高等院校医药类课件-压滴法和革兰染色法实验

实

验

一

一、内容1．介绍实验室规则2．细菌涂片制备革兰染色（份/人）3．细菌动力检查（份/人）4．细菌基本形态、特殊结构（示教）5．基本操作（录像）实验一

二、用具混合菌液（3支/桌）、载玻片、盖玻片、二甲苯、变形杆菌（2支/桌）、示教片（淋球菌、链球菌、伤寒杆菌、破伤风示芽胞、产气荚膜杆菌示荚膜、伤寒杆菌示鞭毛）革兰染液2套、显微镜、镜油二、用具1.通过实验可以加深对理论知识的理解及验证理论课讲述的内容2.通过实验，学会微生物学实验的基本操作技术。树立“无菌”的意识3.培养实事求是的科学态度，正确分析问题和解决问题的能力1.通过实验可以加深对理论知识的理解及验证理论课讲述的内容细菌涂片制备、革兰染色：

细菌涂片制备、革兰染色：涂片干燥固定结晶紫1分钟水洗碘液1分钟95%酒精脱色稀释石炭酸复红30秒干燥油镜观察水洗水洗涂片干燥固定结晶紫1分钟水洗碘液1分钟95%酒精脱色稀释石炭

涂片

1平方厘米

生理盐水+斜面培养物肉汤培养物涂片（1）室温下自然干燥（2）火焰上方10厘米处烘干干燥（1）室温下自然干燥干燥

玻片涂面向上，来回通过外火焰3次固定固定染色待玻片冷后再进行染色染色待玻片冷后再进行染色结晶紫1分结晶紫1分水洗细水冲洗至冲下的水不显色

水洗

碘液1分碘液1分水洗细水冲洗至冲下的水不显色

水洗95%酒精脱色

酒精脱色至滴下酒精无色或淡紫色为止95%酒精脱色酒精脱色至滴下酒精无色或淡紫色为止水洗细水冲洗至冲下的水不显色

水洗稀释石炭酸复红30秒稀释石炭酸复红30秒水洗细水冲洗至冲下的水不显色

水洗干燥用吸水纸干燥用吸水纸油镜观察油镜观察结果革兰阳性G＋：紫色革兰阴性G—：红色结果意义：鉴别细菌指导选择抗菌药物了解细菌的致病性意义：鉴别细菌动力检查法有两种：

悬滴法、压滴法动力检查法有两种：

悬滴法、压滴法不产生气泡高倍镜观察

不产生气泡高倍镜观察

观察动力时，注意区分布朗运动与鞭毛运动布朗运动：细菌左右前后位置改变不大的原地颤动鞭毛运动：细菌有方向性位移观察动力时，注意区分布朗运动与鞭毛运动细菌基本形态细菌基本形态特殊结构：

荚膜：特殊结构：

荚膜：芽胞：芽胞：鞭毛：鞭毛：菌毛：

菌毛：

实

验

一

一、内容1．介绍实验室规则2．细菌涂片制备革兰染色（份/人）3．细菌动力检查（份/人）4．细菌基本形态、特殊结构（示教）5．基本操作（录像）实验一

二、用具混合菌液（3支/桌）、载玻片、盖玻片、二甲苯、变形杆菌（2支/桌）、示教片（淋球菌、链球菌、伤寒杆菌、破伤风示芽胞、产气荚膜杆菌示荚膜、伤寒杆菌示鞭毛）革兰染液2套、显微镜、镜油二、用具1.通过实验可以加深对理论知识的理解及验证理论课讲述的内容2.通过实验，学会微生物学实验的基本操作技术。树立“无菌”的意识3.培养实事求是的科学态度，正确分析问题和解决问题的能力1.通过实验可以加深对理论知识的理解及验证理论课讲述的内容细菌涂片制备、革兰染色：

细菌涂片制备、革兰染色：涂片干燥固定结晶紫1分钟水洗碘液1分钟95%酒精脱色稀释石炭酸复红30秒干燥油镜观察水洗水洗涂片干燥固定结晶紫1分钟水洗碘液1分钟95%酒精脱色稀释石炭

涂片

1平方厘米

生理盐水+斜面培养物肉汤培养物涂片（1）室温下自然干燥（2）火焰上方10厘米处烘干干燥（1）室温下自然干燥干燥

玻片涂面向上，来回通过外火焰3次固定固定染色待玻片冷后再进行染色染色待玻片冷后再进行染色结晶紫1分结晶紫1分水洗细水冲洗至冲下的水不显色

水洗

碘液1分碘液1分水洗细水冲洗至冲下的水不显色

水洗95%酒精脱色

酒精脱色至滴下酒精无色或淡紫色为止95%酒精脱色酒精脱色至滴下酒精无色或淡紫色为止水洗细水冲洗至冲下的水不显色

水洗稀释石炭酸复红30秒稀释石炭酸复红30秒水洗细水冲洗至冲下的水不显色

水洗干燥用吸水纸干燥用吸水纸油镜观察油镜观察结果革兰阳性G＋：紫色革兰阴性G—：红色结果意义：鉴别细菌指导选择抗菌药物了解细菌的致病性意义：鉴别细菌动力检查法有两种：

悬滴法、压滴法动力检查法有两种：

悬滴法、压滴法不产生气泡高倍镜观察

不产生气泡高倍镜观察

观察动力时，注意区分布朗运动与鞭毛运动布朗运动：细菌左右前后位