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文档简介
一、目的要求
1.学习并掌握观察霉菌形态的基本方法。2.了解四类常见霉菌的基本形态特征。
第1页/共20页二、基本原理(1)霉菌可产生复什分枝的菌丝体,分基内菌丝和气生菌丝,气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝,由繁殖菌丝产生孢子。霉菌菌丝体(尤其是繁殖菌丝)及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多(约3~10μm),常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍,因此,用低倍显微镜即可观察。观察霉菌的形态有多种方法,常用的有直接制片观察法、载玻片培养观察法和玻璃培养观察法三种方法,本节课用载玻片培养观察法。第2页/共20页二、基本原理(2)载玻片培养观察法:用无菌操作将培养基琼脂薄层置于载玻片上,接种后盖上盖玻片培养,霉菌即在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。培养一定时间后,将载玻片上的培养物置于显微镜下观察。这种方法既可以保持霉菌自然生长状态,还便于观察不同发育期的培养物。
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三、实验器材1.菌种曲霉(Aspergillussp.),青霉,根霉(Rhizopussp.)和毛霉(Mucorsp.)培养2~5d的马铃薯琼脂平板培养物。2.培养基土豆琼脂或察氏琼脂。3.仪器或其他用具无菌吸管,平皿,载玻片,盖玻片,U型玻棒,解剖针,解剖刀,镊子,50%乙醇,20%的甘油以及显微镜等。第4页/共20页
四、操作步骤——载玻片培养观察法
培养小室的灭菌在平皿皿底铺一张略小于皿底的圆滤纸片,再放一U形玻棒,其上放一洁净载玻片和两块盖玻片,盖上皿盖、包扎后于121℃灭菌30min,烘干备用。琼脂块的制作取已灭菌的马铃薯琼脂培养基6~7ml注入另一灭菌平皿中,使之凝固成薄层。用解剖刀切成0.5~1cm2
的琼脂块,并将其移至上述培养室中的载玻片上(每片放两块)。(注:制作过程应注意无菌操作。)
接种用尖细的接种针挑取很少量的孢子接种于琼脂块的边缘上,用无菌镊子将盖玻片覆盖在琼脂块上。(注:接种量要少,尽可能将分散的孢子接种在琼脂块边缘上,否则培养后菌丝过于稠密影响观察。)
培养先在平皿的滤纸上加3~5ml灭菌的20%甘油(用于保持平皿内的湿度)
,盖上皿盖,28℃培养一周。镜检根据需要可以在不同的培养时间内取出载玻片置低倍镜下观察,必要时换高倍镜。第5页/共20页五、实验报告
1.结果绘图说明四种霉菌的形态特征。
2.思考题(1)你主要根据哪些形态特征来区分上述四种霉菌(2)你认为在显微镜下,细菌、放线菌、酵母菌和霉菌的主要区别是什么?第6页/共20页曲霉图片——24h曲霉第7页/共20页曲霉图片——24h曲霉足细胞第8页/共20页
曲霉图片第9页/共20页根霉图片(1)第10页/共20页根霉图片(2)第11页/共20页根霉图片(3)第12页/共20页根霉图片(4)第13页/共20页青霉图片(1)第14页/共20页青霉图片(2)第15页/共20页青霉图片(3)第16页/共20页青霉图片(4)第17页/
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