免疫缺陷病与性传播疾病的实验诊断

免疫缺陷病与性传播疾病的实验诊断小结HIV、TP概念、定义（了解）HIV、TP病毒学、流行病学（理解）HIV、TP的临床检验（掌握）HIV、TP实验结果的解释与应用（掌握）免疫缺陷病（immunodeficiencydiseases，IDD）定义与分类是指由于免疫系统发育不全或遭受损害所致的免疫功能缺陷引起的疾病。临床表现为反复感染或严重感染。原发性（先天性）免疫缺陷病(premaryimmunodeficiencydisease，PID)继发性（获得性）免疫缺陷病(secondaryimmunodeficiencydisease，SID)常见的原发性免疫缺陷性疾病原发性抗体缺陷病X-连锁无丙种球蛋白血症选择性IgA缺乏症原发性T细胞缺陷病先天性胸腺发育障碍T细胞特异性免疫缺陷症慢性皮肤黏膜念珠菌病原发性吞噬细胞功能缺陷病慢性肉芽肿病白细胞黏附缺陷原发性联合免疫缺陷病原发性补体缺陷病免疫缺陷性疾病常用检测方法体液免疫检测抗体测定：IgG、IgA、IgM、IgD、IgE补体测定：CH50、C3、C4等细胞免疫检测细胞表型分析：T细胞分化抗原检测、B细胞膜表面免疫球蛋白检测、B细胞分化抗原检测细胞功能测定：T细胞花环形成试验、T细胞转化试验、混合淋巴细胞试验、自然杀伤细胞活性检测等细胞因子测定：IL-2、IL-6、IL-8、IL-10、TNF等相关基因检测性传播疾病定义性传播疾病简称性病，指主要通过性接触、类似性行为及间接接触传播的一组传染病。包括艾滋病、梅毒、淋病、软下疳、性病淋巴肉芽肿、非淋菌性尿道炎、尖锐湿疣、生殖器念珠菌病、细菌性阴道病、滴虫病和乙型肝炎等20余种疾病。艾滋病（获得性免疫缺陷综合征，AcquiredImmuneDeficiencySyndrome,AIDS）病原学HIV在外界环境中的生存能力:干燥环境中，HIV活性在几小时降低90－99％在室温（18－30℃）液体环境下，HIV可存活15天以上对一般消毒剂如酒精、次氯酸钠、戊二醛等敏感WHO推荐的灭活HIV方法：100℃20分钟艾滋病的致病机制：HIV感染→CD4+T→免疫功能缺陷艾滋病的传播传染源：AIDS病人、无症状HIV感染者两个必要条件：皮肤有缺口或粘膜暴露、有足够量的病毒进入体液临床特点早期：持续性的体重减轻、间歇热、慢性腹泻、全身淋巴结肿大晚期：机会性感染：多见卡氏肺囊虫和白色念珠菌感染恶性肿瘤：Kaposi肉瘤和恶性淋巴瘤神经系统损害：AIDS痴呆症艾滋病的临床检验HIV抗体检测初筛实验：①酶联免疫吸附法ELISA②硒（金）标法③明胶颗粒凝集法PA④电化学发光法ECLIAHIV初筛试验结果的解释：阳性：确认实验阳性，即为HIV感染者或AIDS。婴儿HIV阳性，需18个月后检测阳性经确认阳性者才能诊断（婴儿被动获得IgG，8-14个月消失，18个月后产生自已的抗体）阴性：确实阴性窗口期高危行为后3个月内为阴性，则可排除HIV感染确证实验：①蛋白印迹法WB:（WesternBlot）：阳性:二条env带或一条env带加一条P24带;阴性：无任何条带不确定：有一个或几个条带，但不满足阳性标准②条带免疫印迹法SIA或LIA③放射免疫沉淀试验RIPA④间接免疫荧光试验IFAHIV病原学检测病原学检测方法核酸检测（cDNA测定-PCR、RNA测定-病毒载量）应用于早期诊断围产期HIV感染的辅助诊断：宫内感染（检测定义）：新生儿出生48小时内检测到病毒核酸，或病毒培养阳性，则提示孕期(宫内）感染。对18个月婴儿HIV抗体WB试验的不确定（或可疑）结果进一步做辅助诊断；在HIV抗体未产生之前（窗口期）辅助诊断急性原发感染；HIV亚型分析；确定人群中HIV的变异；监测临床抗病毒药物治疗效果；检测病毒的耐药性突变。病毒培养分离P24抗原检测：①酶联免疫吸附法ELISA②放射免疫试验RIA③间接免疫荧光试验IFA适用于：HIV-1抗体不确定或窗口期的辅助诊断HIV-1抗体阳性母亲所生婴儿早期的辅助诊断。第四代HIV抗原/抗体ELISA试剂检测呈阳性反应，但HIV-1抗体确认试验呈阴性者的辅助诊断。监测病程进展和抗病毒治疗效果。CD4+T淋巴细胞检测①CD4+T淋巴细胞数目②CD8+T淋巴细胞数目③CD4+T/CD8+T的比例梅毒梅毒：一种性传播疾病Syphilis－梅毒；Treponemiapallidum，TP－苍白螺旋体梅毒是由苍白密螺旋体引起的一种慢性、系统性性传播疾病。人体受感染后，螺旋体很快播散到全身，可引起神经、心血管等多系统损害，甚至威胁生命。梅毒可通过胎盘传染胎儿，导致自发性流产、死产或先天梅毒等。感染梅毒可促进艾滋病的传播，危害很大。梅毒的病毒学特征菌体细长的螺旋状微生物；运动缓慢而有规律；横断分裂繁殖TP在外界环境中的生存能力TP是厌氧菌在干燥环境或阳光照射下会迅速死亡，而在潮湿环境中可生存较长时间。煮沸、肥皂水和一般的消毒剂（如酒精、次氯酸钠等）很容易将它杀死。TP在缺氧的环境下能生存数天，在潮湿的环境里也能存活数小时，在-78℃以下可保持活性甚久。梅毒的传播梅毒螺旋体的唯一宿主：人类传染源：梅毒患者传播途径性接触：主要途径，占95%母婴传播：胎盘传播：先天性梅毒产道传播：后天性梅毒血液传播：输血或血液制品其他传播：接触梅毒患者污染的衣被、毛巾、食具或污染的医疗器械。梅毒的免疫性人类对梅毒无先天免疫性，尚无疫苗接种进行人工免疫，仅能在受感染后产生感染性免疫。已完全治愈的梅毒患者仍可以再感染。特异性抗体IgM型抗体感染2周后即可测出，早期梅毒抗梅治疗3～9个月后或晚期梅毒治疗2年后，大部分病人IgM可转阴性，再感染时又出现阳性，故IgM型抗体的存在也是活动性（现症）梅毒的表现。IgG型抗体感染梅毒4周左右产生，即使经足量抗梅治疗，梅毒螺旋体抗原消失后很长时间，IgG抗体仍可通过记忆细胞的作用继续产生，甚至终生在血清中可测出。胎儿在宫内感染梅毒螺旋体后，胚胎晚期（6～9个月）已能合成IgM型抗体，出生后第3个月开始形成IgG型抗体；IgM抗体不能通过胎盘，而IgG抗体能通过胎盘，如患儿血清中检测出19S-IgM抗梅毒螺旋体抗体是诊断先天梅毒的有力证据。新生儿携带的母体抗体可在生后6～12个月被分解代谢以致检测不到。因此，可以通过连续随访观察6个月判断婴儿是否感染梅毒。非特异性抗体---反应素是梅毒螺旋体破坏人体组织过程中释放出的一种具有抗原性的心磷脂，刺激机体所产生的抗体—反应素，该反应素与从牛心中提取的心磷脂在体外可发生抗原抗体反应。一般在感染后5～7周（或下疳出现后2～3周）产生。经正规治疗后可逐渐消失。梅毒的诊断病史体检：是否有符合梅毒的各种临床表现和体征实验室检查：①病原学检查：直接查梅毒螺旋体(暗视野显微镜)②血清学检验（常用）非特异性梅毒螺旋体血清学试验性病研究实验室玻片试验（VDRL)：由于试剂需现配现用，故而国内实验室很少采用。但VDRL是唯一可用于神经性梅毒诊断的血清学方法快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)：在特制的纸片上进行，加入一定量特制的炭粉，可使抗原抗体出现凝集，用肉眼可观察结果甲苯胺红试验（TRUST)：在试剂中加入甲苯胺红代替炭粉颗粒，使结果更易于观察不加热血清反应素试验（USR)特异性梅毒螺旋体血清学试验酶联免疫法TP-ELISA明胶凝集法TPPA原理：用超声裂解的梅毒螺旋体为抗原，致敏