1血管生成6正常正常微血管结构高度有序，由内皮细胞构成管腔，周38血管生成392023/1/1血管生成72022/12/2739肿瘤血管生成的调节因子402023/1/1肿瘤血管生成的调节因子82022/12/2740VASH(Vasohibin,血管新生抑制蛋白)2004年WatanabeDNA微阵分析实验发现血管内皮生长因子诱导人的脐静脉内皮细胞基因表达谱VASH-1与VASH-2，两者52.5%的同源氨基酸序列方法诱导剂分类2023/1/1VASH(Vasohibin,血管新生抑制蛋白)200441VASH-1，位于人染色体14q24.3，由365个氨基酸组成，在C末端有一簇碱性氨基酸，但此序列中缺乏经典的内质网分泌信号序列，也不与内质网标记蛋白共定位，为非传统的蛋白主要由血管内皮细胞分泌。VASH-2，位于染色体1q32.3上，由355个氨基酸组成。在内皮细胞上表达很低，目前研究显示主要由坏死边缘区的单核细胞分泌。

VASH2023/1/1VASH-1，位于人染VASH-2，位于VASH2022/142VASH作用VASH-1的作用：通过血管内皮生长因子和纤维细胞生长因子的负反馈作用，抑制血管生成。VASH-2的作用，实验表明：具有促血管生成的作用，是否与血管内皮生长因子有关，说法不一，具体机制不详。2023/1/1VASH作用VASH-1的作用：通过血管内皮生长因子和纤维细43VASH在肿瘤血管生成中最新的报道王启志（2012.4）

肝癌中研究表明：VASH-1与血管内皮因子A（VascularendothelialgrowthfactorA,VEGF-A）、CD34具有相关性，与肝癌侵袭、转移密切相关。王志娜等（2013.7）对肝癌组织采用免疫组化的方法，结果表明：VASH-1与缺氧因子1α（hypoxiainduciblefactor1alpha，HIF-1α）在病变组织中两者的表达成正相关，HIF-α能够诱导VEGF的分泌。442023/1/1VASH在肿瘤血管生成中最新的报道王启志（2012.4）44VASH在肿瘤血管生成中最新的报道YazdaniS等（2013.8）

研究表明：肺癌中vasohibin-1/CD31-阳性率代表新生血管在肺癌中的地位，但没有组织病理性的差异性，但血管成熟程度鳞癌低于腺癌，考虑可能是在抗血管生成治疗中，鳞癌副作用较多的原因。KoyanagiT等（2013.12）

研究表明：肝癌中的VASH-2过表达时，核因子（Nuclearfactorkb，NF-kB）上调。KoyanagiT等在对卵巢癌研究中限制VASH-2表达，有助于血管的正常化。452023/1/1VASH在肿瘤血管生成中最新的报道132022/12/2745川芎嗪川芎嗪（tetramehtylpyrazine，TMP）是从中药川芎中分离出来的一种生物碱，即四甲基吡嗪。随着研究的不断深入，在抗肿瘤方面有新的突破。研究显示：1.在不同的肿瘤部位，抗肿瘤血管生成的机制不同，比如：肺癌-环氧化酶2（Cyclooxygenase-2，COX-2）、大肠癌-缺氧因子1α（hypoxiainduciblefactor1alpha，HIF-1α）；2.具有直接杀伤癌细胞的作用。川芎嗪与VASH家族关系有待进一步研究。462023/1/1川芎嗪川芎嗪（tetramehtylpyrazine，TMP46顺铂

顺铂属细胞周期非特异性药物，具有细胞毒性，可抑制癌细胞的DNA复制过程，并损伤其细胞膜上结构，有较强的广谱抗癌作用。临床用于卵巢癌、前列腺癌、睾丸癌、肺癌、鼻咽癌、食道癌等多种实体肿瘤均能显示疗效。两者联合是否通过作用于VASH具有协同抗肿瘤作用。472023/1/1顺铂顺铂属细胞周期非特异性药物，具有细胞毒性，可抑制癌细47研究意义通过对肺癌组织中VASH在血管生成中的作用，有助于深入了解此肿瘤的发生发展机制。可作为早期预测血管转移的参考指标，同时也为预防肿瘤提供理论依据。川芎嗪与顺铂的联合作用于VASH-VEGF-CD31通路，有助于指导临床用药。NO1NO2NO32023/1/1研究意义通过对肺癌组织中VASH在血管生成中的作用，有48研究内容及方案研究内容：本实验通过使用LLC(LewisLungCell)注射C57BL/6小鼠，建立肺腺移植瘤癌模型，空白对照组与腹腔注射用药组，脱颈处死，取出瘤组织，采用透射电镜、免疫组化、蛋白印迹技术，观察药物作用前后肿瘤细胞形态学的改变，检测VASH-1、HIF-α、VEGF、CD31及其VASH-2、NF-kB、VEGF、CD31在肺癌模型中的表达情况。492023/1/1研究内容及方案研究内容：本实验通过使用LLC(LewisL49细胞培养，建立肺腺癌移植瘤模型待肿瘤直径8mm左右，分成空白对照组与腹腔用药组，2周空白对照组腹腔注射用药4组生理盐水组川芎嗪组顺铂组川芎嗪+顺铂组脱颈处死，取出瘤组织，标本制备整理数据，统计分析，撰写论文免疫组化蛋白印迹透射电镜2023/1/1细胞培养，建立肺腺癌移植瘤模型待肿瘤直径8mm左右，分成空白50技术路线检测VASH-VEGF-CD31通路在肺腺癌血管生成中的作用川芎嗪对以上通路的作用川芎嗪联合顺铂协同对以上通路的作用2023/1/1技术路线检测VASH-VEGF-CD31通路在肺腺癌血管生成51拟解决的问题3免疫组化染色过程中怎样选用最佳的抗原修复方法和抗原修复液最大程度地暴露抗原决定簇、恢复抗原性。2

蛋白印迹技术浓缩标本使目的蛋白信号最大化，转膜、洗膜、封闭的时间。1各种样品标本的制备2023/1/1拟解决的问题3免疫组化染色过程中怎样选用最佳的抗原修复方法和52

VASH在肺癌及其它肿瘤中有报道实验中心有条件、有技术支持查阅文献，了解国内外现状可行性分析前期发表肿瘤血管生成论文数篇成功建立肺腺癌移植瘤模型2023/1/1VASH在肺癌及其它肿瘤中有报道实验中心有条件、有技53创新性VASH家族在肺腺癌各自调节血管生成的初步研究川芎嗪对VASH家族影响川芎嗪联合顺铂对VASH家族的影响国内关于VASH家族在肿瘤血管中作用报道相对较少2023/1/1创新性VASH家族在肺腺癌各川芎嗪对川芎嗪联合顺铂对国内关于54计划进度与预期进展计划进度2013年3月-2013年10月查找文献。2013年11月-2014年2月完成预实验。2014年3月-2014年7月完成实验。2014年8月-2014年10月整理数