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文档简介
实验九微生物的浓度测定—血球技术板一、目的要求1.明确血细胞计数板计数的原理2.掌握使用血细胞计数板进行微生物计数的方法。二、基本原理
微生物个体生长的时间较短,很快进入分裂繁殖阶段,个体生长难以测定。它们的生长一般以繁殖即群体生长作为微生物生长的指标。群体生长表现为细胞数目的增加或细胞物质的增加。测定数目的方法有显微镜直接计数法、平板计数法、光电比浊法等。显微镜直接计数法是将小量待测样品的悬浮液置于一种特别的具有确定面积和容积的载玻片上,于显微镜下直接计数的一种简便、快速、直观的方法。
三、实验材料酵母菌液显微镜、血球计数器3.盖玻片、毛细管等
Thoma血球计数板
A.正面图B.纵切面图
1.血球计数板2.盖玻片3.计数室25中格×16小格计数室
16中格×25小格计数室
计数室的两种刻度形式四、实验内容一.酵母菌数量的检测(显微镜直接计数法)注意事项:
取样时先要摇匀菌液;加样时计数室不可有气泡产生。B.调节显微镜光线的强弱适当。
5.计算方法:
6.注意事项:压在方格线上的菌体,以压在底线和右侧线上的菌体计入本格内;遇到有芽体的酵母时,若芽体和母体同等大,就按单个酵母计数。
7.计数完毕后,血球计数板要立即清洗干净,并用吸水纸吸干,最后用擦镜纸擦干净,并放回盒内。
(X1+X2+X3+X4+X5)5X25(或16)X10X1000x稀释倍数
酵母菌细胞数/mL=四、实验内容五、实验报告1、思考题:
(1)在显微镜下直接测定微生物数量有什么优缺点?(2)根据你的体会,说明用血球计数板计数的误差主要来自哪些方面?应如何尽量减少误差,力求准确
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