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文档简介
项目4抗原抗体反应的临床检验
4-1凝集反应检测人体血型
解决的问题:我们为什么要用凝集反应检测人体血型?我们用什么材料和设备完成此检测?我们怎么进行此检测?我们怎么进行结果判定?还有哪些其他相关知识需要我们拓展?项目4抗原抗体反应的临床检验
4-1问题一我们为什么要用凝集反应检测人体血型?问题一接到工作任务
你作为医院检验科的一名临床检验人员在5月12日接到一个工作任务:用凝集反应检测一批人体血样,判定血型。这个工作需要你了解反应原理,并能够用试剂检测血样,给出正确的结论。项目4-1凝集反应检测人体血型
按照医院的标准操作规程开展检测工作。接到工作任务你作为医院检验科的一名临床检验人员在5月项目背景
凝集反应检测人体血型[实验原理]:红细胞作为颗粒性抗原与相应的抗体或抗体血清混合后,在电解质参与下,经过一定时间,抗原抗体凝聚成肉眼可见的凝集块,这种现象称为凝集反应。血清中的抗体称为凝集素,抗原称为凝集原。项目4-1凝集反应检测人体血型项目背景
凝集反应检测人体血型项目4-1凝集反应检测人体血一、基本概念凝集反应定义:
颗粒性抗原(细菌、红细胞等)与相应抗体,在适宜条件下发生结合,出现的肉眼可见的凝集现象。项目6凝集反应检测人体血型直接凝集技术特点:抗原是较大的颗粒性物质反应形成的凝集物主要由抗原物质组成反应效价多以抗体稀释度判定间接凝集技术项目4-1凝集反应检测人体血型一、基本概念凝集反应定义:项目6凝集反应检测人体血型直接凝定义:
细菌、细胞等颗粒性抗原,在适当电解质参与下可直接与相应抗体结合出现凝集,称为直接凝集反应。操作步骤项目4-1凝集反应检测人体血型一、基本概念1.直接凝集技术临床意义:输血交叉配血试验伤寒、副伤寒的肥达试验玻片法试管法定义:操作步骤项目4-1凝集反应检测人体血型一、基本概念1玻片法颗粒性抗原已知抗体……玻片法颗粒性抗原已知…1:21:41:81:161:321:641:128各管血清倍比稀释加入抗原各管抗原量不变振摇混匀、37℃孵育有无凝集出现明显凝集现象的最高稀释倍数为凝集效价:1:64试管法凝集试示意图验AbAgAb试管法
1:21:41:81:161:321:641:128各管血清定义:将可溶性抗原或抗体先吸附于适当大小的颗粒性载体表面(这种载体与免疫无关),然后与相应抗体或抗原结合,在适量的电解质存在下,出现特异性凝集现象,称为间接凝集反应。操作步骤项目4-1凝集反应检测人体血型一、基本概念1.间接凝集技术载体种类:载体微球(红细胞)聚苯乙烯胶乳微球正向间接凝集试验反向间接凝集试验间接凝集抑制试验协同凝集试验定义:操作步骤项目4-1凝集反应检测人体血型一、基本概念1正向间接凝集试验+↓+↓载体微球可溶性抗原免疫微球抗体免疫微球凝集原理:诊断试剂:抗原致敏载体微球检测:标本中是否存在相应抗体。结果判定:阳性:凝集阴性:无现象正向间接凝集试验+↓+↓载体微球可溶性抗原免疫微球抗体免疫微反向间接凝集试验+↓+↓载体微球抗体免疫微球可溶性抗原免疫微球凝集原理:诊断试剂:抗体致敏载体微球检测:标本中是否存在相应抗原。结果判定:阳性:凝集阴性:无现象反向间接凝集试验+↓+↓载体微球抗体免疫微球可溶性抗原免疫微问题二我们用什么材料和设备完成此检测?问题二酶项目4-1凝集反应检测人体血型备注:A型标准血清(含抗B凝集素,使B型、AB型红细胞的凝集原凝集);B型标准血清(含抗A凝集素,使A型、AB型红细胞的凝集原凝集);器具试剂酶项目4-1凝集反应检测人体血型备注:器具试剂问题三我们怎么进行此检测?问题三第一步玻片准备项目4-1凝集反应检测人体血型①取1个玻璃载玻片,放在一张白纸上,在载玻片左边写检测这名字,玻片左上角写“A”右上角写“B”。②用小滴管吸A型标准血清,滴1滴在左侧,用另一小滴管吸B型标准血清,滴1滴在右侧。观看录像第一步玻片准备项目4-1凝集反应检测人体血型①取1个玻实验材料手指载玻片、白纸、记号笔、酒精棉、ABO血清标品实验材料手指载玻片、白纸、记号笔、酒精棉、ABO血清标①消毒受检者的指尖。第二步血型测定项目4-1凝集反应检测人体血型③待血流出后用小滴管吸1滴血,各滴一滴在左侧抗A血清和右侧抗B血清中。②捏紧指尖,用消毒过的采血针迅速刺破皮肤。④混合A型和B型标准血清和红细胞悬液。⑤静置数分钟后,放在低倍镜下观察凝集现象。①消毒受检者的指尖。第二步血型测定项目4-1凝集反应检实验步骤做标记,准备材料取血采样实验步骤做标记,准备材料问题四我们怎么进行结果判定?问题四结果判定项目4-1凝集反应检测人体血型阳性凝集阴性未凝集++++:出现大的凝集块,液体完全清亮透明,即100%凝集。+++:有明显的凝集片,液体几乎完全透明,即75%凝集。++:有可见的凝集片,液体不甚透明,即50%凝集。+:液体混浊,有小的颗粒状物,即25%的凝集。-:液体均匀混浊,即不凝集。结果判定项目4-1凝集反应检测人体血型阳性凝集阴性未凝集+实验步骤滴加标准血清混合实验步骤滴加标准血清混合问题五还有哪些其他相关拓展知识需要我们了解?问题五抗原和抗体的结合是互补性的特异性结合不形成牢固的共价键,通过非共价键结合这种弱的结合力涉及几种分子间的作用力
一、抗原抗体结合力*(1)静电引力*(2)范德华引力*(3)氢键结合力*(4)疏水作用力拓展知识一
抗原和抗体的结合力项目4-1凝集反应检测人体血型抗原和抗体的结合是互补性的特异性结合一、抗原抗体结合力抗原抗体氢键结合力
ONONHH静电引力--++范得华力-++-+--+疏水作用力排斥的水项目4-1凝集反应检测人体血型1.抗原和抗体的结合力示意图抗原抗体氢键结合力OOH静电引力-+范得华力-++-*亲和性是抗体分子上一个抗原结合点与对应的抗原决定簇之间的相适应性而存在着的引力,这是抗原与抗体之间固有的结合力。*亲和力(avidity)
是指反应系统中复杂抗原与相应抗体之间的结合能力。亲和力与亲和性、抗体的结合价和抗原的有效决定簇数目相关。亲和力越大,抗原抗体结合越牢固。2.抗原和抗体的亲和性项目4-1凝集反应检测人体血型*亲和性是抗体分子上一个抗原结合点与对*亲和力(av*1.特异性*2.比例性*3.可逆性
拓展知识二抗原抗体反应特点项目4-1凝集反应检测人体血型*概念:抗原分子,只能与由它刺激所产生的抗体结合而起反应的专一性能。决定因素:由抗原决定簇和抗体分子超变区之间空间结构的互补性决定的。*1.特异性*2.比例性抗原抗体反应特异性示意图项目4-1凝集反应检测人体血型抗原抗体反应特异性示意图项目4-1凝集反应检测人体血型*最适比或等价点最迅速出现沉淀时的抗原抗体的浓度比或量比。
等价带抗原与抗体分子比例合适的范围。
带现象:Ag与Ab比例不适而不出现可见反应。*前带(prozone)抗体过量时。*后代(postzone)
抗原过量时。2.抗原抗体反应比例性项目4-1凝集反应检测人体血型*最适比或等价点等价带抗原与抗体分子比例合适的范围。带现抗体过量比例合适抗原的量抗原过量抗体沉淀的量前带等价带后带抗原抗体反应比例性示意图抗体过量比例合适抗原的量抗原过量抗体沉淀的量前带等价带后带抗概念:是指抗原与抗体结合成复合物后,在一定条件下可解离为游离抗原与抗体的特性。
3.抗原抗体反应可逆性项目4-1凝集反应检测人体血型概念:是指抗原与抗体结合成复合物后,在3.抗原抗体反应可逆性抗体混有SPAg抗体-SPAg抗体-SPAg分离剂一、抗原抗体结合二、分离抗体抗体可逆性示意图抗体混有SPAg抗体-SPAg抗体-SPAg分离剂一、抗原抗作业:父母的血型与子女的血型关系作业:父母的血型与子女的血型关系
项目4抗原抗体反应的临床检验
4-1凝集反应检测人体血型
解决的问题:我们为什么要用凝集反应检测人体血型?我们用什么材料和设备完成此检测?我们怎么进行此检测?我们怎么进行结果判定?还有哪些其他相关知识需要我们拓展?项目4抗原抗体反应的临床检验
4-1问题一我们为什么要用凝集反应检测人体血型?问题一接到工作任务
你作为医院检验科的一名临床检验人员在5月12日接到一个工作任务:用凝集反应检测一批人体血样,判定血型。这个工作需要你了解反应原理,并能够用试剂检测血样,给出正确的结论。项目4-1凝集反应检测人体血型
按照医院的标准操作规程开展检测工作。接到工作任务你作为医院检验科的一名临床检验人员在5月项目背景
凝集反应检测人体血型[实验原理]:红细胞作为颗粒性抗原与相应的抗体或抗体血清混合后,在电解质参与下,经过一定时间,抗原抗体凝聚成肉眼可见的凝集块,这种现象称为凝集反应。血清中的抗体称为凝集素,抗原称为凝集原。项目4-1凝集反应检测人体血型项目背景
凝集反应检测人体血型项目4-1凝集反应检测人体血一、基本概念凝集反应定义:
颗粒性抗原(细菌、红细胞等)与相应抗体,在适宜条件下发生结合,出现的肉眼可见的凝集现象。项目6凝集反应检测人体血型直接凝集技术特点:抗原是较大的颗粒性物质反应形成的凝集物主要由抗原物质组成反应效价多以抗体稀释度判定间接凝集技术项目4-1凝集反应检测人体血型一、基本概念凝集反应定义:项目6凝集反应检测人体血型直接凝定义:
细菌、细胞等颗粒性抗原,在适当电解质参与下可直接与相应抗体结合出现凝集,称为直接凝集反应。操作步骤项目4-1凝集反应检测人体血型一、基本概念1.直接凝集技术临床意义:输血交叉配血试验伤寒、副伤寒的肥达试验玻片法试管法定义:操作步骤项目4-1凝集反应检测人体血型一、基本概念1玻片法颗粒性抗原已知抗体……玻片法颗粒性抗原已知…1:21:41:81:161:321:641:128各管血清倍比稀释加入抗原各管抗原量不变振摇混匀、37℃孵育有无凝集出现明显凝集现象的最高稀释倍数为凝集效价:1:64试管法凝集试示意图验AbAgAb试管法
1:21:41:81:161:321:641:128各管血清定义:将可溶性抗原或抗体先吸附于适当大小的颗粒性载体表面(这种载体与免疫无关),然后与相应抗体或抗原结合,在适量的电解质存在下,出现特异性凝集现象,称为间接凝集反应。操作步骤项目4-1凝集反应检测人体血型一、基本概念1.间接凝集技术载体种类:载体微球(红细胞)聚苯乙烯胶乳微球正向间接凝集试验反向间接凝集试验间接凝集抑制试验协同凝集试验定义:操作步骤项目4-1凝集反应检测人体血型一、基本概念1正向间接凝集试验+↓+↓载体微球可溶性抗原免疫微球抗体免疫微球凝集原理:诊断试剂:抗原致敏载体微球检测:标本中是否存在相应抗体。结果判定:阳性:凝集阴性:无现象正向间接凝集试验+↓+↓载体微球可溶性抗原免疫微球抗体免疫微反向间接凝集试验+↓+↓载体微球抗体免疫微球可溶性抗原免疫微球凝集原理:诊断试剂:抗体致敏载体微球检测:标本中是否存在相应抗原。结果判定:阳性:凝集阴性:无现象反向间接凝集试验+↓+↓载体微球抗体免疫微球可溶性抗原免疫微问题二我们用什么材料和设备完成此检测?问题二酶项目4-1凝集反应检测人体血型备注:A型标准血清(含抗B凝集素,使B型、AB型红细胞的凝集原凝集);B型标准血清(含抗A凝集素,使A型、AB型红细胞的凝集原凝集);器具试剂酶项目4-1凝集反应检测人体血型备注:器具试剂问题三我们怎么进行此检测?问题三第一步玻片准备项目4-1凝集反应检测人体血型①取1个玻璃载玻片,放在一张白纸上,在载玻片左边写检测这名字,玻片左上角写“A”右上角写“B”。②用小滴管吸A型标准血清,滴1滴在左侧,用另一小滴管吸B型标准血清,滴1滴在右侧。观看录像第一步玻片准备项目4-1凝集反应检测人体血型①取1个玻实验材料手指载玻片、白纸、记号笔、酒精棉、ABO血清标品实验材料手指载玻片、白纸、记号笔、酒精棉、ABO血清标①消毒受检者的指尖。第二步血型测定项目4-1凝集反应检测人体血型③待血流出后用小滴管吸1滴血,各滴一滴在左侧抗A血清和右侧抗B血清中。②捏紧指尖,用消毒过的采血针迅速刺破皮肤。④混合A型和B型标准血清和红细胞悬液。⑤静置数分钟后,放在低倍镜下观察凝集现象。①消毒受检者的指尖。第二步血型测定项目4-1凝集反应检实验步骤做标记,准备材料取血采样实验步骤做标记,准备材料问题四我们怎么进行结果判定?问题四结果判定项目4-1凝集反应检测人体血型阳性凝集阴性未凝集++++:出现大的凝集块,液体完全清亮透明,即100%凝集。+++:有明显的凝集片,液体几乎完全透明,即75%凝集。++:有可见的凝集片,液体不甚透明,即50%凝集。+:液体混浊,有小的颗粒状物,即25%的凝集。-:液体均匀混浊,即不凝集。结果判定项目4-1凝集反应检测人体血型阳性凝集阴性未凝集+实验步骤滴加标准血清混合实验步骤滴加标准血清混合问题五还有哪些其他相关拓展知识需要我们了解?问题五抗原和抗体的结合是互补性的特异性结合不形成牢固的共价键,通过非共价键结合这种弱的结合力涉及几种分子间的作用力
一、抗原抗体结合力*(1)静电引力*(2)范德华引力*(3)氢键结合力*(4)疏水作用力拓展知识一
抗原和抗体的结合力项目4-1凝集反应检测人体血型抗原和抗体的结合是互补性的特异性结合一、抗原抗体结合力抗原抗体氢键结合力
ONONHH静电引力--++范得华力-++-+--+疏水作用力排斥的水项目4-1凝集反应检测人体血型1.抗原和抗体的结合力示意图抗原抗体氢键结合力OOH静电引力-+范得华力-++-*亲和性是抗体分子上一个抗原结合点与对应的抗原决定簇之间的相适应性而存在着的引力,这是抗原与抗体之间固有的结合力。*亲和力(avidity)
是指反应系统中复杂抗原与相应抗体之间的结合能力。亲和力与亲和性、抗体的结合价和抗原的有效决定簇数目相关。亲和力越大,抗原抗体结合越牢固。2.抗原和抗体的亲和性项目4-1凝集反应检测人体血型
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