微生物实验思考题

微生物实验思虑题微生物实验思虑题微生物实验思虑题微生物实验思虑题1、用油镜察看时应该注意哪些问题？在载破片和镜头之间加滴什么油？起什么作用？答：应该先用擦镜纸将镜头擦洁净,以防前一次实验的污染.操作时,先低倍再高倍.用完要擦掉油.加滴香柏油。作用：增加折光率,也就是增加了显微镜的分辨率.2、依照实验领悟，谈谈应怎样依照所察看微生物的大小，选择不同样的物镜进行有效的察看。答：细菌用油镜,真菌用高倍镜.都是先用低倍镜找到目标后,再用高倍镜调到合适的视野和合适的清楚度.放线菌、酵母菌、多细胞真菌相对较大，用放大40倍的物镜就能够看了，细菌小，要用放大1000倍的物镜看，感觉还很小。病毒那就要用电子显微镜看了。3、哪些环节会影响革兰氏染色结果的正确性？其中最重点的环节是什么？答：涂片环节、加热固定环节、脱色环节；其中最重点的环节是脱色环节。4、进行革兰氏染色时，为什么特别重申菌龄不能够太老，用老龄细菌染色会出现什么问题？答：着色不均，染色收效不好。阴性阳性不明显分不太清楚,问题是：不便于显微镜下察看是阳性菌仍是阴性菌。5、革兰氏染色时，初染前能加碘液吗?乙醇脱色后复染从前，革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌应分别是什么颜色?答：不能够。由于碘与染料会结合成大分子，使得染料分子不能够穿过细胞的细胞壁，对实验结果造成影响。脱色后复染前，革兰氏阳性菌呈紫色，阴性菌无色。6、不经过复染这一步，可否差异革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌？答：不能够。在复染从前，革兰氏阴性菌是无色透明的，在显微镜下很难察看到；或许脱色过分，也会造成阳性菌脱色，不经过复染，无法进一步差异。7、你认为制备细菌染色标本时,应该注意哪些环节?答:1制备合适的培养基2在超净工作台进步行,保持无菌环境3对培养基,接种环等物品的高温高压灭菌.4倒置培养基,防备冷凝水内流8.为什么要求制片完好干燥后才能用油镜察看?答:1、若未完好干燥,载玻片上的液领悟污染油镜镜头。镜头特别精巧,被污染后不利于下次察看；2、若未完好干燥，水滴会影响油与玻璃之间折光率，造成视野不够清楚。若是涂片未以热固定,将会出现什么问题?加热温度过高、时间太长，又会怎么样呢？答:若是没有加热固定的话，水分蒸发太慢或许在染色时菌领悟被冲刷掉；若是加热时间过久，菌体变形或形态损坏，无法染色。制备培养基的一般程序是什么？答：称量——溶解—调PH值—融化琼脂—过滤分装—包扎标记——灭菌——倒平板做过本次实验后，你认为在制备培养基时要注意些什么问题？答：溶解配料的水要合适；PH要调到7.3左右；要小心手提式高压锅的使用；倒平板时要防备培养基被污染灭菌在微生物学实验操作中有何重要意义？答：防备培养基被污染；防备杂菌影响实验结果试述高压蒸汽灭菌的操作方法和原理。答：高压灭菌的原理是：在密闭的蒸锅内，其中的蒸汽不能够外溢，压力不断上升，使水的沸点不断提高，进而锅内温度也随之增加。在0.1MPa的压力下，锅内温度达121℃。在此蒸汽温度下，能够很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。操作方法：加水——装料、加盖——排气——升压、保压、和降压——取料14.高压蒸汽灭菌时应注意哪些事项？答：第一，无菌包不宜过大，不宜过紧，各包裹间要有空隙，使蒸汽能对流易浸透到包裹央。第二，布类物品应放在金属类物品上，否则蒸汽遇冷凝聚成水珠，使包布受潮。阻碍蒸汽进入包裹中央，严重影响灭菌收效。第三，如期检查灭菌收效。

中15.试述怎样在接种中，贯彻无菌操作的原则

?答：保持操作台的无菌状态与在无菌室操作；

操作前，要进行手的消毒；接种环要加热灭

菌；接种物品要标记。以斜面上的菌种接种到新的斜面培养基为例说明操作方法和注意事项。答：在接种箱或许超净工作台上.将母种经过消毒办理今后,在酒精灯火焰区上方翻开棉塞用接种针挑取一小块菌丝体,接入新的试管培养基上即可.

.17.试设计一个实验，从土壤中分别酵母菌并进行计数。答：无标准答案。18.在酵母菌死活细胞的察看中，使用美蓝液有什么作用？答：差异死活细胞。19.为什么要用乳酸-石碳酸溶液作霉菌水浸片？答：用乳酸-石炭酸的优点是可使细胞不变形，时间；能防备孢子周围飞散。

拥有杀菌、防腐作用；不易干燥，能保持较

长20.细菌与霉菌的菌落有何差异？答：细菌菌落圆滑，易于基质走开；霉菌菌落较大、菌丝修长,菌落松懈,呈绒毛状、蜘蛛网状、棉絮状,无固定大小,多有光彩,不易挑。21.怎样划分霉菌与放线菌的菌落？什么是扩展性菌落？答：霉菌的菌落形态较大,质地一般比放线菌松懈,细胞分化明显菌丝粗壮有核菌落边缘有粗丝状细胞生长快有霉味。而霉菌经常形成复杂的孢子囊孢子梗等构造。放线菌菌落小菌丝细而均匀菌落边缘可见细丝状细胞有泥腥味，放线菌的分生孢子形态构造简单。扩展性菌落：就是原来培养的细菌由于发生扩散,形成的一些非预期的菌落,平常这些菌落会影响正常实验察看,能够用药物控制.可否用血球计数板在油镜下进行计数？为什么？答：不能够。计数时滴在血球计数板上的是菌悬液，相当于在镜头和计数板直接加了一层水。水层会降低视野的亮度和显微镜的分辨率，造成菌体和网格线不清楚。依照自己领悟，说明血球计数板计数的误差主要来自那些方面？怎样减少误差？答：误差主要来自试剂误差、方法误差、仪器误差；减少误差有保持样品的纯净、细胞溶液必定震荡均匀、样品浓度要适中、血球计数板要齐整清楚。菌种珍藏中，白腊油的作用是什么？答：作用是密封。防备空气进入，降低菌种的生理活性。经常使用的细菌菌株，使用哪一种珍藏方法比较好？答：用甘油冷冻珍藏方法保留，在液体培养基中加入百分子十五的甘油，尔后低温冷冻-7度）左右。食品查验为什么要测定细菌菌落总数？答：测定细菌菌落总数是查验食品纯度程度的指标。也是判断其保留能力的指标。实验操作怎样使数据可靠?答：1、向平皿倾注液体时,平皿仅轻轻开启即可；2、检样从开始稀释到倾注最后一个平皿所用时间不宜高出20min.3、培养液和检液在培养皿内要摇匀；4、培养液倾注培养皿时温度要在45摄氏度,免得烫死菌落.食品中检出的菌落总数可否代表该食品上的所有细菌数？为什么？答：不能够代表该食品上所有细菌数。由于在实验过程中会造成细菌的损失或死亡、食品上的细菌包括了各种各种的微生物。29.为什么营养琼脂培养基在使用前要保持在（46±1）℃的温度？答：营养琼脂是用来做菌落总数项目的,若是太热就会将细菌烫死,而太冷则琼脂还没倒就凝结了（凝结点大概在40度）。大肠菌群查验中为什么第一要用乳糖胆盐发酵管？答：由于乳糖胆盐发酵管中的成分有溴甲酚紫，中性时呈蓝紫色，酸性时呈黄色，若是颜不变（呈蓝紫色），说明无产酸的大肠菌群；若是颜色变黄色，说明可能出现能分解乳

色糖产酸的大肠菌群；胆盐能够控制其余细菌生长生殖；看杜氏小管中可否有气体，判断可否为分解乳糖产酸产气的大肠菌群。做空白比较实验的目的?答：目的是查验培养基可否碰到污染，考证无菌操作。为什么大肠菌群的查验要经过复发酵才能证明答：初发酵是样品的发酵结果，不是大肠菌群纯菌的发酵试验，有可能受其余杂菌影响判断结果。进行证明试验防备假阳性结果。33.复发酵为什么使用乳糖发酵管但不需加胆盐?答：胆盐能控制革兰氏阳性菌等杂菌生长.在初发酵，培养基已经加入胆盐控制革兰氏阳性菌生长，并在EMB培养基进步行分别培养，因此复发酵培养时无需乳糖发酵管，免得大肠菌肠碰到控制。内容总结

（1）微生物实验思虑题

1、用油镜察看时应该注意哪些问题

（2）4、进行革兰氏染色