药物分析技术十二五

药物分析技术第三章药物杂质检查技术123杂质的来源与杂质检查方法

一般杂质的检查

特殊杂质的检查

药物杂质检查技术学习目标1.掌握一般杂质检查的原理、方法及杂质限量计算2.熟悉特殊杂质的检查方法3.了解药物杂质检查的意义及药物杂质的来源和分类4.学会药物中常见一般杂质检查和特殊杂质检查的操作第一节杂质的来源与杂质检查方法杂质的来源与杂质检查方法药物的杂质：是指药物中存在的无治疗作用或影响药物的稳定性和疗效，甚至对人体健康有害的物质（一）杂质的来源：主要有两方面的来源一方面是由药物生产过程中引入一、杂质的来源及分类（一）杂质的来源另一方面是在贮藏过程中引入

（二）杂质的分类1.按来源可分为一般杂质和特殊杂质（1）一般杂质是指在自然界中分布较广泛，在多种药物的生产和贮藏过程中容易引入的杂质（2）特殊杂质是指在药物的生产和贮藏过程中，根据药物的性质和生产工艺而引入的杂质

2.按性质可分为信号杂质和有害杂质（1）信号杂质本身一般无害，但其含量的多少可以反映出药物的纯度水平（2）有害杂质对人体有毒害或影响药物的稳定性，如重金属、砷盐等，在质量标准中应严格加以控制，以保证用药安全（二）杂质的分类（一）杂质限量杂质限量是指药物中所含杂质的最大允许量通常用百分之几或百万分之几来表示：如葡萄糖中氯化物的限量为0.01%,重金属的限量为百万分之五二、杂质限量与杂质检查方法杂质的限量检查可分为以下3种方法：1.对照法对照法是将供试品溶液与待检杂质对照溶液，在相同条件下处理后，比较反应结果，从而判断供试品中所含杂质是否超过限量。特点：不需知道杂质的准确含量颜色浑浊色斑比色比浊比较色斑（二）杂质检查方法杂质的限量检查可分为以下3种方法：2.灵敏度法的方法。本法的特点是不需要对照物质，而是以供试品不出现阳性反应为限度。特点：不需对照物质（二）杂质检查方法杂质的限量检查可分为以下3种方法：3.比较法比较法是指取供试品一定量依法检查，测定与待检杂质含量相关的吸光度或旋光度等指标，不得超过规定值，以此控制杂质的限量。特点：准确测定杂质的量，不需对照品（二）杂质检查方法（三）杂质限量计算1.药物中的杂质主要由

和

引入2.杂质限量是指药物中所含杂质的

。通常用

或

来表示3.杂质限量的检查方法主要有

、

、和

三种点滴积累第二节一般杂质的检查（一）原理：对照法（比浊法）一、氯化物检查法1.标准氯化钠溶液的制备2.供试品溶液的制备3.对照溶液的制备4.比浊5.记录和结果判断（二）检查方法1.应遵循平行操作原则供试品管和对照液管的操作应同时进行，加入试剂顺序要一致2.加入硝酸的目的3.如何观察4.供试品溶液如带颜色的处理5.供试液如不澄清的处理（三）注意事项（一）原理：对照法（比浊法）二、硫酸盐检查法硫酸盐检查法的操作流程与氯化物检查法相同，包括：标准硫酸钾溶液的制备→供试品溶液和对照溶液的制备→加入沉淀试剂25%氯化钡溶液→比浊→记录和结果判断等（二）检查方法1.应遵循平行操作原则：供试品管和对照液管的操作应同时进行，加入试剂顺序要一致2.加入盐酸的目的3.如何观察4.供试品溶液如带颜色的处理5.供试液如不澄清的处理（三）注意事项（一）原理：对照法（比色法）三、铁盐检查法标准铁溶液的制备→供试品溶液和对照溶液的制备→加入显色剂30%硫氰酸铵溶液→比色→记录和结果判断等（二）检查方法1.反应在盐酸酸性溶液中进行，可防止Fe3+水解，在中性或碱性溶液中，Fe3+水解生成棕色或棕红色的产物，影响检查2.加入过硫酸铵的目的将供试品可能存在的Fe2+氧化成Fe3+

，同时可以防止红色的硫氰酸铁受光照还原或分解3.加入过硫酸铵的目的将供试品可能存在的Fe2+氧化成Fe3+

，同时可以防止红色的硫氰酸铁受光照还原或分解（三）注意事项重金属系指在试验条件下，能够与硫代乙酰胺或硫化钠作用显色的金属杂质。如银、锑、汞、铅、铜、铋、铬、锡、锌等重金属影响用药安全或药物的稳定性，必须严格控制其限量四、重金属检查法《中国药典》2010年版采用比色法检查，共收载了3种检查方法。主要讲解第一法第一法：硫代乙酰胺法（一）原理：对照法（比色法）

四、重金属检查法1.标准铅溶液的制备2.检查溶液的制备对照溶液的制备（甲管）供试品溶液的制备（乙管）监控管溶液的制备（丙管）3.比色4.结果判断（二）检查方法1.重金属硫化物生成的最佳pH是3.0～3.52.标准铅溶液应在临用前精密量取铅贮备液新鲜稀释配制，以防止硝酸铅水解而造成误差,配制与贮藏用的玻璃容器均不得含铅3.第一法中的丙管，也称为监控管，是为了防止出现假象（三）注意事项砷的危害五、砷盐检查法第一法（古蔡氏法）检砷装置：五、砷盐检查法As3+

＋3Zn＋3H+→3Zn2+

＋AsH3↑AsO33-

＋3Zn＋9H+→3Zn2+

＋3H2O＋AsH3↑AsO43-

＋4Zn＋11H+→4Zn2+

＋4H2O＋AsH3↑砷化氢与溴化汞试纸作用生成色斑：AsH3+2HgBr2→2HBr+AsH(HgBr)2

（黄色）AsH3+3HgBr2→3HBr+As(HgBr)3

（棕色）（一）原理：对照法（比较色斑颜色）1.标准砷溶液的制备2.标准砷斑的制备3.供试品砷斑的制备4.比色5.结果判断（二）检查方法1.在反应液中加入碘化钾和酸性氯化亚锡的目的2.在检砷装置的导气管中装入醋酸铅棉花的目的3.醋酸铅棉花的装填要求4.所用仪器和试液等照本法检查，均不应生成砷斑，或至多生成仅可辨认的斑痕（三）注意事项主要检查检查药物中的酸性、碱性杂质（一）指示剂法在供试品溶液中加入规定的指示液，根据指示液的颜色变化来控制酸性、碱性杂质的限量（二）酸碱滴定法在一定指示液条件下，以消耗一定量的酸或碱滴定液来控制药物中的碱性、酸性杂质的限量六、酸碱度检查法主要检查检查药物中的酸性、碱性杂质（三）pH测定法按照《中国药典》2010年版通则中的规定用电位法（使用酸度计）测定溶液的pH，以控制其酸碱性杂质的限量六、酸碱度检查法干燥失重系指药物在规定的条件下，经干燥后所减失重量的百分率，该法主要检查吸湿水、结晶水及在该条件下能挥发减失的物质(如乙醇等)七、干燥失重测定法常用的干燥方法有：1.恒温常压干燥法（烘箱干燥法）2.干燥剂干燥法3.恒温减压干燥法

（一）操作方法（二）记录和结果计算1.供试品干燥时应注意的问题2.从干燥器中取出供试品后应注意的问题3.干燥器中常用的干燥剂为硅胶、五氧化二磷或无水氯化钙。干燥剂应及时更换,使其保持有效状态（三）注意事项氯化物检查、硫酸盐检查、铁盐检查、重金属检查、砷盐检查常用的沉淀（显色）剂、标准溶液分别是什么？反应的现象是什么？点滴积累第三节特殊杂质检查特殊杂质检查特殊杂质是指该药物在生产和贮藏过程中，因药物本身的性质或生产工艺条件，有可能引入的杂质。如阿司匹林中的游离水杨酸、肾上腺素中的酮体、硫酸阿托品中的莨菪碱等一、利用药物和杂质在物理性质上的差异进行检查二、利用药物和杂质在化学性质上的差异进行检查三、利用药物和杂质在色谱行为上的差异进行检查常用检查方法三、利用药物和杂质在色谱行为上的差异进行检查（一）薄层色谱法（TLC）常用检查方法利用各成分对同一吸附剂吸附能力不同，在流动相（又叫展开剂）流过固定相（又叫吸附剂）的过程中，各成分连续的产生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附，形成差速迁移，从而达到各成分互相分离的目的（一）薄层色谱法（TLC）（二）高效液相色谱法（HPLC）高效液相色谱法1.不加校正因子的主成分自身对照法《中国药典》2010年版规定，按各品种项下规定，取一定量的供试品溶液稀释成与杂质限量相当的溶液，作为对照溶液，然后取供试品溶液和对照溶液适量，分别进样，除另有规定外，供试品溶液的分析时间应为主成分色谱峰保留时间的2倍，测量供试品溶液色谱图上各杂质的峰面积，并与对照溶液主成分的峰面积比较，计算杂质含量（二）高效液相色谱法（HPLC）2.面积归一化法《中国药典》2010年版规定，按各品种项下的规定，配制供试品溶液，取一定量注入仪器，记录色谱图。测量各峰的面积和色谱图上除溶剂峰以外的总色谱峰面积，计算各峰面积占总峰面积的百分率（二）高效液相色谱法（HPLC）药物特殊杂质的检查方法有哪几种？点滴积累目标检测一、单项选择题（A型题）1.药物杂质检查的目的是（）A.控制药物的纯度B.控制药物疗效C.控制药物的有效成分D.控制药物毒性E.检查生产工艺的合理性2.药物中杂质的限量是指（）A.杂质是否存在B.杂质的准确含量C.杂质的最低量D.杂质的最大允许量E.确定杂质的数目目标检测一、单项选择题（A型题）3.杂质检查一般为（）A.限度检查B.含量检查C.检查最低量D.检查最大允许量E.用于原料药检查4.药物中硫酸盐检查时，所用的对照溶液

为（）A.标准氯化钡

B.标准醋酸铅溶液C.标准硝酸银溶液

D.标准硫酸钾溶液E.以上都不对一、单项选择题（A型题）5.古蔡氏法检测砷时，砷化氢气体与下列哪种物质作用生成砷斑（）A.氯化汞B.溴化汞C.碘化汞D.硫化汞E.硝酸汞目标检测一、单项选择题（A型题）6.关于药品中重金属检查，下列说法不正确的是（）A.在酸性溶液中，要以硫代乙酰胺作显色剂B.在碱性溶液中，要以硫化钠作显色剂C.调整供试液为酸性时，用醋酸盐缓冲液D.标准铅溶液通常使用醋酸铅配制E.比色时应将试管置白色衬底上观察目标检测一、单项选择题（A型题）7.用硫代乙酰胺法检查重金属，其pH范围应控制在（）A.2.0～3.5B.3.0～3.5C.6.0～6.5D.7.0～8.5E.9.0～10.58.在古蔡氏法中，加入碘化钾及氧化亚锡试液的主要作用是还原（）A.五价砷成砷化氢B.三价砷成砷化氢C.五价砷成三价砷D.硫成硫化氢E.锑成锑化氢目标检测一、单项选择题（A型题）9.检砷装置导气管中塞入醋酸铅棉花，是为了吸收（）A.氢气B.溴化氢C.硫化氢D.砷化氢E.锑化氢10.检查铁盐杂质，《中国药典》2010年版

使用的显色剂是（）A.硫氰酸铵B.水杨酸钠C.高锰酸钾D.过硫酸铵E.巯基醋酸

目标检测一、单项选择题（A型题）11.《中国药典》2010年版

中用硫氰酸盐法检查铁盐杂质时，将供试品中的Fe2+氧化成Fe3+，使用的氧化剂是（）A.硫酸B.过硫酸铵C.硫代硫酸钠D.过氧化氢E.高锰酸钾12.检查重金属杂质，加入硫代乙酰胺试液，其作用是（）A.稳定剂B.显色剂C.掩蔽剂D.络合剂E.增溶剂

目标检测一、单项选择题（A型题）13.常压恒温干燥法中，《中国药典》2010年版规定的干燥温度一般为（）A.80℃B.90℃C.100℃D.105℃E.120℃目标检测二、配位选择题（B型题）[14～18]以下各项杂质检查中所使用的试剂为：A.硫代乙酰胺试液B.氯化钡试液C.硝酸银试液D.氯化亚锡试液E.硫氰酸铵试液14.药物中铁盐检查（）15.药物中砷盐检查（）16.药物中硫酸盐检查（）17.葡萄糖中重金属检查（）18.药物中氯化物检查（）

目标检测二、配位选择题（B型题）[19～23]以下各项杂质检查中要求在酸性条件下进行，所用的酸为：A.盐酸B.硫酸C.硝酸D.醋酸盐缓冲液E.磷酸19.氯化物的检查（）20.硫酸盐的检查（）21.铁盐的检查（）22.重金属的检查（）23.砷盐的检查（）目标检测三、多项选择题（X型题）24.药物中引入杂质的途径有（）A.生产过程中

B.服用过程中

C.使用过程中

D.储藏过程中

E.运输过程中25.检查药物中的氯化物杂质，需要用下列哪些试剂（）A.稀盐酸B.