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第十一章临床免疫检验仪器一、名词解释酶免疫分析技术:利用酶的高效催化和放大作用与特异性免疫反应结合而建立的一种标记免疫技术。2•均相酶免疫分析法:检测过程中抗原抗体反应后,无需分离结合和游离的酶标记物,直接根据反应前后酶活性的改变进行待检物质测定的分析方法。非均相酶免疫分析法:在酶免疫测定中,抗原抗体反应达到平衡后,需分离游离的和与抗原(或抗体)结合形成复合物的酶标记物,然后对经酶催化的底物显色程度进行测定,再推算出样品中待测抗原(或抗体)含量的分析方法。发光免疫分析技术:利用化学发光现象,根据物质发光的不同特征,即辐射光波长、发光的光子数,与产生辐射的物质分子的结构常数、构型、数量等密切相关,通过受激分子发射的光谱、发光衰减常数、发光方向等来判断分子的属性及发光强度进而判断物质的量的免疫分析技术。5•免疫浊度检测:将液相内的沉淀试验与现代光学仪器和自动分析技术相结合的一项分析技术。放射免疫分析技术:以放射性核素为标记物的标记免疫分析技术。非均相荧光免疫测定法:抗原抗体反应后,先把Ab*Ag与Ab*分离,然后测定Ab*Ag或Ab*中的标记物的量,从而推算出标本中的Ag量的方法。均相荧光免疫测定法:抗原抗体反应后,Ab*Ag中的标记物失去荧光特性,不需进行Ab*Ag与Ab*的分离直接测定游离的Ab*量,从而推算出标本中的Ag量的方法。闪烁体:是将核辐射能激发分子转化成可探测闪光的荧光物质。常用的有有机闪烁体、无机闪烁体和特殊闪烁体等。时间分辨荧光免疫分析:时间分辨荧光免疫测定是用镧系稀土元素及其螯合物(如Eu3+螯合物)作为示踪物标记抗原、抗体、核酸探针等物质,检测标本中的相应抗原或抗体的荧光免疫测定技术。化学发光免疫技术:在检测化学反应中,某些化学基团被氧化后形成激发态,并在返回基态的同时发射一定波长的光子。仪器利用这种化学基团标记在免疫分析的抗原或抗体上所建立起来的免疫分析为化学发光免疫分析。其实质是化学反应与免疫反应相结合的一种高灵敏度的分析方法,亦称为微量倍增技术。散射免疫浊度法:一束光线通过溶液时受到光散射和光吸收两个因素的影响而使光的强度减弱。在5°〜96°角的方向上测量散射光强度和被测溶液中微粒浓度关系的方法称之。二、选择题【A型题】1.应用最广泛的均相酶免疫分析是(C)CEDIASPEIAEMITELISAIFA酶免疫分析技术用于样品中抗原或抗体的定量测定是基于(C)酶标记物参与免疫反应固相化技术的应用,使结合和游离的酶标记物能有效的分离含酶标记物的免疫复合物中酶可使催化底物显色,其颜色的深浅与待测物含量相关酶催化免疫反应,复合物中酶的活性与样品测值成正比酶催化免疫反应,复合物中酶的活性与样品测值成反比均相酶免疫分析法的测定对象主要是(A)抗原或半抗原不完全抗体免疫复合物补体完全抗体微孔板固相酶免疫测定仪器(酶标仪)的固相支持物是(D)玻璃试管磁性小珠磁微粒PVC微孔板乳胶微粒化学发光免疫检测的物质不包括(D)甲状腺激素生殖激素肿瘤标志物血清IgG含量血清总IgE含量电化学发光免疫分析中,电化学反应进行在(C)液相中固相中电极表面上气相中电磁铁表面关于电化学发光免疫分析,下列描述中错误的是(B)是一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应包括了电化学反应和光致发光两个过程化学发光剂主要是三联吡啶钌检测方法主要有双抗体夹心法、固相抗原竞争法等模式以磁性微珠作为分离载体下面有关酶标仪的性能指标评价的叙述中,正确的是(B)A.灵敏度评价中,其吸光度应小于0.01滤光片的检测值与标定值之差越接近与零且峰值越大,则滤光片的质量越好准确度的评价中,其吸光度值应在0.1左右线性测定中,利用单波长平行检测8次通道差检测中,蒸馏水调零后,于750nm处检测3次在酶免疫分析仪的精密度评价中,采用双波长作双份平行测定,每日测定2次,最少应连续测定的天数是(E)TOC\o"1-5"\h\z5天7天12天50天20天下述酶标仪的主要技术参数中,线性范围一般为(A)0.000~3.0000.000~2.0000.000~1.50000.000~4.0000.000T.000散射比浊法的特异性好于透射比浊法,其原理是(E)散射比浊法的入射光波长较短检测点接近光源IC的体积大IC的折射率大避免了杂信号的影响测定半抗原或药物,常用(D)透射免疫比浊法终点散射比浊法速率散射比浊法速率抑制免疫比浊法免疫胶乳浊度测定法速率散射比浊法之所以能比传统的沉淀反应试验大大地缩短时间,主要是因为(A)在抗原抗体反应的第一阶段判定结果不需复杂的仪器设备使用低浓度的琼脂或琼脂糖反应的敏感度高速率散射比浊法反应速度快透射免疫比浊法检测的原理是(C)测定光线通过反应混合液时,被其中IC反射的光的强度测定光线通过反应混合液时,被其中IC折射的光的强度测定光线通过反应混合液时,被其中IC吸收的光的强度测定光线通过反应混合液时,透过的光的强度测定光线通过反应混合液时,透射的光的强度散射免疫比浊法检测的原理是(B)测定光线通过反应混合液时,被其中IC反射的光的强度测定光线通过反应混合液时,被其中IC折射的光的强度测定光线通过反应混合液时,被其中IC吸收的光的强度测定光线通过反应混合液时,透过的光的强度测定光线通过反应混合液时,透射的光的强度主要用于测定各种激素、蛋白质、酶、药物及病毒抗原的技术是(C)荧光偏振免疫测定荧光免疫显微技术时间分辨荧光免疫测定底物标记荧光免疫测定流式荧光免疫技术临床药物浓度检测的首选方法是(B)时间分辨荧光免疫测定荧光偏振免疫测定荧光免疫显微技术流式荧光免疫技术底物标记荧光免疫测定最适合于时间分辨荧光免疫测定的荧光物质是(E)异硫氰酸荧光素四乙基罗丹明四甲基异硫氰酸罗丹明藻红蛋白镧系稀土元素最理想且临床最常用的放射性核素为(A)TOC\o"1-5"\h\zI125Cr51Co60H3I131释放0射线的核素是(D)I125Cr51Co60H3I131H3标记发射免疫技术比I125标记发射免疫技术的优越之处是(D)标记方法简便放射性测量方法简便,效率高易获得高比放射性标记物标记物保存期比较长放射性废弃物处理较易有关发射免疫分析原理的描述,正确的是(D)Ag和Ag*与相应Ab的结合能力相同Ag*为限量,待测Ag竞争性抑制Ag*与Ab的结合Ag*Ab复合物量与待测Ag量成正比反应平衡时,游离放射性强度(F)与待测Ag成正比标记抗体为过量表示抗体的特异性指标是(D)免疫活性亲和常数效价交叉反应率比放射性反映抗体与相应抗原结合的能力的指标是(B)免疫活性亲和常数效价交叉反应率放射化学纯度融合了特异性和非特异性B/F分离技术特点的方法是(D)活性炭吸附法双抗体法固相分离法PR试剂法化学沉淀法关于发射免疫分析中分离法的选择要求,下列描述错误的是(D)分离应彻底、迅速操作应简便,重复性好分离过程应不影响免疫复合物的形成分离效果应受反应介质影响试剂来源容易,价格低廉在放射免疫分析中,制作标准曲线形状不受放射性标记物的衰变影响的反应参数是(D)B/FB/B+FF/BB/B0B在放射免疫分析中,是标准曲线呈正比例双曲线,横坐标是测定物标准品浓度,纵坐标是(C)B/FB/B+FF/BB/B0B免疫放射分析方法的创建者为(B)Coons于1941年创建Berson和Yallow于1959年创建Nakene和Pierce于1966年创建Miles和Hales于1968年创建Engrall和Perlmann于1971年创建与放射免疫分析相比,免疫放射分析最显著的特点是(C)使用单克隆抗体采用固相分离法反应属于非竞争性结合可以测定大分子和小分子抗原灵敏度较高下面关于免疫放射分析的描述中,正确的是(A)反应体系中,相对于抗原,标记抗体是过量的单位点和双位点IRMA均采用固相抗体作分离抗原与抗体的结合属于竞争性结合反应平衡时,游离标记物量与待测抗原量成正比反应平衡时,待测抗原量与结合的*Ag-Ab成反比为提高放射免疫分析的检测灵敏度,方法学设计时应注意避免(B)制备高比放射性的标记物增加抗体的用量选用顺序饱和法实验流程筛选高亲和力的抗体选用特异性B/F分离方法与RIA比较,IRMA最突出的特点是(B)IRMA的反应速度更慢非竞争结合,使IRMA灵敏度更高抗体用量较少,但对K值要求更高反应参数与待测抗原含量成反比单位点IRMA采用固相抗体分离法放射性活度是指(A)单位时间内的核衰变数,即每秒衰变次数,用Bq表示单位质量样品中所含放射性活度,以Bq/g或Bq/mmol表示单位体积溶液中所含放射性活度,以Bq/ml表示结合于抗原上的放射强度占总放射强度的百分率,即碘化蛋白质的放射强度占总放射强度的百分率单位质量标记物的放射强度,单位为Bq/ug自动型多通道酶标仪有多个光束和多个光电检测器,一般配置数为(D)TOC\o"1-5"\h\z2个4个6个8个12个检测酶免疫分析仪的灵敏度,其吸光度A应大于(A)0.010.020.030.040.08酶免疫分析仪的维护重点是(E)打印机计算机传动装置D.电倍增管光学部分,防止滤光片霉变【X型题】不同的酶免疫分析仪的吸附免疫试剂的载体有(ABCDE)微孔板试管小珠磁微粒胶乳微粒均相免疫测定的特点是(ABCD)属于竞争结合分析法AgE与Ab结合形成AbAgE后,其中的酶活性将减弱或增强不需将AbAgE与AgE分离,可直接测定酶活性的变化推算出待测抗原量主要用于小分子抗原和半抗原的测定灵敏度大于异相酶免疫测定全自动微孔板式ELISA分析仪的加样系统包括(ABCDE)加样针条码阅读器样品盘试剂架加样台下列叙述中,正确的是(ABCDE)Westernblot具有SDS的高分辨率和ELISA的高特异性亲和素-生物素ELISA法可大大提高敏感度斑点-ELISA法的特异性高于ELISA法酶免疫电泳法可起到微量抗原定位作用及提高敏感性IRMA的灵敏度较RIA高,所有待测物参与反应酶免疫技术的优点有(ABCDE)灵敏度高、特异性强、准确性好实验简便,易操作易于自动化分析易与其他标记免疫技术偶联标记试剂的有效期较长全自动微孔式ELISA分析仪的光路系统包括(ABCDE)光源滤光片光导纤维镜片光电倍增管临床上ELISA主要用于(ABCDE)病原体及抗体测定蛋白质测定非肽类激素测定药品测定毒品测定化学发光免疫技术的方法学类型包括(BDE)时间分辨荧光免疫测定化学发光免疫测定荧光偏振免疫测定化学发光酶免疫测定电化学发光免疫测定发光免疫技术的方法学类型包括(ABCDE)时间分辨荧光免疫测定化学发光免疫测定荧光偏振免疫测定化学发光酶免疫测定电化学发光免疫测定在发光酶免疫分析中,抗原抗体反应模式主要有(ABC)固相抗原竞争法双抗体夹心法双抗原夹心法PAP法补体法在化学发光免疫技术中,常用的B/F分离技术包括(ABE)磁颗粒分离法微粒子捕获法PEG沉淀法PR试剂法包被珠分离法化学发光免疫分析通常用于(ABCD)甲状腺激素检测生殖激素检测肿瘤标志物分子检测贫血因子检测淋巴细胞亚群检测关于电化学发光免疫分析,下列描述正确的是(ABCDE)是一种在电极表面有电化学引发的特异性化学发光反应包括了电化学和化学发光两个过程化学发光剂是三联吡啶钌检测方法主要有双抗体夹心法、固相抗原竞争法等模式采用磁颗粒分离技术下列关于化学发光免疫分析的描述,正确的是(ACE)双抗体夹心法是固相抗体和标记抗体与待测标本中相应抗原反应双抗体夹心法分析其检测的发光量与待测的抗原含量成反比固相抗原竞争法常用于小分子抗原的测定固相抗原竞争法分析其检测的发光量与待测的抗原含量成正比双抗体夹心法常用于大分子抗原的测定免疫浊度测定的条件是(ABDE)反应体系中必须保持抗体过量全自动免疫浊度仪应具有抗原过量监测功能H型抗体是免疫比浊的理想试剂适量的PEG6000可以缩短终点法发动反应时间适量的PEG6000可以增加速率法的反应峰值根据Rayleigh方程,散射免疫法比浊法具有的特点是(ABCD)入射光波长越小,散射光越强散射光强度与IC的浓度成正比散射光的强度与IC的体积成正比散射光强度随焦点至检测器距离的平方和的增加而下降抗体过剩时散射光信号最强免疫乳胶浊度测定法的特点是(ABCD)为一种带载体的免疫比浊法吸附有抗体的胶乳颗粒,遇相应抗原时可发生凝集光线可以透过均匀分散的胶乳颗粒两个以上胶乳颗粒凝聚时,可使透过光减少适用于免疫胶乳浊度法的胶乳颗粒直径应稍大于入射光的波长对荧光素影响的因素是(ABCDE)PH、温度溴化物、碘化物等杂质荧光素的浓度细胞固定剂化合物常用的荧光素是(ABCD)异硫氰酸荧光素四乙基罗丹明四甲基异硫氰酸罗丹明藻红蛋白镧系稀土元素释放Y射线的核素包括(ABC)TOC\o"1-5"\h\zI125Cr51Co60C14H3用于放射性标记的抗原或抗体的质量主要影响方法学的(AB)灵敏度特异性准确度D.线性范围E.精确度22.1125标记放射免疫技术在下列哪方面优于H3标记放射免疫技术(ABCE)标记方法简便,易获得高比放射性标记物放射性测量方法简便,效率高对标记化合物影响较少,不影响抗原免疫学活性标记物保存期较长放射性废弃物处理较易关于间接标记法标记I125的描述,正确的是(ABCD)避免氧化剂和蛋白质直接接触,对蛋白质活性影响较小I125通过SHPP连接到蛋白质分子表面赖氨酸残基或蛋白质的活性中心,蛋白质生物活性影响较小在蛋白质分子内载体分子引起位阻效应,影响其生物活性,对分子量小的蛋白质影响更明显由于标记过程分两步进行,故碘标记蛋白质比放射性和碘的利用率较直接标记法低常用的氧化剂是氯胺T理想的分离技术应具备(ABCDE)简便易行,适于大批量样品分析分离完全,快速,非特异性结合低试剂来源容易,价格低廉,稳定性好,可长期保存不受外界因素和样品中其他组分的干扰,对标准品和待测抗原分离效果相同适合自动化分析的要求放射免疫分析中,B/F的分离方法有(ABCDE)吸附法双抗体法固相分离法PR试剂法化学沉淀法属于特异性B/F分离技术的是(BCD)吸附法双抗体法固相分离法PR试剂法化学沉淀法27.IRMA的优点是(ABD)敏感度高特异性强准确性好结果稳定用血量少28.RIA标准曲线制作时,纵坐标的反应参数有(ABCDE)B/FB/B+FF/BB/BB关于RIA曲线,为使标准曲线呈反比例双曲线,横坐标是测定物标准品浓度,纵坐标是(ABDE)B/FB/B+FF/BB/B0B免疫放射分析与放射免疫分析的不同是(ABCDE)IRMA的反应速度更快采用固相分离法反应属于非竞争性结合,使IRMA灵敏度更高可以测定大分子和小分子抗原抗体用量大,但对K值要求不高化学发光免疫分析系统的微机系统是仪器的核心部分,其功能包括(ABCDE)程控操作自动监测指示判断数据处理故障诊断全自动微粒子发光免疫分析仪的主要组成部分包括(ABCDE)微电脑控制系统样品处理系统实验运行系统中心供给系统中心控制系统自动化免疫分析比浊技术的主要优势有(ABCDE)稳定性好敏感度高精确度高分析简便、快速避免污染和标本用量三、简答题简述酶免疫分析技术的分类。酶免疫分析技术按实际用途,可分为酶免疫组化和酶免疫测定两大类;按抗原抗体反应后是否需将结合的和游离的酶标记物分离,可分为均相酶免疫分析和非均相酶免疫分析两种方法。异相酶免疫测定又可分为固相酶免疫测定和液相酶免疫测定。简述酶标仪的基本工作原理。酶标仪的基本工作原理就是分光光度法,按照比色原理分析抗原或抗体的含量。1.酶标仪的性能评价指标有哪些?酶标仪的性能评价指标有滤光片波长精度检查及其峰值测定、灵敏度和准确度、通道差与孔间差检测、零点飘移、精密度评价、线性测定、双波长评价等。简述化学发光免疫分析的原理。化学发光免疫分析是用化学发光剂直接标记的抗原或抗体与待测标本中相应抗体或抗原、磁颗粒性的抗原或抗体反应,通过磁场把结合状态(B)和游离状态(F)的化学发光剂标记物分离开来,然后在结合状态(B)部分中加入发光促进剂进行发光反应,通过对结合状态(B)发光强度的检测进行定量或定性检测。简述电化学发光免疫分析的原理。电化学发光免疫分析是电化学发光和免疫测定相结合的技术,是一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应,实际上包括了电化学和化学发光两个过程。ECL是电启动发光反应。化学发光剂三联吡啶钉[Ru(bpy)]2+标记抗体,通过抗原抗体反应和磁颗粒分离技术,根据三联吡啶钌在电极上发出的光强度的大小对待测的抗原或抗体进行定量或定性验测。简述发光免疫分析仪的特点和临床应用。发光免疫分析法具有高度敏感性和高特异性,试剂安全、稳定、价廉等特点。在临床上的应
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