免疫治疗课件

免疫治疗

immunotherapy免疫治疗

immunotherapy免疫治疗的概念针对机体低下或亢进的免疫功能，根据免疫学原理，利用物理、化学和生物学的收到人为地增强或抑制机体的免疫功能，达到治疗疾病目的的措施。免疫治疗的概念针对机体低下或亢进的免疫功能，根据免疫学原理，免疫治疗的类型根据对机体免疫应答的影响分为：免疫增强疗法(immunostimulationtherapy)免疫抑制疗法(immunosuppressiontherapy)根据治疗特异性分为：特异性免疫治疗(specificimmunotherapy)非特异性免疫治疗(non-specific~)根据治疗所用制剂分为：主动免疫治疗(active~)被动免疫治疗(passive~)Ab

Ag

CK

Cells

drug免疫治疗的类型根据对机体免疫应答的影响分为：根据治疗特异性分（一）免疫增强疗法和免疫抑制疗法

1．免疫增强疗法用途：治疗免疫功能低下的疾病种类：非特异性免疫增强剂、疫苗、抗体或淋巴细胞过继免疫疗法、细胞因子疗法。2．免疫抑制疗法用途：治疗免疫功能亢进的疾病种类：非特异性免疫抑制剂、淋巴细胞及其表面分子的抗体、诱导免疫耐受的疫苗。

（一）免疫增强疗法和免疫抑制疗法（二）主动免疫治疗和被动免疫治疗1．主动免疫治疗（activeimmunotheraphy）原理：给免疫应答健全的机体输入抗原性的疫苗或免疫佐剂，激活或增强免疫应答，使机体自身产生抵抗疾病的能力。制剂：疫苗；瘤苗、卡介苗、短小棒状杆菌等。2．被动免疫治疗（passiveimmunotheraphy）又称过继免疫治疗adoptiveimmunotheraphy

原理：将对疾病有免疫力的供者的免疫应答产物转移给其他个体或自体细胞体外经处理后回输自身→治疗疾病

制剂：抗体、小分子免疫肽（如转移因子、胸腺肽）、免疫效应细胞等。（二）主动免疫治疗和被动免疫治疗（三）特异性免疫治疗和非特异性免疫治疗

1．特异性免疫治疗（1）主动特异性免疫治疗原理：利用Ag诱导机体对该特定Ag的刺激产生特异性免疫应答或免疫耐受，达到治疗的目的。特点：见效慢、维持时间长。（2）被动特异性免疫治疗原理：直接向机体输入特异性免疫应答产物，使机体立即获得针对某一抗原的应答或耐受。特点：见效快、维持时间短。（三）特异性免疫治疗和非特异性免疫治疗

（三）特异性免疫治疗和非特异性免疫治疗2．非特异性免疫治疗范围：广，包括非特异性免疫增强剂或免疫抑制剂的应用。特点：作用无特异性；对机体免疫功能可广泛抑制；易致不良反应。（三）特异性免疫治疗和非特异性免疫治疗一、抗体为基础的免疫治疗一、抗体为基础的免疫治疗种类

免疫血清

（第一代）

抗菌、抗病毒、抗毒素，胎盘（丙种）球蛋白，ALG

应用限制：动物来源（制备、纯化、免疫原性），病原变异、传播疾病（人源）

单克隆抗体

（第二代）

抗细胞表面分子单抗、抗CKs单抗、 抗体导向药物治疗

应用限制：鼠源性（纯化）免疫原性差（肿瘤）种类

基因工程抗体（第三代）

将Ig各片段编码基因，人为拼接成Ig编码基因 （VDJC、VJC）（重组DNA技术）并让其在原 核或真核细胞大量表达嵌合抗体、人源化抗体、完全人源化抗体 单链抗体、双价抗体基因工程抗体（第三代）(一）免疫血清：来自免疫动物或人体的血清成分是多克隆抗体。1、抗毒素antitoxin2、丙种球蛋白（r-globulin）：胎盘球蛋白、人血浆丙种球蛋白3、人特异性免疫球蛋白4、抗菌免疫血清5、抗病毒免疫血清6、抗T细胞丙种球蛋白免疫治疗课件（二）抗体1、多克隆抗体（免疫血清）（1）抗毒素血清（antitoxicserum）性质：马血清用途：治疗和紧急预防外毒素所致疾病。常用制剂：白喉抗毒素、破伤风抗毒素等。（2）胎盘（丙种）球蛋白（placentalγ–globulin）用途：预防麻疹、传染性肝炎等，治疗丙种球蛋白缺乏症。常用制剂：胎盘球蛋白、人血清丙种球蛋白。特点：由于地区和人群免疫情况不同，制剂中所含抗体种类及数量不尽相同。（3）人特异性免疫球蛋白来源：恢复期病人、含高效价特异性抗体的供血者接受类毒素和疫苗免疫者的血浆（二）抗体1、多克隆抗体（免疫血清）（二）抗体（4）抗菌免疫血清（antibacterialimmuneserum）种类：抗鼠疫、抗炭疽、抗痢疾、抗百日咳等抗菌血清。特点：防治效果不显著，现已被磺胺类、抗生素所代替。（5）抗病毒免疫血清（antiviralimmuneserum）种类：抗麻疹免疫血清、抗狂犬病免疫血清、抗乙型脑炎免疫血清等。特点：预防作用显著，治疗效果不明显，因不能进入细胞内杀死病毒。（6）抗淋巴细胞丙种球蛋白（anti-lymphocyteγ–globulin，ALG）制备：用T淋巴细胞免疫动物的免疫血清，经提纯制成作用：在补体协同下溶解T淋巴细胞，使外周血中T淋巴细胞减少。用途：预防移植排斥、治疗某些自身免疫病。（二）抗体（4）抗菌免疫血清（antibacteriali（二）单克隆抗体(monoclonalantibody)特异性强，靶向性好，应用广泛（二）单克隆抗体(monoclonalantibody)单抗类药物的类型：1、抗细胞表面分子的单抗：2、抗细胞因子的单抗：3、抗体导向药物：抗-CD3单抗，用于GVHD和HVGD的治疗抗IL-1、抗TNFa单抗治疗类风湿关节炎、Crohn病放射（131I，125I）免疫耦联物、化学（甲氨蝶呤）免疫耦联物、免疫毒素（蓖麻毒素、白喉毒素）耦联物单抗类药物的类型：1、抗细胞表面分子的单抗：2、抗细胞因子的（二）抗体2、单克隆抗体（1）抗细胞表面分子的单抗用途：人CD3单抗——移植排斥反应；人CD4单抗——预防移植排斥反应；治疗类风湿性关节炎、多发性硬化症等。（2）抗细胞因子单抗用途：抗IL-1、TNF单抗——中和作用，减轻炎症反应。治疗类风湿性关节炎等慢性炎症性疾病。

（二）抗体2、单克隆抗体（二）抗体2、单克隆抗体（3）抗体导向药物治疗由导向部分（mAb）和药物（化疗药物、毒素、同位素）两部分组成。

放射免疫疗法同位素+mAb

抗体导向药物疗法化疗药物+mAb

免疫毒素疗法毒素+mAb（二）抗体2、单克隆抗体tumorprodrugdrugtoxinradioisotope

Enzyme单抗治疗图tumorprodrugdrugtoxinradioisotImmunotoxin:Antibody-ToxinConjugateImmunotoxin:Antibody-ToxinCoTumorcellenzyme抗体与酶分子偶联prodrugdrugenzymeTumorcellenzyme抗体与酶分子偶联prodr诱发人抗小鼠反应(ＨＡＭＡ，humananti-murineantibody)可降低抗体效果，甚至造成人体损伤半衰期较短,可较快被清除而影响疗效在人体中常不能有效激活补体和Ｆｃ受体相关的效应系统鼠源性单抗用于人体治疗存在的主要问题有诱发人抗小鼠反应(ＨＡＭＡ，humananti-murin怎样制作人源化单抗？采取什么方法？怎样制作人源化单抗？采取什么方法？通过DNA重组和蛋白质工程技术，在基因水平上进行切割、拼接或修饰，重新组装成新的抗体分子。特异性强、人源化、均一性强、可批量生产。（三）基因工程抗体（geneticengineeringantibody）（三）基因工程抗体（geneticengineering（1）嵌合抗体(鼠-人嵌合抗体)

（chimericantibody）构成：鼠源性抗体的V区＋人抗体的C区（2）人源化抗体（CDR移植抗体）（CDRgraftedantibody）构成：小鼠抗体CDR序列取代人源抗体CDR序列。（3）完全人源抗体构成：将人Ig基因转染小鼠，刺激产生人抗体，

经杂交瘤技术大量产生制备。（4）小分子抗体

Ig被酶水解产生含有H链和L链V区的片段有结合抗原的能力。这些片段大小仅为抗体的1/3~1/12，故称为小分子抗体。小分子抗体也可以相互结合或与适当的配体结合。（5）双特异性抗体双特异性抗体（bispecificantibody，BsAb）又称双功能抗体（bifunctionantibody，BfAb），构成：一个Ig的两个抗原结合部位可分别与两种不同的抗原表位结合。（1）嵌合抗体(鼠-人嵌合抗体)基因工程抗体的类型：1、人-鼠嵌合抗体（chimericantibody）：鼠源性抗体V区+人抗体C区，也可将IgG2b转换成IgG1或IgG3，提高Ab的细胞毒性在基因水平上将小鼠的Ig可变区与人的Ig恒定区嵌合在一起，所产生的抗体含有70-80%的人Ig分子的序列基因工程抗体的类型：1、人-鼠嵌合抗体（chimerica人-鼠嵌合抗体基因工程改造策略免疫球蛋白基因载体的构建H链嵌合载体L链嵌合载体共转染细胞启动子Pr鼠VH人CHPr鼠VL人CL人-鼠嵌合抗体基因工程改造策略免疫球蛋白H链嵌合载体L链鼠VH鼠VL人CL人CH抗体分泌细胞人-鼠嵌合基因工程抗体鼠VH鼠VL人CL人CH抗体分泌细胞人-鼠嵌合基因工程抗体2、人源化抗体（humanizedantibody）：将鼠源性抗体的CDR区序列连接至人抗体框架，也称为（CDR-graftedantibody），更进一步减少鼠抗体的成分免疫治疗课件嵌合抗体、CDR移植抗体的比较嵌合抗体、CDR移植抗体的比较FDA已批准上市的部分嵌合抗体：

抗-CD20单抗（rituxinmab，利妥昔单抗），是针对CD20抗原的人鼠嵌合型单抗，通过介导ADCC、CDC杀伤肿瘤细胞。治疗B细胞淋巴瘤抗Her-2单抗（trastuzumab，曲妥珠单抗），人源化单抗，治疗Her-2（EGFR）表达高的乳腺癌Herceptin(抗体名称)人源化抗体乳腺癌cellHER-2FDA已批准上市的部分嵌合抗体：Herceptin赛尼哌Zenapax。是靶向CD25抗原的人源化单抗，是第一个无严重不良反应的免疫抑制剂，适应症为预防无高度免疫的同种异体肾移植患者的器官排斥反应，与环孢素和皮质固醇的免疫抑制剂合用。FDA已批准上市的部分嵌合抗体：抗TNFa单抗（infliximab，英夫利昔单抗），是一种特异性阻断TNF-α的人鼠嵌合型单抗，属TNF拮抗剂，治疗类风湿关节炎、Crohn病赛尼哌Zenapax。是靶向CD25抗原的人源化单抗，FDA目前有数百种抗肿瘤特异性MAb进入临床试验。尤其在抗血癌领域MAb取得了很大成功。由于完整的Ab分子不易渗透进实体瘤、透过血脑屏障，也不能口服，限制了其应用。如何解决这个问题？目前有数百种抗肿瘤特异性MAb进入临床试验。如何解决这个3.小分子抗体酶解法：量？纯度？3.小分子抗体酶解法：量？纯度？（4）小分子抗体

Ig被酶水解产生含有H链和L链V区的片段有结合抗原的能力。这些片段大小仅为抗体的1/3~1/12，故称为小分子抗体。小分子抗体也可以相互结合或与适当的配体结合。根据结构，可将小分子抗体分为4类。1．Fab段构成：VH、CH1＋L链2．单域抗体和最小识别单位构成：单域抗体（singledomainantibody）

VH或VL

最小识别单位（minimalrecognitionunit，MRU）

单个CDR3．Fv片段：构成：VH＋VL4．单链抗体（singlechainantibody，SCA）或单链Fv（ScFv）构成：VL-不同的连接物-VH→多肽链特点：分子量小，穿透力强和体内清除快。（4）小分子抗体基因工程技术是当今较为成熟的技术！基因工程技术是当今较为成熟的技术！免疫球蛋白基因载体的构建H链表达载体L链表达载体共转染细胞PrVHCH1PrVLCL抗体分泌细胞VHVLCL-S-S-CH1Fab抗体分子的制备免疫球蛋白H链表达载体L链表达载体共转染细胞Pr分别构建载体L链表达载体H链表达载体PrVH

PrVL抗体分泌细胞VHVL-S-S-

Fv小分子抗体的制备分别构建载体L链表H链表PrVH3、小分子抗体：Fab段、Fv片段1/3抗体1/6抗体Fv结构示意图antigenbindingfragment,Fabvariabledomainfragment,Fv3、小分子抗体：Fab段、Fv片段1/3抗体1/6抗体Fv结3、小分子抗体：单域抗体(single-domainantibody,sdAb)、单链抗体单域抗体单链抗体(scFv)VH或VL单一结构域组成1/12抗体由接头将VH-VL连接成一条链。1/6抗体sdAb最初是从软骨鱼和骆驼科动物中克隆到有无轻链、单一重链可变区保留完整的抗原结合活性。具有分子小、稳定性高、体内组织渗透性好、可溶性好、易表达、抗原识别表位独特的特性。3、小分子抗体：单域抗体单链抗体(scFv最小识别单位、双特异性抗体最小识别单位、双特异性抗体免疫治疗课件4、抗体库技术抗体库技术产生的三项技术基础RT-PCR：能够克隆全套抗体可变区基因抗体基因片段在大肠杆菌的功能性表达噬菌体展示技术（phagedisplay)●

人源抗体的制备●抗体性能的改良●

不经免疫制备抗体抗体库技术的应用4、抗体库技术抗体库技术产生的三项技术基础RT-PCR：抗体药物的临床应用单克隆抗体基因工程抗体破伤风抗血清、蛇毒抗血清等抗肿瘤(鼠,人-鼠)抗肿瘤,自身免疫病抗血清抗体药物的临床应用单克隆抗体基因工程抗体破伤风抗血清、蛇毒抗二、抗原为基础的免疫治疗治疗性疫苗（therapeuticvaccine）1、增强免疫应答2、诱导免疫耐受二、抗原为基础的免疫治疗治疗性疫苗（therapeutic（一）以抗原表位的形式进行的免疫治疗HSP能与多种肽结合，形成HSP-肽复合物，能激活多个CTL克隆，因此HSP被称为“伴侣抗原肽（chaperoneantigenicpeptide）

抗原表位8-12个aa，易降解。与载体结合制成疫苗。前体条件：需已知抗原肽序列。

（一）以抗原表位的形式进行的免疫治疗HSP能与多种肽结合，形（二）以抗原分子或片段的形式进行的免疫治疗重组抗原疫苗：重组HBV表面抗原疫苗、Pre-S2疫苗；重组HPV疫苗等DNA疫苗：诱导对MBP（髓磷脂碱性蛋白）的免疫耐受，治疗小鼠EAE（人类MS）重组病毒疫苗：编码有效免疫原的基因插入减毒病毒（痘苗病毒、腺病毒），接种后体内持续产生抗原。转基因植物疫苗：将编码有效免疫原的基因插入可食用植物细胞中。（二）以抗原分子或片段的形式进行的免疫治疗重组抗原疫苗：重组三、细胞因子及其拮抗剂为基础的免疫治疗1、细胞因子疗法2、细胞因子阻断疗法3、细胞因子基因疗法三、细胞因子及其拮抗剂为基础的免疫治疗采用细胞因子及其拮抗剂进行的免疫治疗

细胞因子补充和添加疗法：

常应用重组细胞因子作为生物应答调变剂治疗肿瘤、感染、造血障碍等疾病。

细胞因子阻断和拮抗疗法：

主要用于治疗自身免疫性疾病、移植排斥、感染性体克等。

细胞因子基因疗法：

将细胞因子或其受体基因导入体内，使其在体内持续表达并发挥治疗效应。目前多项基因疗法用于治疗恶性肿瘤、感染、自身免疫性疾病。采用细胞因子及其拮抗剂进行的免疫治疗

（一）细胞因子疗法——

应用重组细胞因子作为药物IFNα、β、γ抗肿瘤细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、IFN、TNFα、GM-CSF促进造血细胞因子GM-CSF、G-CSF、EPO（一）细胞因子疗法——

免疫治疗课件（二）细胞因子阻断疗法——

阻断细胞因子与其受体结合或信号转导重组可溶性I型TNF受体（solubleTNFreceptorI，sTNFRI）：治疗类风湿关节炎、感染性休克solubleIL-1receptor，sIL-1R：抑制移植排斥反应、实验性自身免疫病sTGFβRII：阻断TGFβ介导的免疫抑制和致纤维化作用TNF单抗IL-1RA（IL-1receptorantagonist，IL-1受体拮抗剂）（二）细胞因子阻断疗法——

（三）细胞因子基因疗法——

体内持续表达CK或CKR解决CK半衰期短、副作用大的问题细胞因子基因转染免疫效应细胞、肿瘤细胞、造血干细胞（三）细胞因子基因疗法——

四、细胞为基础的免疫治疗1、造血干细胞移植2、免疫效应细胞疗法3、DC疗法四、细胞为基础的免疫治疗（一）造血干细胞移植——

促进免疫重建，恢复造血功能骨髓移植外周血干细胞移植脐血干细胞移植（一）造血干细胞移植——

（二）免疫效应细胞疗法——

抗肿瘤、抗病毒感染NK（naturalkillercell）LAK（lymphokineactivatedkillercell）：IL-2活化的PBMC（NK）CIK（cytokineinducedkillercell）：anti-CD3McAb、IL-2、IFN-γ、TNF-α联合活化的PBMC（NKT）TIL（tumorinfiltratinglymphocyte）：IL-2活化的肿瘤浸润淋巴细胞，特异性杀伤，MHC限制（二）免疫效应细胞疗法——

（三）ＤＣ疗法将肿瘤抗原、抗原多肽、肿瘤提取物载荷于抗原提呈细胞；免疫肿瘤患者；激活抗肿瘤免疫反应。（三）ＤＣ疗法将肿瘤抗原、抗原多肽、肿瘤提取物载荷于抗原提呈（四）肿瘤疫苗（tumorvaccine）活瘤苗：不经灭活、危险；减毒或灭活瘤苗：放射线照射、化疗药物、高低温处理；抑制生长能力，保留其免疫原性；异构的瘤苗：过碘乙酸盐、神经氨酸酶、病毒感染等修饰；增强免疫原性。（四）肿瘤疫苗（tumorvaccine）活瘤苗：不经灭活五、免疫调节剂1、免疫增强剂2、免疫抑制剂五、免疫调节剂（一）免疫增强剂免疫因子：转移因子（transferfactor）、免疫核糖核酸（immuneRNA，iRNA）、胸腺肽（thymicpeptide）、IFN、TNF化学合成药物：左旋咪唑（levamisole）、异丙肌苷（isoprinosine）微生物制剂：BCG、CP、CpGODN中药制剂（一）免疫增强剂免疫因子：转移因子（transferfac采用免疫增强剂进行的免疫治疗

生物应答调节剂（BRM）

能增强、促进或调节机体免疫功能的生物或非生物制剂。微生物制剂：有卡介苗和短小棒状杆菌

化学合成药物：这类药物有左旋咪唑和西咪替丁

中药制剂：如香菇、灵芝、黄芪、人参、刺五加

上述免疫增强剂能非特异增强机体免疫功能。采用免疫增强剂进行的免疫治疗（二）免疫抑制剂抗-CD3单抗、抗-CD25单抗激素制剂化学合成药真菌代谢产物天然药物反义技术（二）免疫抑制剂抗-CD3单抗、抗-CD25单抗经常不断地学习,你就什么都知道。你知道得越多,你就越有力量StudyConstantly,AndYouWillKnowEverything.TheMoreYouKnow,TheMorePowerfulYouWillBe学习总结62经常不断地学习,你就什么都知道。你知道得越多,你就越有力量学结束语当你尽了自己的最大努力时，失败也是伟大的，所以不要放弃，坚持就是正确的。WhenYouDoYourBest,FailureIsGreat,SoDon'TGiveUp,StickToTheEnd演讲人：XXXXXX时间：XX年XX月XX日

63结束语63免疫治疗

immunotherapy免疫治疗

immunotherapy免疫治疗的概念针对机体低下或亢进的免疫功能，根据免疫学原理，利用物理、化学和生物学的收到人为地增强或抑制机体的免疫功能，达到治疗疾病目的的措施。免疫治疗的概念针对机体低下或亢进的免疫功能，根据免疫学原理，免疫治疗的类型根据对机体免疫应答的影响分为：免疫增强疗法(immunostimulationtherapy)免疫抑制疗法(immunosuppressiontherapy)根据治疗特异性分为：特异性免疫治疗(specificimmunotherapy)非特异性免疫治疗(non-specific~)根据治疗所用制剂分为：主动免疫治疗(active~)被动免疫治疗(passive~)Ab

Ag

CK

Cells

drug免疫治疗的类型根据对机体免疫应答的影响分为：根据治疗特异性分（一）免疫增强疗法和免疫抑制疗法

1．免疫增强疗法用途：治疗免疫功能低下的疾病种类：非特异性免疫增强剂、疫苗、抗体或淋巴细胞过继免疫疗法、细胞因子疗法。2．免疫抑制疗法用途：治疗免疫功能亢进的疾病种类：非特异性免疫抑制剂、淋巴细胞及其表面分子的抗体、诱导免疫耐受的疫苗。

（一）免疫增强疗法和免疫抑制疗法（二）主动免疫治疗和被动免疫治疗1．主动免疫治疗（activeimmunotheraphy）原理：给免疫应答健全的机体输入抗原性的疫苗或免疫佐剂，激活或增强免疫应答，使机体自身产生抵抗疾病的能力。制剂：疫苗；瘤苗、卡介苗、短小棒状杆菌等。2．被动免疫治疗（passiveimmunotheraphy）又称过继免疫治疗adoptiveimmunotheraphy

原理：将对疾病有免疫力的供者的免疫应答产物转移给其他个体或自体细胞体外经处理后回输自身→治疗疾病

制剂：抗体、小分子免疫肽（如转移因子、胸腺肽）、免疫效应细胞等。（二）主动免疫治疗和被动免疫治疗（三）特异性免疫治疗和非特异性免疫治疗

1．特异性免疫治疗（1）主动特异性免疫治疗原理：利用Ag诱导机体对该特定Ag的刺激产生特异性免疫应答或免疫耐受，达到治疗的目的。特点：见效慢、维持时间长。（2）被动特异性免疫治疗原理：直接向机体输入特异性免疫应答产物，使机体立即获得针对某一抗原的应答或耐受。特点：见效快、维持时间短。（三）特异性免疫治疗和非特异性免疫治疗

（三）特异性免疫治疗和非特异性免疫治疗2．非特异性免疫治疗范围：广，包括非特异性免疫增强剂或免疫抑制剂的应用。特点：作用无特异性；对机体免疫功能可广泛抑制；易致不良反应。（三）特异性免疫治疗和非特异性免疫治疗一、抗体为基础的免疫治疗一、抗体为基础的免疫治疗种类

免疫血清

（第一代）

抗菌、抗病毒、抗毒素，胎盘（丙种）球蛋白，ALG

应用限制：动物来源（制备、纯化、免疫原性），病原变异、传播疾病（人源）

单克隆抗体

（第二代）

抗细胞表面分子单抗、抗CKs单抗、 抗体导向药物治疗

应用限制：鼠源性（纯化）免疫原性差（肿瘤）种类

基因工程抗体（第三代）

将Ig各片段编码基因，人为拼接成Ig编码基因 （VDJC、VJC）（重组DNA技术）并让其在原 核或真核细胞大量表达嵌合抗体、人源化抗体、完全人源化抗体 单链抗体、双价抗体基因工程抗体（第三代）(一）免疫血清：来自免疫动物或人体的血清成分是多克隆抗体。1、抗毒素antitoxin2、丙种球蛋白（r-globulin）：胎盘球蛋白、人血浆丙种球蛋白3、人特异性免疫球蛋白4、抗菌免疫血清5、抗病毒免疫血清6、抗T细胞丙种球蛋白免疫治疗课件（二）抗体1、多克隆抗体（免疫血清）（1）抗毒素血清（antitoxicserum）性质：马血清用途：治疗和紧急预防外毒素所致疾病。常用制剂：白喉抗毒素、破伤风抗毒素等。（2）胎盘（丙种）球蛋白（placentalγ–globulin）用途：预防麻疹、传染性肝炎等，治疗丙种球蛋白缺乏症。常用制剂：胎盘球蛋白、人血清丙种球蛋白。特点：由于地区和人群免疫情况不同，制剂中所含抗体种类及数量不尽相同。（3）人特异性免疫球蛋白来源：恢复期病人、含高效价特异性抗体的供血者接受类毒素和疫苗免疫者的血浆（二）抗体1、多克隆抗体（免疫血清）（二）抗体（4）抗菌免疫血清（antibacterialimmuneserum）种类：抗鼠疫、抗炭疽、抗痢疾、抗百日咳等抗菌血清。特点：防治效果不显著，现已被磺胺类、抗生素所代替。（5）抗病毒免疫血清（antiviralimmuneserum）种类：抗麻疹免疫血清、抗狂犬病免疫血清、抗乙型脑炎免疫血清等。特点：预防作用显著，治疗效果不明显，因不能进入细胞内杀死病毒。（6）抗淋巴细胞丙种球蛋白（anti-lymphocyteγ–globulin，ALG）制备：用T淋巴细胞免疫动物的免疫血清，经提纯制成作用：在补体协同下溶解T淋巴细胞，使外周血中T淋巴细胞减少。用途：预防移植排斥、治疗某些自身免疫病。（二）抗体（4）抗菌免疫血清（antibacteriali（二）单克隆抗体(monoclonalantibody)特异性强，靶向性好，应用广泛（二）单克隆抗体(monoclonalantibody)单抗类药物的类型：1、抗细胞表面分子的单抗：2、抗细胞因子的单抗：3、抗体导向药物：抗-CD3单抗，用于GVHD和HVGD的治疗抗IL-1、抗TNFa单抗治疗类风湿关节炎、Crohn病放射（131I，125I）免疫耦联物、化学（甲氨蝶呤）免疫耦联物、免疫毒素（蓖麻毒素、白喉毒素）耦联物单抗类药物的类型：1、抗细胞表面分子的单抗：2、抗细胞因子的（二）抗体2、单克隆抗体（1）抗细胞表面分子的单抗用途：人CD3单抗——移植排斥反应；人CD4单抗——预防移植排斥反应；治疗类风湿性关节炎、多发性硬化症等。（2）抗细胞因子单抗用途：抗IL-1、TNF单抗——中和作用，减轻炎症反应。治疗类风湿性关节炎等慢性炎症性疾病。

（二）抗体2、单克隆抗体（二）抗体2、单克隆抗体（3）抗体导向药物治疗由导向部分（mAb）和药物（化疗药物、毒素、同位素）两部分组成。

放射免疫疗法同位素+mAb

抗体导向药物疗法化疗药物+mAb

免疫毒素疗法毒素+mAb（二）抗体2、单克隆抗体tumorprodrugdrugtoxinradioisotope

Enzyme单抗治疗图tumorprodrugdrugtoxinradioisotImmunotoxin:Antibody-ToxinConjugateImmunotoxin:Antibody-ToxinCoTumorcellenzyme抗体与酶分子偶联prodrugdrugenzymeTumorcellenzyme抗体与酶分子偶联prodr诱发人抗小鼠反应(ＨＡＭＡ，humananti-murineantibody)可降低抗体效果，甚至造成人体损伤半衰期较短,可较快被清除而影响疗效在人体中常不能有效激活补体和Ｆｃ受体相关的效应系统鼠源性单抗用于人体治疗存在的主要问题有诱发人抗小鼠反应(ＨＡＭＡ，humananti-murin怎样制作人源化单抗？采取什么方法？怎样制作人源化单抗？采取什么方法？通过DNA重组和蛋白质工程技术，在基因水平上进行切割、拼接或修饰，重新组装成新的抗体分子。特异性强、人源化、均一性强、可批量生产。（三）基因工程抗体（geneticengineeringantibody）（三）基因工程抗体（geneticengineering（1）嵌合抗体(鼠-人嵌合抗体)

（chimericantibody）构成：鼠源性抗体的V区＋人抗体的C区（2）人源化抗体（CDR移植抗体）（CDRgraftedantibody）构成：小鼠抗体CDR序列取代人源抗体CDR序列。（3）完全人源抗体构成：将人Ig基因转染小鼠，刺激产生人抗体，

经杂交瘤技术大量产生制备。（4）小分子抗体

Ig被酶水解产生含有H链和L链V区的片段有结合抗原的能力。这些片段大小仅为抗体的1/3~1/12，故称为小分子抗体。小分子抗体也可以相互结合或与适当的配体结合。（5）双特异性抗体双特异性抗体（bispecificantibody，BsAb）又称双功能抗体（bifunctionantibody，BfAb），构成：一个Ig的两个抗原结合部位可分别与两种不同的抗原表位结合。（1）嵌合抗体(鼠-人嵌合抗体)基因工程抗体的类型：1、人-鼠嵌合抗体（chimericantibody）：鼠源性抗体V区+人抗体C区，也可将IgG2b转换成IgG1或IgG3，提高Ab的细胞毒性在基因水平上将小鼠的Ig可变区与人的Ig恒定区嵌合在一起，所产生的抗体含有70-80%的人Ig分子的序列基因工程抗体的类型：1、人-鼠嵌合抗体（chimerica人-鼠嵌合抗体基因工程改造策略免疫球蛋白基因载体的构建H链嵌合载体L链嵌合载体共转染细胞启动子Pr鼠VH人CHPr鼠VL人CL人-鼠嵌合抗体基因工程改造策略免疫球蛋白H链嵌合载体L链鼠VH鼠VL人CL人CH抗体分泌细胞人-鼠嵌合基因工程抗体鼠VH鼠VL人CL人CH抗体分泌细胞人-鼠嵌合基因工程抗体2、人源化抗体（humanizedantibody）：将鼠源性抗体的CDR区序列连接至人抗体框架，也称为（CDR-graftedantibody），更进一步减少鼠抗体的成分免疫治疗课件嵌合抗体、CDR移植抗体的比较嵌合抗体、CDR移植抗体的比较FDA已批准上市的部分嵌合抗体：

抗-CD20单抗（rituxinmab，利妥昔单抗），是针对CD20抗原的人鼠嵌合型单抗，通过介导ADCC、CDC杀伤肿瘤细胞。治疗B细胞淋巴瘤抗Her-2单抗（trastuzumab，曲妥珠单抗），人源化单抗，治疗Her-2（EGFR）表达高的乳腺癌Herceptin(抗体名称)人源化抗体乳腺癌cellHER-2FDA已批准上市的部分嵌合抗体：Herceptin赛尼哌Zenapax。是靶向CD25抗原的人源化单抗，是第一个无严重不良反应的免疫抑制剂，适应症为预防无高度免疫的同种异体肾移植患者的器官排斥反应，与环孢素和皮质固醇的免疫抑制剂合用。FDA已批准上市的部分嵌合抗体：抗TNFa单抗（infliximab，英夫利昔单抗），是一种特异性阻断TNF-α的人鼠嵌合型单抗，属TNF拮抗剂，治疗类风湿关节炎、Crohn病赛尼哌Zenapax。是靶向CD25抗原的人源化单抗，FDA目前有数百种抗肿瘤特异性MAb进入临床试验。尤其在抗血癌领域MAb取得了很大成功。由于完整的Ab分子不易渗透进实体瘤、透过血脑屏障，也不能口服，限制了其应用。如何解决这个问题？目前有数百种抗肿瘤特异性MAb进入临床试验。如何解决这个3.小分子抗体酶解法：量？纯度？3.小分子抗体酶解法：量？纯度？（4）小分子抗体

Ig被酶水解产生含有H链和L链V区的片段有结合抗原的能力。这些片段大小仅为抗体的1/3~1/12，故称为小分子抗体。小分子抗体也可以相互结合或与适当的配体结合。根据结构，可将小分子抗体分为4类。1．Fab段构成：VH、CH1＋L链2．单域抗体和最小识别单位构成：单域抗体（singledomainantibody）

VH或VL

最小识别单位（minimalrecognitionunit，MRU）

单个CDR3．Fv片段：构成：VH＋VL4．单链抗体（singlechainantibody，SCA）或单链Fv（ScFv）构成：VL-不同的连接物-VH→多肽链特点：分子量小，穿透力强和体内清除快。（4）小分子抗体基因工程技术是当今较为成熟的技术！基因工程技术是当今较为成熟的技术！免疫球蛋白基因载体的构建H链表达载体L链表达载体共转染细胞PrVHCH1PrVLCL抗体分泌细胞VHVLCL-S-S-CH1Fab抗体分子的制备免疫球蛋白H链表达载体L链表达载体共转染细胞Pr分别构建载体L链表达载体H链表达载体PrVH

PrVL抗体分泌细胞VHVL-S-S-

Fv小分子抗体的制备分别构建载体L链表H链表PrVH3、小分子抗体：Fab段、Fv片段1/3抗体1/6抗体Fv结构示意图antigenbindingfragment,Fabvariabledomainfragment,Fv3、小分子抗体：Fab段、Fv片段1/3抗体1/6抗体Fv结3、小分子抗体：单域抗体(single-domainantibody,sdAb)、单链抗体单域抗体单链抗体(scFv)VH或VL单一结构域组成1/12抗体由接头将VH-VL连接成一条链。1/6抗体sdAb最初是从软骨鱼和骆驼科动物中克隆到有无轻链、单一重链可变区保留完整的抗原结合活性。具有分子小、稳定性高、体内组织渗透性好、可溶性好、易表达、抗原识别表位独特的特性。3、小分子抗体：单域抗体单链抗体(scFv最小识别单位、双特异性抗体最小识别单位、双特异性抗体免疫治疗课件4、抗体库技术抗体库技术产生的三项技术基础RT-PCR：能够克隆全套抗体可变区基因抗体基因片段在大肠杆菌的功能性表达噬菌体展示技术（phagedisplay)●

人源抗体的制备●抗体性能的改良●

不经免疫制备抗体抗体库技术的应用4、抗体库技术抗体库技术产生的三项技术基础RT-PCR：抗体药物的临床应用单克隆抗体基因工程抗体破伤风抗血清、蛇毒抗血清等抗肿瘤(鼠,人-鼠)抗肿瘤,自身免疫病抗血清抗体药物的临床应用单克隆抗体基因工程抗体破伤风抗血清、蛇毒抗二、抗原为基础的免疫治疗治疗性疫苗（therapeuticvaccine）1、增强免疫应答2、诱导免疫耐受二、抗原为基础的免疫治疗治疗性疫苗（therapeutic（一）以抗原表位的形式进行的免疫治疗HSP能与多种肽结合，形成HSP-肽复合物，能激活多个CTL克隆，因此HSP被称为“伴侣抗原肽（chaperoneantigenicpeptide）

抗原表位8-12个aa，易降解。与载体结合制成疫苗。前体条件：需已知抗原肽序列。

（一）以抗原表位的形式进行的免疫治疗HSP能与多种肽结合，形（二）以抗原分子或片段的形式进行的免疫治疗重组抗原疫苗：重组HBV表面抗原疫苗、Pre-S2疫苗；重组HPV疫苗等DNA疫苗：诱导对MBP（髓磷脂碱性蛋白）的免疫耐受，治疗小鼠EAE（人类MS）重组病毒疫苗：编码有效免疫原的基因插入减毒病毒（痘苗病毒、腺病毒），接种后体内持续产生抗原。转基因植物疫苗：将编码有效免疫原的基因插入可食用植物细胞中。（二）以抗原分子或片段的形式进行的免疫治疗重组抗原疫苗：重组三、细胞因子及其拮抗剂为基础的免疫治疗1、细胞因子疗法2、细胞因子阻断疗法3、细胞因子基因疗法三、细胞因子及其拮抗剂为基础的免疫治疗采用细胞因子及其拮抗剂进行的免疫治疗

细胞因子补充和添加疗法：

常应用重组细胞因子作为生物应答调变剂治疗肿瘤、感染、造血障碍等疾病。

细胞因子阻断和拮抗疗法：

主要用于治疗自身免疫性疾病、移植排斥、感染性体克等。

细胞因子基因疗法：

将细胞因子或其受体基因导入体内，使其在体内持续表达并发挥治疗效应。目前多项基因疗法用于治疗恶性肿瘤、感染、自身免疫性疾病。采用细胞因子及其拮抗剂进行的免疫治疗

（一）细胞因子疗法——

应用重组细胞因子作为药物IFNα、β、γ抗肿瘤细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、IFN、TNFα、GM-CSF促进造血细胞因子GM-CSF、G-CSF