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文档简介
化学发光联用技术在体内药物分析中的应用
人或动物体液体内药物分析各组织器官中药物分析代谢物浓度了解
药物在体内数量和质量的变化获得药代动力学参数和转变代谢的方式代谢的途径药物的研究临床合理应用有助于体内药物分析具有下列特点:①样品复杂,干扰杂质多。②样品量少,不易重新获得被测物浓度或活性极低,可供分析的样品量少,尤其是在连续测定过程中,很难再度获得完全相同的样品。③要求较快提供结果供临床用药监护的检测分析方法。④要有一定的仪器设备,实验室应拥有样品冷贮、萃取、浓集以及多种检测条件。⑤工作量大测得数据的处理和阐明有时比较困难。仪器设备简单操作方便化学发光分析快速分析法灵敏度高线性范围宽
药物分析中应用广泛
化学发光分析法(CL)是根据化学反应产生的辐射光的强度来确定物质含量的分析方法。优点:
局限性
目前为止,化学发光法对药物制剂的有效成分进行定量测定的研究很多,但对生物样品如血浆、尿液中的药物代谢物即体内药物分析的研究却并不多。这是因为生物样品成分复杂,若想利用高灵敏度的化学发光分析法测定生物样品的痕量药物及其代谢物就必须先将其从生物样品中分离出来。这就要求将灵敏度高的化学分析法与具有高分离效率的其他技术联合使用或联用特异性的反应进行体内药物分析化学发光法和其他技术的联用在体内药物分析中的应用主要见下:
●高效液相色谱-化学发光检测法
●毛细管电泳-化学发光联用检测法
●化学发光免疫分析法
●分子印迹-化学发光法
●微流控芯片-化学发光检测技术
●高效液相色谱-化学发光检测法液相色谱化学发光分析法(HPLC-CL)是将液相色谱的高效分离与化学发光的高灵敏特性有效结合起来的一种分析方法,非常适合于复杂组分中低含量药物的分析。药物在体内被代谢后,利用液相色谱柱将其与生物样品的主成分分开,然后将药物及其代谢物通过某化学发光体系或将其与某化学发光试剂混合,通过检测体系的化学发光强度来测量体内药物的含量,进而获得药代动力学数据。●孙永华等利用RP-HPLC-CL法成功地测定了血样和尿样中的盐酸青藤碱●付爱华等用阳离子交换树脂作为载体,将钌(Ⅱ)联吡啶固定在树脂上,制备成微型柱作为检测元件,经色谱柱分离的雷尼替丁在树脂微型柱上发生化学发光反应,据此测定了人血液中的雷尼替丁含量。除了利用HPLC-CL技术研究测定各类药物的实际生物样品外,人们也将研制HPLC-CL的商品化检测仪器作为重要的研究目标。
应用:●陆桦等根据在碱性条件下,三联吡啶钉在铂电极上的弱电化学发光信号可以被盐酸甲氯芬酯增敏的现象,建立了一种毛细管电泳.电化学发光法测定人血浆中盐酸甲氯芬酯的新方法。
●康艳辉等利用毛细管电泳-电化学发光法测定了人尿中的氟派啶醇,检出限为3.5ug/L。
●梁汝萍等采用带有柱端电化学发光(ECL)检测池的毛细管电泳(CE)法分离并测定了尿液中的盐酸维拉帕米的含量。
●孙汉文等利用毛细管电泳-联吡啶钌电化学发光法同时测定了血浆中的丁卡因与普鲁卡因。
●化学发光免疫分析法化学发光免疫分析法(Chemiluminescencelmmunoassay,CLIA)是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合,用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测分析技术。目前CLIA对药物的检测主要集中在体内药物分析上。
应用:
●杨青等利用化学发光免疫分析法检测了人血清孕酮●高彬文等利用化学发光免疫分析法测定了猪尿中莱克多巴胺残留
●吕干新等则利用化学发光免疫法成功地检测了地高辛血药浓度,为临床合理使用地高辛提供了可靠依据●朱坛则对化学发光免疫分析法在临床中的应用进展进行了综述研究。
目前,国内化学发光免疫分析法免疫系统的研制尚赶不上国外。因此,提高国内化学发光免疫系统的灵敏度和可靠性,研发新的化学发光体系将是日后研究的重点;另外,CLIA与其他分离系统如高效液相色谱、毛细管电泳的联合使用也是目前化学发光免疫分析研究的重点方向。●分子印迹-化学发光法
分子印迹技术(MolecularImprintingPolymer,MIP)是一种制备分子印迹聚合物的技术。MIP具各较高的分离性能,与灵敏度高的化学发光联用后便产生了分子印迹.化学发光法(MIP-CL),该方法可用于复杂样品中痕量物质的测定,尤其对生物样品的测定效果显著。目前,分子印迹-化学发光法广泛应用于尿样中多种药物的分析检验,均取得不错的效果,而对血样中药物的测定目前研究的较少,仍存在进一步研究的空间。分子印迹技术在化学发光的应用中主要集中在分子印迹-化学发光传感器、分子印迹固相萃取-化学发光分析上。
高灵敏度的化学发光检测技术与高选择性的分子印迹技术的在线联用,将拓展化学发光在复杂样品痕量分析中的应用,在体内药物分析中将有很好的应用前景。●微流控芯片化学发光检测技术微流控芯片是将样品的制备、分离、检测等过程集中在一块芯片上,而且是自动化地完成这些过程,目前在化学领域上主要是对生物组分进行检测,具有强大的发展前景。CL/ECL与微流控芯片联用是当前化学发光分析研究的一个新热点。应用:
●Greenway等在酸性Ru(bDy)3²﹢溶液中加入表面活性剂,以电渗流为驱动力,利用Ru(bpy)s²+化学发光体系测定了可卡因。
●Zhao等采用微芯片CE-ECL系统对尿样中的林肯霉素进行了检测,无需前处理,为临床和制药领域林肯霉素的检测提供了一种全新的方法。
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