分子生物学检验技术产前诊断pgd

无创产技检生无创产技检生学P257and1风险计受精着床症状出2临症状着床风险计受精着床症状出2临症状着床非整倍数目增非整倍数目增加或减少定义：体细条或数条3类型a.单体型：2n‐1；X，21，22号类型a.单体型：2n‐1；X，21，22号丢失常见b.三体型：2n+1；常13、18、21体常见，性XYY三体型有、XXY 多体型：仅见于性48YY421三体综合唐氏综合征（21三体综合唐氏综合征（Down’sSyndrome，愚足月新生儿最常见的至今没有根治方疾病，我国每年约2000万新生儿,每年约有26600DS儿出生。我国有大约60万以上的DS者5临床表特殊面容：面部扁平、鼻梁低平、眼距宽、外眦上斜、：患者智商临床表特殊面容：面部扁平、鼻梁低平、眼距宽、外眦上斜、：患者智商（IQ）通常为30～60生长发育迟缓和肌张力减退：出生体重偏低，肌张力低下，身材矮小，短颈，颈背皮肤松垂，手短而宽、通贯至少1/3食管瘘等伴发症也较其它疾病常见。患白血病的风险为618三体综合18三体综合征是次于18三体综合18三体综合征是次于新生儿发生率约为1/7500愚型的第二种常见主要临床表现智力、生长发育迟缓、胸骨短、严重的心脏畸形以及肌张力等。颅面部的畸形包括小颌畸形、枕部突出、小耳以及低位耳13三体综合1313三体综合13三体综合为1/20000～25000主要临床表现：严重的中枢神经系统畸形，内脏畸形，颅面部的畸形，手足畸形821三体21三体综合征二级预防模9母亲血清标记物和超声筛查度唐氏综合症检出率:~65%，假阳性率:4.5-母亲血清标记物和超声筛查度唐氏综合症检出率:~65%，假阳性率:4.5-增加抑制素A，可以将检出率增加到的NT测量，21三体检出率：77%，假阳性率的唐氏综合症的检测检出率可以达到89%，假阳性结合生化分析和颈WapnerR,etal.-trimesterscreeningfortrisomies21and18.NEnglJMed血清学筛查存在的问•孕周的确确血清学筛查存在的问•孕周的确确•许未严格控制孕期筛查的时•取血时间与开单时间，称体重时间不一致的问•操作缺的技术规侵入性产风11周之前可侵入性产风11周之前可行性较侵入性产的利与47,XY,弊：侵入性产的利与47,XY,弊：a）周期长：1c）主要参考文献：TaborA,etal.RCTofamniocentesisin4606low目前快速产方法的利•目前快速产方法的利•••••基于FISH的产优点：所需样本量少，检测周期短（）缺点：价格昂贵，通量小。基于定量PCR的产优点：①所需样本量少，检测周期短（24h）。②价格便宜，通量大•缺点：对于嵌合型21三体，定量PCR可能会出现样本中母血的污染也会影响结果的判断，技•第1第2代）•(卵细胞浆技•第1第2代）•(卵细胞浆内注射•第3（pre-)diagnosis,PGD胚胎植入•第三代”技••–具有遗传学异常的父母，其子代也•第三代”技••–具有遗传学异常的父母，其子代也有遗传学异常的高度风险，不愿意进行选择的–易位导致的反复自者–大于37岁的妇非整倍体性的体者，尤其常见的分子生物学检测技•单细胞主要用于常见的分子生物学检测技•单细胞主要用于缺陷遗传的•荧光原位杂交技术:主要用疾病•比组杂•技基于新一技术的非侵入性前非整倍体检测基于新一技术的非侵入性前非整倍体检测的优非侵入性，避，等风险，降低孕妇心理担高灵敏度，高特异检测周期短——5天（12个工作日通量大，质控容易（只有文是手动过程外周血含有游离胚胎胚胎外周血含有游离胚胎胚胎段比小，长度在75bp250bp之间cffDNA主要参考文献：Fetalcf‐DNAdetectedviaYchromosome。LoYMetal.,Lancet血浆DNA的存在形血浆DNA的存在形体cffDNA快速降分体cffDNA快速降分Loetal.AmJHumGenet1998;血浆DNA的DNA背血20血浆DNA的DNA背血20DNA高背景带来的检测难血20DNA高背景带来的检测难血203体带来的微量DNA变纯胚胎DNA，唐氏与正常21的剂量变化•3:2=血浆DNA中胚3体带来的微量DNA变纯胚胎DNA，唐氏与正常21的剂量变化•3:2=血浆DNA中胚胎DNA占20%时，唐氏与正常21化的剂量•11:10=血浆DNA中胚胎的DNA一般占5%到30%，大多小于唐氏与正常21的剂量变化大多<当胚胎DNA只占5%时量理论上会增加胚胎血浆DNA的2121组的1.3%，检测1.3%的全部DNA的2.5%只占增量要求非常高的精确荧光定量PCR（realtimePCR）的精确度（CV）在数码PCR（digitalPCR)的精确度（CV）在的精确度（CV）在第二胚胎含量5%的情组拷贝/mL血5%胚胎含量5%的情组拷贝/mL血5%胚50胚组组分辨率50/2000胚胎比例Chr.11:Chr.21:Chr.11:Chr.21:第二•第二•提取血浆•适应人12孕周以上适应人12孕周以上的所有孕尤其是具有以下情况者•••••高龄孕史、心理压力史局限•三体疾病中极少数是由嵌合体引起。因嵌合体的三体细胞与二体细局限•三体疾病中极少数是由嵌合体引起。因嵌合体的三体细胞与二体细比例不定，基于深技术检测嵌合体存在一定难度。对于多胞胎而言也有似情况，如多胞胎中的某一患有21三体综合征而另为正常，该技检测多胞胎存在一定难度。本检测结果可能受此影响。嵌合体或多胞胎色体三体患者在总人群中的比例极低•如孕妇本人疾病患者，本检测结果可能受此影响•即使严格按照技术规范流程进行操作，在极少数情况下可能因样本自然溶或血浆游离DNA含量过低（体重过大等）等原因导致无法进行检测，在种情况下，需要重样本，不愿重者不予退费局限•在极少数情况下，孕妇近期接受过异体输血、移局限•在极少数情况下，孕妇近期接受过异体输血、移植手术、干细胞治疗等，检测结果可能受此影响•在极少数情况下患有除21、18、13外的其异常，检测结果可能受此影响•在极少