高考生物(全国版)一轮复习课件：第34讲-微生物的培养和利用

第34讲PART11微生物的培养和利用基础知识巩固│考点互动探究│考例考法直击│教师备用习题第34讲PART11微生物的培养基础知识巩固│考点互动探第34讲微生物的培养和利用考试说明1．微生物的分离和培养(实验探究能力)。2．某种微生物数量的测定(实验探究能力)。3．培养基对微生物的选择作用(实验探究能力)。4．微生物在其他方面的应用(实验探究能力)。第34讲微生物的培养和利用考试说明1．微生物的分离和培养(一、微生物的实验室培养1．培养基(1)概念：人们按照微生物对____________的不同需求，配制出供其生长繁殖的____________。(2)营养成分：水、________、________、无机盐四类营养物质，另外还需要满足微生物生长对_______、特殊营养物质以及________的要求。(3)类型基础知识巩固链接教材2.制作流程2．无菌技术(1)目的：获得________________。(2)关键：防止________的入侵。(3)无菌技术的主要方法及适用对象主要方法适用对象灭菌____________接种环、接种针干热灭菌培养皿等玻璃器具高压蒸汽灭菌____________消毒____________牛奶化学消毒________________________无菌室营养物质营养基质碳源氮源pH氧气固体液体纯净培养物杂菌灼烧灭菌培养基巴氏消毒操作者双手紫外线消毒一、微生物的实验室培养基础知识巩固链接教材2.制作流程2．3．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基(1)步骤：计算→_____→溶化→_____→倒平板。(2)倒平板的过程①在火焰旁右手拿锥形瓶，左手____________。②右手拿锥形瓶，使锥形瓶的瓶口迅速通过_______。③左手将培养皿打开一条缝隙，右手将培养基倒入培养皿，左手立刻盖上______________。④待平板冷却凝固后，将平板________放置，使皿盖在下、皿底在上。基础知识巩固链接教材4．纯化大肠杆菌图11­34­1

(1)平板划线法(图中________)：通过接种环在琼脂固体培养基表面________的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。称量灭菌

拔出棉塞火焰培养皿的皿盖倒过来A连续划线3．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基基础知识巩固链接教材4．纯化大基础知识巩固链接教材(2)稀释涂布平板法(图中________)：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到________________的表面，进行培养。当稀释倍数足够高时，即可获得单个细菌形成的________。5．菌种的保藏(1)对于频繁使用的菌种，可以采用__________法。(2)对于需要长期保存的菌种，可以采用________法。二、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1．筛选菌株(1)自然界中目的菌株筛选的依据：根据它对__________的要求，到相应的环境中去寻找。(2)实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于____________生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。B琼脂固体培养基菌落临时保藏甘油管藏生存环境目的菌株基础知识巩固链接教材(2)稀释涂布平板法(图中_______基础知识巩固链接教材(3)选择培养基：允许特定种类的微生物生长，同时________和________其他种类微生物生长的培养基。2．统计菌落数目(1)常用方法：________________法。(2)统计依据当样品的__________足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个________。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品大约含有多少活菌。(3)其他方法：还可利用_____________计数。3．设置对照设置对照的主要目的是排除实验组中____________对实验结果的影响，提高实验结果的__________，例如为了排除培养基被杂菌污染的可能性，需以________________培养基培养作为空白对照。抑制阻止稀释涂布平板稀释度活菌显微镜直接非测试因素可信度未接种的基础知识巩固链接教材(3)选择培养基：允许特定种类的微生物生项目内容实验原理

(1)能合成________的细菌才能分解尿素

(2)配制以________为唯一氮源的培养基，能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌实验流程土壤取样(富含____________)→配制土壤溶液和制备培养基→____________→涂布平板与培养→菌落________鉴定

(1)方法：在以尿素为唯一氮源的培养基中加入________指示剂培养分解尿素的细菌

(2)原理：细菌分解尿素的反应中，细菌合成脲酶将尿素分解成了________，其会使培养基中的________增强，pH升高基础知识巩固链接教材4．实验设计脲酶尿素有机质系列稀释计数酚红氨碱性项目内容实验原理(1)能合成________的细菌才能分解2．纤维素分解菌的筛选(1)方法：____________法。(2)原理：________。(3)培养基：以____________为唯一碳源的选择培养基。基础知识巩固链接教材三、分解纤维素的微生物的分离1．纤维素酶(1)纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括________、_________和_____________三种组分。(2)作用：纤维素______________________。C1酶CX酶葡萄糖苷酶纤维二糖葡萄糖刚果红染色透明圈红色复合物纤维素2．纤维素分解菌的筛选基础知识巩固链接教材三、分解纤维素的微基础知识巩固链接教材(4)实验流程纤维素选择培养基梯度稀释鉴别纤维素分解菌透明圈基础知识巩固链接教材(4)实验流程纤维素选择培梯度稀释鉴别纤考点一微生物的分离与培养考点互动探究１．消毒和灭菌的区别条件结果消毒较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子2．两种纯化细菌的方法的比较比较项目平板划线法稀释涂布平板法图示关键操作接种环在固体平板培养基表面连续划线

①一系列的梯度稀释；②涂布平板法操作考点一微生物的分离与培养考点互动探究１．消毒和灭菌的区别条考点互动探究比较项目平板划线法稀释涂布平板法注意事项每次划线前后均需灼烧接种环稀释度要足够高，为确保实验成功可以增加稀释度的范围菌体获取在具有显著的菌落特征的区域菌落中挑取菌体从适宜的稀释度的平板上的菌落中挑取菌体比较项目平板划线法稀释涂布平板法

优点可以根据菌落的特点获得某种微生物的单细胞菌落既可以获得单细胞菌落，又能对微生物计数缺点不能对微生物计数操作复杂，需要涂布多个平板考点互动探究比较项目平板划线法稀释涂布平板法注意事项每次划考点互动探究3．平板划线操作3个易错点(1)灼烧接种环之后，要冷却后再进行接种，以免温度太高杀死菌种。(2)划线时最后一区域不要与第一区域相连。(3)划线用力要大小适当，防止用力过大将培养基划破。考点互动探究3．平板划线操作3个易错点1．

[2016·安徽名校联盟模拟]根据微生物分离和培养的知识，回答下列问题：(1)分离纯化大肠杆菌的关键步骤是________，该步骤常用的方法有两种：____________和__________________，其中一种方法是将菌液进行一系列的________________，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养。(2)在微生物的实验室培养过程中，获得纯净培养物的关键是__________________，因此需要对培养基和培养皿进行________处理，操作者的双手需要进行清洁和________。(3)分离分解尿素的细菌的培养基中要以尿素为唯一________(填“碳源”或“氮源”)。考点互动探究典例追踪1．[2016·安徽名校联盟模拟]根据微生物分离和培养的考点互动探究[答案](1)接种平板划线法稀释涂布平板法梯度稀释(2)防止外来杂菌入侵灭菌消毒(3)氮源[解析]

(1)分离纯化大肠杆菌的关键步骤是接种，该步骤常用的方法有两种：平板划线法和稀释涂布平板法，其中稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养。(2)在微生物的实验室培养过程中，获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌入侵，因此需要对培养基和培养皿进行灭菌处理，操作者的双手需要进行清洁和消毒。(3)分离分解尿素的细菌的培养基中要以尿素为唯一氮源。考点互动探究[答案](1)接种平板划线法稀释涂布平板法2．

[2016·河南商丘一中模拟]回答下列有关微生物的相关问题：(1)在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑________、__________和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、__________、______________等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。(2)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能______________。考点互动探究典例追踪(3)通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的__________。(4)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_______________________________________________________。(5)若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过________处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。2．[2016·河南商丘一中模拟]回答下列有关微生物的相考点互动探究[解析]

(1)大肠杆菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、易培养、生活周期短等优点，培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑温度、酸碱度和渗透压等条件。(2)紫外线能使蛋白质变性，还能损伤DNA的结构。(3)对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的鉴定。(4)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生。(5)有的大肠杆菌会释放一种强烈的毒素，并可能导致肠道出现严重症状，使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。[答案](1)温度pH易培养生活周期短(2)损伤DNA的结构(3)鉴定(或分类)(4)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生(5)灭菌考点互动探究[解析](1)大肠杆菌具有体积小、结构简单、变考点二微生物的筛选与计数考点互动探究选择培养基的作用原理(1)在培养基中加入某种化学物质，如加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌；加入高浓度的食盐可以得到金黄色葡萄球菌。这里的加入是在满足基本所需培养成分的基础上加入。(2)改变培养基中的营养成分，如缺乏氮源时可以分离出固氮微生物；以石油作为唯一碳源时，可以分离出能消除石油污染的微生物。(3)改变微生物的培养条件，如将培养基放在高温环境中培养可以得到耐高温的微生物。(4)通过某些特殊环境分离微生物，如在高盐环境中可分离耐盐菌；在高温环境中可分离得到耐高温的微生物。考点二微生物的筛选与计数考点互动探究选择培养基的作用原理考点互动探究２．选择培养基与鉴别培养基的比较种类制备方法原理用途举例选择培养基培养基中加入某些化学物质依据某些微生物对某些物质或环境条件的嗜好、抗性而设计从众多微生物中分离所需的微生物加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌鉴别培养基培养基中加入某种指示剂或化学药品依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中的特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计鉴别不同种类的微生物伊红—美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌考点互动探究２．选择培养基与鉴别培养基的比较种类制备方法原理考点互动探究3．两种计数方法的比较比较项目间接计数法(稀释涂布平板法)直接计数法(显微计数法)原理当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量公式每克样品中的菌落数：(C÷V)×M。C：某稀释度下平板上生长的平均菌落数；V：涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)；M：稀释倍数每毫升原液所含细菌数：每小格平均细菌数×400×10000×稀释倍数缺点当两个或多个菌体连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落不能区分细胞死活结果比实际值偏小比实际值偏大考点互动探究3．两种计数方法的比较比较间接计数法直接计数法原1．[2016·江西赣州一模]某实验小组欲从豆油污染的土壤中筛选出能高效降解脂肪的菌株。请回答：(1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以__________为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于________培养基。(2)为避免培养皿污染，需将培养皿呈________状态放置。为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行____________处理。(3)为了筛选出菌株，可将适量的__________试剂滴加在平板中的菌落周围，洗去浮色后，如果菌落周围的现象是______________________，则说明此种菌能够分泌脂肪酶。(4)纯化菌种时，为了得到单菌落，可采用____________法将菌种接种于新的培养基平板上。考点互动探究典例追踪1．[2016·江西赣州一模]某实验小组欲从豆油污染的土壤考点互动探究[解析]

(1)欲筛选出能降解豆油的菌株，培养基中应只含有豆油而无其他碳源，不能降解豆油的细菌在此培养基上不能生存；从功能上讲，这类培养基属于选择培养基。(2)为避免培养皿污染，需将培养皿呈倒置状态放置；为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行梯度稀释处理。(3)由于脂肪遇苏丹Ⅳ试剂会出现红色，所以为了筛选出目的菌株，可将适量的苏丹Ⅳ试剂滴加在平板中的菌落周围，洗去浮色后，如果菌落周围的现象是出现透明圈、不出现红色圈，则说明此种菌能够分泌脂肪酶。(4)分离纯化菌种时，需采用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，使聚集在一起的细菌细胞分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落，以便纯化菌种。[答案](1)豆油选择(2)倒置梯度稀释(3)苏丹Ⅳ出现透明圈、不出现红色圈(4)平板划线考点互动探究[解析](1)欲筛选出能降解豆油的菌株，培养基2．[2016·辽宁辽南协作体二模]为了调查某城市自来水的水质状况，某研究小组测定了自来水水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题：(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。涂布平板所用的培养基是________(填“固体”或“液体”)培养基；该培养基的制备过程是___________________。对培养基灭菌的方法是________________法。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白培养基培养了一段时间，若空白培养基出现了菌落。请分析说明原因(写出两个)：①______________；②_______________。考点互动探究典例追踪(2)培养基灭菌后，将1mL水样稀释1000倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为51、50和49。据此可得出每升水样中的活菌数为_____________个。(3)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，第二次及以后每次划线之前都要灼烧接种环，目的是__________的菌种，使下次划线的菌种直接来源于_______________。2．[2016·辽宁辽南协作体二模]为了调查某城市自来水的考点互动探究[解析]

(1)涂布平板所用的培养基是固体培养基；该培养基的制备过程是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。对培养基灭菌的方法是高压蒸汽灭菌法。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白培养基培养了一段时间，若空白培养基出现了菌落，其可能原因是①培养基灭菌不合格；②倒平板过程被污染(或培养皿灭菌不合格)。(2)培养基灭菌后，将1mL水样稀释1000倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为51、50和49。据此可得出每升水样(1L＝1000mL)中的活菌数＝×1000×10×1000＝5.0×108(个)。(3)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，第二次及以后每次划线之前都要灼烧接种环，目的是杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端。[答案](1)固体计算、称量、溶化、灭菌、倒平板高压蒸汽灭菌培养基灭菌不合格倒平板过程被污染(或培养皿灭菌不合格)(2)5.0×108

(3)杀死上次划线后接种环上残留上次划线的末端考点互动探究[解析](1)涂布平板所用的培养基是固体培养基3．[2016·河南洛阳模拟]为从土壤中筛选能有效降解有机化合物X的细菌，研究人员用化合物X、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选出能高效降解化合物X的细菌(目的菌)。图11­34­2是从土壤中筛选出该细菌的过程示意图，下表是分离纯化的结果。请回答下列问题：记录项目：透明圈直径/菌落直径考点互动探究典例追踪图11­34­2(1)培养基中的有机化合物X主要为目的菌提供________等营养要素。从土壤中富集能有效降解有机化合物X的细菌时，应选用________(填“固体”或“液体”)培养基。菌落编号12348小时1.62.83.072小时2.21.25.096小时2.31.24.23．[2016·河南洛阳模拟]为从土壤中筛选能有效降解有机(2)配制成10－1浓度稀释液时，用无菌移液管从富集液的上清液中吸取1mL，移入盛有________mL无菌水的试管中，并依次配制10－2～10－10的梯度稀释液。(3)在分离、纯化过程中，图中②③过程接种的方法分别为________________________。在倒平板前，应对玻璃器皿和培养基灭菌，灭菌方法是________________。(4)分析菌种的分离纯化结果，应选择为________号菌落进行扩大生产，原因是________________________________________。(5)实验过程中还需配制空白培养基作为对照，其目的是____________________________________________________。考点互动探究典例追踪(2)配制成10－1浓度稀释液时，用无菌移液管从富集液的上清考点互动探究[解析]

(1)微生物的生长需要水、无机盐、碳源、氮源和生长因子，化合物X为目的菌提供碳源和氮源等营养要素；从土壤中富集能有效降解有机化合物X的细菌时，应选用液体培养基。(2)配制成10－1浓度稀释液时，用无菌移液管从富集液的上清液中吸取1mL，移入盛有9mL无菌水的试管中。(3)据图分析，②的菌落均匀是稀释涂布平板法接种，③的平板上有明显的划痕是平板划线法接种；对玻璃器皿和培养基灭菌需要使用高压蒸汽灭菌法灭菌。(4)据表分析，3号菌落的透明圈直径/菌落直径最大，菌种降解化合物X的能力最强，所以应该使用3号菌落进行扩大生产。(5)实验中将空白培养基进行培养的目的是作为对照实验，以检验培养基和平板的灭菌是否合格。[答案](1)氮源、碳源液体(2)9(3)稀释涂布平板法、平板划线法高压蒸汽灭菌法(4)3透明圈直径/菌落直径越大，菌种降解化合物X的能力越强(5)检验培养基和平板的灭菌是否合格考点互动探究[解析](1)微生物的生长需要水、无机盐、碳源考点三微生物在其他方面的应用考点互动探究分离纤维素分解菌所用的两种培养基比较分离纤维素分解菌的实验中先用选择培养基，再用鉴别培养基。(1)选择培养基为液体培养基，以纤维素作为碳源和能源的微生物可以正常生长，而其他绝大多数微生物不能正常生长；因培养基中无凝固剂，为液体培养基，利用液体培养基能使营养成分被充分消耗，以增加纤维素分解菌的浓度。(2)鉴别培养基含琼脂，为固体培养基，细菌可在培养基上形成肉眼可见的菌落。刚果红染色法应用的就是鉴别培养基。考点三微生物在其他方面的应用考点互动探究分离纤维素分解菌所1．

[2016·安徽六校教育研究会二模]现在大力提倡无纸化办公，但是每年仍然不可避免地产生大量的废纸，其主要成分是木质纤维，人类正努力将其转化为一种新的资源——乙醇。图11­34­3是工业上利用微生物由纤维素生产乙醇的基本工艺流程，请回答相关问题：考点互动探究典例追踪图11­34­31．[2016·安徽六校教育研究会二模]现在大力提倡无纸(1)自然界中①环节需要的微生物大多分布在______________的环境中。将从土壤中获得的微生物培养在以____________为碳源，并加入__________的培养基上，筛选周围有__________的菌落。(2)在如上所述的筛选过程中获得了三个菌落，对它们分别培养，并完成环节②，且三种等量酶液中酶的浓度相同，则你认为三种酶液的活性______________(填“一定相同”“不一定相同”或“一定不同”)，可以通过____________________________进行定量测定。(3)生产中可以满足④环节的常见菌种是__________，为了确保获得产物乙醇，⑤环节要注意__________________。考点互动探究典例追踪(1)自然界中①环节需要的微生物大多分布在_________考点互动探究[解析]

(1)富含纤维素的环境中纤维素分解菌较多，筛选纤维素分解菌时在纤维素作为唯一碳源的选择培养基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其他微生物则不能生长；在培养基中加入刚果红，其可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。(2)三种酶液的活性不一定相同的原因是纤维素酶的活性不一定相同，需要对其活性进行鉴定。(3)满足④环节的常见菌种是酵母菌，⑤环节表示无氧发酵，即发酵装置密闭(或保证无氧条件等)。[答案](1)富含纤维素纤维素刚果红透明圈(2)不一定相同对纤维素酶分解纤维素后所产生的葡萄糖(3)酵母菌发酵装置的密闭性(或保证无氧条件等)

考点互动探究[解析](1)富含纤维素的环境中纤维素分解菌较2．

[2016·江西南昌重点中学二模]科技工作者研究出利用秸秆生产燃料酒精的技术，大致流程如下图(以玉米秸秆为例)。请回答：图11­34­4(1)玉米秸秆预处理后，应该选用特定的酶进行水解，使之转化为发酵所需的葡萄糖。从以下哪些微生物中可以提取到上述的酶？________。A．酿制果醋的醋酸菌B．生长在腐木上的霉菌C．制作酸奶的乳酸菌考点互动探究典例追踪D．生产味精的谷氨酸棒状杆菌(2)若要从土壤中分离生产这种酶的微生物，培养基中的碳源为________。(3)某同学对这种微生物培养液进行数量测定，在稀释倍数为105对应的培养基中测得平板上菌落数的平均值为23.4，那么每毫升样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.2mL)________个。(4)用这种方法测定密度，实际活菌数量要比测得的菌落数量多，原因是___________________________。2．[2016·江西南昌重点中学二模]科技工作者研究出利考点互动探究[解析]

(1)生长在腐木上的霉菌、生长在落叶堆中的蘑菇及反刍动物瘤胃中生存的某些微生物中含有纤维素酶。(2)筛选目的微生物需要使用选择培养基，培养基中的碳源为纤维素。(3)根据题意可知，每毫升样品中的菌落数是23.4×105÷0.2＝1.17×107(个)。(4)用稀释涂布平板法进行微生物计数时，当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的是一个菌落，所以实际活菌数量要比测得的菌落数量多。[答案](1)B(2)纤维素(3)1.17×107(4)当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的是一个菌落考点互动探究[解析](1)生长在腐木上的霉菌、生长在落叶堆考例考法直击1．[2016·全国卷Ⅰ]空气中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物，以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。实验步骤如下：①配制培养基(成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O);②制作无菌平板；③设置空白对照组和若干实验组，进行相关操作；④将各组平板置于37℃恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落的平均数。回答下列问题：(1)该培养基中微生物所需的氮来源于______________。若要完成步骤②，该培养基中的成分X通常是__________。(2)步骤③中，实验组的操作是________________________________________。(3)若在某次调查中，某一实验组平板上菌落平均数为36个/平板，而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落，这种结果说明在此次调查中出现了____________现象。若将30(即36－6)个/平板作为本组菌落数的平均值，该做法____________(填“正确”或“不正确”)。考例考法直击1．[2016·全国卷Ⅰ]空气中的微生物在重力考例考法直击[解析]本题考查微生物的培养与计数，主要考查学生的识记、理解与实验设计能力。(1)培养基中的牛肉膏和蛋白胨中都含有蛋白质，可作为氮源。用于计数的培养基应为固体培养基，需加入琼脂等凝固剂。(2)该实验的目的是了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况，所以需将灭菌后的平板放置在教室不同高度的位置上，开盖暴露一段时间，然后再在恒温箱中培养。(3)空白对照组应是无菌平板，所以应该无菌落出现，有菌落出现说明培养基被污染了，那么其他各实验组的培养基也不合格，所以需要重新制作平板。[答案](1)牛肉膏、蛋白胨琼脂(2)将各实验组平板分别放置在教室不同高度的位置上，开盖暴露一段时间(3)污染不正确考例考法直击[解析]本题考查微生物的培养与计数，主要考查学生考例考法直击2．[2016·全国卷Ⅲ]某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。回答下列问题：(1)分离纯化乳酸菌时，首先需要用__________对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的理由是__________________________________________________________。(2)推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有____________________和__________________。分离纯化时应挑选出________________的菌落作为候选菌。(3)乳酸菌在－20℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的__________(填“蒸馏水”“甘油”或“碳酸钙”)。考例考法直击2．[2016·全国卷Ⅲ]某同学用新鲜的泡菜滤考例考法直击[答案](1)无菌水泡菜滤液中菌的浓度高，直接培养很难分离得到单菌落(2)鉴别乳酸菌中和产生的乳酸(或酸)具有透明圈(3)甘油[解析]本题考查微生物的培养及泡菜制作方面的知识。(1)分离纯化乳酸菌时，首先需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的理由是在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的乳酸菌将被分散成单个细菌，从而能在培养基表面形成单菌落。(2)在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有中和乳酸菌代谢过程中产生的乳酸和利于乳酸菌的识别与分离。分离纯化时应挑选出在平板上有透明圈的菌落作为候选菌。(3)乳酸菌在－20℃长期保存时，甘油可起到密封和隔绝空气的作用。考例考法直击[答案](1)无菌水泡菜滤液中菌的浓度高，直考例考法直击3．[2014·新课标全国卷Ⅰ]植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题：(1)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将__________分解成________。(2)在含纤维素的培养基中加入刚果红(CR)时，CR可与纤维素形成________色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的________。(3)为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见下表)：注：“＋”表示有，“－”表示无。据表判断，培养基甲____________(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是________________；培养基乙________(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是___________________________。酵母膏无机盐淀粉纤维素粉琼脂CR溶液水培养基甲＋＋＋＋－＋＋培养基乙＋＋＋－＋＋＋考例考法直击3．[2014·新课标全国卷Ⅰ]植物秸秆中的纤考例考法直击[解析]

(1)纤维素酶是一种复合酶，该酶是由C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶3种组分组成，前两种酶可将纤维素分解为纤维二糖，葡萄糖苷酶可将纤维二糖分解为葡萄糖。(2)刚果红可与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物便无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。(3)生物适应一定环境，环境对生物具有选择作用，只有在纤维素含量丰富的环境中纤维素分解菌才会发挥作用。纤维素分解菌选择培养基属于液体培养基。纤维素分解菌鉴别培养基属于固体培养基，要分离和鉴别纤维素分解菌，都需要以纤维素为主要碳源的培养基，培养基乙不具有选择的作用。[答案](1)纤维二糖葡萄糖(2)红透明圈(3)不能液体培养基不能用于分离单菌落不能培养基中没有纤维素，不会形成CR－纤维素红色复合物，即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌考例考法直击[解析](1)纤维素酶是一种复合酶，该酶是由C考例考法直击4．[2014·新课标全国卷Ⅱ]为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题：

(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是______________________________；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为________。

(2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，接种环通过________灭菌，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是________________________________________。(3)示意图A和B中，________表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。考例考法直击4．[2014·新课标全国卷Ⅱ]为了调查某河流考例考法直击A

B图11­34­5(4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中________的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高________的利用率。考例考法直击考例考法直击[解析]

(1)为了确定培养基的灭菌是否合格，微生物学实验一般会设置空白对照：随机取若干灭菌后的不接种的培养基在相同条件下培养一段时间，观察培养基上是否有菌落生成，若无菌落生成说明灭菌合格；利用平板菌落计数法的计算公式估算水样中的活菌数：

×M(

×稀释倍数)＝×100＝3.8×107/L。(2)接种时接种环需要灼烧灭菌；在第二次及以后每次划线时，总是从上一次的末端开始划线，这样做的目的是通过划线次数的增加，使每次划线时菌体的数目逐渐减少，以便得到单个菌落。(3)由题图可知，B图菌落分布相对均匀，应为稀释涂布平板法接种的结果。(4)振荡培养可以增加液体培养基的氧气含量，促进好氧型微生物的生长，另外振荡培养还可以使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率。[答案](1)检测培养基平板灭菌是否合格3.8×107(2)灼烧将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落(3)B

(4)溶解氧营养物质考例考法直击[解析](1)为了确定培养基的灭菌是否合格，微教师备用习题1．高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉嗜热菌样品中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图所示：(1)进行①过程的目的是________，②过程所使用的接种方法是________________法。(2)从用途上来说，Ⅰ号培养基属于________培养基，配制时仅以________作为唯一碳源；从物理状态上来说，Ⅱ号培养基属于固体培养基，配制时应加入________作为凝固剂。(3)Ⅰ、Ⅱ号培养基配制和灭菌时，灭菌与调节pH的先后顺序是__________________。一般对配制的培养基采用______________法灭菌。(4)培养一段时间后，应从Ⅰ号培养基上挑出__________的菌落，接种到Ⅱ号培养基上。

教师备用习题1．高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。教师备用习题[答案](1)稀释稀释涂布平板(2)选择淀粉琼脂(3)先调节pH，后灭菌高压蒸汽灭菌(4)透明圈大[解析]

(1)据图分析，①过程称为稀释，②过程是为了筛选单菌落，可用稀释涂布平板的方法给Ⅰ号培养基接种。(2)Ⅰ号培养基按功能分称为选择培养基，配制培养基时需要以淀粉为唯一的碳源；在液体培养基中添加琼脂可以配制成固体培养基，Ⅱ号培养基属于固体培养基。(3)培养基制作完成后要调整pH，再灭菌；培养基一般进行高压蒸汽灭菌。(4)培养一段时间后，菌落周围会出现透明圈，透明圈越大说明菌落分解淀粉的能力越强，所以应从Ⅰ号培养基上挑出透明圈大的菌落，接种到Ⅱ号培养基上。教师备用习题[答案](1)稀释稀释涂布平板(2)选择教师备用习题2．有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。

(1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、________________四类，该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源，其原因是________________________________。(2)纯化菌株时，通常使用的划线工具是__________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域及其他划线区域均无菌落，造成划线无菌落可能的操作失误有__________、____________。(3)为探究苯磺隆的降解机制，将该菌种的培养液过滤离心，取上清液作图乙所示实验。该实验的假设是____________，该实验设计是否合理？________。为什么？_______________。

教师备用习题2．有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环教师备用习题[答案](1)氮源和无机盐只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长和繁殖(2)接种环接种环灼烧后未冷却划线未从第一区域末端开始(3)目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白质不合理缺少空白对照[解析]

(1)微生物的各种培养基配方一般都含有水、碳源、氮源和无机盐四类营养物质；选择培养基允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长，因而培养基必须以苯磺隆为唯一碳源，只让目的菌株生存繁殖。(2)纯化菌株时，通常使用的划线工具是接种环(或接种针)；接种环在平板内的每一次划线前，都要先灼烧灭菌冷却后划线，而且要从上一次划线末端而非空白处划线，不冷却会烫死上次划线末端的菌株，从空白处划线是不会有菌落生长的。(3)图乙上清液中加入的蛋白酶溶液是用于水解上清液中的某蛋白质的，由此可判定实验假设是目的菌株通过分泌某种蛋白质来降解苯磺隆，但是尚需设置不加入蛋白酶的对照组实验，否则没有说服力，因而实验设计不合理。教师备用习题[答案](1)氮源和无机盐只有能利用苯磺隆的部编本语文，部编本初中语文，部编本小学语文，部编本语文课件，部编本语文试卷，小学语文，小学数学，小学英语，小学试卷小学英语试卷，小学数学试卷，小学英语试卷，初中语文数学化学，政治历史，科学课件，试卷温：语文教材的总主编和主要编写人员是全国申报遴选、教育部聘任的，编写组主要由三部分人组成，一是学科专家，包括一些大学教授、作家和诗人，二是优秀的教研员和教师，三是人教社的编辑。前后参加编写组的有60多人，另外还有外围的各学科的咨询专家、学者，人数就更多了。“部编本”语文教材的编写从2012年3月8日正式启动，到现在4年多了。以往教材编制都由出版社来实施，请个主编，搭起班子，最多也就用一二年。教材编写经过复杂的程序，包括确定大纲和体例框架、拟定样张、选文、进入具体编写等。起始年级初稿出来后，先后经过14轮评审，还请100名基层的特级教师提意见，最后才提交给教育部。提升。仅做学习交流，谢谢！部编本语文，部编本初中语文，部编本小学语文，部编本语文课件，部编本语文试卷，小学语文，小学数学，小学英语，小学试卷小学英语试卷，小学数学试卷，小学英语试卷，初中语文数学化学，政治历史，科学课件，试卷温：语文教材的总主编和主要编写人员是全国申报遴选、教育部聘任的，编写组主要由三部分人组成，一是学科专家，包括一些大学教授、作家和诗人，二是优秀的教研员和教师，三是人教社的编辑。前后参加编写组的有60多人，另外还有外围的各学科的咨询专家、学者，人数就更多了。“部编本”语文教材的编写从2012年3月8日正式启动，到现在4年多了。以往教材编制都由出版社来实施，请个主编，搭起班子，最多也就用一二年。教材编写经过复杂的程序，包括确定大纲和体例框架、拟定样张、选文、进入具体编写等。起始年级初稿出来后，先后经过14轮评审，还请100名基层的特级教师提意见，最后才提交给教育部。提升。仅做学习交流，谢谢！语文：初一新生使用的是教育部编写的教材，也称“部编”教材。“部编本”是指由教育部直接组织编写的教材。“部编本”除了语文，还有德育和历史。现有的语文教材，小学有12种版本，初中有8种版本。这些版本现在也都做了修订，和“部编本”一同投入使用。“部编本”取代原来人教版，覆盖面比较广，小学约占50%，初中约占60%。今秋，小学一年级新生使用的是语文出版社的修订版教材，还是先学拼音，后学识字。政治：小学一年级学生使用的教材有两个版本，小学一年级和初一的政治教材不再叫《思想品德》，改名为《道德与法治》。历史：初一新生使用华师大版教材。历史教材最大的变化是不再按科技、思想、文化等专题进行内容设置，而是以时间为主线，按照历史发展的时间顺序进行设置。关于部编版，你知道多少？为什么要改版？跟小编一起来了解下吧！一新教材的五个变化一、入学以后先学一部分常用字，再开始学拼音。汉字是生活中经常碰到的，但拼音作为一个符号，在孩子们的生活中接触、使用都很少，教学顺序换一换，其实是更关注孩子们的需求了。先学一部分常用常见字，就是把孩子的生活、经历融入到学习中。二、第一册识字量减少，由400字减少到300字。第一单元先学40个常用字，比如“地”字，对孩子来说并不陌生，在童话书、绘本里可以看到，电视新闻里也有。而在以前，课文选用的一些结构简单的独体字，比如“叉”字，结构比较简单，但日常生活中用得不算多。新教材中，增大了常用常见字的比重，减少了一些和孩子生活联系不太紧密的汉字。三、新增“快乐阅读吧”栏目，引导学生开展课外阅读。教材第一单元的入学教育中，有一幅图是孩子们一起讨论《西游记》等故事，看得出来，语文学习越来越重视孩子的阅读表达，通过读故事、演故事、看故事等，提升阅读能力。入学教育中第一次提出阅读教育，把阅读习惯提升到和识字、写字同等重要的地位。四、新增“和大人一起读”栏目，激发学生的阅读兴趣，拓展课外阅读。有家长担心会不会增加家长负担，其实这个“大人”包含很多意思，可以是老师、爸妈、爷爷、奶奶、外公、外婆等，也可以是邻居家的小姐姐等。每个人讲述一个故事，表达是不一样的，有人比较精炼，有人比较口语化，儿童听到的故事不同，就会形成不同的语文素养。五、语文园地里，新增一个“书写提示”的栏目。写字是有规律的，一部分字有自己的写法，笔顺都有自己的规则，新教材要求写字的时候，就要了解一些字的写法。现在信息技术发展很快，孩子并不是只会打字就可以，写字也不能弱化。二为什么要先识字后学拼音？一位语文教研员说，孩子学语文是母语教育，他们在生活中已经认了很多字了，一年级的识字课可以和他们之前的生活有机结合起来。原先先拼音后识字，很多孩子觉得枯燥，学的时候感受不到拼音的用处。如果先接触汉字，小朋友在学拼音的过程中会觉得拼音是有用的，学好拼音是为了认识更多的汉字。还有一位小学语文老师说：“我刚刚教完一年级语文，先学拼音再识字，刚进校门的孩子上来就学，压力会比较大，很多孩子有挫败感，家长甚至很焦急。现在让一年级的孩子们先认简单的字，可以让刚入学的孩子们感受到学习的快乐，消除他们害怕甚至恐惧心理。我看了一下网上的新教材，字都比较简单，很多小朋友都认识。”语文：初一新生使用的是教育部编写的教材，也称“部编”教材。“部编本”是指由教育部直接组织编写的教材。“部编本”除了语文，还有德育和历史。现有的语文教材，小学有12种版本，初中有8种版本。这些版本现在也都做了修订，和“部编本”一同投入使用。“部编本”取代原来人教版，覆盖面比较广，小学约占50%，初中约占60%。今秋，小学一年级新生使用的是语文出版社的修订版教材，还是先学拼音，后学识字。政治：小学一年级学生使用的教材有两个版本，小学一年级和初一的政治教材不再叫《思想品德》，改名为《道德与法治》。历史：初一新生使用华师大版教材。历史教材最大的变化是不再按科技、思想、文化等专题进行内容设置，而是以时间为主线，按照历史发展的时间顺序进行设置。关于部编版，你知道多少？为什么要改版？跟小编一起来了解下吧！一新教材的五个变化一、入学以后先学一部分常用字，再开始学拼音。汉字是生活中经常碰到的，但拼音作为一个符号，在孩子们的生活中接触、使用都很少，教学顺序换一换，其实是更关注孩子们的需求了。先学一部分常用常见字，就是把孩子的生活、经历融入到学习中。二、第一册识字量减少，由400字减少到300字。第一单元先学40个常用字，比如“地”字，对孩子来说并不陌生，在童话书、绘本里可以看到，电视新闻里也有。而在以前，课文选用的一些结构简单的独体字，比如“叉”字，结构比较简单，但日常生活中用得不算多。新教材中，增大了常用常见字的比重，减少了一些和孩子生活联系不太紧密的汉字。三、新增“快乐阅读吧”栏目，引导学生开展课外阅读。教材第一单元的入学教育中，有一幅图是孩子们一起讨论《西游记》等故事，看得出来，语文学习越来越重视孩子的阅读表达，通过读故事、演故事、看故事等，提升阅读能力。入学教育中第一次提出阅读教育，把阅读习惯提升到和识字、写字同等重要的地位。四、新增“和大人一起读”栏目，激发学生的阅读兴趣，拓展课外阅读。有家长担心会不会增加家长负担，其实这个“大人”包含很多意思，可以是老师、爸妈、爷爷、奶奶、外公、外婆等，也可以是邻居家的小姐姐等。每个人讲述一个故事，表达是不一样的，有人比较精炼，有人比较口语化，儿童听到的故事不同，就会形成不同的语文素养。五、语文园地里，新增一个“书写提示”的栏目。写字是有规律的，一部分字有自己的写法，笔顺都有自己的规则，新教材要求写字的时候，就要了解一些字的写法。现在信息技术发展很快，孩子并不是只会打字就可以，写字也不能弱化。二为什么要先识字后学拼音？一位语文教研员说，孩子学语文是母语教育，他们在生活中已经认了很多字了，一年级的识字课可以和他们之前的生活有机结合起来。原先先拼音后识字，很多孩子觉得枯燥，学的时候感受不到拼音的用处。如果先接触汉字，小朋友在学拼音的过程中会觉得拼音是有用的，学好拼音是为了认识更多的汉字。还有一位小学语文老师说：“我刚刚教完一年级语文，先学拼音再识字，刚进校门的孩子上来就学，压力会比较大，很多孩子有挫败感，家长甚至很焦急。现在让一年级的孩子们先认简单的字，可以让刚入学的孩子们感受到学习的快乐，消除他们害怕甚至恐惧心理。我看了一下网上的新教材，字都比较简单，很多小朋友都认识。”部编本语文，部编本初中语文，部编本小学语文，部编本语文课件，第34讲PART11微生物的培养和利用基础知识巩固│考点互动探究│考例考法直击│教师备用习题第34讲PART11微生物的培养基础知识巩固│考点互动探第34讲微生物的培养和利用考试说明1．微生物的分离和培养(实验探究能力)。2．某种微生物数量的测定(实验探究能力)。3．培养基对微生物的选择作用(实验探究能力)。4．微生物在其他方面的应用(实验探究能力)。第34讲微生物的培养和利用考试说明1．微生物的分离和培养(一、微生物的实验室培养1．培养基(1)概念：人们按照微生物对____________的不同需求，配制出供其生长繁殖的____________。(2)营养成分：水、________、________、无机盐四类营养物质，另外还需要满足微生物生长对_______、特殊营养物质以及________的要求。(3)类型基础知识巩固链接教材2.制作流程2．无菌技术(1)目的：获得________________。(2)关键：防止________的入侵。(3)无菌技术的主要方法及适用对象主要方法适用对象灭菌____________接种环、接种针干热灭菌培养皿等玻璃器具高压蒸汽灭菌____________消毒____________牛奶化学消毒________________________无菌室营养物质营养基质碳源氮源pH氧气固体液体纯净培养物杂菌灼烧灭菌培养基巴氏消毒操作者双手紫外线消毒一、微生物的实验室培养基础知识巩固链接教材2.制作流程2．3．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基(1)步骤：计算→_____→溶化→_____→倒平板。(2)倒平板的过程①在火焰旁右手拿锥形瓶，左手____________。②右手拿锥形瓶，使锥形瓶的瓶口迅速通过_______。③左手将培养皿打开一条缝隙，右手将培养基倒入培养皿，左手立刻盖上______________。④待平板冷却凝固后，将平板________放置，使皿盖在下、皿底在上。基础知识巩固链接教材4．纯化大肠杆菌图11­34­1

(1)平板划线法(图中________)：通过接种环在琼脂固体培养基表面________的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。称量灭菌

拔出棉塞火焰培养皿的皿盖倒过来A连续划线3．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基基础知识巩固链接教材4．纯化大基础知识巩固链接教材(2)稀释涂布平板法(图中________)：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到________________的表面，进行培养。当稀释倍数足够高时，即可获得单个细菌形成的________。5．菌种的保藏(1)对于频繁使用的菌种，可以采用__________法。(2)对于需要长期保存的菌种，可以采用________法。二、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1．筛选菌株(1)自然界中目的菌株筛选的依据：根据它对__________的要求，到相应的环境中去寻找。(2)实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于____________生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。B琼脂固体培养基菌落临时保藏甘油管藏生存环境目的菌株基础知识巩固链接教材(2)稀释涂布平板法(图中_______基础知识巩固链接教材(3)选择培养基：允许特定种类的微生物生长，同时________和________其他种类微生物生长的培养基。2．统计菌落数目(1)常用方法：________________法。(2)统计依据当样品的__________足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个________。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品大约含有多少活菌。(3)其他方法：还可利用_____________计数。3．设置对照设置对照的主要目的是排除实验组中____________对实验结果的影响，提高实验结果的__________，例如为了排除培养基被杂菌污染的可能性，需以________________培养基培养作为空白对照。抑制阻止稀释涂布平板稀释度活菌显微镜直接非测试因素可信度未接种的基础知识巩固链接教材(3)选择培养基：允许特定种类的微生物生项目内容实验原理

(1)能合成________的细菌才能分解尿素

(2)配制以________为唯一氮源的培养基，能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌实验流程土壤取样(富含____________)→配制土壤溶液和制备培养基→____________→涂布平板与培养→菌落________鉴定

(1)方法：在以尿素为唯一氮源的培养基中加入________指示剂培养分解尿素的细菌

(2)原理：细菌分解尿素的反应中，细菌合成脲酶将尿素分解成了________，其会使培养基中的________增强，pH升高基础知识巩固链接教材4．实验设计脲酶尿素有机质系列稀释计数酚红氨碱性项目内容实验原理(1)能合成________的细菌才能分解2．纤维素分解菌的筛选(1)方法：____________法。(2)原理：________。(3)培养基：以____________为唯一碳源的选择培养基。基础知识巩固链接教材三、分解纤维素的微生物的分离1．纤维素酶(1)纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括________、_________和_____________三种组分。(2)作用：纤维素______________________。C1酶CX酶葡萄糖苷酶纤维二糖葡萄糖刚果红染色透明圈红色复合物纤维素2．纤维素分解菌的筛选基础知识巩固链接教材三、分解纤维素的微基础知识巩固链接教材(4)实验流程纤维素选择培养基梯度稀释鉴别纤维素分解菌透明圈基础知识巩固链接教材(4)实验流程纤维素选择培梯度稀释鉴别纤考点一微生物的分离与培养考点互动探究１．消毒和灭菌的区别条件结果消毒较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子2．两种纯化细菌的方法的比较比较项目平板划线法稀释涂布平板法图示关键操作接种环在固体平板培养基表面连续划线

①一系列的梯度稀释；②涂布平板法操作考点一微生物的分离与培养考点互动探究１．消毒和灭菌的区别条考点互动探究比较项目平板划线法稀释涂布平板法注意事项每次划线前后均需灼烧接种环稀释度要足够高，为确保实验成功可以增加稀释度的范围菌体获取在具有显著的菌落特征的区域菌落中挑取菌体从适宜的稀释度的平板上的菌落中挑取菌体比较项目平板划线法稀释涂布平板法

优点可以根据菌落的特点获得某种微生物的单细胞菌落既可以获得单细胞菌落，又能对微生物计数缺点不能对微生物计数操作复杂，需要涂布多个平板考点互动探究比较项目平板划线法稀释涂布平板法注意事项每次划考点互动探究3．平板划线操作3个易错点(1)灼烧接种环之后，要冷却后再进行接种，以免温度太高杀死菌种。(2)划线时最后一区域不要与第一区域相连。(3)划线用力要大小适当，防止用力过大将培养基划破。考点互动探究3．平板划线操作3个易错点1．

[2016·安徽名校联盟模拟]根据微生物分离和培养的知识，回答下列问题：(1)分离纯化大肠杆菌的关键步骤是________，该步骤常用的方法有两种：____________和__________________，其中一种方法是将菌液进行一系列的________________，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养。(2)在微生物的实验室培养过程中，获得纯净培养物的关键是__________________，因此需要对培养基和培养皿进行________处理，操作者的双手需要进行清洁和________。(3)分离分解尿素的细菌的培养基中要以尿素为唯一________(填“碳源”或“氮源”)。考点互动探究典例追踪1．[2016·安徽名校联盟模拟]根据微生物分离和培养的考点互动探究[答案](1)接种平板划线法稀释涂布平板法梯度稀释(2)防止外来杂菌入侵灭菌消毒(3)氮源[解析]

(1)分离纯化大肠杆菌的关键步骤是接种，该步骤常用的方法有两种：平板划线法和稀释涂布平板法，其中稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养。(2)在微生物的实验室培养过程中，获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌入侵，因此需要对培养基和培养皿进行灭菌处理，操作者的双手需要进行清洁和消毒。(3)分离分解尿素的细菌的培养基中要以尿素为唯一氮源。考点互动探究[答案](1)接种平板划线法稀释涂布平板法2．

[2016·河南商丘一中模拟]回答下列有关微生物的相关问题：(1)在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑________、__________和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、__________、______________等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。(2)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能______________。考点互动探究典例追踪(3)通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的__________。(4)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_______________________________________________________。(5)若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过________处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。2．[2016·河南商丘一中模拟]回答下列有关微生物的相考点互动探究[解析]

(1)大肠杆菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、易培养、生活周期短等优点，培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑温度、酸碱度和渗透压等条件。(2)紫外线能使蛋白质变性，还能损伤DNA的结构。(3)对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的鉴定。(4)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生。(5)有的大肠杆菌会释放一种强烈的毒素，并可能导致肠道出现严重症状，使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。[答案](1)温度pH易培养生活周期短(2)损伤DNA的结构(3)鉴定(或分类)(4)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生(5)灭菌考点互动探究[解析](1)大肠杆菌具有体积小、结构简单、变考点二微生物的筛选与计数考点互动探究选择培养基的作用原理(1)在培养基中加入某种化学物质，如加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌；加入高浓度的食盐可以得到金黄色葡萄球菌。这里的加入是在满足基本所需培养成分的基础上加入。(2)改变培养基中的营养成分，如缺乏氮源时可以分离出固氮微生物；以石油作为唯一碳源时，可以分离出能消除石油污染的微生物。(3)改变微生物的培养条件，如将培养基放在高温环境中培养可以得到耐高温的微生物。(4)通过某些特殊环境分离微生物，如在高盐环境中可分离耐盐菌；在高温环境中可分离得到耐高温的微生物。考点二微生物的筛选与计数考点互动探究选择培养基的作用原理考点互动探究２．选择培养基与鉴别培养基的比较种类制备方法原理用途举例选择培养基培养基中加入某些化学物质依据某些微生物对某些物质或环境条件的嗜好、抗性而设计从众多微生物中分离所需的微生物加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌鉴别培养基培养基中加入某种指示剂或化学药品依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中的特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计鉴别不同种类的微生物伊红—美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌考点互动探究２．选择培养基与鉴别培养基的比较种类制备方法原理考点互动探究3．两种计数方法的比较比较项目间接计数法(稀释涂布平板法)直接计数法(显微计数法)原理当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量公式每克样品中的菌落数：(C÷V)×M。C：某稀释度下平板上生长的平均菌落数；V：涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)；M：稀释倍数每毫升原液所含细菌数：每小格平均细菌数×400×10000×稀释倍数缺点当两个或多个菌体连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落不能区分细胞死活结果比实际值偏小比实际值偏大考点互动探究3．两种计数方法的比较比较间接计数法直接计数法原1．[2016·江西赣州一模]某实验小组欲从豆油污染的土壤中筛选出能高效降解脂肪的菌株。请回答：(1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以__________为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于________培养基。(2)为避免培养皿污染，需将培养皿呈________状态放置。为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行____________处理。(3)为了筛选出菌株，可将适量的__________试剂滴加在平板中的菌落周围，洗去浮色后，如果菌落周围的现象是______________________，则说明此种菌能够分泌脂肪酶。(4)纯化菌种时，为了得到单菌落，可采用____________法将菌种接种于新的培养基平板上。考点互动探究典例追踪1．[2016·江西赣州一模]某实验小组欲从豆油污染的土壤考点互动探究[解析]

(1)欲筛选出能降解豆油的菌株，培养基中应只含有豆油而无其他碳源，不能降解豆油的细菌在此培养基上不能生存；从功能上讲，这类培养基属于选择培养基。(2)为避免培养皿污染，需将培养皿呈倒置状态放置；为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行梯度稀释处理。(3)由于脂肪遇苏丹Ⅳ试剂会出现红色，所以为了筛选出目的菌株，可将适量的苏丹Ⅳ试剂滴加在平板中的菌落周围，洗去浮色后，如果菌落周围的现象是出现透明圈、不出现红色圈，则说明此种菌能够分泌脂肪酶。(4)分离纯化菌种时，