《中药化学》教学课件

《中药化学》幻灯片本课件PPT仅供大家学习使用学习完请自行删除，谢谢！本课件PPT仅供大家学习使用学习完请自行删除，谢谢！《中药化学》幻灯片本课件PPT仅供大家学习使用一、纸色谱〔PC〕双向纸色谱层析：别离黄酮及黄酮苷第一向：醇性展开剂，如n-BuOH-HOAc-H2O〔4：1：5，上层，BAW〕、t-BuOH-HOAc-H2O〔3：1：1，TBA〕、水饱和正丁醇等正相，极性小的化合物Rf值大。适合游离黄酮。第二向：水性展开剂，如水、2～5％乙酸等。反相，极性大的化合物Rf值大。适合黄酮苷。显色：UV、UV/AlCl3、UV/NH3等。一、纸色谱〔PC〕双向纸色谱层析：别离黄酮及黄酮苷BAW（4:1:5,上层）第一向：醇性展开剂黄酮苷黄酮苷元90°第二向：水性展开剂2％乙酸黄酮苷元黄酮苷一、纸色谱（PC）BAW（4:1:5,上层）第一向：醇性展开剂黄酮苷黄酮苷元9二、薄层色谱法〔TLC〕〔1〕硅胶：适用于极性小的弱酸性黄酮类化合物。展开剂：多用有机溶剂，如氯仿/甲醇。〔2〕聚酰胺：游离黄酮苷元及其苷。展开剂：极性强，大多含醇、酸或水。〔3〕纤维素：别离黄酮苷元及苷。展开剂：醇性或水性。显色：UV、UV/AlCl3、UV/NH3等。二、薄层色谱法〔TLC〕〔1〕硅胶：适用于极性小的弱酸性黄酮第5节黄酮类化合物的构造测定一、紫外光谱（UV）二、红外光谱（IR）三、质谱（MS）四、核磁（NMR）第5节黄酮类化合物的构造测定一、紫外光谱（UV）原理：是分子中某些价电子吸收了一定波长的电磁波,由低能级跃近到高能级而产生的一种光谱。引起分子中电子能级跃迁光波波长范围：100-800nm.λmax：跃迁电子的能级差εmax：电子跃迁的机率

一、紫外光谱〔UV〕原理：是分子中某些价电子吸收了一定波长的电磁波,由低能级跃近一、紫外光谱〔UV〕类型：

σ-σ*<150nmn-σ*150～250nm(N,O)π-π*160～200nm(非共轭)n-π*280～300nm常见化合物

共轭烯烃：π-π*，210～270nm，K带，ε≥104

α,β-不饱和醛酮：n-π*，290～310nm，R带，ε=10-100

一、紫外光谱〔UV〕类型：σ-σ*<150常用术语生色团：分子中产生所示谱带的主要功能团。助色团：与生色团相连使生色团波长红移且强度增大。红〔紫〕移：基团或溶剂的影响，波长增大〔减小〕。增色效应：溶剂或助色团影响，吸收强度增大的效应。减色效应：取代或溶剂的影响，吸收强度减小的效应。溶剂效应：不同溶剂中谱带产生的位移。末端吸收：在仪器极限处测出的吸收。肩峰：吸收曲线在下降或上升处有停顿或增加或降低。一、紫外光谱〔UV〕常用术语一、紫外光谱〔UV〕黄酮类存在桂皮酰基及苯甲酰基组成的交叉共轭体系,在200～400nm间，有两个主要的紫外吸收带。黄酮类化合物的UV光谱B环桂皮酰系统带I：300～

400nmA环苯甲酰系统带II：240～

285nm一、紫外光谱（UV）黄酮类存在桂皮酰基及苯甲酰基组成的交叉共轭体系,在200～判断黄酮类型(峰位、吸收强度)黄酮（醇）：带Ⅰ、带Ⅱ二氢黄酮、异黄酮：带Ⅰ弱，带Ⅱ强查耳酮、橙酮：带Ⅰ强，带Ⅱ弱一、紫外光谱（UV）判断黄酮类型(峰位、吸收强度)一、紫外光谱（UV）《中药化学》教学课件诊断试剂：能使黄酮的酚-OH离解或形成络合物，导致UV光谱变化，对判断构造有诊断意义的试剂。如NaOMe、NaOAc、NaOAc-H3BO3、AlCl3、AlCl3/HCl等。

一、紫外光谱（UV）诊断试剂：一、紫外光谱（UV）带Ⅱ（nm）带Ⅰ（nm）黄酮类型250～280304～350黄酮250～280328～357黄酮醇（3-O苷）250～280358～385黄酮醇（3-OH游离）（一）黄酮、黄酮醇类UV光谱黄酮（醇）在甲醇中的UV光谱特征带Ⅱ（nm）带Ⅰ（nm）黄酮类型250～2803〔一〕黄酮、黄酮醇类〔1〕黄酮与黄酮醇UV图形相似，仅带Ⅰ位置不同，可用于区别。黄酮：304-350nm黄酮醇：352-385nm〔游离〕，328-357nm〔成苷〕

判断C3-OH的有无有

C3-OH

BandⅠλmax＞350nmC3-O糖苷

BandⅠλmax＜350nm〔一〕黄酮、黄酮醇类〔1〕黄酮与黄酮醇UV图形相似，仅带Ⅰ位〔2〕A、B环上的取代基影响相应的吸收峰峰位和峰形如含氧取代基，会使相应吸收带红移。A环：7-OH、-OCH3，Ⅱ红移5-OH，Ⅰ、Ⅱ均红移B环：4’-OH或-OCH3、3-OH，Ⅰ红移假设有邻二酚-OH，会使带Ⅱ歧分，出现肩峰。〔3〕母核上-OH苷化，会引起相应吸收带紫移，特别是带Ⅰ。〔一〕黄酮、黄酮醇类〔2〕A、B环上的取代基影响相应的吸收峰峰位和峰形〔一〕黄（一）黄酮、黄酮醇类（一）黄酮、黄酮醇类利用诊断试剂对黄酮〔醇〕UV光谱的影响检出羟基位置1.甲醇钠〔NaOMe〕2.乙酸钠〔NaOAc〕3.乙酸钠/硼酸〔NaOAc/H3BO3〕4.三氯化铝及三氯化铝/盐酸〔AlCl3与AlCl3/HCl〕〔一〕黄酮、黄酮醇类利用诊断试剂对黄酮〔醇〕UV光谱的影响检出羟基位置〔一〕黄酮〔一〕黄酮、黄酮醇类1.甲醇钠〔NaOMe〕碱性强，使所有酚-OH解离，促进电子跃迁，使相应带红移〔1〕Ⅰ红移40-65nm，强度不变或增强，有4’-OH。〔2〕Ⅰ红移50-60nm，强度减弱，有3-OH〔无4’-OH〕〔3〕7-OH，Ⅱ红移;且在320-330nm有新吸收带,成苷后消失〔4〕含3,4’-、3,3’,4’-、5,3’,4’-、5,6,7-、5,7,8-OH的黄酮类，在NaOMe作用下易氧化破坏，吸收带随测定时间延长而衰退。（确定4’-OH）〔一〕黄酮、黄酮醇类1.甲醇钠〔NaOMe〕（确定4’-《中药化学》教学课件《中药化学》教学课件《中药化学》教学课件〔一〕黄酮、黄酮醇类2.乙酸钠〔NaOAc〕碱性比甲醇钠小，仅使7-、4’-OH解离，相应吸收带红移。〔1〕7-OH，带Ⅱ红移5-20nm；假设6-、8-同时有含氧基，Ⅱ红移很小〔几乎不位移〕。〔2〕4’-OH，带Ⅰ红移40-65nm〔与MeONa一样〕。〔3〕存在碱敏感构造时，如含3,4’-、3,3’,4’-、5,6,7-、5,7,8-OH的黄酮类，吸收带随测定时间延长而衰退。（确定7-OH）〔一〕黄酮、黄酮醇类2.乙酸钠〔NaOAc〕（确定7《中药化学》教学课件〔一〕黄酮、黄酮醇类3.乙酸钠/硼酸〔NaOAc/H3BO3〕母核上有邻二酚-OH，碱性下可与硼酸络合，使相应带红移。

A环：Ⅱ红移5-10nm〔不含5,6-OH〕B环：Ⅰ红移12-30nm（确定邻二酚-OH）〔一〕黄酮、黄酮醇类3.乙酸钠/硼酸〔NaOAc/H3BO4.三氯化铝及三氯化铝/盐酸〔AlCl3与AlCl3/HCl〕铝盐可与5-OH,4-C=O、3-OH,4-C=O、邻二酚OH络合，红移；假设络合物不稳定，加酸分解。络合物的稳定性：3-OH>5-OH>邻二酚OH〔一〕黄酮、黄酮醇类4.三氯化铝及三氯化铝/盐酸〔AlCl3与AlCl3〔1〕样品+AlCl3/HCl与样品+MeOH比较：一样时：既无3-OH，也无5-OH不同时：有3-OH或同时有3-OH及5-OH，Ⅰ红移50-60nm；只有5-OH,Ⅰ红移35-55nm〔2〕样品+AlCl3/HCl与样品+AlCl3比较：一样时：A、B环无邻二酚羟基不同时：B环有邻二酚-OH，紫移30-40nm；B环有邻三酚-OH，紫移20nm。邻二酚-OH在A环，情况类似。〔一〕黄酮、黄酮醇类（确定3-OH、5-OH、邻二酚OH）〔1〕样品+AlCl3/HCl与样品+MeOH比较：〔一〕黄《中药化学》教学课件例：芦丁的UV光谱UVλmaxnm：

MeOH259266sh299sh359NaOMe272327410NaOAc271325393NaOAc/H3BO3262298387AlCl3/HCl271300364sh402AlCl3275303sh433Ⅰ为359nm（＞350）黄酮醇或3-O-苷ΔⅠ=410-359=51nm4’-OHΔⅡ=271-259=12nm7-OHΔⅠ=387-359=28nmB环有邻二-OH

ΔⅠ=402-359=43nm5-OHΔⅠ=402-433=-31nmB环有邻二OH例：芦丁的UV光谱UVλmaxnm：Ⅰ为359nm（＞有苯甲酰系统，无桂皮酰系统，带Ⅱ有很强吸收，带Ⅰ以肩峰或低强度吸收峰出现，区分黄酮及黄酮醇。〔二〕异黄酮、二氢黄酮〔醇〕类有苯甲酰系统，无桂皮酰系统，带Ⅱ有很强吸收，带Ⅰ以肩峰或带Ⅱ（nm）带Ⅰ（nm）类型245～270310～330（肩峰）异黄酮270～295300～330（肩峰）二氢黄酮（醇）〔二〕异黄酮、二氢黄酮〔醇〕类UV加入诊断试剂：同黄酮，但诊断试剂仅影响带Ⅱ，即A环。带Ⅱ（nm）带Ⅰ（nm）3.举例某黄酮化合物有3’-OCH3、5-OH，还有3个-OH，试根据信息确定这三个羟基的位置。UV：〔1〕参加NaOMe，随时间延长而衰退；〔2〕参加NaOAc，I、II均红移；〔3〕参加NaOAc/H3BO3，I、II不变。解析：由〔1〕知，存在碱敏感基团，如3,4’-OH、3,3’,4’-OH、5,6,7-OH、5,7,8-OH、5,3’,4’-OH，但3’-OCH3，故可能是3,4’-OH、5,6,7-OH、5,7,8-OH。由〔2〕知，有7-OH、4’-OH。由〔3〕知，无邻二酚-OH。练习１：3.举例某黄酮化合物有3’-OCH3、5-OH，还有3个-O含1个葡萄糖的黄酮苷，苷元是槲皮素，确定glc的连接位置。UV〔λmax〕：IIIMeOH366250NaOMe随时间延长而衰退NaOAc405264NaOAc/H3BO3366250AlCl3/HCl428265练习2：（黄酮醇）

（3-OH,4’-OH或邻OH）

（7-OH、4’-OH）（无邻二酚-OH）（Δ62,3-OH和5-OH）含1个葡萄糖的黄酮苷，苷元是槲皮素，确定glc的连接位置。练洋芹素葡萄糖苷，分子式为C21H20O10。黄色，盐酸-镁粉反响为橙红色，氧氯化锆-枸橼酸反响黄色褪去，UV光谱如下，推断该化合物构造。练习3：UV苷IIIMeOH268333NaOMe269386NaOAc267387NaOAc/H3BO3267340

UV苷元IIIMeOH267336NaOMe275392NaOAc274376NaOAc/H3BO3268338黄酮或黄酮醇苷带I红移53nm，有4’-OH带II无红移，无7-OHA、B环上无邻二酚-OH

黄酮带I红移56nm，有4’-OH带II红移7nm，有7-OHA、B环上无邻二酚-OH洋芹素葡萄糖苷，分子式为C21H20O10。黄色，盐酸小结类型MeOH带II带I说明黄酮250-285304-350两峰强度基本相同黄酮醇（3-OR）

328-357含氧基↑，红移↑黄酮醇（3-OH）

352-385

异黄酮245-270肩峰A环基团影响带II二氢黄酮（醇）270-295低强度小峰B环基团不影响带I小结类型MeOH带II带I说明黄酮250-285304-3诊断试剂带II带I说明作用NaOMe40-60↑50-60↓随时间延长，逐渐衰减320-330有4’-OH，无3-OH有3-OH，无4’-OH有3,4’-OH或3,3’,4’-OH（衰减更快）有7-OH判断4’-OHNaOAc5-20有7-OH及4’-OH判断7-OHNaOAc/H3BO35-1012-30有6,7-OH或7,8-OHB环有邻二酚羟基判断邻二酚-OHAlCl3/HCl50-6035-55有3,5-二OH或3-OH有5-OH，无3-OH判断3-OH5-OHAlCl3与AlCl3/HCl30-40200B环有邻二酚羟基B环皆有邻三酚羟基A,B环皆无邻二酚羟基判断邻二酚OHUV小结：诊断试剂带II带I说明作用NaOMe40-60↑有4’-二、红外光谱（IR）

原理分子吸收红外光引起的振动能级跃迁和转动能级跃迁而产生的吸收信号。4000-1500cm-1为官能团区，用于官能团鉴定1500-500cm-1为指纹区，用于鉴别两化合物是否相同

应用推断官能团，如苯环、羰基、羟基等

IR相同的化合物，能确定为同一个化合物二、红外光谱（IR）原理40004001500－O－H－N－H①3600～3200③3000～2700－C－H(饱和)O＝C－H⑤1850～1550C＝O＞1700(孤立)＜1700(共轭)②3300～3000＝C－H≡C－H④≈2200C≡NC≡C⑥1600～1450(多峰)苯环主要官能团IR特征吸收40004001500－O－H①3600～3200③3000黄酮类化合物的IR1600-1500cm-1游离：3640-3610cm-1缔合：3500-3200cm-1υC=O，1690-1640cm-1

黄酮类化合物的IR1600-1500cm-质谱能够提供的信息：⑴分子质量：低分辨质谱可以确定分子质量⑵分子式：高分辨质谱仪可以确定分子式⑶鉴定某些官能团：如甲基(m/z15)、羰基(m/z28)、甲氧基(m/z31)、乙酰基(m/z43)……⑷分子结构信息：由分子结构与裂解方式的经验规律,根据碎片离子的m/z及相对丰度RA提供分子结构信息⑸人机问答：给出可能的化合物

三、质谱〔MS〕质谱能够提供的信息：三、质谱〔MS〕常用术语：基峰：离子强度最大的峰，其相对强度或丰度为100。质荷比：离子的质量与所带电荷之比，用m/z表示。分子离子：丧失1个电子生成的带正电荷离子。碎片离子：分子离子裂解产生的所有离子。重排离子：经过重排反响产生的离子。准分子离子：比分子量多〔或少〕1质量单位的离子。三、质谱〔MS〕常用术语：三、质谱〔MS〕电子轰击电离（electronimpactionization,EI）化学电离（chemicalionization,CI）场电离（fieldionization,FI）场解吸（fielddesorption,FD）快原子轰击（fastatombombardment,FAB）基质辅助激光解吸电离（matrix-assistedlaserdesportionionization,MALDI）电喷雾电离（electrosprayionization,ESI）大气压化学电离（atmosphericpressurechemicalionization,APCI）MS分类——离子源三、质谱〔MS〕电子轰击电离（electronimpactionizat黄酮类化合物的MS〔一〕黄酮苷元〔El-MS〕黄酮苷元在电子轰击质谱〔El-MS〕中分子离子峰[M]+较强，且为基峰。〔二〕黄酮苷〔FD-MS、FAB-MS、ESI-MS〕黄酮苷极性强、难气化以及对热不稳定，EI测不到分子离子峰，采用FD-MS和FAB-MS、ESI-MS等软电离质谱技术，可获得强的分子离子峰[M]+、准分子离子峰[M+H]+、[M+Na]+峰。峰强度大，且给出糖基碎片〔外侧糖、内侧糖〕。三、质谱（MS）黄酮类化合物的MS三、质谱（MS）途径-I：（RDA裂解）途径-II：两种裂解方式相互竞争、相互制约。

（一）黄酮苷元(El-MS)途径-I：（一）黄酮苷元(El-MS)（1）黄酮(El-MS)（1）黄酮(El-MS)化合物A1+.B1+.黄酮1201025，7-二氢黄酮1521025，7，4'-三羟基黄酮1521185，7-二羟基，4'-甲氧基黄酮152132黄酮类化合物的质谱数据

（1）黄酮(El-MS)化合物A1+.B1+.黄酮1201025，7-二氢黄酮152〔2〕黄酮醇(El-MS)

大多数黄酮醇苷元的分子离子峰[M+]是基峰，裂解主要按方式Ⅱ进行，得到的B2+.、及其失去CO而形成的[B2-28]+离子具有诊断价值。

根据B2+.和分子离子之间的质荷比之差，可以推断黄酮醇中A环和C环的取代情况〔2〕黄酮醇(El-MS)大多数黄酮醇苷元的分子离

具有2’-OH或2’-OCH3的黄酮醇，易失去-OH或-OCH3形成新的五元杂环。〔2〕黄酮醇具有2’-OH或2’-OCH3的黄酮醇，易失去-OH或-〔二〕黄酮苷MS〔FD、FAB、ESI〕黄酮苷类化合物在FD-MS、FAB-MS、ESI-MS谱可给出强烈的M+及[M+H]+。还给出糖基的某些碎片，为化合物的构造鉴定提供了重要的信息。

〔二〕黄酮苷MS〔FD、FAB、ESI〕黄酮苷类化合物MS小结：黄酮苷元类化合物的两种裂解方式：

黄酮：裂解方式I黄酮醇：裂解方式II判断A、B环的取代情况：根据A1+.、B1+.、B2+.碎片离子可以判断A、B环上-OH的取代；B2+与M+的m/z差可知A、C环的取代。MS小结：黄酮苷元类化合物的两种裂解方式：NMR是由磁性核受幅射而发生跃迁所形成的吸收光谱。研究最多、应用最广的是1H核和13C核的NMR氢谱〔1H-NMR〕碳谱〔13C-NMR〕四、核磁共振谱(NMR)NMR是由磁性核受幅射而发生跃迁所形成的吸收光谱。研究四、核磁共振—氢谱（1H-NMR）化学位移δ（Chemicalshift,）：用于判断H的化学环境和磁环境可提供的结构信息1H核自旋裂分及偶合常数J(Hz)(Couplingconstant)：用于判断H与H的关系积分面积：用于确定H个数四、核磁共振—氢谱（1H-NMR）化学位移δ（Chemic常见质子的化学位移(ppm)：

烷氢：RCH3，0.7-1.2R2CH2，1.3R3CH，1.5烯氢：C=C-H，4.5-7.5芳氢：Ar-H，6-9.5醇：HO-C-H，3.4-4；HO-C-H，1-5.5酸：HOOC-C-H，2-2.6；HOOC-C-H，10.5-12羰基：O=C-C-H，2-2.7醛基：R-CHO，9-10酚：ArO-H，4.8-8.0四、核磁共振谱(1HNMR)常见质子的化学位移(ppm)：四、核磁共振谱(1HNMR偶合常数：偕偶〔Jgem〕:sp3J=10~16Hzsp2C=CH2J=0~3HzN=CH2J=7.6~17Hz邻偶〔Jvic〕:烯型：Jcis=6~12HzJtrans=12~18Hz芳环：J=6~9HzJae=2~6HzJaa=8~13HzJee=2~8Hz远程偶合：苯环Jm=1~3HzJp=0~1Hz四、核磁共振谱(1HNMR)偶合常数：四、核磁共振谱(1HNMR)〔一〕黄酮类化合物的1HNMR黄酮中的主要氢质子：

A环质子B环质子C环质子糖基上的质子取代基上的质子〔一〕黄酮类化合物的1HNMR黄酮中的主要氢质子：1.A环质子〔1〕5,7-二羟基黄酮δH66.9-5.7〔d，J6,8=2.5Hz〕δH86.9-5.7〔d，J8,6=2.5Hz〕δH6<δH8，H-6较H-8高场7-羟基苷化后H-6和H-8信号均向低场移动A（一）黄酮类化合物的1HNMR1.A环质子〔1〕5,7-二羟基黄酮A（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的1HNMRH-6H-8（一）黄酮类化合物的1HNMRH-6H-8(2)7-羟基黄酮δH58.0〔d，J5,6=9)δH67.1-6.3〔dd,J6,5=9,J6,8=2.5〕δH87.1-6.3〔d,J8,6=2.5〕H-5较H-6、H-8低场，是由于羰基的去屏蔽效应的影响。H-6、H-8较5,7-二OH黄酮低场，且相互位置可能颠倒。A（一）黄酮类化合物的1HNMR(2)7-羟基黄酮A（一）黄酮类化合物的1HNMR（一）黄酮类化合物的1HNMR（一）黄酮类化合物的1HNMRB（一）黄酮类化合物的1HNMR2.B环质子

(1)4’-氧化黄酮

δH2’,6’7.5（d,J=8.5）

δH3’,5’6.8（d,J=8.5）

δH-3’,5’<δH-2’,6’

B（一）黄酮类化合物的1HNMR2.B环质子

(1)4’（一）黄酮类化合物的1HNMRH-2’,6’H-3’,5’（一）黄酮类化合物的1HNMRH-2’,6’H-3’,(2)3’,4’-二氧化黄酮：δH6’7.3-7.9〔dd，J6’,5’=8.5；J6’,2’=2.5〕δH2’7.2-7.8〔d，J2’,6’=2.5〕δH5’7.1-6.7〔d，J5’,6’=8.5〕B（一）黄酮类化合物的1HNMR(2)3’,4’-二氧化黄酮：B（一）黄酮类化合物的1H（一）黄酮类化合物的1HNMRH-2’H-5’H-6’（一）黄酮类化合物的1HNMRH-2’H-5’H-6(3)3’,4’,5’-三氧化黄酮：假设R1=R2=R3=H，那么H-2’,6’为单峰，6.7-7.5假设上述条件不成立，那么H-2’,6’分别为二重峰〔J=2Hz〕

B（一）黄酮类化合物的1HNMR(3)3’,4’,5’-三氧化黄酮：B（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的1HNMR（一）黄酮类化合物的1HNMR3.C环质子(1)黄酮δH36.3〔s〕〔易与H6、H8混，但峰形不同，单峰〕

C（一）黄酮类化合物的1HNMR3.C环质子C（一）黄酮类化合物的1HNMR（一）黄酮类化合物的1HNMR（一）黄酮类化合物的1HNMR(2)异黄酮

H-2位于羰基位，受羰基去屏蔽作用，且通过碳与氧相连，故较一般芳香质子低场，δ7.6-7.8。C

δH27.6-7.8（s）（一）黄酮类化合物的1HNMR(2)异黄酮H-2位于羰基位，受羰基去屏蔽作用，且通过（一）黄酮类化合物的1HNMR（一）黄酮类化合物的1HNMR(3)二氢黄酮：H-2,dd,δ5.2Jtrans=11Hz〔反偶〕Jcis=5Hz〔顺偶〕两个H-3,分别为dd峰，中心位于δ2.8H-3eJ=17Hz〔偕偶〕，5Hz〔顺偶〕H-3aJ=17Hz〔偕偶〕，11Hz〔反偶〕23C（一）黄酮类化合物的1HNMR(3)二氢黄酮：23C（一）黄酮类化合物的1HNMR（一）黄酮类化合物的1HNMR（一）黄酮类化合物的1HNMR〔4〕二氢黄酮醇H-2与H-3为反式双直立键，J=11Hz，双重峰H-2δ4.8-5.0H-3δ4.1-4.33-OR苷化，供电子能力下降，两个氢的向低场位移。（一）黄酮类化合物的1HNMR〔4〕二氢黄酮醇（一）黄酮类化合物的1HNMR（一）黄酮类化合物的1HNMR（一）黄酮类化合物的1HNMR（5）查耳酮：

（一）黄酮类化合物的1HNMR（5）查耳酮：（一）黄酮类化合物的1HNMR（6）橙酮：

（一）黄酮类化合物的1HNMR（6）橙酮：（一）黄酮类化合物的1HNMR4.糖上质子在糖的1H-NMR中：端基质子——δ4.5~5.5ppm其它质子——δ3.5~4.5ppm鼠李糖的C-CH3——δ0.7~1.2ppm〔dJ=6.5Hz〕（一）黄酮类化合物的1HNMR4.糖上质子（一）黄酮类化合物的1HNMR〔1〕单糖苷端基质子的峰位于成苷的位置以及糖的种类有关：葡萄糖苷：C3-OR，1’’-H：5.7-6.0C-5,C-6,C-7,C-4’-OR,1’’-H：4.8-5.2鼠李糖苷：C3-OR，1’’-H：5.0-5.1C-7-OR,1’’-H：5.1-5.3（一）黄酮类化合物的1HNMR〔1〕单糖苷（一）黄酮类化合物的1HNMRH-2’为a键:（一）黄酮类化合物的1HNMR可通过糖上C1-H与C2-H的偶合常数，来判断苷键的构型（α、β）H-2’为a键:（一）黄酮类化合物的1HNMR可通过糖上CH-2’为e键:无法用J值判断苷键的构型。ａ-L-鼠李糖苷J1’2=Jee=2-3Hzβ-L-鼠李糖苷J1’2=Jae=2-3Hz（一）黄酮类化合物的1HNMRH-2’为e键:无法用J值判断苷键的构型。ａ-L-鼠李糖苷〔1〕双糖苷：末端糖上的H-1’’’因离黄酮母核较远，受到的去屏蔽作用较小，因而较与苷元直接相连的糖的H-1’’处于较高场的位置。δH1’’’末端<δH1’’与苷元相连（一）黄酮类化合物的1HNMR〔1〕双糖苷：末端糖上的H-1’’’因离黄酮母核较远，受到的(5)其他质子酚-OH：δH5-OH12.4δH7-OH10.9δH3-OH9.7C6-CH3，C8-CH3：2.45-2.05,δC6-CH3<δC8-CH3-OCH3：4.1-3.5〔3H,s〕-OCOCH3：糖-OH乙酰化，2.1-1.65〔3H,s〕酚-OH乙酰化，2.5-2.3〔3H,s〕（一）黄酮类化合物的1HNMR(5)其他质子（一）黄酮类化合物的1HNMR某黄酮化合物1H-NMR数据如下：

δppm：6.18(1H,d,J=2H)6.38(1H,s)6.50(1H,d,J=2Hz)6.90(2H,d,J=8Hz)7.70(2H,d,J=8Hz)6-H3-H8-H3’,5’-H2’,6’-H练习某黄酮化合物1H-NMR数据如下：δppm：6.1四、核磁共振—碳谱（13C-NMR）化学位移δ（Chemicalshift,）用于判断13C的化学环境和磁环境可提供的结构信息峰高或峰面积常规13C谱不提供积分曲线等定量数据四、核磁共振—碳谱（13C-NMR）化学位移δ（Chem各种常见的13C核的化学位移如下：四、核磁共振——碳谱（13C-NMR）各种常见的13C核的化学位移如下：四、核磁共振——碳谱（(二)黄酮类化合物的13CNMR(二)黄酮类化合物的13CNMRC=OC-2(或C-β)C-3(或C-α)归属168.6~169.8(s)137.8~140.7(d)122.1~122.3(s)异橙酮类

174.5~184.0(s)160.5~163.2(s)104.7~111.8(d)黄酮类149.8~155.4(d)122.3~125.9(s)异黄酮类147.9(s)136.0(d)黄酮醇类182.5~182.7(s)146.1~147.7(s)111.6~111.9(d)(=CH-)橙酮类

188.0~197.0(s)

136.9~145.4(d)116.6~128.1(d)查耳酮类75.0~80.3(d)42.8~44.6(t)二氢黄酮类82.7(d)71.2(d)二氢黄酮醇类C=OC-2(或C-β)C-3(或C-α)归属168.6~1确定黄酮类化合物的取代图示：

XZiZoZmZpOH26.9-12.71.4-7.3OCH330.2-14.70.9-8.1(二)黄酮类化合物的13CNMR确定黄酮类化合物的取代图示：XZiZoZmZpOH26.9-(二)黄酮类化合物的13CNMR(二)黄酮类化合物的13CNMR《中药化学》教学课件《中药化学》教学课件NMR小结：黄酮母核：A环：5,7-OH，δ6-H(d),δ8-H(d)=6.9-5.77-OH，δ6-H(dd),δ8-H(d)=7.1-6.3；δ5-H(d)=8B环：4’-OR，δH-2’,6’(d),δH-3’,5’(d)=7.9-6.53’,4’-OR，H-6’(dd，2,8Hz)；H-2’(d,2Hz)；H-5’(d,2Hz)3’,4’,5’-OR，取代基一样：s，δH-6’(d),δH-2’(d)=7.5-6.5C环：黄酮δH-3(s)=6.3糖基质子：葡萄糖，δH-其他<δH-1’’(d)=6.0-4.8鼠李糖，δH-1’’(d)=5.0其他质子：δAr-OHδ5-OH=12.4δ7-OH=10.9δ3-OH=9.7δ-OCH3=4.1-3.5δ-COCH3=2.1NMR小结：黄酮母核：槲皮素的光谱数据

IR:3500-3000(-OH),1670,1620(C=O)槲皮素的光谱数据

IR:3500-3000(-OH),1UVmax(MeOH):371,256,206UVmax(MeOH):371,256,206EI-MS:302(M+100%),274(M+-CO),273(M+-CHO),245(273-CO),153,152,137,109,77EI-MS:302(M+100%),274(M+-CO),《中药化学》教学课件《中药化学》教学课件从唇形科植物中分得一成分为淡黄色结晶I，分子式为C21H22O11。定性反响：三氯化铁，蓝绿色盐酸-镁粉反响，橙色Molish反响，紫色环氧氯化锆-枸橼酸反响，黄色褪去UV〔λmax〕：IIIMeOH256266sh348NaOMe264301sh394NaOAc259406NaOAc/H3BO4258353AlCl3/HCl273295sh357387示有酚-OH示为黄酮类化合物示有糖或苷示有5-OHI为348nm，示无3-OHI红移46nm，示有4’-OH无7-OH无邻二酚-OHI红移，示有5-OH例1：从唇形科植物中分得一成分为淡黄色结晶I，分子式为C21H22IRυmaxcm-1：3350(-OH)，1659(C=O)，1603，1490(苯)。1HNMR(DMSO-d6TMS)：δppm6.3(1H,s)6.7(1H,d,J=2.5)7.0(1H,d,J=2.5)6.8(2H,d,J=8.0)8.1(2H,d,J=8.0)I用酸水解，水解产物为II和母液，母液经PC鉴定为一鼠李糖〔鼠李糖苷〕；II经重结晶，测定其分子式为C15H10O6，盐酸-镁粉、三氯化铁反响阳性，与锆盐-枸橼酸反响黄色褪去，Molish反响为阴性〔无糖基〕。3-H6-H8-H3’,5’-H2’,6’-HIRυmaxcm-1：3350(-OH)，16从黄芩根中别离出成分I的数据如下：浅黄色结晶，mp.300-302℃(dec)。化学检查：三氯化铁，阳性盐酸-镁粉反响，阳性Gibbs反响，阴性氨性氯化锶反响，阴性元素分析C16H12O6。MSm/z(%)：300(M+,55.6)，285(100)〔M-15为基峰，示有-OCH3〕，118(19.4)〔B环产生的碎片〕。UV〔λmax〕：MeOH277328NaOAc284390AlCl3/HCl274373NaOMe284395示有酚-OH示为黄酮类化合物示C8无H，即被取代示无邻二酚-OHI为328nm，示无3-OHII红移，示有7-OH示有5-OH示有4’-OH例2：从黄芩根中别离出成分I的数据如下：示有酚-OHIRυmaxcm-1：3430，3200(-OH)，1660(C=O)，1610，1580(苯)。

1HNMR(DMSO-d6)：δppm3.82(3H,s)6.20(1H,s)6.68(1H,s)6.87(2H,d,J=9)7.81(2H,d,J=9)

-OCH36-H3-H3’,5’-H2’,6’-HIRυmaxcm-1：3430，3200(-O百蕊草素〔I〕的构造测定:浅黄色结晶，mp.190-192℃化学检查：三氯化铁，暗褐色盐酸-镁粉反响，紫红色Molish反响，紫色环氧氯化锆-枸橼酸反响，黄色褪去氨性氯化锶反响，阴性UV〔λmax〕：IIIMeOH264346NaOMe273390320shNaOAc271395NaOAc/H3BO3264346AlCl3/HCl272303348395示有酚-OH示为黄酮类化合物示有糖或苷示有5-OH示无邻二酚-OHI为346nm，示无3-OHI红移44nm，示有4’-OHII红移，示有7-OH无邻二酚-OH示有5-OH例3：百蕊草素〔I〕的构造测定:示有酚-OH用5%硫酸水解，过滤，〔1〕沉淀物与锆盐-枸橼酸试剂反响，黄色不褪，沉淀物的UV参加NaOMe后，随测定时间延长而衰退；〔2〕母液用氢氧化钡中和，过滤，滤液经浓缩后进展PPC，检出葡萄糖和鼠李糖；百蕊草素〔I〕测1HNMR：δppm0.95(3H,d,J=6)3.52-5.70(12H,m)6.83,(1H,d,J=2)7.26(1H,d,J=2)7.20(2H,d,J=9)8.01(2H,d,J=9)文献值：glc-rha在1,4连接时，mp.190-192℃。rha-CH3糖-HA环H6A环H8B环H3’,5’B环H2’,6’用5%硫酸水解，过滤，〔1〕沉淀物与锆盐复习思考题：1.名词解释黄酮类化合物穿插共轭体系双向层析盐酸镁粉反响四氢硼钠反响二氯化锆枸橼酸反响氨性氯化锶反响2.问答题〔1〕认识黄酮类化合物的根本母核及二级构造。〔2〕比较不同类型的黄酮化合物的颜色、溶解度及酸性，并说明理由。〔3〕分别用光谱法及化学法区分或鉴别各黄酮类化合物。〔4〕根据黄酮类化合物的性质，简述提取、别离及检识黄酮类化合的方法，说明pH值对此过程的影响，并设计流程图。〔5〕黄酮及黄酮苷进展纸层析时，分别以醇性展开剂、水性展开剂展开，比较Rf值大小。〔6〕说明在聚酰胺柱和SephadexLH-20柱上，以甲醇为洗脱剂时，不同黄酮类化合物的流出顺序，并说明理由。〔7〕简述黄酮及黄酮醇质谱裂解规律，并比较异同点。〔8〕如何利用化学显色法及波谱法推断黄酮类化合物的构造？复习思考题：1.名词解释ThankYouforYourAttention!ThankYouforYourAttention!《中药化学》幻灯片本课件PPT仅供大家学习使用学习完请自行删除，谢谢！本课件PPT仅供大家学习使用学习完请自行删除，谢谢！《中药化学》幻灯片本课件PPT仅供大家学习使用一、纸色谱〔PC〕双向纸色谱层析：别离黄酮及黄酮苷第一向：醇性展开剂，如n-BuOH-HOAc-H2O〔4：1：5，上层，BAW〕、t-BuOH-HOAc-H2O〔3：1：1，TBA〕、水饱和正丁醇等正相，极性小的化合物Rf值大。适合游离黄酮。第二向：水性展开剂，如水、2～5％乙酸等。反相，极性大的化合物Rf值大。适合黄酮苷。显色：UV、UV/AlCl3、UV/NH3等。一、纸色谱〔PC〕双向纸色谱层析：别离黄酮及黄酮苷BAW（4:1:5,上层）第一向：醇性展开剂黄酮苷黄酮苷元90°第二向：水性展开剂2％乙酸黄酮苷元黄酮苷一、纸色谱（PC）BAW（4:1:5,上层）第一向：醇性展开剂黄酮苷黄酮苷元9二、薄层色谱法〔TLC〕〔1〕硅胶：适用于极性小的弱酸性黄酮类化合物。展开剂：多用有机溶剂，如氯仿/甲醇。〔2〕聚酰胺：游离黄酮苷元及其苷。展开剂：极性强，大多含醇、酸或水。〔3〕纤维素：别离黄酮苷元及苷。展开剂：醇性或水性。显色：UV、UV/AlCl3、UV/NH3等。二、薄层色谱法〔TLC〕〔1〕硅胶：适用于极性小的弱酸性黄酮第5节黄酮类化合物的构造测定一、紫外光谱（UV）二、红外光谱（IR）三、质谱（MS）四、核磁（NMR）第5节黄酮类化合物的构造测定一、紫外光谱（UV）原理：是分子中某些价电子吸收了一定波长的电磁波,由低能级跃近到高能级而产生的一种光谱。引起分子中电子能级跃迁光波波长范围：100-800nm.λmax：跃迁电子的能级差εmax：电子跃迁的机率

一、紫外光谱〔UV〕原理：是分子中某些价电子吸收了一定波长的电磁波,由低能级跃近一、紫外光谱〔UV〕类型：

σ-σ*<150nmn-σ*150～250nm(N,O)π-π*160～200nm(非共轭)n-π*280～300nm常见化合物

共轭烯烃：π-π*，210～270nm，K带，ε≥104

α,β-不饱和醛酮：n-π*，290～310nm，R带，ε=10-100

一、紫外光谱〔UV〕类型：σ-σ*<150常用术语生色团：分子中产生所示谱带的主要功能团。助色团：与生色团相连使生色团波长红移且强度增大。红〔紫〕移：基团或溶剂的影响，波长增大〔减小〕。增色效应：溶剂或助色团影响，吸收强度增大的效应。减色效应：取代或溶剂的影响，吸收强度减小的效应。溶剂效应：不同溶剂中谱带产生的位移。末端吸收：在仪器极限处测出的吸收。肩峰：吸收曲线在下降或上升处有停顿或增加或降低。一、紫外光谱〔UV〕常用术语一、紫外光谱〔UV〕黄酮类存在桂皮酰基及苯甲酰基组成的交叉共轭体系,在200～400nm间，有两个主要的紫外吸收带。黄酮类化合物的UV光谱B环桂皮酰系统带I：300～

400nmA环苯甲酰系统带II：240～

285nm一、紫外光谱（UV）黄酮类存在桂皮酰基及苯甲酰基组成的交叉共轭体系,在200～判断黄酮类型(峰位、吸收强度)黄酮（醇）：带Ⅰ、带Ⅱ二氢黄酮、异黄酮：带Ⅰ弱，带Ⅱ强查耳酮、橙酮：带Ⅰ强，带Ⅱ弱一、紫外光谱（UV）判断黄酮类型(峰位、吸收强度)一、紫外光谱（UV）《中药化学》教学课件诊断试剂：能使黄酮的酚-OH离解或形成络合物，导致UV光谱变化，对判断构造有诊断意义的试剂。如NaOMe、NaOAc、NaOAc-H3BO3、AlCl3、AlCl3/HCl等。

一、紫外光谱（UV）诊断试剂：一、紫外光谱（UV）带Ⅱ（nm）带Ⅰ（nm）黄酮类型250～280304～350黄酮250～280328～357黄酮醇（3-O苷）250～280358～385黄酮醇（3-OH游离）（一）黄酮、黄酮醇类UV光谱黄酮（醇）在甲醇中的UV光谱特征带Ⅱ（nm）带Ⅰ（nm）黄酮类型250～2803〔一〕黄酮、黄酮醇类〔1〕黄酮与黄酮醇UV图形相似，仅带Ⅰ位置不同，可用于区别。黄酮：304-350nm黄酮醇：352-385nm〔游离〕，328-357nm〔成苷〕

判断C3-OH的有无有

C3-OH

BandⅠλmax＞350nmC3-O糖苷

BandⅠλmax＜350nm〔一〕黄酮、黄酮醇类〔1〕黄酮与黄酮醇UV图形相似，仅带Ⅰ位〔2〕A、B环上的取代基影响相应的吸收峰峰位和峰形如含氧取代基，会使相应吸收带红移。A环：7-OH、-OCH3，Ⅱ红移5-OH，Ⅰ、Ⅱ均红移B环：4’-OH或-OCH3、3-OH，Ⅰ红移假设有邻二酚-OH，会使带Ⅱ歧分，出现肩峰。〔3〕母核上-OH苷化，会引起相应吸收带紫移，特别是带Ⅰ。〔一〕黄酮、黄酮醇类〔2〕A、B环上的取代基影响相应的吸收峰峰位和峰形〔一〕黄（一）黄酮、黄酮醇类（一）黄酮、黄酮醇类利用诊断试剂对黄酮〔醇〕UV光谱的影响检出羟基位置1.甲醇钠〔NaOMe〕2.乙酸钠〔NaOAc〕3.乙酸钠/硼酸〔NaOAc/H3BO3〕4.三氯化铝及三氯化铝/盐酸〔AlCl3与AlCl3/HCl〕〔一〕黄酮、黄酮醇类利用诊断试剂对黄酮〔醇〕UV光谱的影响检出羟基位置〔一〕黄酮〔一〕黄酮、黄酮醇类1.甲醇钠〔NaOMe〕碱性强，使所有酚-OH解离，促进电子跃迁，使相应带红移〔1〕Ⅰ红移40-65nm，强度不变或增强，有4’-OH。〔2〕Ⅰ红移50-60nm，强度减弱，有3-OH〔无4’-OH〕〔3〕7-OH，Ⅱ红移;且在320-330nm有新吸收带,成苷后消失〔4〕含3,4’-、3,3’,4’-、5,3’,4’-、5,6,7-、5,7,8-OH的黄酮类，在NaOMe作用下易氧化破坏，吸收带随测定时间延长而衰退。（确定4’-OH）〔一〕黄酮、黄酮醇类1.甲醇钠〔NaOMe〕（确定4’-《中药化学》教学课件《中药化学》教学课件《中药化学》教学课件〔一〕黄酮、黄酮醇类2.乙酸钠〔NaOAc〕碱性比甲醇钠小，仅使7-、4’-OH解离，相应吸收带红移。〔1〕7-OH，带Ⅱ红移5-20nm；假设6-、8-同时有含氧基，Ⅱ红移很小〔几乎不位移〕。〔2〕4’-OH，带Ⅰ红移40-65nm〔与MeONa一样〕。〔3〕存在碱敏感构造时，如含3,4’-、3,3’,4’-、5,6,7-、5,7,8-OH的黄酮类，吸收带随测定时间延长而衰退。（确定7-OH）〔一〕黄酮、黄酮醇类2.乙酸钠〔NaOAc〕（确定7《中药化学》教学课件〔一〕黄酮、黄酮醇类3.乙酸钠/硼酸〔NaOAc/H3BO3〕母核上有邻二酚-OH，碱性下可与硼酸络合，使相应带红移。

A环：Ⅱ红移5-10nm〔不含5,6-OH〕B环：Ⅰ红移12-30nm（确定邻二酚-OH）〔一〕黄酮、黄酮醇类3.乙酸钠/硼酸〔NaOAc/H3BO4.三氯化铝及三氯化铝/盐酸〔AlCl3与AlCl3/HCl〕铝盐可与5-OH,4-C=O、3-OH,4-C=O、邻二酚OH络合，红移；假设络合物不稳定，加酸分解。络合物的稳定性：3-OH>5-OH>邻二酚OH〔一〕黄酮、黄酮醇类4.三氯化铝及三氯化铝/盐酸〔AlCl3与AlCl3〔1〕样品+AlCl3/HCl与样品+MeOH比较：一样时：既无3-OH，也无5-OH不同时：有3-OH或同时有3-OH及5-OH，Ⅰ红移50-60nm；只有5-OH,Ⅰ红移35-55nm〔2〕样品+AlCl3/HCl与样品+AlCl3比较：一样时：A、B环无邻二酚羟基不同时：B环有邻二酚-OH，紫移30-40nm；B环有邻三酚-OH，紫移20nm。邻二酚-OH在A环，情况类似。〔一〕黄酮、黄酮醇类（确定3-OH、5-OH、邻二酚OH）〔1〕样品+AlCl3/HCl与样品+MeOH比较：〔一〕黄《中药化学》教学课件例：芦丁的UV光谱UVλmaxnm：

MeOH259266sh299sh359NaOMe272327410NaOAc271325393NaOAc/H3BO3262298387AlCl3/HCl271300364sh402AlCl3275303sh433Ⅰ为359nm（＞350）黄酮醇或3-O-苷ΔⅠ=410-359=51nm4’-OHΔⅡ=271-259=12nm7-OHΔⅠ=387-359=28nmB环有邻二-OH

ΔⅠ=402-359=43nm5-OHΔⅠ=402-433=-31nmB环有邻二OH例：芦丁的UV光谱UVλmaxnm：Ⅰ为359nm（＞有苯甲酰系统，无桂皮酰系统，带Ⅱ有很强吸收，带Ⅰ以肩峰或低强度吸收峰出现，区分黄酮及黄酮醇。〔二〕异黄酮、二氢黄酮〔醇〕类有苯甲酰系统，无桂皮酰系统，带Ⅱ有很强吸收，带Ⅰ以肩峰或带Ⅱ（nm）带Ⅰ（nm）类型245～270310～330（肩峰）异黄酮270～295300～330（肩峰）二氢黄酮（醇）〔二〕异黄酮、二氢黄酮〔醇〕类UV加入诊断试剂：同黄酮，但诊断试剂仅影响带Ⅱ，即A环。带Ⅱ（nm）带Ⅰ（nm）3.举例某黄酮化合物有3’-OCH3、5-OH，还有3个-OH，试根据信息确定这三个羟基的位置。UV：〔1〕参加NaOMe，随时间延长而衰退；〔2〕参加NaOAc，I、II均红移；〔3〕参加NaOAc/H3BO3，I、II不变。解析：由〔1〕知，存在碱敏感基团，如3,4’-OH、3,3’,4’-OH、5,6,7-OH、5,7,8-OH、5,3’,4’-OH，但3’-OCH3，故可能是3,4’-OH、5,6,7-OH、5,7,8-OH。由〔2〕知，有7-OH、4’-OH。由〔3〕知，无邻二酚-OH。练习１：3.举例某黄酮化合物有3’-OCH3、5-OH，还有3个-O含1个葡萄糖的黄酮苷，苷元是槲皮素，确定glc的连接位置。UV〔λmax〕：IIIMeOH366250NaOMe随时间延长而衰退NaOAc405264NaOAc/H3BO3366250AlCl3/HCl428265练习2：（黄酮醇）

（3-OH,4’-OH或邻OH）

（7-OH、4’-OH）（无邻二酚-OH）（Δ62,3-OH和5-OH）含1个葡萄糖的黄酮苷，苷元是槲皮素，确定glc的连接位置。练洋芹素葡萄糖苷，分子式为C21H20O10。黄色，盐酸-镁粉反响为橙红色，氧氯化锆-枸橼酸反响黄色褪去，UV光谱如下，推断该化合物构造。练习3：UV苷IIIMeOH268333NaOMe269386NaOAc267387NaOAc/H3BO3267340

UV苷元IIIMeOH267336NaOMe275392NaOAc274376NaOAc/H3BO3268338黄酮或黄酮醇苷带I红移53nm，有4’-OH带II无红移，无7-OHA、B环上无邻二酚-OH

黄酮带I红移56nm，有4’-OH带II红移7nm，有7-OHA、B环上无邻二酚-OH洋芹素葡萄糖苷，分子式为C21H20O10。黄色，盐酸小结类型MeOH带II带I说明黄酮250-285304-350两峰强度基本相同黄酮醇（3-OR）

328-357含氧基↑，红移↑黄酮醇（3-OH）

352-385

异黄酮245-270肩峰A环基团影响带II二氢黄酮（醇）270-295低强度小峰B环基团不影响带I小结类型MeOH带II带I说明黄酮250-285304-3诊断试剂带II带I说明作用NaOMe40-60↑50-60↓随时间延长，逐渐衰减320-330有4’-OH，无3-OH有3-OH，无4’-OH有3,4’-OH或3,3’,4’-OH（衰减更快）有7-OH判断4’-OHNaOAc5-20有7-OH及4’-OH判断7-OHNaOAc/H3BO35-1012-30有6,7-OH或7,8-OHB环有邻二酚羟基判断邻二酚-OHAlCl3/HCl50-6035-55有3,5-二OH或3-OH有5-OH，无3-OH判断3-OH5-OHAlCl3与AlCl3/HCl30-40200B环有邻二酚羟基B环皆有邻三酚羟基A,B环皆无邻二酚羟基判断邻二酚OHUV小结：诊断试剂带II带I说明作用NaOMe40-60↑有4’-二、红外光谱（IR）

原理分子吸收红外光引起的振动能级跃迁和转动能级跃迁而产生的吸收信号。4000-1500cm-1为官能团区，用于官能团鉴定1500-500cm-1为指纹区，用于鉴别两化合物是否相同

应用推断官能团，如苯环、羰基、羟基等

IR相同的化合物，能确定为同一个化合物二、红外光谱（IR）原理40004001500－O－H－N－H①3600～3200③3000～2700－C－H(饱和)O＝C－H⑤1850～1550C＝O＞1700(孤立)＜1700(共轭)②3300～3000＝C－H≡C－H④≈2200C≡NC≡C⑥1600～1450(多峰)苯环主要官能团IR特征吸收40004001500－O－H①3600～3200③3000黄酮类化合物的IR1600-1500cm-1游离：3640-3610cm-1缔合：3500-3200cm-1υC=O，1690-1640cm-1

黄酮类化合物的IR1600-1500cm-质谱能够提供的信息：⑴分子质量：低分辨质谱可以确定分子质量⑵分子式：高分辨质谱仪可以确定分子式⑶鉴定某些官能团：如甲基(m/z15)、羰基(m/z28)、甲氧基(m/z31)、乙酰基(m/z43)……⑷分子结构信息：由分子结构与裂解方式的经验规律,根据碎片离子的m/z及相对丰度RA提供分子结构信息⑸人机问答：给出可能的化合物

三、质谱〔MS〕质谱能够提供的信息：三、质谱〔MS〕常用术语：基峰：离子强度最大的峰，其相对强度或丰度为100。质荷比：离子的质量与所带电荷之比，用m/z表示。分子离子：丧失1个电子生成的带正电荷离子。碎片离子：分子离子裂解产生的所有离子。重排离子：经过重排反响产生的离子。准分子离子：比分子量多〔或少〕1质量单位的离子。三、质谱〔MS〕常用术语：三、质谱〔MS〕电子轰击电离（electronimpactionization,EI）化学电离（chemicalionization,CI）场电离（fieldionization,FI）场解吸（fielddesorption,FD）快原子轰击（fastatombombardment,FAB）基质辅助激光解吸电离（matrix-assistedlaserdesportionionization,MALDI）电喷雾电离（electrosprayionization,ESI）大气压化学电离（atmosphericpressurechemicalionization,APCI）MS分类——离子源三、质谱〔MS〕电子轰击电离（electronimpactionizat黄酮类化合物的MS〔一〕黄酮苷元〔El-MS〕黄酮苷元在电子轰击质谱〔El-MS〕中分子离子峰[M]+较强，且为基峰。〔二〕黄酮苷〔FD-MS、FAB-MS、ESI-MS〕黄酮苷极性强、难气化以及对热不稳定，EI测不到分子离子峰，采用FD-MS和FAB-MS、ESI-MS等软电离质谱技术，可获得强的分子离子峰[M]+、准分子离子峰[M+H]+、[M+Na]+峰。峰强度大，且给出糖基碎片〔外侧糖、内侧糖〕。三、质谱（MS）黄酮类化合物的MS三、质谱（MS）途径-I：（RDA裂解）途径-II：两种裂解方式相互竞争、相互制约。

（一）黄酮苷元(El-MS)途径-I：（一）黄酮苷元(El-MS)（1）黄酮(El-MS)