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浅析发酵中的染菌问题一.染菌问题的影响不到产品。染菌对不同发酵过程的影响青霉素发酵过程:由于许多杂菌都能产生青霉素酶,因此不管染菌是发生危害十分严重。核苷或核苷酸发酵过程:由于所用的生产菌种是多种营养缺陷型微生物,pH菌,但噬菌体污染对谷氨酸发酵的影响较大。染菌发生的不同时间对发酵的影响养液中几乎没有抗生素(产物)或只有很少抗生素(产物力低,容易污染杂菌。如在此阶段染菌,应将培养液全部废弃。发酵前期染菌:发酵前期菌量不很多,与杂菌没有竞争优势;且还未合成产物(抗生素)耗不多,可以重新灭菌,补加一些营养,重新接种再用。发酵中期染菌:发酵中期染菌会严重干扰产生菌的代谢。杂菌大量产酸,pH有时甚至会使已产生的产物分解。有时也会使发酵液发臭,产生大量泡沫。发酵后期染菌:发酵后期发酵液内已积累大量的产物,特别是抗生素,对严重,又破坏性较大,可以提前放罐。二.发酵异常现象种子培养异常(表现为培养的种子质量不合格):代谢不正常。发酵异常:菌体生长差;pH体浓度过高或过低;菌体生长差。三.染菌原因的分析从染菌的规模来分析染菌原因大批发酵罐染菌系统必须定期经常检查。分发酵罐(或罐组)染菌菌不彻底所造成的。个别发酵罐连续染菌和偶然染菌径都可能引起。从染菌的类型来分析所染杂菌的类型也是判断染菌原因的重要依据之一。一般认为,污染耐热3.不同污染时间分析在发酵过程的初始阶段发生染菌或称发酵前期染菌。此时大部分染菌也空气带菌等原因而引起。泡沫顶盖以及操作问题而引起染菌。四.染菌防治1种子带菌的及防止染菌、种子培养所涉及的设备和装置染菌。在制备种子时对砂土管、斜面、三角瓶及摇瓶均严格进行管理,防止杂菌有一定的长度,保存温度尽量保持相对稳定,不宜有太大变化受杂菌污染后才能使用空气带菌及其防治选用和装填、过滤介质的灭菌和管理等方面完善空气净化系统。加强生产环境的卫生管理,减少生产环境中空气的含菌量,正确选择采气压机进口空气的洁净度。设计合理的空气预处理工艺,尽可能减少生产环境中空气带油、水量,提止空气冷却器漏水,防止冷却水进入空气系统等。设计和安装合理的空气过滤器,防止过滤器失效。选用除菌效率高的过滤的剧变和流速的急增。操作失误导致染菌及其防治通常对于淀粉质培养基地灭菌采用实罐灭菌较好,一般在升温前先通过搅可避免“假压”造成染菌。要严防泡沫升顶,尽可能添加消泡剂防止泡沫的大量产生。用化学试剂浸泡等方法来灭菌。设备渗漏或“死角”造成的染菌及其防治设备渗漏主要是指发酵罐、补糖罐、冷却盘管、管道阀门等,由于化学腐蚀(发酵代谢所产生的有机酸等发生腐蚀作用)、电化学腐蚀、磨蚀、加工制作不良等原因形成微小漏孔后发生渗漏染菌。五.噬菌体感染和处理方法0.1引起噬菌体感染的原因设备的渗漏、空气系统、培养基灭菌不彻底。噬菌体感染防治槽中。取样、洗罐或倒罐的带菌液体要处理后才允许排入下水道。把好种子关,实现严格的无菌操作。用药液喷洒。如已感染噬菌体可采用以下处理方法:选育抗性菌株。轮换使用专一性不同的菌株。2~4ppm,0.1%三聚磷酸钠,0.6%檬酸钠或铵等)。将培养液重新灭菌再接种(噬菌体不耐热,70~80℃5其他方法。
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