尿液检验标准化、质控进展课件

尿液检验标准化、质控进展曾真现状

解决方案尿液检验标准化、质控进展曾真现状

解决方1第一章

干化学检测尿液

有形成分质控

第一章

干化学检测尿液

有形成分质控

2检测化学项目多、速度快；检测是红细胞、中性粒细胞的化学成分；质控物为化学物质，不是真实形态学成分；现状检测化学项目多、速度快；现状3干化学的问题特异性不够好；干扰物质的影响不能质控；许多有形成分不能检测；本底干扰检测结果：本底+尿液颜色干扰；尿液漏滴造成漏检；干化学方法自身不能证实检测的真实性；不符合ISO15189；只能是过筛检测；问题干化学的问题特异性不够好；问题4例：干化学对白细胞检测的局限性检测粒细胞的酯酶淋巴细胞不能检测干扰物质：庆大、先锋、甲醛、胆红质等例：干化学对白细胞检测的局限性检测粒细胞的酯酶5对策镜检证实和检测不能检测的有形成分；使用特异性检测方法检测化学成分；改进方法，减少本底干扰和漏检；对策镜检证实和检测不能检测的有形成分；6第二章

有形成分检测仪器的质控

第二章

有形成分检测仪器的质控

7有形成分检测仪器技术不同质控不同流式：质控物为特制颗粒物；机器视觉技术：红细胞没有质控物的仪器现状有形成分检测仪器技术不同质控不同流式：质控物为特制颗粒物；现8

第一节

流式技术仪器

第一节

流式技术仪器

9质控依据是血液分析质控物为特制颗粒，不是尿液有形成分，为替代品，与实际检测无系统属性；干扰物影响无法质控和检测；检测错误时检测者无法获悉；分类计数无意义；实际意义是质控计数准确性；质控依据和问题流式质控依据是血液分析质控依据和问题流式10特制颗粒质控物，实际检测无系统属性流式特制颗粒质控物，实际检测无系统属性流式11无法质控干扰错误结晶、酵母菌误识别为红细胞流式标记物红细胞仪器不能审核真菌结晶无法质控干扰错误结晶、酵母菌误识别为红细胞流式标记物红12检测错误时仪器无法知道流式检测错误时仪器无法知道流式13优势和不足优势：

1、流式+图像：实现仪器检测验证功能；2、图像更直观、可信；不足1、因为拍不到清晰图片，所有图像按相似性处理获得，由仪器内图库提供单一成分的图片；2、拍不到清晰图片，识别极易出错，验证功能打折扣；3、验证错误导致提供图片错误，结果不正确；结论仍然不能代替镜检数字图像流式优势和不足优势：数字图像流式14（CLSI原NCCLS)尿液分析操作指南（第三版）GP16-A3(2009)（CLSI原NCCLS)GP16-A315Number4GP16-A3

24©ClinicalandLaboratoryStandardsInstitute.Allrightsreserved.

10.1.2UrineParticleAnalyzers64-68Automatedurineanalyzersusevarioustechnologiestoclassifyandenumerateparticlesinurine.Dependingontheinstrument,thetechnologiesincorporatedcanincludeimpedance,

digitalimagingflowcytometry,

flowcytometry,

lightscatter,dyes,fluorescence,orsomecombinationthereof.Particleswithlikecharacteristicsarethengroupedandclassified.TheelementsthataretypicallyidentifiedincludeRBC,WBC,epithelialcells(squamousandnonsquamous),casts(benignandpathologic),bacteria,sperm,mucus,crystals,andsmallroundcells.Samplesshowingabnormalities,eitherlaboratory-definedorasindicatedbytheanalyzer,arethenreviewedmicroscopicallybyatechnologist.Negativesamplesmayobviatetheneedformanualmicroscopy.Number4GP16-A3

24©Clinical16国际标准（GP16-A32009年）给出的解决对策1、数字图像流式细胞仪、流式细胞仪等标本不论是实验室认为或仪器检测异常时（Samplesshowingabnormalities,eitherlaboratory-definedorasindicatedbytheanalyzer,）必须用人工镜检方法重新检测确认。2、阴性结果可以免除镜检确认。国际标准（GP16-A32009年）给出的解决对策1、数字17国际标准的参考文献64DelangheJ.Newscreeningdiagnostictechniquesinurinalysis.ActaClinBelg.2019;62:155-161.65OttigerC,HuberAR.Quantitativeurineparticleanalysis:integrativeapproachfortheoptimalcombinationofautomationwithUF-100andmicroscopicreviewwithKOVAcellchamber.ClinChem.2019;49:617-623.66DelangheJR,KouriTT,HuberAR,etal.Theroleofautomatedurineparticleflowcytometryinclinicalpractice.ClinChimActa.2000;301:1-18.67RoggemanS,ZamanZ.Safelyreducingmanualurinemicroscopyanalysesbycombiningurineflowcytometerandstripresults.AmJClinPathol.2019;116:872-878.68ShayanfarN,ToblerU,vonEckardsteinA,BestmannL.Automatedurinalysis:firstexperiencesandacomparisonbetweentheIrisiQ200urinemicroscopysystem,theSysmexUF-100flowcytometerandmanualmicroscopicparticlecounting.ClinChemLabMed.2019;45:1251-1256.国际标准的参考文献64DelangheJ.Newsc18

第二节

机器视觉技术仪器

第二节

机器视觉技术仪器

19质控依据机器视觉方法学：显微镜镜检与人工显微镜镜检区别：操作自动化前期仪器能智能识别计数尿液有形成分国际标准：ISLH

RecommendedReferenceProcedurefortheEnumerationofParticlesinUrine(2019)质控依据机器视觉方法学：显微镜镜检20ISLH主要内容1、不离心尿液直接检测，计数池体积达到6.4ul2、低倍镜

观察计数大型有形成分（上皮细胞、管型）；高倍镜

观察计数小型有形成分（细胞、真菌、结晶等）3、结果以“个/ul”报告。4、统计学精度

低倍：（管型和上皮）至少计数50个

CV<14%；

高倍：（红、白细胞等）至少计数200个，

CV<7%；ISLH主要内容1、不离心尿液直接检测，计数池体积达到6.421一、标准镜检参考方法的检测特点不离心尿液直接镜检改变离心尿液沉渣镜检检测体积：最大体积6.4ul(不是1ul)

目的：提高灵敏度，确保检测准确性

原因：不离心尿液直接镜检极易漏检报告：个/ul一、标准镜检参考方法的检测特点不离心尿液直接镜检22机器视觉技术采取的方法检测：不离心尿液直接检测检测体积：大于6.4ul（通过低倍镜大面积扫描定位。高倍镜跟踪识别而实现）实现：低浓度不漏检灵敏度达到：1个细胞/ul检测报告：个/ul机器视觉技术采取的方法检测：不离心尿液直接检测23必须有两个镜头：高倍镜和低倍镜两个镜头观察的内容不同（大小不同）两个镜头观察的范围不同（体积范围不同）两个镜头观察的细节不同（分辨率不同）二、标准镜检参考方法的基本要求：必须有两个镜头：高倍镜和低倍镜二、标准镜检参考方法的基本要求24采用两个镜头：高倍镜和低倍镜检测方式完全按照显微镜镜检方法机器视觉技术采取的方法采用两个镜头：高倍镜和低倍镜机器视觉技术采取的方法25仪器工作流程

完全参照人工镜检标准参考方法进样充池低倍过筛（视野数可设置）低倍定位分类计数（管型、上皮）高倍识别分类计数报告清洗阴性阳性人工辅判仪器工作流程进充低倍过筛低倍定位分类计数高倍识别报清洗阴性26统计学精度低倍：（管型和上皮）至少计数50个CV<14%；高倍：（红、白细胞等）至少计数200个，

CV<7%；这是在有形成分浓度不低时候的理想统计学精度三、标准镜检参考方法的理想精密度统计学精度三、标准镜检参考方法的理想精密度27通过低倍镜：大面积扫描定位。高倍镜：跟踪识别而实现

上海检验中心检测认证：CV为4%临界浓度：分布不均匀，检测体积过大；机器视觉技术采取的方法通过机器视觉技术采取的方法28机器视觉目前质控的不足：质控物只有单一红细胞；其他有形成分暂时没有质控商品，期待；所有的有形成分智能分类计数水平有提升空间，在此期间人工审核不能少；标准图库建立和指导意义大，需要增加和加强；实际意义：质控计数准确性；分类计数在人工审核后才具有意义；机器视觉目前质控的不足：质控物只有单一红细胞；其他有形成分暂29第三节

数字图像自动化仪器

如何达到人工镜检标准

第三节

数字图像自动化仪器

如何达到人工镜检标准

30自动化数字图像仪器=人工镜检条件是否符合ISLH（2019年）的国际标准条件；是否是使用的具有高、低倍镜的显微镜;拍摄图像是否是真实显微镜下的实景？图像经过处理否？检测灵敏度能否达到:3-10个细胞/ul;结果有人工审核；审核人员专业知识、经验、能力、责任心；自动化数字图像仪器=人工镜检条件31仪器技术原因：主要是检测灵敏度达不到要求，不能质控；识别能力不理想，无法质控；单镜头的局限性，虽有图像，小的看不清，全局面不够；检测体积达不到国际标准要求，精确度较差；问题无质控品的仪器仪器技术原因：主要是检测灵敏度达不到要求，不能质控；问题32第四节

如何能是尿液检测标准和正确

尿液检验标准化、质控进展课件33如何能是尿液检测标准和正确按国际标准文件ISLH（2019）和GP16-A3执行，不折扣；尿液检验必须包括：理想、化学和镜检；任何仪器检测结果必须与人工镜检相符合；总原则如何能是尿液检测标准和正确按国际标准文件总原则34非形态学自动化仪器检测的阳性结果必须镜检复检（按GP16-A3）；非形态学自动化仪器干扰成分必须镜检区分；自动化仪器灵敏度必须达到：3-10个细胞/ul干化学和流式结合再次过筛不科学；如何能是尿液检测标准和正确流式非形态学自动化仪器检测的阳性结果必须镜检复检（按GP16-A35以ISLH(2019)考核；镜检自动化仪器人工审核不能省略；镜检自动化仪器灵敏度必须达到：3-10个细胞/ul如何能是尿液检测标准和正确形态学仪器以ISLH(2019)考核；如何能是尿液检测标准和正确形态学36单镜头仪器需要研究和证实的是小的有形成分是否能准确识别和区分，同时检测体积能否达到要求，以免漏检；质控中应在定性准确的基础上要求定量准确，如果定性不好，片面强调定量准确无意义；如何能是尿液检测标准和正确单镜头仪器如何能是尿液检测标准和正确37谢谢！谢谢！38尿液检验标准化、质控进展课件39尿液检验标准化、质控进展曾真现状

解决方案尿液检验标准化、质控进展曾真现状

解决方40第一章

干化学检测尿液

有形成分质控

第一章

干化学检测尿液

有形成分质控

41检测化学项目多、速度快；检测是红细胞、中性粒细胞的化学成分；质控物为化学物质，不是真实形态学成分；现状检测化学项目多、速度快；现状42干化学的问题特异性不够好；干扰物质的影响不能质控；许多有形成分不能检测；本底干扰检测结果：本底+尿液颜色干扰；尿液漏滴造成漏检；干化学方法自身不能证实检测的真实性；不符合ISO15189；只能是过筛检测；问题干化学的问题特异性不够好；问题43例：干化学对白细胞检测的局限性检测粒细胞的酯酶淋巴细胞不能检测干扰物质：庆大、先锋、甲醛、胆红质等例：干化学对白细胞检测的局限性检测粒细胞的酯酶44对策镜检证实和检测不能检测的有形成分；使用特异性检测方法检测化学成分；改进方法，减少本底干扰和漏检；对策镜检证实和检测不能检测的有形成分；45第二章

有形成分检测仪器的质控

第二章

有形成分检测仪器的质控

46有形成分检测仪器技术不同质控不同流式：质控物为特制颗粒物；机器视觉技术：红细胞没有质控物的仪器现状有形成分检测仪器技术不同质控不同流式：质控物为特制颗粒物；现47

第一节

流式技术仪器

第一节

流式技术仪器

48质控依据是血液分析质控物为特制颗粒，不是尿液有形成分，为替代品，与实际检测无系统属性；干扰物影响无法质控和检测；检测错误时检测者无法获悉；分类计数无意义；实际意义是质控计数准确性；质控依据和问题流式质控依据是血液分析质控依据和问题流式49特制颗粒质控物，实际检测无系统属性流式特制颗粒质控物，实际检测无系统属性流式50无法质控干扰错误结晶、酵母菌误识别为红细胞流式标记物红细胞仪器不能审核真菌结晶无法质控干扰错误结晶、酵母菌误识别为红细胞流式标记物红51检测错误时仪器无法知道流式检测错误时仪器无法知道流式52优势和不足优势：

1、流式+图像：实现仪器检测验证功能；2、图像更直观、可信；不足1、因为拍不到清晰图片，所有图像按相似性处理获得，由仪器内图库提供单一成分的图片；2、拍不到清晰图片，识别极易出错，验证功能打折扣；3、验证错误导致提供图片错误，结果不正确；结论仍然不能代替镜检数字图像流式优势和不足优势：数字图像流式53（CLSI原NCCLS)尿液分析操作指南（第三版）GP16-A3(2009)（CLSI原NCCLS)GP16-A354Number4GP16-A3

24©ClinicalandLaboratoryStandardsInstitute.Allrightsreserved.

10.1.2UrineParticleAnalyzers64-68Automatedurineanalyzersusevarioustechnologiestoclassifyandenumerateparticlesinurine.Dependingontheinstrument,thetechnologiesincorporatedcanincludeimpedance,

digitalimagingflowcytometry,

flowcytometry,

lightscatter,dyes,fluorescence,orsomecombinationthereof.Particleswithlikecharacteristicsarethengroupedandclassified.TheelementsthataretypicallyidentifiedincludeRBC,WBC,epithelialcells(squamousandnonsquamous),casts(benignandpathologic),bacteria,sperm,mucus,crystals,andsmallroundcells.Samplesshowingabnormalities,eitherlaboratory-definedorasindicatedbytheanalyzer,arethenreviewedmicroscopicallybyatechnologist.Negativesamplesmayobviatetheneedformanualmicroscopy.Number4GP16-A3

24©Clinical55国际标准（GP16-A32009年）给出的解决对策1、数字图像流式细胞仪、流式细胞仪等标本不论是实验室认为或仪器检测异常时（Samplesshowingabnormalities,eitherlaboratory-definedorasindicatedbytheanalyzer,）必须用人工镜检方法重新检测确认。2、阴性结果可以免除镜检确认。国际标准（GP16-A32009年）给出的解决对策1、数字56国际标准的参考文献64DelangheJ.Newscreeningdiagnostictechniquesinurinalysis.ActaClinBelg.2019;62:155-161.65OttigerC,HuberAR.Quantitativeurineparticleanalysis:integrativeapproachfortheoptimalcombinationofautomationwithUF-100andmicroscopicreviewwithKOVAcellchamber.ClinChem.2019;49:617-623.66DelangheJR,KouriTT,HuberAR,etal.Theroleofautomatedurineparticleflowcytometryinclinicalpractice.ClinChimActa.2000;301:1-18.67RoggemanS,ZamanZ.Safelyreducingmanualurinemicroscopyanalysesbycombiningurineflowcytometerandstripresults.AmJClinPathol.2019;116:872-878.68ShayanfarN,ToblerU,vonEckardsteinA,BestmannL.Automatedurinalysis:firstexperiencesandacomparisonbetweentheIrisiQ200urinemicroscopysystem,theSysmexUF-100flowcytometerandmanualmicroscopicparticlecounting.ClinChemLabMed.2019;45:1251-1256.国际标准的参考文献64DelangheJ.Newsc57

第二节

机器视觉技术仪器

第二节

机器视觉技术仪器

58质控依据机器视觉方法学：显微镜镜检与人工显微镜镜检区别：操作自动化前期仪器能智能识别计数尿液有形成分国际标准：ISLH

RecommendedReferenceProcedurefortheEnumerationofParticlesinUrine(2019)质控依据机器视觉方法学：显微镜镜检59ISLH主要内容1、不离心尿液直接检测，计数池体积达到6.4ul2、低倍镜

观察计数大型有形成分（上皮细胞、管型）；高倍镜

观察计数小型有形成分（细胞、真菌、结晶等）3、结果以“个/ul”报告。4、统计学精度

低倍：（管型和上皮）至少计数50个

CV<14%；

高倍：（红、白细胞等）至少计数200个，

CV<7%；ISLH主要内容1、不离心尿液直接检测，计数池体积达到6.460一、标准镜检参考方法的检测特点不离心尿液直接镜检改变离心尿液沉渣镜检检测体积：最大体积6.4ul(不是1ul)

目的：提高灵敏度，确保检测准确性

原因：不离心尿液直接镜检极易漏检报告：个/ul一、标准镜检参考方法的检测特点不离心尿液直接镜检61机器视觉技术采取的方法检测：不离心尿液直接检测检测体积：大于6.4ul（通过低倍镜大面积扫描定位。高倍镜跟踪识别而实现）实现：低浓度不漏检灵敏度达到：1个细胞/ul检测报告：个/ul机器视觉技术采取的方法检测：不离心尿液直接检测62必须有两个镜头：高倍镜和低倍镜两个镜头观察的内容不同（大小不同）两个镜头观察的范围不同（体积范围不同）两个镜头观察的细节不同（分辨率不同）二、标准镜检参考方法的基本要求：必须有两个镜头：高倍镜和低倍镜二、标准镜检参考方法的基本要求63采用两个镜头：高倍镜和低倍镜检测方式完全按照显微镜镜检方法机器视觉技术采取的方法采用两个镜头：高倍镜和低倍镜机器视觉技术采取的方法64仪器工作流程

完全参照人工镜检标准参考方法进样充池低倍过筛（视野数可设置）低倍定位分类计数（管型、上皮）高倍识别分类计数报告清洗阴性阳性人工辅判仪器工作流程进充低倍过筛低倍定位分类计数高倍识别报清洗阴性65统计学精度低倍：（管型和上皮）至少计数50个CV<14%；高倍：（红、白细胞等）至少计数200个，

CV<7%；这是在有形成分浓度不低时候的理想统计学精度三、标准镜检参考方法的理想精密度统计学精度三、标准镜检参考方法的理想精密度66通过低倍镜：大面积扫描定位。高倍镜：跟踪识别而实现

上海检验中心检测认