医院环境微生物监测标准操作规程

医院环境微生物监测标准操作规程一、监测指征1．感染暴发或感染流行时，环境因素在感染传播中有流行病学意义。2．监测潜在的危险环境状况，证明有危险的病原体存在或证明危险的病原体已被成功清除。3．当某项感染控制措施改变时，评估其效果；或者根据规范要求，仪器设备或系统启用时监测。4．目标性监测的需要。5．循证医学证据支持。二、空气监测（沉降法）（一）采样时间：消毒处理后与进行医疗活动之前。（二）采样高度：距地面垂直高度80～150cm。（三）采样点设置1．非洁净房间：室内面积≤30㎡，在对角线上设里、中、外3点。里、外两点位置各距墙1m；室内面积>30㎡，设东、西、南、北、中5点。其中东、西、南、北4点均距墙1m。9cm直径普通营养琼脂平板在采样点暴露5min后送检培养。2．洁净房间：清洁房间在空态或静态条件下，根据房间的不同清洁级别进行布点，操作按照GB50333—2002。9cm直径普通营养琼脂平板在采样点暴露30min后送检培养。（四）采样注意事项1．采样人员做好手部卫生，佩戴口罩、帽子等个人防护装备。进入清洁房间采样须穿洁服。2．皿盖打开顺序应先内后外；手臂及头不可越过培养皿上方；行走及放置动作要轻，尽量减少对空气流动状态的影响；皿盖应扣放，以防污染。3．采样结束后，由外向内合上皿盖。4．采样完毕的培养皿应在6h内培养。（五）实验室检验1．培养皿在37℃培养48h后，进行菌落计数和致病菌检验。普通营养琼脂培养基的配制按照GB／T4789．28—2003；菌落计数方法按照GB\T7918．2—1987；致病菌检验：溶血性链球菌检验按照GB／T4789．11—2003，沙门菌检验按照CB\T4789．4—2003，铜绿假单胞菌检验按照GB／T7918．4—1987，金黄色葡萄球菌检验按照CB\T7918．5—1987，，2．计算结果：非洁净房间以100c㎡的平皿在空气中暴露5min即相当于10L空气中的细菌数，计算公式为：细菌数（cfu／m3）=1000÷（A／100×t×10／5）×N=50000N／At式中：t——平皿暴露于空气中的时间（min）；N—一培养后平皿上的菌落数（cfu／平皿）；A——所用平皿的面积（c㎡）。洁净房间直接以“个／（30min·Φ90）”平皿为单位计算结果。（六）结果判断：参照GB15982—1995《医院消毒卫生标准》。三、物体表面监测（一）采样时间：消毒处理后4h内。（二）采样方法被采样本面积<100c㎡取全部表面；如采样面积≥100c㎡，连续采样4个位置（不可有重叠），每个位置采5cm×5cm的大小，用浸有无菌生理盐水的棉拭子1支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次，并随之转动棉拭子，剪去手接触部位后，将棉拭子投入10ml无菌生理盐水试管内。不规则的物体表面，用棉拭子直接涂擦，采样面积≥30c㎡（三）采样注意事项1．送检时间不得超过6h，若样品保存于4℃，则不得超过24h。2．消毒后采样一定要采用中和剂，不同消毒剂所用中和剂不同，可参考2002版《消毒技术规范》。（四）实验室检验1．取1m1倾注培养，平行双份。37℃培养48h，进行菌落计数和致病菌检验。普通营养琼脂培养基的配制按照GB／T4789．28—2003；菌落计数方法按照（3B／T7918．2—1987；致病菌检验与空气监测相同。