肿瘤免疫治疗讲义课件

肿瘤免疫治疗肿瘤免疫治疗1中国每年新增癌症312万例(一天8550例)，死亡250万例;平均每6分钟就有一人确诊癌症；每5个死亡病人中就有一个死于癌症;

我国肿瘤发病率每年以3%-5%的速度提高，年均肿瘤医疗费用都在1500亿元以上。预计到2015年我国肿瘤医院诊疗人次将达到21600万人次左右，住院人数将达到940万人左右。中国每年新增癌症312万例(一天8550例)，死亡250万例2肿瘤的治疗手段手术放疗化疗肿瘤免疫治疗肿瘤的治疗手段手术放疗化疗肿瘤免疫治疗3免疫系统和免疫细胞免疫:机体抵抗或清除有潜在威胁的有害外源物质或非正常细胞的能力;包括以下功能:防御入侵病原(病毒、细菌等)；清除老旧细胞(老的红细胞等)和残损组织(疾病、损伤等)；识别摧毁非正常细胞或突变细胞(抵抗肿瘤发生)；排斥“异源”细胞(比如器官移植)；病理免疫反应:过敏–对无害物质的过度免疫反应；自身免疫疾病；免疫系统和免疫细胞免疫:机体抵抗或清除有潜在威胁的有害外源4免疫系统和免疫细胞免疫系统和免疫细胞5免疫系统和免疫细胞免疫系统和免疫细胞6免疫系统和免疫细胞固有免疫（innateimmunity）吞噬细胞:单核巨噬细胞和中性粒细胞；抗原提呈细胞；树突状细胞(DC):专职抗原提呈细胞，特异性免疫应答启动者；自然杀伤细胞(NK):直接杀伤，或者特异性抗体介导；自然杀伤T细胞(NKT):细胞毒作用和免疫调节作用；其他固有免疫细胞:嗜碱性粒细胞，嗜酸性粒细胞等；适应性免疫（adaptiveimmunity）T淋巴细胞:CD4+CD8+；B淋巴细胞:分泌抗体、抗原提呈、免疫调节；免疫系统和免疫细胞固有免疫（innateimmunity）7抗原提呈和抗原提呈细胞(APC)抗原提呈细胞(AntigenPresentingCells):DC,巨噬细胞,B细胞等；抗原提呈和抗原提呈细胞(APC)抗原提呈细胞(Antigen8肿瘤免疫治疗讲义课件9肿瘤发生和免疫逃避肿瘤特异抗原（TumorSpecificAntigen,TSA）肿瘤相关抗原（TumorAssociatedAntigen,TAA）非特异免疫应答：NK细胞，巨噬细胞特异性免疫应答：通过抗原提呈，激活CD4+,CD8+T细胞抗原性弱，或者抗原变调；肿瘤生长速度超过清除速度；肿瘤分泌抑制免疫的介质；肿瘤细胞缺乏共刺激因子；肿瘤细胞抗凋亡；宿主免疫力低下；肿瘤发生和免疫逃避肿瘤特异抗原（TumorSpecific10ImmunotherapyImmunotherapy11肿瘤免疫治疗讲义课件12DC疫苗树突状细胞(DendriticCells,DC)广泛分布脑以外的全身组织和脏器，数量较少，外周血单个核细胞1%，有许多分枝突起而命名；全职的抗原提呈细胞（APC）；DC疫苗树突状细胞(DendriticCells,DC)13DC疫苗NIH

Clinical

Trials注册的DC

Vaccine临床试验有252项黑色素瘤(46)，肾癌(22)，乳腺癌，胶质瘤，卵巢癌，前列腺癌，白血病；结肠癌，肉瘤，肝细胞肝癌，HIV感染Provenge®来自Dendreon公司

2010年4月被美国FDA批准用于治疗晚期前列腺癌病人；自体DC细胞，用蛋白PAP附载，GM-CSF刺激；一个月内注射3次，治疗一例的费用9.3万美金；3年后存活率对照组23%

Provenge组32%；对照组平均存活时间21.7个月，Provenge组平均存活25.8个月；2005年2月批准DC-MelVac治疗Ⅳ期黑色素瘤DC疫苗NIHClinicalTrials注册的DCV14DC疫苗DC疫苗15活性杀伤的免疫细胞淋巴因子激活的杀伤细胞（lymphokineActivatedKiller,

LAK）分离人的PBMC加入IL-2诱导4-6天,使用时同时加入IL-2;前体是NK细胞和少量T细胞,没有明确标志物（CD56+

CD16+）;由于大剂量的IL-2,毛细血管毒性大;33个GBM病人平均存活时间（月）：17.2vs10.21年生存率88%

vs

36%Dillmanetal.JImmunotherVolume32,Number9,November–December2009活性杀伤的免疫细胞淋巴因子激活的杀伤细胞（lymphokin16活性杀伤的免疫细胞肿瘤浸润淋巴细胞(TumorInfiltratingLymphocyte,

TIL)来源于肿瘤组织,引流淋巴结，胸腹水；分离后用高浓度IL-2诱导，主要是CD8+的T细胞；同时用免疫抑制剂能增加TIL效果；效果是LAK的50-100倍，副作用小，细胞存活周期长；NathalieLabarrie`re,etal.CancerImmunolImmunother(2002)51:532–538活性杀伤的免疫细胞肿瘤浸润淋巴细胞(TumorInfilt17活性杀伤的免疫细胞细胞毒性T淋巴细胞（cytotoxicT-lymphocyte，CTL）分离淋巴细胞用淋巴因子或抗原刺激，回输体内；可以直接杀伤，也可以通过分泌一些淋巴因子；连续杀伤，可以是抗原特异性，具有MHC-Ⅰ局限性；在病毒感染免疫方面研究比较多；Barveetal.JClinOncol26:4418-4425

活性杀伤的免疫细胞细胞毒性T淋巴细胞（cytotoxicT18活性杀伤的免疫细胞细胞因子诱导的杀伤细胞(CytokineInducedKiller,CIK):细胞因子诱导，IL-2，IL-1，INF-γ，α-CD3单抗；CD3+，CD56+；非HMC局限的，光谱杀瘤；具有NK细胞不受HMC限制，但具有CD8+细胞的特异杀伤力；正常人1%-5%，增殖迅速；博雅干细胞集团：20%举例：第三军医大学158胃癌病人CIK疗法的临床试验1*109细胞一次，一天间隔一天，5次一个疗程；六轮化疗后接受5轮CIK细胞治疗；活性杀伤的免疫细胞细胞因子诱导的杀伤细胞(Cytokine19活性杀伤的免疫细胞LiangrongShi,etal.CancerImmunolImmunother(2012)61:2251–2259三年和五年生存率（OS）：

54.5%

23.4%对照组平均42.1个月

67.6%

32.4%CIK组平均48.1个月三年和五年生存率（DFS

)：

36.4%

10.4%对照组平均34.1个月

47.3%

28.3%CIK组平均40.4个月活性杀伤的免疫细胞LiangrongShi,etal.20ACTL肿瘤细胞靶向治疗CLS自体细胞治疗术DC-CIK疗法AAV-DC-CTLACTL肿瘤细胞靶向治疗CLS自体细胞治疗术DC-CIK疗法21AAV-DC-CTL靶向性抗肿瘤细胞免疫技术抗原附载：AAV病毒感染DC；效应细胞：CTL（细胞毒性T淋巴细胞）特点：感染效率高，特异性高，得到大量效应CTL；AAV-DC-CTL靶向性抗肿瘤细胞免疫技术抗原附载：AAV22AAV-DC-CTL靶向性抗肿瘤细胞免疫技术天津医科大学肿瘤医院肿瘤研究所I期安全性临床试验招募30人临床分期4期的胃癌晚期病人AAV携带CEA基因感染附载DC细胞，激活TCL；1*109细胞/次，每个月一次，至少一次；北京肿瘤医院I期安全性临床试验招募27人中国癌症病人AAV携带CEA基因感染附载DC细胞，激活TCL；双臂：2-8*108细胞/次，8*108细胞/次；安全性：随访8个月，没有急性或者慢性副作用（继续随访）有效性：2例部分好转，1例稍微好转，9例稳定，其中6例的CEA指标下降；AAV-DC-CTL靶向性抗肿瘤细胞免疫技术天津医科大学肿瘤23DC-CIK细胞免疫技术抗原附载：多肽,肿瘤细胞裂解物,肿瘤细胞；效应细胞：CIK（细胞因子诱导的杀伤细胞）特点：结合了DC附载的靶向性特异性和CIK的快速增殖,光谱杀瘤能力；DC-CIK细胞免疫技术抗原附载：多肽,肿瘤细胞裂解物,肿瘤24DC-CIK细胞免疫技术NIH

clinicaltrials:12项临床试验治疗：鼻咽癌，胃癌，乳腺癌，胰腺癌，肝细胞肝癌，食道癌，肾癌；LiliYang,etal.CancerImmunolImmunother(2013)62:65–73122例非小细胞肺癌36例腺癌，18例鳞癌DC-CIK细胞免疫技术NIHclinicaltrial25DC-CIK细胞免疫技术肾癌137例分成三组：DC-CIK，TNF-α，对照组ZHANHai-lun，etal.ChineseMedicalJournal2012;125(21):3771-3777调节性T细胞明显下降五年生存率：100%，93.3%，88.9%DC-CIK细胞免疫技术肾癌137例分成三组：DC-C26谢谢！谢谢！27肿瘤免疫治疗肿瘤免疫治疗28中国每年新增癌症312万例(一天8550例)，死亡250万例;平均每6分钟就有一人确诊癌症；每5个死亡病人中就有一个死于癌症;

我国肿瘤发病率每年以3%-5%的速度提高，年均肿瘤医疗费用都在1500亿元以上。预计到2015年我国肿瘤医院诊疗人次将达到21600万人次左右，住院人数将达到940万人左右。中国每年新增癌症312万例(一天8550例)，死亡250万例29肿瘤的治疗手段手术放疗化疗肿瘤免疫治疗肿瘤的治疗手段手术放疗化疗肿瘤免疫治疗30免疫系统和免疫细胞免疫:机体抵抗或清除有潜在威胁的有害外源物质或非正常细胞的能力;包括以下功能:防御入侵病原(病毒、细菌等)；清除老旧细胞(老的红细胞等)和残损组织(疾病、损伤等)；识别摧毁非正常细胞或突变细胞(抵抗肿瘤发生)；排斥“异源”细胞(比如器官移植)；病理免疫反应:过敏–对无害物质的过度免疫反应；自身免疫疾病；免疫系统和免疫细胞免疫:机体抵抗或清除有潜在威胁的有害外源31免疫系统和免疫细胞免疫系统和免疫细胞32免疫系统和免疫细胞免疫系统和免疫细胞33免疫系统和免疫细胞固有免疫（innateimmunity）吞噬细胞:单核巨噬细胞和中性粒细胞；抗原提呈细胞；树突状细胞(DC):专职抗原提呈细胞，特异性免疫应答启动者；自然杀伤细胞(NK):直接杀伤，或者特异性抗体介导；自然杀伤T细胞(NKT):细胞毒作用和免疫调节作用；其他固有免疫细胞:嗜碱性粒细胞，嗜酸性粒细胞等；适应性免疫（adaptiveimmunity）T淋巴细胞:CD4+CD8+；B淋巴细胞:分泌抗体、抗原提呈、免疫调节；免疫系统和免疫细胞固有免疫（innateimmunity）34抗原提呈和抗原提呈细胞(APC)抗原提呈细胞(AntigenPresentingCells):DC,巨噬细胞,B细胞等；抗原提呈和抗原提呈细胞(APC)抗原提呈细胞(Antigen35肿瘤免疫治疗讲义课件36肿瘤发生和免疫逃避肿瘤特异抗原（TumorSpecificAntigen,TSA）肿瘤相关抗原（TumorAssociatedAntigen,TAA）非特异免疫应答：NK细胞，巨噬细胞特异性免疫应答：通过抗原提呈，激活CD4+,CD8+T细胞抗原性弱，或者抗原变调；肿瘤生长速度超过清除速度；肿瘤分泌抑制免疫的介质；肿瘤细胞缺乏共刺激因子；肿瘤细胞抗凋亡；宿主免疫力低下；肿瘤发生和免疫逃避肿瘤特异抗原（TumorSpecific37ImmunotherapyImmunotherapy38肿瘤免疫治疗讲义课件39DC疫苗树突状细胞(DendriticCells,DC)广泛分布脑以外的全身组织和脏器，数量较少，外周血单个核细胞1%，有许多分枝突起而命名；全职的抗原提呈细胞（APC）；DC疫苗树突状细胞(DendriticCells,DC)40DC疫苗NIH

Clinical

Trials注册的DC

Vaccine临床试验有252项黑色素瘤(46)，肾癌(22)，乳腺癌，胶质瘤，卵巢癌，前列腺癌，白血病；结肠癌，肉瘤，肝细胞肝癌，HIV感染Provenge®来自Dendreon公司

2010年4月被美国FDA批准用于治疗晚期前列腺癌病人；自体DC细胞，用蛋白PAP附载，GM-CSF刺激；一个月内注射3次，治疗一例的费用9.3万美金；3年后存活率对照组23%

Provenge组32%；对照组平均存活时间21.7个月，Provenge组平均存活25.8个月；2005年2月批准DC-MelVac治疗Ⅳ期黑色素瘤DC疫苗NIHClinicalTrials注册的DCV41DC疫苗DC疫苗42活性杀伤的免疫细胞淋巴因子激活的杀伤细胞（lymphokineActivatedKiller,

LAK）分离人的PBMC加入IL-2诱导4-6天,使用时同时加入IL-2;前体是NK细胞和少量T细胞,没有明确标志物（CD56+

CD16+）;由于大剂量的IL-2,毛细血管毒性大;33个GBM病人平均存活时间（月）：17.2vs10.21年生存率88%

vs

36%Dillmanetal.JImmunotherVolume32,Number9,November–December2009活性杀伤的免疫细胞淋巴因子激活的杀伤细胞（lymphokin43活性杀伤的免疫细胞肿瘤浸润淋巴细胞(TumorInfiltratingLymphocyte,

TIL)来源于肿瘤组织,引流淋巴结，胸腹水；分离后用高浓度IL-2诱导，主要是CD8+的T细胞；同时用免疫抑制剂能增加TIL效果；效果是LAK的50-100倍，副作用小，细胞存活周期长；NathalieLabarrie`re,etal.CancerImmunolImmunother(2002)51:532–538活性杀伤的免疫细胞肿瘤浸润淋巴细胞(TumorInfilt44活性杀伤的免疫细胞细胞毒性T淋巴细胞（cytotoxicT-lymphocyte，CTL）分离淋巴细胞用淋巴因子或抗原刺激，回输体内；可以直接杀伤，也可以通过分泌一些淋巴因子；连续杀伤，可以是抗原特异性，具有MHC-Ⅰ局限性；在病毒感染免疫方面研究比较多；Barveetal.JClinOncol26:4418-4425

活性杀伤的免疫细胞细胞毒性T淋巴细胞（cytotoxicT45活性杀伤的免疫细胞细胞因子诱导的杀伤细胞(CytokineInducedKiller,CIK):细胞因子诱导，IL-2，IL-1，INF-γ，α-CD3单抗；CD3+，CD56+；非HMC局限的，光谱杀瘤；具有NK细胞不受HMC限制，但具有CD8+细胞的特异杀伤力；正常人1%-5%，增殖迅速；博雅干细胞集团：20%举例：第三军医大学158胃癌病人CIK疗法的临床试验1*109细胞一次，一天间隔一天，5次一个疗程；六轮化疗后接受5轮CIK细胞治疗；活性杀伤的免疫细胞细胞因子诱导的杀伤细胞(Cytokine46活性杀伤的免疫细胞LiangrongShi,etal.CancerImmunolImmunother(2012)61:2251–2259三年和五年生存率（OS）：

54.5%

23.4%对照组平均42.1个月

67.6%

32.4%CIK组平均48.1个月三年和五年生存率（DFS

)：

36.4%

10.4%对照组平均34.1个月

47.3%

28.3%CIK组平均40.4个月活性杀伤的免疫细胞LiangrongShi,etal.47ACTL肿瘤细胞靶向治疗CLS自体细胞治疗术DC-CIK疗法AAV-DC-CTLACTL肿瘤细胞靶向治疗CLS自体细胞治疗术DC-CIK疗法48AAV-DC-CTL靶向性抗肿瘤细胞免疫技术抗原附载：AAV病毒感染DC；效应细胞：CTL（细胞毒性T淋巴细胞）特点：感染效率高，特异性高，得到大量效应CTL；AAV-DC-CTL靶向性抗肿瘤细胞免疫技术抗原附载：AAV49AAV-DC-CTL靶向性抗肿瘤细胞