试验中医学教学大纲

《实验中医学》教学大纲方肇勤上海中医药大学基础医学院实验中医学教研室

(2013/9/23)一、前言实验中医学是采用科学实验的方法研究和发展中医学的一门学科。《实验中医学》是中医基础学科的重要课程。《实验中医学》课程的主要授课对象为中医院校的本科生，包括中医专业，中医基础医学专业，针灸专业，推拿专业和中药专业等。开设课程目的是介绍实验中医学的进展，培养学生采用现代科学的实验方法和技术研究和发展中医学的素质和能力；培养学生的科研思维和实验能力，在继承的基础上，开展中医现代化研究，发扬中医药的优势，为发展中医药事业和人类的健康事业作出贡献。本教材分七个章：第一章绪论；第二章实验中医学的基本方法；第三章中医临床实验研究；第四章中医动物实验研究；第五章中医细胞生物学实验研究；第六章实验中医学常用实验方法及其应用；第七章实验指导。二、教学内容和要求第一章绪论［目的要求］.掌握实验中医学的性质、内容和任务。.掌握学习实验中医学的注意事项。.了解实验中医学的发展简史。［教学内容］.实验中医学的性质、内容和任务。.实验中医学发展简史。.学习实验中医学的注意事项。第二章实验中医学的基本方法［目的要求］.掌握中医文献的收集与研究方法。.掌握中医实验研究的基本方法和要求(1)选题。(2)实验研究设计。包括实验设计的3个基本原则、研究设计的基本要素、样本大小的确定、常用实验设计方案。(3)研究准备。(4)实验实施。(5)常见的偏倚、误差及控制方法。(6)实验数据统计分析。(7)原始材料归类与存档。(8)研究论文撰写与答辩。.了解中医药实验研究的道德(1)以人为被试的研究准则，以及世界医学大会赫尔辛基宣言《人体医学研究的伦理准则》。(2)以动物为被试的研究准则。(3)严禁科学欺骗。.了解古典中医文献的主要参考书。［教学内容］第一节中医文献的收集与研究.中医文献在实验研究中的重要性。.古典中医文献的收集、整理与研究(1)中医古典文献的特点。(2)中医古典文献收集的原则。(3)中医古典文献的收集方法。(4)中医古典文献的整理与研究。.当代中医文献的收集、整理与研究(1)充分利用大型工具书。(2)深入挖掘名老中医经验。(3)重视利用现代检索技术方法。(4)借助统计学方法进行文献研究。.古典中医文献的主要参考书。第二节中医实验研究的基本方法和要求.选题。.实验研究设计(1)实验设计的3个基本原则。(2)研究设计的基本要素。(3)样本大小的确定。(4)常用实验设计方案。.研究准备。.实验实施。.常见的偏倚、误差及控制方法。.实验数据统计分析。.原始材料归类与存档。.研究论文撰写与答辩。第三节中医药实验研究的道德.以人为被试的研究准则。.以动物为被试的研究准则。.严禁科学欺骗。.附录：世界医学大会赫尔辛基宣言《人体医学研究的伦理准贝IJ》。第三章中医临床实验研究［目的要求］.掌握中医临床实验的基本方法。.掌握中医临床实验设计，包括临床实验设计的3个基本要素、4个基本原则和方法，以及临床实验设计的一些方案。.掌握中医临床实验的质量控制。.掌握中医辨证方法与标准。.掌握中医治疗学实验的主要方法。.了解中医临床实验的一些方法及沿革，包括古代和现代中医临床采用的一些研究方法。.了解舌诊和脉象的实验研究。.了解中医证本质的实验研究。.了解中医治疗学实验研究的案例与进展。［教学内容］第一节中医临床实验的基本方法1.中医临床实验的一些方法及沿革（1）古代中医临床采用的一些研究方法。（2）现代中医临床采用的一些研究方法：流行病学、循证医学、实验、数理统计、信息科学、社会科学和软科学方法。.中医临床实验设计（1）中医临床实验设计及其意义。（2）临床实验设计的3个基本要素一一研究对象、处理因素、实验效应。（3）临床实验设计的4个基本原则和方法一一对照、随机、重复、盲法。（4）临床实验设计的一些方案：自身对照设计、配对设计、交叉设计、完全随机设计、随机区组设计、序贯实验设计、队列研究、病例-对照研究。.中医临床实验的质量控制（1）偏倚的产生及控制：选择偏倚、测量偏倚、混杂偏倚。（2）机遇的认识与控制。（3）依从性的评价及改善措施。第二节中医诊断学实验研究.舌诊的实验研究。.脉象的实验研究。.中医辨证方法与标准的研究（1）中医辨证方法。（2）一些代表性的辨证标准。(3)症状严重程度与疗效评价标准。4.中医证本质的实验研究(1)血瘀证的实验研究。(2)脾虚证的实验研究。第三节中医治疗学实验研究.中医治疗学实验的主要方法(1)遵循中医临床实验的基本方法。(2)临床治疗学研究的方法。(3)临床治疗学的临床前实验。.中医治疗学实验研究的案例(1)胆宁片治疗慢性胆囊炎、胆石病的临床试验。(2)醒脑开窍针刺法治疗中风750例临床回顾研究。(3)中西医结合治疗急腹症。(4)支气管哮喘的治疗研究。(5)回族汤瓶八诊疗法。(6)壮医的特色诊疗方法。第四章中医动物实验研究［目的要求］.掌握动物实验的一般原则和方法。包括实验动物的选择，以及中医动物实验研究的注意点。.掌握中医证候动物模型的建立方法。.掌握常用实验动物大鼠、小鼠的四诊和辨证方法。.了解证候动物模型的开创和发展。.了解大鼠、小鼠的四诊和辨证方法的创建与发展。.了解动物实验在中医研究中的应用。涉及：藏象气血理论，针刺镇痛，血瘀与活血化瘀研究，治则与治法研究，中药资源开发，中药生物工程，中药炮制与药性、药效，青蒿素类药物药效学研究，中药毒性研究，中药复方药代动力学研究，方剂研究等。［教学内容］第一节动物实验的一般原则和方法.实验动物的选择。.中医动物实验研究的注意点。第二节证候动物模型与实验动物辨证.证候动物模型的开创和发展(1)证本质和证动物模型的开创和发展。(2)中医证候动物模型的复制方法。(3)动物模型研究存在的问题及展望。.大鼠、小鼠的四诊和辨证方法的创建与发展(1)大鼠、小鼠的四诊采集。(2)大鼠、小鼠计量化、标准化四诊采集。(3)大鼠、小鼠常见证候辨证标准。(4)大鼠、小鼠计量辨证方法和标准。第三节动物实验在中医研究中的应用.藏象气血理论。.针刺镇痛。.血瘀与活血化瘀研究。.治则与治法研究。.中药资源开发。.中药生物工程。.中药炮制与药性、药效。.青蒿素类药物药效学研究。.中药毒性研究。.中药复方药代动力学研究。.方剂研究。第五章中医细胞生物学实验研究［目的要求］.掌握细胞生物学的基本概念及内容。包括细胞的基本结构与功能、细胞的增殖与分化、细胞的衰老与死亡。.掌握细胞培养的概念和方法。.掌握中药血清药理学的概念和方法。.了解细胞生物学的其它常用研究技术。包括显微镜技术、细胞化学技术、细胞周期分析、细胞凋亡的测定、细胞结构成分的离心分离技术、分子生物学技术等。.了解细胞生物学技术在中医研究中应用的现状。［教学内容］第一节细胞生物学.细胞的基本结构与功能。.细胞的增殖与分化。.细胞的衰老与死亡。第二节细胞生物学常用实验技术.细胞培养技术(1)细胞体外培养的一般条件。(2)细胞的冻存与复苏。(3)培养细胞的生长与观察。.显微镜技术。.中药血清药理学(1)中药血清药理学实验方法的提出。(2)中药血清药理学实验方法的主要内容。.细胞化学技术。.细胞周期分析。.细胞凋亡的测定。.细胞结构成分的离心分离技术。.分子生物学技术。第三节细胞生物学技术在中医研究中的应用.中药资源的开发与利用。.中药药理研究的体外实验(1)中药制剂的体外实验。(2)中药有效成分的体外实验。.中医基础理论的探讨。第六章实验中医学常用实验方法及其应用［目的要求］.掌握生理学、形态学、生物化学、分子生物学等不同学科实验研究方法的特点和优势。.掌握依据实验研究的不同目的，选择合适的实验技术和综合多种技术。.了解生理学的主要方法及其在中医研究中的应用。.了解形态学的主要方法及其在中医研究中的应用。包括解剖学、病理解剖学方法，组织学、病理学方法，电子显微镜方法。.了解生物化学的主要方法及其在中医研究中的应用。.了解分子生物学的主要方法及其在中医研究中的应用。［教学内容］第一节生理学方法及其在中医研究中的应用.生理学的主要方法(1)生理学实验常用仪器：刺激系统，探测系统，信号调节系统，显示、记录系统，机体或离体组织生命维持设备/保障系统。(2)生理学实验常用方法：神经系统、循环系统、呼吸系统、消化系统。.实验中医学应用生理学方法的现状与案例(1)肾的研究。(2)脾的研究。第二节形态学方法及其在中医研究中的应用.形态学的主要方法(1)解剖学、病理解剖学方法。(2)组织学、病理学方法：普通光镜标本制备技术，涂片、铺片、磨片标本的制备，组织化学，免疫组织化学，放射自显影，流式细胞术，激光扫描共聚焦显微术，细胞凋亡检测技术，组织学常用显微镜，病理细胞的采集与观察。(3)电子显微镜方法：电子显微镜(透射电镜、扫描电镜)、电子显微术、病理超微结构观察。.实验中医学应用形态学方法的现状与案例（1）藏象理论：肾、脾、肝、心、肺的研究。（2）证候理论：实热、虚热证候的研究，血瘀证候的研究，温病营血证候的研究。（3）经络理论。（4）新近发展形态学技术的引进。第三节生物化学方法及其在中医研究中的应用.生物化学的主要方法（1）生物大分子物质的分离和提纯；（2）离心技术；（3）层析技术；（4）电泳技术；（5）光谱技术；（6）其他。.实验中医学应用生物化学方法的现状与案例（1）阴虚与阳虚；（2）心气虚；（3）肝和肝虚证；（4）脾虚证；（5）肺虚证；（6）肾虚与物质代谢；（7）体质学说。第四节分子生物学方法及其在中医研究中的应用.分子生物学的主要技术和方法（1）载体；（2）分子克隆常用酶；（3）重组载体；（4）DNA的凝胶电泳；（5）真核细胞RNA的制备；（6）Northernblot；（7）基因表达谱芯片和DNA阵列技术；（8）标记DNA或RNA探针；（9）cDNA文库构建；（10）真核细胞DNA的提取；（11）DNA文库构建；（12）Southernblot；（13）DNA的测序；（14）PCR、DD-PCR和RT-PCR；（15）DNA的诱变；（16）克隆化基因在大肠杆菌和哺乳动物培养细胞中表达；（17）克隆化基因所表达蛋白质的检测和分析；（18）Westernblot；（19）蛋白双向电泳。.实验中医学应用分子生物学方法的现状与案例（1）分子生物学技术在中医基础理论研究中的应用：肾本质的研究、中医药延缓衰老的研究、瘀血和活血化瘀治法的研究、治则治法研究。（2）分子生物学技术在中医临床上的应用。（3）分子生物学技术在针灸研究中的应用。（4）分子生物技术在方药研究中的应用：在方剂研究中的应用、在中药研究中的应用（中药品种鉴定与质量评价、中药材药效评价与筛选、改良中药品质和提高药品质量）。第七章实验指导［目的要求］1.目的（1）增进学生对实验中医学的理解。（2）培养初步的中医学实验技术和能力。2.要求（1）积极、热情投入。最大程度地激发出学习与探索的潜能和积极性。要求勤思考、勤观察、勤提问、勤动手。（2）认真参与实验研究的每一个过程，在研究中去观察问题，发现问题，思考问题，提出问题，参考文献，综合分析，得出合理的研究结论。培养分析问题的能力、解决问题的能力。（3）要求在学习研究中要求发扬团队协作精神。（4）要求培养科学的实事求是学风，客观地进行实验设计、分析报道实验结果。（5）掌握各实验的实验原理。（6）掌握各实验所用的仪器设备，药品，试剂的调试，准备和配制以及全部实验准备工作。（7）掌握各实验的具体操作技术和方法，做好观察和记录。（8）掌握实验结果的统计方法，准确分析实验结果。（9）掌握实验报告的撰写方法。［教学内容］实验一实验的一些基本要求与技术。实验二动物实验的基本方法与技术。实验三小鼠的四诊和辨证方法及体质筛选。实验四“气能摄血”实验。实验五生三七粉对小鼠凝血时间的作用。实验六不同治法对利血平气虚证小鼠的作用比较。实验七不同治法对环磷酰胺阳虚证小鼠的作用比较。实验八不同急性胃溃疡模型小鼠的比较及评价。实验九肺气肿和肺气虚证大鼠模型的建立。实验十气虚血瘀证局灶性脑缺血大鼠模型及中药干预。实验十一温病卫气营血动物模型实验。［教学方法］.理论与教学实验配合如下：第一章“绪论”：实验一“实验的一些基本要求与技术”，实验室示教和配制试剂，为学生进入实验室进行准备。第二章“实验中医学的基本方法”：实验二“动物实验的基本方法与技术”，包括小鼠、大鼠、家兔的抓取固定、标记编号、给药、采血、麻醉、处死、解剖等技术培训。第三章“中医临床实验研究”：实验三“小鼠的四诊和辨证方法及体质筛选”，以及实验四、五两个小的动物实验，以增进四诊和辨证标准，及治疗方法验证与发展的理解，熟练动物实验技能。第四章“中医动物实验研究”：实验六、七，观察证候动物造模后的证候属性，以及不同治法的作用与异同。第五章“中医细胞生物学实验研究”，鉴于大多细胞培养室有严格的无菌操作要求，建议采用示教或采用多媒体教学。第六章“实验中医学常用实验方法及其应用”：实验八、九、十，我国常见病动物模型，以及实验十一的外感热病动物模型，及其治疗干预。有关形态学、生理学、生物化学、分子生物学实验，分别出现在实验六及以后的各章节中，可以安排对应的实验操作。.在观摩教学课件后，学员自愿分组，4〜6人一组，以小组为单位开展实验。三、参考性教学时数分配.理论课36个学时。大致安排为：理论课内容（学时） 总学时TOC\o"1-5"\h\z第一章绪论（3） 3第二章实验中医学的基本方法：中医文献（2）、实验基本方法（5）、研究的道德（1） 8第三章中医临床实验研究：基本方法（2）、断学/治疗（2） 4第四章中医动物实验研究：原则和方法（2）、证候动物模型与实验动物辨证（4） 6第五章中医细胞生物学实验研究 3第六章实验中医学常用实验方法及其应用：生理学（2）、形态学（6）、生物化学（2）、分子生物学 122）合计 362.实验课72个学时（我校开展“中医学综合实验”，以替代该实验课）。建议安排为：理论课内容 学时实验一实验的一些基本要求与技术 3实验二动物实验的基本方法与技术 3实验三小鼠的四诊和辨证方法及体质筛选 6实验四“气能摄血”实验 6实验五生三七粉对小鼠凝血时间的作用 6实验六不同治法对利血平气虚证小鼠的作用比较 9实验七不同治法对环磷酰胺阳虚证小鼠的作用比较9实验八不同急性胃溃疡模型小鼠的比较及评价 9实验九，或实验十，或实验十^一 21合计 72四、考试和考核办法.理论课考试：笔试。.实验课考核建议：学习和实验态度（40%）、研究报告（60%）。五、大纲使用说明.本大纲供中医基础专业、七年制专业使用，亦适用于其它专业，包括研究生选修或辅修本课程的学生。.在教学过程中，任课教师可根据具体情况对大纲所规定的教学内容和教学时数安排进行适当调整，但不能影响课程的基本体系。六、主要参考书目[1]克洛德•贝尔纳.实验医学研究导论（夏康农,管光东译）.第一版.北京：商务印书馆,1991.[2]国家中医药管理局主编.中医临床研究方法指南（网络版）.[3]孟庆云.中国中医药发展五十年:1949-1999.第一版.关B州：河南医科大学出版社,1999.[4]方肇勤主编.中医辨证论治学.第一版.上海:上海中医药大学出版社,2008.[5]方肇勤主编.中医学综合实验.第一版.上海：上海中医药大学出版社,2004.[6]马继兴.中医文献学.第一版.上海：上海科学技术出版社.1990.[7]张灿坤.中医古籍文献学.第一版.北京:人民卫生出版社，1998.[8]贲长恩主编.医学科研思路方法与程序.第一版.北京：人民卫生出版社,2009.[9]汪谦主编.现代医学实验方法.第一版.北京:人民卫生出版社,1998.[10]金正均.医学试验设计原理.第一版.上海：上海科学技术出版社,1964.[11]倪宗瓒.医学统计学.第二版.北京:人民卫生出版社,1998.[12]杨树勤.卫生统计学.第三版.北京:人民卫生出版社，1992.[13]周仁郁，崔相学.统计方法及实验.第一版.成都:西南交通大学出版社,2002.[14]袁肇凯.中医诊断实验方法学.第一版.北京:科学出版社,2003.[15]朱文锋.中医诊断学.第一版.北京:人民卫生出版社,1999.[16]袁肇凯.中医诊断实验方法学.第一版.北京:科学出版社,2003.[17]程虹译.人类疾病的动物模型.第一版.上海:上海医科大学出版社,1989.[18]方喜业.医学实验动物学.第一版.北京：人民卫生出版社,1995.[19]卢耀增.实验动物学.第一版.北京:北京医科大学，中国协和医科大学联合出版社,1995.[20]杨幼明.医学实验动物学.第一版.上海:上海医科大学出版社,1998.[21]刘福英，刘田福.实验动物学.第一版.北京:中国科学技术出版社,2005.[22]陈小野.实用中医证候动物模型学.第一版.北京：北京医科大学，中国协和医科大学联合出版社,1993.[23]郑小伟主编.中医实验动物模型方法学.第一版.上海：上海中医药大学出版社,1999.[24]方肇勤主编.辨证论治实验方法学一一实验小鼠诊法和辨证.第一版.上海:上海科学技术出版社,2006.[25]方肇勤主编.大鼠/小鼠辨证论治实验方法学.第一版.科学出版社,2009.[26]李仪奎.中药药理实验方法学.第一版.上海：上海科学技术出版社,1991.[27]陈奇.中药药理研究方法学.第一版.北京：人民卫生出版社,1993.[28]徐叔云主编.药理实验方法学.第二版.北京：人民卫生出版社,1994.[29]王夔主编.中药研究现代方法学.第一版.北京:化学工业出版社,2004.[30]日本•真岛英信.生理学（姚承禹等校译）.第一版.北京:人们卫生出版社,1987.[31]陈次青编著.生理学.第一版.北京:人民卫生出版社,1991.[32]韩济生主编.神经科学纲要.第一版.北京:北京医科大学，中国协和医科大学联合出版社,1993.[33]沈岳良主编.现代生理学实验教程.第一版.北京:科学出版社,2002.[34]郑思竞主编.人体解剖学.第二版.北京:人民卫生出版社,1985.[35]杜卓民.实用组织学技术.第二版.北京：人民卫生出版社,1998.[36]武忠弼主编.病理学.第四版.北京：人民卫生出版社,1994.[37]周庚寅主编.组织病理学技术.第一版.北京:北京大学医学出版社,2006.[38]钟慈声主编.细胞和组织的超微结构.第一版.北京:人民卫生出版社,1984.[39]陈啸梅.组织化学手册.第一版.北京:人民卫生出版社,1982.[40]周爱儒主编.生物化学，第五版.北京:人民卫生出版社,2001.[41]张龙翔，张庭芳,李令媛主编.生化实验方法和技术.第二版.北京:高等教育10出版社,1997.[42]赵永芳编著.生物化学技术原理及其应用.第二版.武汉:武汉大学出版社,1994.[43]黄培堂等译.分子克隆实验指南.第三版.北京：科学出版社,2002.[44]方肇勤主编.分子生物学技术在中医药研究中的应用.第二版.上海：上海科学技术出版社,2008.[45]沈关心，周汝麟主编.现代免疫学实验技术.第一版.武汉：湖北医科大学出版社,1998.[46]钱玉昆主编.实用免疫学新技术.第一版.北京：北京医科大学，中国协和医科大学联合出版社，1994.[47]许贤豪.神经免疫学.第一版.北京:北京医科大学，中国协和医科大学联合出版社,1994.B.H.坎特威茨,H.L.罗迪格（III）,D.G.埃尔姆斯.实验心理学一一掌握心理学的研究（郭秀艳等译）.第一版.上海:华东师范大学出版社,2001.中医学综合实验PBL/案例教学教学大纲上海中医药大学基础医学院实验中医学教研室

方肇勤2013-9-23修订目录：一、课程性质和学习目标二、教学内容三、PBL/案例教学教学评价原则和方法四、教材和教学条件五、参考书和参考文献一、课程性质和学习目标.课程性质《中医学综合实验》是一门由学生独立自主设计和采用多手段实验研究的综合实验课。本课程培养学生独立地综合运用多种实验方法开展中医药科研课题研究的能力，要求学生独立地进行选题、设计、实验准备、实验研究、实验数据统计和分析、撰写实验研究报告，从而初步奠定基本的科研基础。课程中采用PBL/案例教学教学，在于进一步完善和贯彻综合实验课程的教学理念，使学生在教师的指导下，通过自行查阅相关文献资料、组间交流讨论和分析，以及针对具体案例开展实验设计，最大限度地投入课程的各个教学环节，激发学生的学习积极性和主动性，完成教学大纲的各项要求，取得满意的教学效果，以期实现从学到用11的能力的培养。.教学的目的和要求(1)PBL/案例教学教学的一般目的和要求1)PBL/案例教学教学的一般目的本课程的目的是鼓励学生独立学习、给学生在探究未知的不易解决的困惑中发现自身的欠缺，通过PBL/案例教学课程的每一阶段，了解相关问题的来龙去脉进而解决问题的实践机会。希望能够激发学生的学习好奇心，鼓励其寻根问底地探究和深入细致地探讨问题中所包含的内容、概念和原理，使学生能够独立地综合运用多种实验方法开展中医实验研究的能力、中医药学研究的创新、创造、开拓的精神和能力、使学生具备良好的科研素质。通过参与PBL/案例教学教学过程学生应达到下述教学目标：①PBL/案例教学基本教学目标，有知识、能力及情感等多重目标。②学习本学科的学习方法，提高自主学习的能力，以及获取和评价信息的能力。③还应培养团队协作能力和共同开展研究的能力，善于思考，敢于发表个人意见；通过彼此回馈与分享，协助学生了解与他人的互动模式，察觉自己的人际关系，建立情感支持及鼓励，提高正向表达技巧。2)PBL/案例教学教学的一般要求①学生必须主动、积极地投入课程的每个教学环节。教师在课程中只起辅导和咨询作用，学生在教师给出案例和问题后，应自行查阅文献，认真研读和分析，在此基础上初步得出合理的结论，进而通过组间讨论、交流，对某一问题有全面的、正确的理解。要求充分调动和发挥个人的主观能动性，不依赖教师，不人云亦云，在学习中观察问题，发现问题，思考问题，探究问题，并在课堂讨论时大胆发表己见，虚心吸收同学、老师的观点和意见，从中有效地取舍，拓展思路。②学生应加强自学能力，包括获取新信息、新知识的能力、分析、消化和利用信息的能力、对文献的评判和取舍能力等。③学生在学习研究中要求发扬团队协作精神，不仅保证自己有效地学习，且应关心和帮助同伴，在组间和班级交流时认真听取和吸纳别人的意见，学会在坚持自己意见的同时尊重他人的学术观点，并能通过交流扬长补短，充实和完善自己的知识。④通过学习学生应具备：对自身学术上和情感上的优势和局限性有较清醒和理智的了解；责任心和可信任感；关心他人和与之沟通的能力；客观评价自己和小组其他成员学业水平的能力。12(2)本课程教学的特殊目的和要求通过本课程的学习，学生应该能够：1)了解有关疾病中医药动物实验开展的现状和存在的问题、发展趋势。由此涉及：大致了解我国某一常见病、难治病，例如原发性肝癌存在同病异证的现象，及其临床表现，辨证标准和要点；大致了解有关疾病西医、中医、中西医结合治疗的方法和特点，及其几十年来所取得的进展；了解其疗效的提高、机制的阐明有赖于开展大量的动物实验。2)了解大鼠、小鼠标准化四诊和辨证方法学探索和发展的现状，以及个体化辨证论治和疗效评价的现状。由此涉及了解虚证动物模型的主要制作方法，及其证候表现、实验室指标的改变，治疗与疗效，存在问题和发展趋势。3)能够初步撰写文献综述和口头交流。4)充分挖掘案例中隐含的学术问题，依据有关研究背景和现状，以及教学条件，提出假说、开展实验设计。3.大体学习流程分4个教学单元：(1)第1个教学单元：介绍、分组；提交原发性肝癌等中医动物实验报道案例；课堂内外的PBL。(2)第2个教学单元：小组举荐代表介绍该组PBL结果；提交小鼠同病异证和异病同证的论文案例；课堂内外的PBL。特点是从临床需求出发，了解相应疾病的疗效评价和机制研究等动物实验，进而引申到开展常见疾病模型实验动物辨证论治的方法及重要性。(3)第3个教学单元：小组举荐代表介绍该组PBL结果；案例教学，提交来自某班级有关乙酰苯肼小鼠血虚造模及不同中医治法疗效比较案例；课堂内外的案例教学，以小组为单位开展实验设计。(4)第4个教学单元：小组举荐代表介绍该组案例教学结果，提交实验设计，课堂充分讨论存在的问题、假说和验证假说的方法；对个人和他人做出评价。4.时间安排日期课堂教学课后学习2012/12/17本次主题如导学，分组。第一次讨论课程。1学时2学时PBL4学时2012/12/24第二次讨论课程3学时PBL4学时2012/12/31第三次讨论课程及引入案例教学3学时案例学习4学时2013/01/07第四次案例教学讨论课程，总结。3学时撰写报告4学时*与以往PBL教学不同的是，2012年在第三次教学中引入案例教学，具体参见有关案例教学教师指导手册和案例。PBL和案例教学的一般考核仍安排在第四次课中，包括案例教学的一般考核。二、教学内容具体参见：“上海中医药大学PBL教案一一中医学综合实验”在中医学综合实验课程的前4周安排PBL教学，每次课堂讨论133学时。该教案由系列案例构成，主要内容如下：第一次课程（1）案例：固本活血解毒法治疗原发性肝癌的实验研究。（2）问题：1）同病异证。①原发性肝癌的同病异证的表现是什么？②近年国内中医学者是怎样认识的，辨证标准如何？请列表比较。重点在虚证（脏腑涉及脾、肺、肾）。2）国内原发性肝癌的中医药动物实验采用了哪些组方或方法，与临床报道的异同，为什么？存在什么问题？发展趋势如何？3）国内原发性肝癌的中医药动物实验有没有采用辨证论治的，或近似的方法，采用了哪些方法，存在什么问题？4）①如何提高原发性肝癌的疗效，②西医是如何开展临床疗效评价的、③中医是如何开展临床疗效评价的？④各自进展如何？请列表比较。第二次课程（1）案例：大鼠、小鼠常见证候计量化辨证方法的建立及其评价。（2）问题：1）虚证动物模型的制作方法有哪些，其证候表现如何？检测了哪些实验室指标？采用了哪些动物、造模方法如何？2）虚证动物模型治疗与疗效如何？10年间每年文献的数量情况、存在问题和发展趋势如何？3）有关大鼠、小鼠四诊和辨证方法学探索和发展的现状如何？发展趋势如何（近6年文献）？4）不同疾病大鼠/小鼠辨证论治对疾病和证候的疗效如何？存在什么问题，发展趋势如何？第三次课程（1）案例：乙酰苯肼溶血性贫血造模小鼠证候属性、演变，及不同治法方药疗效比较。（2）问题：学生依据案例方法、结果、对结果判断的分歧、存在的问题等予以归纳，参考学术界研究背景和发展趋势，提出实验设计和撰写案例报告。第四次课程（1）不同小组案例实验设计介绍、评选。（2）实验设计课堂交流与完善。（3）学生评价。（4）教师总结。14三、PBL教学评价原则和方法（一）原则.评价频次PBL有多次评价（作为一门课程）和单次评价（作为课程的一个单元）两种方式，本课程选择后者一一在PBL和案例教学4个单元结束后集中进行。.参与评价者（1）教师对各个学生评价。（2）每个学生对本人及本小组内其他学生评价。（3）学生对教学评价（含学生对教师评价）。.评价的内容（1）普通PBL教学评价，重在PBL教学形式和理念贯彻的评价。（2）知识点的评价，重点评价个人的案例报告。（3）教学评价一一案例教学调查报告。.与综合实验考核的关系以上得到两个分数，其与原先的综合实验评价分数的关系如下:《中医学综合实验》成绩由4部分构成：PBL/案例教学占30%、案例报告占20%；实验报告占40%,实验态度占10%。（二）普通PBL教学评价指标体系.在小组学习中组织、准备、投入和贡献（20/100分）.学习自主性、按时参加每次学习讨论（20/100分）.表达与合作能力、信息获取与自学能力、分析问题与总结归纳能力、知识面拓展等能力的评价（60/100分），具体为：（1）对教师所给案例和问题的理解程度（10/100分）（2）课堂表达的情况（逻辑性、系统性、清晰度和书记掌握，10/100分）（3）能否提出有价值的问题（20/100分）（4）文献收集的针对性、数量和新近程度（10/100分）（5）文献的研读和分析情况（10/100分）.《中医学综合实验》PBL课程学生评价量表学生姓名： 学号： 日期（年/月/日）：请按以下方法评价你本人和你小组各成员的成绩。方法：以100分制分别评价各学生A、B、C三栏，总分一栏由老师统计。TOC\o"1-5"\h\zA.在小组中B.学习自主C.表达与合作能力、信息总分=学生组织、投入和性、按时参加获取与自学能力、分析问题AX0.2 +姓名贡献（〜100每次讨论与总结归纳能力、知识面拓Bx0-2 +分） （〜100分） 展（〜100分） Cx0.6155.《中医学综合实验》PBL课程教师评价量表教师姓名： 日期（年/月/日）：请按以下方法评价每一位学生的成绩。方法：以100分制分别评价各学生A、B、C三栏，总分一栏由专人统计。A.在小组中B.学习自主C.表达与合作能力、信息总分=学生组织、投入和性、按时参加获取与自学能力、分析问题AX0.2+姓名贡献（〜100每次讨论与总结归纳能力、知识面拓Bx0-2+分） （〜100分） 展（〜100分） Cx0.66.最终成绩权重（1）自我评价占：30%（2）小组评价占:30%（3）教师评价占:40%（三）知识点的评价指标体系——案例报告案例报告涉及：①从案例中所归纳出的问题；②与该问题有关研究背景和进展（文献综述）；③提炼出论据和论证；④得出结论和提出假说；⑤设计可行的实验方案以验证假说；⑥参考文献。案例报告重点要回答3个问题：（1）是什么一一立场陈述/表明结论（从案例出发，问题的界定）。（2）为什么一一论证（结合文献综述，诊断、证明因果关系）。（3）怎么办一一实验设计（行动计划：步骤、方法、风险）。四、教材和教学条件.教材：方肇勤主编.中医学综合实验上海中医药大学出版社，2004.教学条件（1）学校图书馆网一一CNKI、VIP等数据库。（2）学校图书馆。（3）多媒体PBL小教室。五、参考材料.互联网资讯（1）互联网有关生物医学全文数据库、有关检索引擎..主要参考书（1）方肇勤主编.实验中医学.上海科学技术出版社，第二版，2008.（2）方肇勤主编.中医辨证论治学.上海中医药大学出版社，第一版,2008.（3）方肇勤主编.辨证论治实验方法学一一实验小鼠诊法和辨证.上海科学技术出版社，第一版,2006.16(4)方肇勤主编.大鼠/小鼠辨证论治实验方法学.科学出版社,第一版,2009.(5)威廉.埃利特.案例学习指南一一阅读、分析、讨论案例和撰写案例报告[M].刘刚，等译.中国人民大学出版社,2009.(6)陈小野主编.实用中医证候动物模型学.北京医科大学/北京协和医科大学联合出版社,1993.(7)郑小伟主编.中医实验动物模型方法学.上海中医药大学出版社,1999.(8)贲长恩主编.医学科研思路方法与程序.人民卫生出版社,2009.3.主要参考文献[1]方肇勤.辨证标准的基本要素与构成.上海中医药杂志,2004,38(1):3-6.[2]方肇勤.开拓证研究新途径的思考.上海中医药杂志,2001,35(4):4-5.[3]方肇勤.中医基础证的一原三维研究.中国中西医结合杂志，2002,(4):250-251.[4]陈德溯，陈晓，方肇勤.建立荷瘤小鼠分期辨证方法的初步研究.中国医药学报,2002,17(增刊):248-250.[5]陈晓,陈德溯,方肇勤.荷瘤小鼠非创伤性辨证指标的对照研究.中医杂志,2003,44(1):58-59.[6]潘志强，方肇勤,阚卫兵，等.正常昆明种小鼠后爪图谱及RGB值.上海中医药大学学报,2003,17(3):46-47.[7]潘志强，方肇勤,阚卫兵，等.荷瘤小鼠后爪部分证的标志图谱.中国中医基础医学杂志,2004,10(2):27-29.[8]潘志强，方肇勤,付晓伶，等.荷瘤小鼠若干典型证的演变及其后爪图像特征.上海中医药杂志,2004,10(6):62-64.[9]潘志强，方肇勤，章怡祎.行为学检测在实验小鼠辨证中的应用.上海中医药大学学报,2007,21(1):33-36.[10]潘志强，卢文丽，方肇勤.小鼠舌象的显微拍摄.中国中医基础医学杂志，2007,13(3):189-191.[11]潘志强，方肇勤.小鼠虚证模型实验研究现状及发展趋势.上海中医药大学学报,2003,17(4):60-63.[12]卢文丽，方肇勤.阳虚证动物模型的造模方法与评析.上海中医药大学学报,2004,18(4):44-48.[13]卢文丽，方肇勤.阳虚证动物模型诊断指标与评析.上海中医药杂志，2005,39(4):42-46.[14]付晓伶，方肇勤.阴虚证动物模型的造模方法及评析.上海中医药大学学报,2004,18(2):51-54.[15]许敏,方肇勤.血虚证动物模型造模方法与评析.上海中医药大学学报,2006.20(3):73-76.[16]李军兰，方肇勤.气虚证动物模型造模方法综述.上海中医药大学学报，2004,18(3):56-60.[17]卢文丽，方肇勤,潘志强，等.小鼠气、血、阴、阳虚等四种模型四诊的比较和评价.中国中医基础医学杂志,2006,12(6):433-438.[18]卢文丽，方肇勤,潘志强，等.四种不同品系小鼠气虚血虚证候的比较与评价.辽宁中医杂志,2007,34(4):519-522.[19]方肇勤，潘志强，陈晓.实验小鼠四诊方法学的创建和意义.上海中医药大学杂志,2006,40⑺:1-4，封3.17[20]方肇勤主编.辨证论治实验方法学一一实验小鼠诊法和辨证.上海:上海科学技术出版社,2006.[21]方肇勤，潘志强，卢文丽，等.上海中医药大学实验中医学教研室证候及辨证论治研究的进展.中国科协第148次青年科学家论坛发言(北京,07/12/14-16).[22]方肇勤，潘志强，付晓伶，等.小鼠四诊采集项目标准的建议.中国中医基础医学杂志,2005,11(9):692-694.[23]方肇勤，潘志强,汤伟昌，等.小鼠四诊工作站构建与操作标准探讨[J].上海中医药大学学报,2006,20(1):42-46.[24]方肇勤，潘志强，卢文丽，等.小鼠常见证候的辨证标准.中国中医基础医学杂志,2006,12(7):508-510.[25]方肇勤，潘志强，卢文丽，等.大鼠、小鼠常见证候计量化辨证及方法的建立及其评价.中国中医基础医学杂志,2007,13(7):502-505.[26]方肇勤，侯俐，卢文丽，等.荷瘤小鼠证候的发生、演变、兼证及预后.上海中医药杂志,2007,41(1):57-62.[27]潘志强，方肇勤，卢文丽.H22肝癌与Lewis肺癌荷瘤小鼠证候特征比较研究.北京中医药大学学报,2008,31(3):184-188.[28]卢文丽，方肇勤,潘志强，等.6种胃溃疡小鼠模型的证候特征及比较.上海中医药杂志,2007,41(8):63-68.[29]卢文丽，方肇勤,潘志强，等.不同方法致实验性胃溃疡小鼠的同病异证.湖南中医杂志,2008,24(1):69-72.[30]卢文丽，方肇勤,潘志强，等.应激等致大鼠实验性胃溃疡的征候特征及比较.福建中医药.2008,39(2):45-48.[31]卢文丽，方肇勤，潘志强,等.应激等致大鼠实验性胃溃疡的同病异证和异病同证.浙江中医药大学学报.2008,32(3):317-320.[32]刘小美，方肇勤,卢文丽，等.糖尿病模型大鼠证候的特征及演变.辽宁中医杂志,2008,35(1):130-134.[33]刘小美，方肇勤，卢文丽，等.糖尿病大鼠的同病异证与异病同证.浙江中医杂志,2008.43(1):10-13.[34]刘小美，方肇勤,潘志强，等.两种不同配方高脂饲料致高脂血症大鼠的证候比较.安徽中医学院学报,2008,27(2):33-37.[35]方肇勤，卢文丽，潘志强，等.不同证候荷瘤小鼠神经-内分泌-免疫网络基因转录的特征.中华中医药杂志,2007,22(增刊):8-14.[36]方肇勤，潘志强,卢文丽，等.不同证候荷瘤小鼠下丘脑、垂体基因表达与外显子剪接的特征.第十一届全国肝癌会议发言(南宁,07/10/25-27).[37]方肇勤，潘志强，卢文丽,等.不同证候荷瘤小鼠的情志与神经内分泌基因表达的特征.中华中医药学会情绪与健康和疾病及其中医药干预国际学术研讨会发言(青岛,8/24-27).[38]潘志强，付晓伶，方肇勤.荷瘤小鼠辨证论治的进一步研究.中国中医基础医学杂志,2007,13(1):28-31.[39]潘志强，方肇勤,卢文丽，等.阳气虚和气阴阳虚证荷瘤小鼠肾上腺基因表达的差异性.上海中医药大学学报,2008,22(3):45-50.[40]彭成，等.试论中医证候动物模型的研究技术，成都中医学院学报,1989,12(3):44-46.[41]北京师范大学生物系消化生理科研组.中医脾虚证动物模型的造型.中华医学杂志,1980,60(2):83-86.[42]沈丽波，钱会南.脾虚模型实验研究方法概述.中国中医药信息杂志,2005,12(1):93-95.[43]陈小野，周永生,樊雅莉，等.脾气虚证动物模型规范化的初步研究.中国医药18学报,2001,16(4):52-58.[44]任平，刘芳，黄熙，等.脾虚大鼠生长抑素、胃动素、胆囊收缩素内分泌细胞的变化.成都中医药大学学报,2001,24(1):35-37.[45]赵军宁,王建华，黄衡,等.胃泌素受体在脾虚大鼠的异常表达与中药调控作用研究.中国中医基础理论杂志,2000,6(5):36-39.[46]王艳杰.脾虚证的酶学研究进展.辽宁中医杂志,2002,29(10):635-636.[47]陈永辉.脾虚证免疫学研究进展.安徽中医学院学报,2001,20(4):58-60.[48]王天芳,杨维益.脾主肌肉的实验研究进展.北京中医药大学学报,1996,19(5):22-24.[49]孙福立，等.试用睡眠剥夺方法建立心虚证的动物模型 .中西医结合杂志,1998,39(2):110.《中医学综合实验》教学大纲方肇勤上海中医药大学基础医学院实验中医学教研室(2013/9/23)一、前言《中医学综合实验》是培养学生独立、综合运用多种实验方法研究中医课题能力的一门课程，是中医基础学科的重要课程之一。几十年的中医现代实验研究表明，如何把传统的中医理论与现代高科学技术结合起来，合理地运用后者来研究、发掘和发展前者，是中医现代化过程中突出存在的问题，其中关键是人才。中医现代化的实验研究需要大量复合型人才。这样的人才既要求对传统中医理论方法的了解，又要求对现代科学技术有关原理、方法、技术、理论的掌握，并能够把两者合理有机地组合起来。在以往开展中医研究、研究生培养中，明显暴露出缺乏这样的人才，大学本科教育阶段缺乏相应的教学手段和措施。因此，缺少这样的教学形式和环节，已经成为限制中医药迅速发展的一条重要因素。《中医学综合实验》即针对这样的现状和需求而开设，课程在《实验中医学》培训的基础上，要求并指导学生在教师的指导下，综合所学中、西医学知识、现代研究技术，独立自主地开展包括选题、课题设计、研究准备、实验实施、实验数据分析，乃至撰写实验报告等系统的实践，使学生在实践中去进一步检验所学的知识，暴露其知识面的欠缺，主动去吸取有关知识，并综合运用这些知识，在实践中完成从学到用的能力培养和升华。针对学生对医学文献的检索、评判性阅读、分析归纳综合，以及提出问题和解决问题等能力差；对新时期中医学知识产生有赖于开展大量实验研发的重要性认识不足，轻视中医实验研究等存在问题，19自2008年起，该课程引入了PBL教学，希望进一步提高教学效果。二、教学内容和要求［目的要求］.目的《中医学综合实验》的主要目的是培养学生独立地、综合运用多种实验方法开展中医实验研究的能力。课程设计以充分调动学生的学习热情，培养独立研究的基本能力，及其综合能力，并在教学形式上给予保证。在教学中要求学生综合所学中、西医学知识、现代研究技术，独立自主地开展包括选题、课题设计、研究准备、实验实施、实验数据分析，至撰写实验报告等系统的实践，使学生在实践中去检验所学的知识，暴露其知识面的欠缺，主动去吸取有关知识，并综合运用这些知识，在实践中完成从学到用的能力的培养和升华。.要求(1)明确学习目的：1)培养学生中医药学创新、创造、开拓的精神和能力，尤其注重能力的培养，学用结合；2)培养学生科研素质，激励学生发现知识的局限、主动自学，不断补充完善其知识结构；3)培养学生的科研思想素质，包括对研究的兴趣、实事求是的态度、尊重他人的学术见解和研究成果、团队协作精神、主动精神。这些素质、精神、能力对毕业后从事中医医疗、科研、教学是十分必要的，是二十一世纪中医药人才的基本要求。4)培养批判性阅读能力。(2)要求热情、积极投入。最大程度地激发出潜能，最大程度地调动学习、研究、创造的积极性。投入愈多，收获愈多。鼓励勤思考、勤观察、勤提问、勤动手。鼓励加强交流，切磋利弊，获得大量的书本上学不到、体会不深切的知识。(3)在教学形式上保证学生成为主角，辅以启发教育，注意培养独立科学研究的能力。充分调动和发挥个人的主观能动性。要求学生亲自动手，独立、主动、认真地参与实验研究的每一个过程，主动参与研究的所有环节，在研究中去观察问题，发现问题，思考问题，探究问题，参考文献，综合分析，得出合理的研究结论。并在研究、讨论中培养分析问题的能力、解决问题的能力、表达能力和取舍决策的能力、创新能力。课堂讨论鼓励学生大胆发表己见，虚心吸收同学、老师的观点和意见，扩展分析思路，培养独立分析问题的能力。从中有效地培养独立开展实验中医学研究的能力、竞争和拼搏的精神、开拓创造的能力。增强科研的信心和勇气，培养科学实验思维能力。(4)要求在学习研究中要求发扬团队协作精神。(5)要求培养和加强自学能力，获取新知识的能力。(6)要求培养因时、因地、因人制宜的能力。课程开展过程中20要求处理好理想与现实的关系。由于受到教学经费的限制、课时的限制、学生实验研究技术的水准、教学实施所在科室实验条件的限制、带教教师学术水平的限制等等，所开展的实验往往会与部分，甚至多数学生所期望、理想的有一定的差距。在最终确定并开展的综合实验所采用的技术、方法、内容往往不可能是最先进的、最激动、最系统、最周全的。为此，既要求学生培养准确地了解环境、适应环境，调整研究的思路、设想、方法的能力；同时要求学生从今后研究工作需要出发，高标准、严要求，在有限的条件下获得最大的锻炼和教益。使学生因人、因地、因时制宜的能力得到培训，增加今后研究的适应力、应变能力。同时，培养学生坚毅的心理素质、毅力、自控能力和承受挫折的能力。学会尊重他人的观点。（7）要求培养科学的实事求是学风，客观地进行实验设计、分析报道实验结果。（8）要求重视培养信息的收集、利用与交流的能力。［教学内容］.首先介绍本课程的教学方式，要求学生课后自学《中医学综合实验》教材，内容包括：第一章绪论第二章选题第三章课题设计第四章研究准备第五章实验实施第六章实验数据分析第七章撰写实验报告第八章综合实验实例附录.学生自愿分组选题，分作4组。.PBL与案例教学（PBL与案例教学另有配套的教学大纲、教案和具体教学文件）。期间完成以小组为单位的选题。.选题课堂交流、提问、答疑，每组由第1人介绍。无记名投票确定选题。.任课教师与学生一道课堂商量具体实验设计，明确各小组的研究内容和分工。.学生预初实验和技能培训，实验准备。.开展正式实验和实验数据分析。.课堂实验结果交流和数据处理讨论。.学生进一步完成数据处理和分析，独立撰写研究报告（该研究报告作为成绩）。.课堂每组推荐1人模拟论文答辩。.教师进行课程总结。21

［教学方法］1.教学原则(1)加强批判性阅读和思维能力的培养；加强拓展思维、分析问题、提出问题、解决问题能力的培养。(2)以学生自学和自己动手选题、设计、技术培训和实验准备与预实验、实验及撰写研究报告为主，教师指导、分析为辅。2.教学安排(1)教师介绍课程及教学方案。(2)平行开课的3个班级，各班学生自愿分为4组；重组入6个PBL/案例教学小班，开展PBL/案例教学。PBL/案例教学参考相应的PBL/案例教学大纲。(3)在PBL/案例教学期间，以小组为单位，利用计算机检索等方法开展选题；并各自独立撰写文献综述。(4)PBL/案例教学结束后，各组回到各自原先的班级，开展选题的课堂交流、答疑，每组由第1人介绍。经课堂选题分析与讨论后，由学生以小组为单位，无记名投票决定最终选题。(5)在老师的指导下课题设计课堂讨论与完善，明确研究内容，及各小组承担实验工作。(6)学生在老师的指导下进行实验技能培训、实验准备、预初实验。(7)学生在导师指导下开展实验研究工作。(8)各组学生推举1名代表课堂PPT介绍实验结果，及其初步的分析，开展课堂讨论。(9)学生在老师的指导下完成数据处理、分析。学生独立撰写研究报告并上交，作为考试内容之一。(10)各组推荐1名代表课堂PPT介绍研究报告，学生和教师提问，模拟答辩。(11)教师进行课程总结和点评。三、参考性教学时数分配本课程标准学时为70个学时。具体学时分配如下:周次课堂讲授课程介绍；第一次PBL

周次课堂讲授课程介绍；第一次PBL

简介、分组，案例1、讨论第二次PBL汇报，案例2、讨论第一次案例教学

汇报，案例、讨论实验见习查阅资料、研读、

发言准备、撰写综述(图书馆等)

查阅资料、研读、

发言准备、撰写综述(图书馆等)

查阅资料、研读、

发言准备、撰写综述(图书馆等)22

22第二次案例教学

汇报，实验设计交流

讨论、评价查阅资料、研读、第二次案例教学

汇报，实验设计交流

讨论、评价3发言准备、撰写综述4确立和完善实验设计、

观看教学录像8910各组实验结果PPT

介绍和讨论

研究结果模拟答辩

课程总结小鼠四诊检测训练实验准备、预实验

继续实验准备、预实验

动物造模和用药确立和完善实验设计、

观看教学录像8910各组实验结果PPT

介绍和讨论

研究结果模拟答辩

课程总结小鼠四诊检测训练实验准备、预实验

继续实验准备、预实验

动物造模和用药四诊检测，处死动物、实验展开

继续实验，准备PPT

撰写实验报告，准备答辩PPT47778合计2149四、考试和考核办法课程成绩由以下4个部分构成：.PBL/案例教学评价占30%（其中，学生自我评价占30%、小组评价占30%、导师评价占40%）。.文献综述占20%。.研究报告占40%。.实验研究态度和贡献度占10%。五、大纲使用说明.本大纲供中医基础专业、七年制专业使用，亦适用于其它专业，包括研究生选修或辅修本课程的学生。.在教学过程中，任课教师可根据具体情况对大纲所规定的教学内容和教学时数安排进行适当调整，但不能影响课程的基本体系。六、主要参考书目.方肇勤主编.实验中医学.第二版.上海：上海科学技术出版社，2008..方肇勤主编.中医学综合实验.第一版.上海：上海中医药大学出版社,2004,第二次印刷..方肇勤主编.分子生物学技术在中医药研究中的应用.第二版.上海：上海科学技术出版社,2008..贲长恩主编.医学科研思路方法与程序.第一版.北京：人民卫生出版社,2009..汪谦主编.现代医学实验方法.第一版.北京：人民卫生出版社,1996..侯灿主编.医学科学研究入门.第一版.上海：上海科学技术出版社,1981..倪宗瓒.医学统计学.第二版.北京：人民卫生出版社,1998.23.方喜业.医学实验动物学.第一版.北京：人民卫生出版社,1995..李仪奎.中药药理实验方法学.第一版.上海：上海科学技术出版社，1990..史继学，等.实用医学论文写作与技巧.第一版.北京：中国医药科技出版社,1997.《分子生物学技术在中医药研究中的应用》教学大纲方肇勤上海中医药大学基础医学院实验中医学教研室(2013/9/23)一、前言分子生物学实验技术的发展日新月异，中医药的研发中已愈来愈广泛地采用了分子生物学技术。然而，与国内外西医界相比，分子生物学技术在中医药研发中的应用还存在很大的差距，突出表现在知识普及不够、研发投入不足和技术使用不当，该技术在中医药研发中能否用、为何用、如何用的问题还没有得到根本的解决。为此，1996年，我们编写了《分子生物学常用技术与方法》；2002年，我们编写并正式出版了《分子生物学技术在中医药研究中的应用》。鉴于近年来分子生物学技术又有了长足的发展，而中医药研发工作对该技术的需求日益增加，我们对原著进行了调整与充实。主要包括8个部分：.绪论。重点介绍分子生物学技术在中医药研发中应用的现状，深入浅出地介绍如何用和怎样用，以及本著各章节的结构与关系。.分子生物学常用基本技术。介绍重组质粒、质粒转化大肠杆菌、阳性单菌落扩增与小量DNA制备、酶切重组质粒和电泳分离所插入的DNA、从凝胶中回收DNA、大量质粒DNA制备、哺乳类动物细胞的培养、植物细胞悬浮培养技术。.DNA的研究方法。介绍哺乳类动物基因组DNA的提取、植物基因组DNA的提取、基因组文库的建立与筛选、Southernblot、PCR、DNA双脱氧链终止法测序、动植物药材的ISSR指纹图谱技术、中药RAPD指纹图谱技术。.RNA的研究方法。介绍组织总RNA提取、mRNA的分离、Northernblot、RT-PCR、ABI荧光实时定量PCR、原位杂交、基因芯片、cDNAArray、DD-PCR、cDNA库建立、基因全序列cDNA库24筛选、RACE-PCRo.蛋白质的研究方法。介绍哺乳类动物组织蛋白质的提取、植物组织蛋白质的提取、Westernblot、ELISA、免疫组织化学、单克隆抗体制备、蛋白质双向电泳。.基因功能与表达调控的研究方法。介绍RNAi、SmallRNA的提取与分析、报道基因与基因调控元件的检测、点突变PCR、基因敲除技术、Footprint、凝胶阻滞分析、植物细胞的基因转化。.分子生物学