猪繁殖与呼吸综合征病毒-课件

猪繁殖与呼吸综合征病毒

（Porcinereproductiveandrespiratorysyndrome

virus，PRRSV）

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)能引起猪的一种高度传染性疾病，又称“猪蓝耳病”。症状:

妊娠母猪的繁殖障碍(流产、死胎、木乃伊胎)。

各种年龄猪特别是仔猪的呼吸道疾病。一、PRRSV的形态特征1、套式病毒目动脉炎病毒科动脉炎病毒属

2、基本形态及核酸病毒粒子呈卵圆形，直径50～65nm。

核衣壳直径30～35nm，呈二十面体对称。

有囊膜。

单分子线状单股正链RNA病毒。3、病毒蛋白有核衣壳蛋白（N，分子质量120000u）和两种主要囊膜蛋白（M和GP5）。M是非糖基化的嵌膜蛋白，分子质量160000u。GP5为糖蛋白，分子质量约25000u。GP5与M通过二硫键形成二聚体，对病毒的感染力及中和作用至关重要。此外，还有4种次要囊膜蛋白（GP2、GP3、GP4及E）及两种大分子非结构蛋白（NSP）。

二、PRRSV的增殖与变异

1、病毒的增殖病毒增殖的细胞：猪的单核细胞-巨噬细胞系统内增殖猪肺泡巨噬细胞外周单核细胞肺间质巨噬细胞最为敏感在宿主细胞浆的空泡膜及滑面内质网小池膜上“出芽”，成熟的病毒粒子多蓄积在空泡腔内。

病毒增殖数量与其适应宿主细胞程度有密切关系。

病毒增殖的过程：

鼻黏膜或上呼吸道系统(巨噬细胞)血液循环初级复制部位

病毒增殖的特点：增殖的特点有严格的宿主专一性

对巨噬细胞有专嗜性。

抗体依赖性增强作用即在亚中和抗体水平存在的情况下，在细胞上的复制能力反而得到增强。2、病毒的变异PRRSV分为两个型：（1）以Lelystadvirus(LV株)为代表的欧洲型（简称A亚群）。（2）以ATCCVR-2332毒株为代表的美洲型（简称B亚群）。

两者在抗原上有显著差异，只有很少的交叉反应。

A亚群：广泛的基因组变异。

B亚群：呈较为保守性。不同毒株之间在毒力和致病力上有明显的差异。

我国的PRRSV均属美洲型，迄今还没有发现欧洲型株，同时我国的分离毒株也存在变异现象，现已发现有缺失变异毒株的存在。四、PRRSV的抵抗力1、病毒的稳定性受pH和温度的影响比较大。在pH﹤5或pH﹥7的条件下，其感染力降低95%以上。病毒在-70℃可保存18个月，4℃保存1个月，37℃48h，56℃45min完全失去感染力。

2、干燥可很快使病毒失活。3、对有机溶剂十分敏感，经氯仿处理后，其感染性可下降99.99％。4、对常用的化学消毒剂的抵抗力不强。

4、传播途径PRRSV主要传播途径是接触感染、空气传播，也可通过胎盘垂直传播。易感猪可经以下几种途径而感染病毒：经口、鼻腔、肌肉、腹腔、静脉及子宫内接种。与带毒猪直接接触。与污染有PRRSV的运输工具、器械接触。感染猪的流动也是本病的重要传播方式。六、PRRSV的实验室诊断该病毒确切诊断需依赖实验室诊断技术，包括病毒分离鉴定、血清学诊断和分子生物学诊断技术。（一）病毒分离鉴定病毒分离鉴定是诊断PRRSV最确切的方法1、病料首选材料：肺、扁桃体、脾、淋巴结和血清。适宜的检验材料：死产和流产胎儿的脾肺血清和胸水。检出率最高：弱胎猪和有呼吸道症状的急性感染猪。2、分离病毒的细胞

原代细胞：PAM。

传代细胞：CL2621、MAl04、Marcl45等细胞系。但就临诊分离率而言，PAM的敏感性要高于传代细胞。注意：（1）一般来说日龄小的猪对病毒的敏感性更高些。（2）首次传代有时可能无CPE，需盲传2～3代。（3）

不同的毒株可能适应不同的细胞系。有些毒株仅能在PAM或仅能在CL2621细胞中生长。欧洲株在PAM上的复制速度更快、效率更高。北美毒株在CL2621上更有利于分离。

3、病毒鉴定的技术（1）单克隆抗体或多克隆抗体免疫荧光抗体技术（2）单层过氧化物酶试验（3）RT-PCR技术（4）电镜技术（二）血清学诊断采用血清学抗体检测技术是应用最为广泛的实验室诊断方法。目前有4种不同的方法用于检测血清中的PRRSV抗体，包括：方法优点缺点间接免疫荧光抗体试验

（IFA）特异性高早期诊断抗原变异会影响结果结果主观判定免疫过氧化物酶单层试验（IPMA）

特异性高敏感性高早期诊断结果主观判定高背景抗原变异会影响结果

血清中和试验（SN）可检测期长敏感性低耗时抗原变异会影响结果酶联免疫吸附试验

（ELISA）自动化操作高品质控制高背景（三）分子生物学诊断技术1、RT-PCR2、巢式PCR3、原位PCR4、RT-PCR-RFLP5、