江西省稳派教育2023学年高三压轴卷生物试卷含解析

2023学年高考生物模拟试卷考生请注意：1．答题前请将考场、试室号、座位号、考生号、姓名写在试卷密封线内，不得在试卷上作任何标记。2．第一部分选择题每小题选出答案后，需将答案写在试卷指定的括号内，第二部分非选择题答案写在试卷题目指定的位置上。3．考生必须保证答题卡的整洁。考试结束后，请将本试卷和答题卡一并交回。一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1．“结构与功能观”是生物学的基本观点。其内涵是：一定的结构必然有与之相对应的功能存在，且任何功能都需要一定的结构来完成。下列叙述不符合该观点的是（）A．功能越复杂的生物膜，其上的蛋白质种类和数量越多B．内质网内连核膜外连细胞膜，广阔的膜面积为酶提供附着点C．人的卵细胞体积较大，相对表面积也大，有利于细胞与周围环境的物质交换D．小肠绒毛上皮细胞内有大量线粒体，有利于细胞的吸收功能2．下列关于人体细胞生命历程的说法，错误的是（）A．自由基攻击生物膜的磷脂分子时也产生自由基B．细胞分裂能力随细胞分化程度的提高而提高C．细胞凋亡有助于机体维持自身的稳定D．细胞分化的直接原因是细胞内产生了不同的蛋白质3．下列有关科学史中研究材料、方法及结论的叙述，错误的是（）A．孟德尔以豌豆为研究材料，采用杂交等方法，提出了基因的分离和自由组合定律B．摩尔根以果蝇为研究材料，统计分析后代眼色分离比，证明了基因位于染色体上C．赫尔希与蔡斯以噬菌体为研究材料，利用同位素示踪技术，证明DNA是噬菌体的遗传物质D．建构数学模型的方法，可以用于研究种群数量变化和酶活性变化的规律4．下列关于微生物的叙述，正确的是（）A．染色体变异不能发生在噬菌体中B．微生物都是生态系统中的分解者C．格里菲思的肺炎双球菌转化实验证明了DNA是遗传物质D．T2噬菌体侵染大肠杆菌时，逆转录酶与DNA—起进入细胞5．下图为甲、乙两种单基因遗传病的遗传家系图，其中一种遗传病为伴性遗传。人群中乙病的发病率为1/256。下列叙述正确的是A．甲病是伴X染色体隐性遗传病B．和的基因型不同C．若与某正常男性结婚，所生正常孩子的概率为25/51D．若和再生一个孩子，同时患两种病的概率为1/176．肿瘤细胞一旦死亡就会释放钾离子到细胞外，钾离子通常细胞内浓度高于细胞外，细胞外增加的钾离子可降低免疫细胞活性，阻止它们的抗肿瘤功能。下列相关叙述正确的是（）A．发挥抗肿瘤功能的细胞是浆细胞B．细胞外高浓度钾离子导致免疫细胞数量减少C．细胞外低浓度钾离子是免疫细胞功能实现的必要条件D．死亡的肿瘤细胞释放钾离子体现细胞膜的选择透性二、综合题：本大题共4小题7．（9分）有资料表明胃癌细胞中有胃泌素相关基因的表达，而且外源性胃泌素对胃癌细胞有明显促进生长的作用。某科研人员为验证外源性胃泌素的上述作用，以及进一步研究丙谷胺对其作用的影响，进行了以下实验研究。请完善实验思路，并根据实验结果进行分析。（要求与说明：用细胞流式测定仪测定细胞周期分布；实验结果测定的具体操作不作要求；培养过程中培养液变化忽略不计；实验条件适宜）（1）完善实验思路：①将X型胃癌细胞培养3天后制备细胞悬液备用。用细胞培养液配制适宜浓度的胃泌素溶液和丙谷胺溶液。②取适量等量细胞悬液加入4组培养瓶中待继续培养，每组若干，各组处理如下。甲组：_______；乙组：51μL丙谷胺溶液+51uL细胞培养液；丙组：_______；丁组：111µL细胞培养液。③将上述样品在适宜条件下进行培养。48h后取部分样品测定________，并记录。④_______，并记录。⑤对实验数据进行统计分析，结果如下。表：胃泌素和丙谷胺对X型胃癌细胞增殖及细胞周期的影响组别72h，571nm48h，各时期细胞百分比（%）OD值G1SG2+M甲1．767±1．132．613．94．9乙1．27±1．1971．119．157．85丙1．585±1．1228．619．1111．31丁1．561±1．12671．119．1111．11（注：OD值大小可体现细胞增殖情况；丁组细胞的细胞周期T=9h。）（2）实验分析与讨论：①用OD值作为检测细胞增殖指标的依据是_______。甲组与丁组数据比较，说明甲组的处理最可能是促进了S期细胞的________，从而促进肿瘤细胞增殖。乙、丁组数据几乎没有差异，但甲、丙组数据差异明显，可见丙谷胺具有________作用。②据表中数据，在答题卷相应坐标系中画出丁组细胞中核DNA含量的周期性变化曲线，并将坐标系补充完整________________。8．（10分）2020年初新型冠状病毒（COVID-19）引发的新冠肺炎疫情袭卷全球，给人类的生命造成很大威胁。请回答相关问题：（1）病毒引发的“战争”时刻在我们机体内进行着，双方随时随地博弈，改变自己也改变对方，完善自己也完善对方，这个过程在生物学上称为_________。（2）人的一生可能感染上百种病毒，人体主要通过_________免疫阻止病毒在体内扩散。截止3月中旬，国家药品监督局共批准新冠病毒核酸检测试剂10个，抗体检测试剂6个，进一步服务疫情防控需要。核酸检测试剂检测的物质是_________，抗体检测试剂的检测原理是_________________________。（3）新冠肺炎是由病毒感染引起的传染病，患者表现发热，乏力，干咳等症状。人体发烧的主要原因是病毒毒素或人体T淋巴细胞分泌的_________作用于下丘脑的体温调节中枢，最终引起_________（填激素名称）的分泌量增加，该激素使机体_________增加。（4）发烧时多喝水可使细胞外液渗透压下降，使垂体释放_________减少，尿量_________，促进代谢废物的排出，有助于改善发热症状。9．（10分）正常细胞不能合成干扰素，但含有干扰素基因。我国科学家釆用基因工程技术生产干扰素a-2b已实现量产。具体做法是将产生干扰素的人白细胞的mRNA分离，反转录得到干扰素基因。将含有四环素、氨苄青霉素抗性基因的质粒PBR322和干扰素基因进行双酶切，用连接酶连接。将重组载体DNA分子在一定条件下导入大肠杆菌，在培养基中筛选培养，检测干扰素的表达量，选出高效表达的工程菌。请回答：（1）在分化诱导因子作用下，正常细胞可以摆脱抑制、合成干扰素，该过程发生的实质是________________________________（2）据下图分析，构建重组载体DNA分子时，可以选用_____两种限制酶对质粒pBR322和干扰素基因进行双酶切，目的是既能保证目的基因和质粒正向连接，又能防止_____________________________(答两点)。（3）将重组质粒导入大肠杆菌中，然后将细菌涂布到含_____的选择培养基上培养，就可得到含质粒PBR322或重组质粒的细菌单菌落；再从每一个单菌落中挑取部分细菌转涂到含有_____的培养基上，不能生长的绝大部分是含有重组质粒的细菌，原因是_____（4）干扰素在体外保存非常困难，如果将其分子中的一个半胱氨酸变成丝氨酸，在-70°C条件下可以保存半年。实现这一转变需要直接对_____进行修饰或改造，这属于蛋白质工程的范畴。10．（10分）基因工程为培育抗病毒植物开辟了新途径，下图为研究人员培育转花叶病毒外壳蛋白基因（CMV-CP基因，长度为740个碱基对）番茄的主要过程示意图(Kanr为卡那霉素抗性基因)。请回答：（1）将CMV-CP基因导入番茄细胞后，培育的番茄植株具有抗CMV感染能力，这种现象属于植物的特异性免疫，该免疫过程中抗原是____。（2）过程①接种的农杆菌细胞中，Kanr及CMV-CP基因应整合在Ti质粒的T-DNA内部，这是由于__。使用液体培养基培养农杆菌的目的是____。（3）为确定用于筛选的Kan适宜浓度，研究人员进行实验，结果如右表。最终确定过程③④加入的Kan浓度为35mg·L-1，该浓度既可___，又不至于因Kan浓度过高影响导入重组DNA细胞的生长发育。Kan浓度/mg．L-1接种外植体数形成愈伤组织数外植体状况05549正常形成愈伤组织25662只膨大、不易形成愈伤组织35660变褐色死亡50640变褐色死亡（4）过程③、④所需的培养基为__（填“固体”或“液体”）培养基。过程⑤再生植株抗性鉴定时，引物序列设计的主要依据是_____，引物序列长度及G+C比例直接影响着PCR过程中_______（填“变性”或“退火”或“延伸”）的温度。（5）过程⑤电泳结果如图，其中l号为标准参照，2号为重组Ti质粒的PCR产物，3-6号为抗性植株DNA的PCR产物，可以确定3—6号再生植株中____号植株基因组中整合了CMV-CP基因。11．（15分）宫颈癌是女性常见的恶性肿瘤之一，人乳头状瘤病毒（HPV）与宫颈癌的发生密切相关。抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV，从而及时监控宫颈癌的发生，以下是以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程。据图回答下列问题：（1）单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有________________________。（2）动物细胞工程技术的基础是____________。（3）灭活病毒诱导细胞融合的原理是病毒表面含有的_______和_______能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝集，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子中心排布，细胞膜打开，细胞发生融合。（4）对于抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞应尽早进行克隆化，克隆化的方法最常用的是有限稀释法，即稀释细胞到3~11个/mL，每孔加入细胞稀释液1．1mL，目的是____________。（5）可以利用蛋白质工程技术对抗HPV抗体进行改造以延长其体外保存的时间，蛋白质工程是指以____________的关系作为基础，通过______________，对现有的蛋白质进行改造，或制造种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。

参考答案一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、C【解析】

蛋白质在细胞膜行使功能时起重要作用，因此，功能越复杂的细胞膜，蛋白质的种类和数量越多；内质网能有效地增加细胞内的膜面积，其外连细胞膜，内连核膜，将细胞中的各种结构连成一个整体。【详解】A、蛋白质是生命活动的主要承担者，生物膜上的蛋白质主要有载体蛋白、受体蛋白、酶等，三种蛋白质都具有专一性，因此生物膜上蛋白质的种类和数量越多，膜的功能越复杂，A正确；B、内质网内连核膜外连细胞膜，广阔的膜面积为酶提供附着点，B正确；C、人卵细胞的体积较大，相对表面积小，不利于细胞与周围环境的物质交换，C错误；D、小肠绒毛上皮细胞内有大量线粒体，可产生大量能量用于细胞主动运输吸收营养物质，D正确。故选C。【点睛】解答此题需要明确生物膜系统的结构、功能，熟悉各种细胞器的分布及作用，并能结合选项分析作答。2、B【解析】

1、细胞分化是指在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态，结构和生理功能上发生稳定性差异的过程。细胞分化的实质：基因的选择性表达，因此导致不同细胞内蛋白质出现差异性。一般随着细胞分化程度提高细胞的分裂能力减弱，高度分化的细胞失去分裂能力。2、细胞凋亡是由基因决定的细胞编程序死亡的过程。细胞凋亡是生物体正常的生命历程，对生物体是有利的，而且细胞凋亡贯穿于整个生命历程。细胞凋亡是生物体正常发育的基础、能维持组织细胞数目的相对稳定、是机体的一种自我保护机制。在成熟的生物体内，细胞的自然更新、被病原体感染的细胞的清除，是通过细胞凋亡完成的。【详解】A、自由基攻击生物膜的磷脂分子时产物同样是自由基，且产生的自由基又会攻击别的分子，产生雪崩式反应，对生物膜损伤较大，A正确；B、根据以上分析可知，细胞分裂能力随细胞分化程度的提高而减弱，且高度分化的细胞失去分裂能力，B错误；C、细胞凋亡是由基因决定的细胞自动结束生命的历程，有助于机体维持自身的稳定，C正确；D、分化方向不同的细胞中选择表达的基因不同，因此mRNA种类不同，指导合成的蛋白质不同，D正确。故选B。3、A【解析】

孟德尔以豌豆为实验材料，应用杂交、自交和测交的手段，通过假说演绎法提出了分离定律和自由组合定律。摩尔根证明基因在染色体上，是通过果蝇的杂交和测交实验去验证的，识记各生物实验的实验材料和实验方法是本题的解题关键。【详解】A、孟德尔提出分离定律和自由组合定律时还没有对基因进行了解，所以不能说基因的分离定律和自由组合定律，A错误；B、摩尔根通过白眼果蝇和红眼果蝇的杂交，统计后代眼色的性别和性状的比例，证明了基因在染色体上，B正确；C、赫尔希和蔡司提出DNA是遗传物质的实验过程主要采用了T2噬菌体和大肠杆菌为实验材料，利用同位素示踪法将DNA和蛋白质分开研究，从而得出了该结论，C正确；D、种群的数量变化和酶活性变化都采用了绘制曲线这一数学模型来表示，D正确；故选A。4、A【解析】

1、在生态系统中，微生物可能是生产者（如硝化细菌、光合细菌等）、消费者（如寄生细菌）、分解者（如腐生细菌）。2、肺炎双球菌转化实验包括格里菲斯体内转化实验和艾弗里体外转化实验，其中格里菲斯体内转化实验证明S型细菌中存在某种“转化因子”，能将R型细菌转化为S型细菌；艾弗里体外转化实验证明DNA是遗传物质。3、T2噬菌体侵染细菌的实验步骤：分别用35S或32P标记噬菌体→噬菌体与大肠杆菌混合培养→噬菌体侵染未被标记的细菌→在搅拌器中搅拌，然后离心，检测上清液和沉淀物中的放射性物质。【详解】A、噬菌体属于病毒，没有细胞结构，不含染色体，所以不可能发生染色体变异，A正确；B、在生态系统中，微生物不一定都是分解者，如硝化细菌属于生产者、寄生细菌属于消费者，B错误；C、格里菲思的肺炎双球菌转化实验，证明了已经被加热杀死的S型细菌中，必然含有某种促成这一转化的活性物质—“转化因子”，没有证明DNA是遗传物质，C错误；D、T2噬菌体属于DNA病毒，不含逆转录酶，D错误。故选A。【点睛】本题主要考查病毒的结构、遗传物质的探索等相关知识，要求考生识记病毒的结构，明确T2噬菌体属于DNA病毒，再结合所学的知识准确判断各选项。5、C【解析】

根据Ⅱ2×Ⅱ3→Ⅲ3可知，乙病为常染色体隐性遗传病，设相关的基因为A/a；根据题意可知，甲病为伴性遗传病，由于甲病有女患者，故为伴X遗传病，又因为Ⅲ3患甲病，而Ⅳ1正常，故可以确定甲病为伴X显性遗传病，设相关的基因为B/b。根据人群中乙病的发病率为1/256，可知a基因概率为1/16，A基因频率为15/16，则AA=15/16×15/16=225/256，Aa=2×1/16×15/16=30/256。【详解】A、根据分析可知，甲病为伴X染色体显性遗传病，A错误；B、根据Ⅲ3同时患甲病和乙病可知，Ⅱ3的基因型为AaXbXb，根据Ⅱ4患乙病可知，Ⅲ6为AaXbXb，二者基因型相同，B错误；C、根据Ⅲ3同时患甲病和乙病可知，Ⅱ2和Ⅱ3的基因型分别为AaXBY、AaXbXb，则Ⅲ1为1/3AAXBXb或2/3AaXBXb，正常男性XbY乙病的基因型为Aa的概率为30/256÷（30/256+225/256）=2/17，二者婚配的后代患乙病的概率为2/3×2/17×1/4=1/51，不患乙病的概率为1-1/51=50/51，后代不患甲病的概率为1/2，故后代正常的概率为50/51×1/2=25/51，C正确；D、Ⅲ3的基因型为aaXBXb，Ⅲ4甲病的基因型为XbY，乙病相关的基因型为Aa的概率为30/256÷（30/256+225/256）=2/17，为AA的概率为1-2/17=15/17，后代患乙病的概率为2/17×1/2=1/17，患甲病的概率为1/2，再生一个孩子同时患两种病的概率为1/17×1/2=1/34，D错误。故选C。【点睛】本题易错点在于很多考生容易把乙病当成伴Y遗传病，在分析遗传系谱图时，要把所有患有相同疾病的个体统一分析，准确判断。判断口诀：无中生有为隐性，隐性遗传看女病（女患者），父子患病为伴性；有中生无为显性，显性遗传看男病（男患者），母女患病为伴性。6、C【解析】

癌细胞的特征：（1）具有无限增殖的能力；（2）细胞形态结构发生显著变化；（3）细胞表面发生改变，细胞膜上的糖蛋白等物质降低，导致细胞彼此间的黏着性减小，易于扩散转移；（4）失去接触抑制。【详解】A、发挥抗肿瘤功能的细胞是效应T细胞，A错误；B、细胞外高浓度钾离子导致免疫细胞活性降低，并非数量减少，B错误；C、细胞外增加的钾离子可降低免疫细胞活性，因此细胞外低浓度钾离子是免疫细胞功能实现的必要条件，C正确；D、死亡的肿瘤细胞细胞膜失去了选择透过性，D错误。故选：C。【点睛】关键：识别并消灭肿瘤细胞通过细胞免疫中的效应T的接触引起，不是浆细胞，浆细胞只是产生抗体，发挥体液免疫的功能。二、综合题：本大题共4小题7、51uL置泌素+51uL细胞培养液51uL胃泌素+51uL丙谷胺溶液细胞周期分布/各时期细胞百分比72h后取剩余样品（在571nm波长）测定OD值细胞密度与（细胞悬液的）OD值呈正比/线性关系/OD值越大细胞数越多DNA复制对抗/抑制外源性胃泌素【解析】

题意分析，外源性胃泌素对胃癌细胞有明显促进生长的作用。本实验的目的是验证外源性胃泌素的上述作用，并且还要进一步研究丙谷胺对胃泌素促进生长作用的的影响，根据实验目的并结合题目中的信息可知实验中的自变量为胃泌素、丙谷胺以及胃泌素和丙谷胺三种不同因素的处理，因变量为OD值以及细胞周期中各期的变化，实验过程中无关变量要求相同且适宜。【详解】（1）根据分析可知，补充实验如下：①实验试剂的准备：将X型胃癌细胞培养3天后制备细胞悬液备用。用细胞培养液配制适宜浓度的胃泌素溶液和丙谷胺溶液。②取适量等量细胞悬液加入4组培养瓶中待继续培养，每组若干，分组、编号，然后给与不同处理如下：甲组中加入51uL胃泌素溶液+51uL细胞培养液；乙组中加入51μL丙谷胺溶液+51uL细胞培养液；丙组中加入51uL胃泌素溶液+51uL丙谷胺溶液；丁组中加入111µL细胞培养液。③为保证无关变量的一致性，需要将上述样品在适宜条件下进行培养。根据题目中的实验结果可知，48h后取部分样品测定细胞周期分布/各时期细胞百分比，并记录。④结合实验表格可知，72h后取剩余样品（在571nm波长）测定OD值，并记录。（2）实验分析如下①由于细胞密度与（细胞悬液的）OD值呈正比，故可用OD值的大小表示细胞数目的多少。甲组与丁组数据比较，处于S期的细胞的占比高于丁组，说明甲组胃泌素的处理最可能是促进了S期细胞的DNA复制，进而加快了后续的分裂过程，从而促进肿瘤细胞增殖。比较发现乙、丁组数据几乎没有差异，但甲、丙组数据差异明显，由此可推测丙谷胺具有对抗/抑制外源性胃泌素作用，从而对抗了胃泌素促进癌细胞生长的作用。②绘图过程中需要根据表中的数据来绘制，故需要计算出细胞周期中各时期的长短，题意显示丁组细胞细胞进行有丝分裂，细胞周期为9小时，则G1经历时间为9×71%=14小时，此期进行DNA复制前的准备阶段，进行有关RNA和蛋白质合成；S期经历时间为9×9%=4小时，此期进行DNA分子的复制，故此期后DNA数目加倍；G2+M经历时间为9×11%=2小时，此期后形成新的子细胞，其中的DNA数目与原来亲代细胞的DNA数目相同，据此绘图如下：【点睛】熟知有丝分裂过程中染色体行为变化以及相关的物质变化是解答本题的关键！实验设计能力是本题考查的重要能力，对实验设计的基本原则以及设计的基本思路的掌握是学生的必备能力。8、共同进化体液新型冠状病毒RNA抗原与抗体特异性结合淋巴因子甲状腺激素产热抗利尿激素增加【解析】

1、体液免疫过程为：（1）感应阶段：除少数抗原可以直接刺激B细胞外，大多数抗原被吞噬细胞摄取和处理，并暴露出其抗原决定簇；吞噬细胞将抗原呈递给T细胞，再由T细胞呈递给B细胞；（2）反应阶段：B细胞接受抗原刺激后，开始进行一系列的增殖、分化，形成记忆细胞和浆细胞；（3）效应阶段：浆细胞分泌抗体与相应的抗原特异性结合，发挥免疫效应。2、细胞免疫过程为：（1）感应阶段：吞噬细胞摄取和处理抗原，并暴露出其抗原决定簇，然后将抗原呈递给T细胞；（2）反应阶段：T细胞接受抗原刺激后增殖、分化形成记忆细胞和效应T细胞，同时T细胞能合成并分泌淋巴因子，增强免疫功能。（3）效应阶段：效应T细胞发挥效应。【详解】（1）病毒和我们机体随时随地博弈，改变自己也改变对方，完善自己也完善对方，这个过程在生物学上称为共同进化。（2）人体主要通过体液免疫阻止病毒在体内扩散，再通过细胞免疫予以消灭。COVID-19的含有的核酸只有RNA，因此核酸检测试剂盒的原理是利用样品RNA逆转录制备单链DNA，然后用标记的单链DNA与待测RNA分子之间进行碱基互补配对，根据杂交结果诊断待测RNA分子，抗体检测试剂的检测原理是抗原与抗体特异性结合。（3）人体发烧的主要原因是病毒毒素或人体T淋巴细胞分泌的淋巴因子作用于下丘脑的体温调节中枢，最终引起甲状腺激素的分泌量增加，促进机体的新陈代谢，从而增加产热。（4）发烧时多喝水可使细胞外液渗透压降低，刺激下丘脑渗透压感受器，使垂体释放的抗利尿激素减少，肾小管、集合管对水分的重吸收减少，尿量增加，促进代谢废物的排出，有助于改善发热症状。【点睛】本题考查体温调节、水盐调节和免疫调节的相关知识，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力。9、基因的选择性表达酶B、酶C质粒与目的基因自身环化；防止同时破坏质粒中的两个标记基因氨苄青霉素四环素目的基因的插入破坏了四环素抗性基因，重组质粒上只含有氨苄青霉素抗性基因，而质粒上含氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因，在含有四环素的培养基上，导入重组质粒的细菌不能生长，而只导入质粒的细菌能生长基因【解析】

1、基因表达载体的组成：目的基因、启动子、终止子、标记基因等。标记基因可便于目的基因的鉴定和筛选。2、由于不同限制酶识别的碱基序列不同，所以在切割质粒和目的基因时常用双酶切，可防止目的基因反向粘连和质粒自行环化。【详解】（1）细胞分化的实质是基因选择性表达，故在分化诱导因子作用下，正常细胞可以摆脱抑制、合成干扰素，该过程发生的实质是基因的选择性表达。（2）标记基因可用于鉴定目的基因是否导入受体细胞，所以重组质粒上至少要保留一个标记基因，由于两个标记基因上均含有酶A的切点，所以不能用酶A切割，为了防止连接时目的基因和质粒自身环化，故在构建重组载体DNA分子时，可以选用酶B和酶C两种限制酶对质粒pBR322和干扰素基因进行双酶切。（3）由于质粒和重组质粒上都含有氨苄青霉素抗性基因，而未导入质粒的细菌不含有该抗性基因，所以将重组质粒导入大肠杆菌中，然后将细菌涂布到含氨苄青霉素的选择培养基上培养，就可得到含质粒PBR322或重组质粒的细菌单菌落；由于目的基因的插入破坏了四环素抗性基因，重组质粒上只含有氨苄青霉素抗性基因，而质粒上含有氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因，因此再从前面培养基上获得的每一个单菌落中挑取部分细菌转涂到含有四环素的培养基上，不能生长的绝大部分是含有重组质粒的细菌。（4）蛋白质工程是通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造的一项技术。【点睛】本题考查基因工程和蛋白质工程的相关知识，要求考生识记基因工程的操作工具及操作步骤等，掌握各步骤中的相关细节，能结合所学的知识准确答题，属于考纲理解和应用层次的考查。10、CMV-CP（花叶病毒外壳蛋白）Ti质粒中仅T-DNA片段可以进入植物细胞并整合到植物细胞染色体DNA中使农杆菌大量繁殖，重组Ti质粒扩增杀死没有导入重组DNA的普通番茄细胞固体基因两端的部分核苷酸序列退火3【解析】

将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法（原理：农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上；根据农杆菌的这一特点，如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上。【详解】（1）据题干信息可知“将CMV-CP基因导入番茄细胞后，培育的番茄植株具有抗CMV感染能力”，故可推知该过程中抗原是CMV-CP（花叶病毒外壳蛋白）。（2）由以上分析可知：因Ti质粒中仅T-DNA片段可以进入植物细胞并整合到植物细胞染色体DNA中，故Kanr及CMV-CP基因应整合在Ti质粒的T-DNA内部；为使农杆菌大量繁殖，重组Ti质粒扩增，需要使用液体培养基培养农杆菌，液体培养基可使菌体与营养物质充分接触。（3）据题干信息可知：Kanr为卡那霉素抗性基因，故若番茄细胞中成功导入重组质粒，则能在Kan培养基上存活，若未成功导入，则将被杀死，据表格数据可知，在Kan浓度为35mg·L-1时，既可将未导入重组DNA的普通番茄细胞全部被杀死（愈伤组织为0，外植体变褐色死亡），又不至于因Kan浓度过高影响导