2022年医学专题-肉毒芽孢杆菌的检验

肉毒梭状芽孢杆菌检验(jiǎnyàn)技术第一页，共十三页。肉毒杆菌(gǎnjūn)简介肉毒杆菌是一种生长在缺氧(quēyǎnɡ)环境下的细菌，在罐头食品及密封腌渍食物中具有极强的生存能力，是目前毒性最强的毒素之一。肉毒杆菌是一种致命病菌，在繁殖过程中分泌毒素，是毒性最强的蛋白质之一。军队常常将这种毒素用于生化武器。人们食入和吸收这种毒素后，神经系统将遭到破坏，出现头晕、呼吸困难和肌肉乏力等症状。第二页，共十三页。二肉毒棱菌（cl.botulinum）为腐物寄生菌，广泛分布(fēnbù)于土壤和动物粪便中。革兰氏阳性粗大杆菌。单独或成双排列，有时可见短链状。有周身鞭毛，无荚膜。芽胞椭圆形，大于菌体，位于次极端，使菌体似网球拍状，芽胞抵抗力甚强。严格厌氧，在普通琼脂培养基上形成直径3～5mm不规则的菌落，血液琼脂平板上有β溶血。能消化肉渣，使之变黑，有腐败恶臭。分解葡萄糖、麦芽糖及果糖，产酸产气。液化明胶，产生hzs，不形成吲哚。第三页，共十三页。三肉毒毒素(dúsù)是一种神经毒素(dúsù)，能透过机体各部的粘膜。肉毒毒素由胃肠道吸收后，经淋巴和血行扩散，作用于颅脑神经核和外周神经肌肉接头以及植物神经末梢，阻碍乙酰胆碱释放，影响神经冲动的传递，导致肌肉的松弛性麻痹。第四页，共十三页。第五页，共十三页。第六页，共十三页。显微(xiǎnwēi)镜下的肉毒杆菌(gǎnjūn)第七页，共十三页。眼角植入肉毒杆菌(gǎnjūn)的对比图第八页，共十三页。肉毒素的检验(jiǎnyàn)程序

样品（食品）

消毒检测增菌、产毒培养30度5天报告(bàogào)（一）毒素检测

观察生长性状、染色镜检报告（二）

分离培养增菌产毒培养30度5天观察菌落性状，染色镜检毒素检测培养检查

报告（三）第九页，共十三页。检验所需器材(qìcái)培养基和试剂：庖肉培养基、卵黄琼脂培养基、明教磷酸盐缓冲液、肉毒分型抗毒诊断血清(xuèqīng)、胰酶、革兰氏染色液等。设备和器材：离心机及离心管、研波及细砂、培养箱、显微镜、厌氧培养装置、1ml和10ml吸管、1ml注射器、平皿、接种环、载玻片、小白鼠等。第十页，共十三页。肉毒毒素(dúsù)检测样品制备(zhìbèi)检出实验确证实验毒力测定定型试验肉毒梭菌检验(jiǎnyàn)样品处理增菌培养分离培养

第十一页，共十三页。1)典型的肉毒中毒，小白鼠会在4——6h内死亡，而且98%——99%的小白鼠会在12h内死亡，因此，实验前24h内的观察是非常重要的。2)24h后的死亡是可疑的，除非有典型症状出现(chūxiàn)。3）如果小白鼠注射经1：2或1：5倍数稀释的样品后死亡，但注射更高稀释度的样品后未死亡，这也是非常可疑的现象，一般为非特异性死亡。4）小白鼠要用不会抹去的染料加以标记。5）小白鼠的饲料与水必须及时添加，充分供应。6）食物中发现毒素，表明未经充分的加热处理，可能引起肉毒中毒。7）检出肉毒梭菌，但未检出肉毒毒素，不能证明此食物会引起肉毒中毒。8）肉毒中毒的诊断必须以检出食物中的肉毒毒素为准。9）中和试验可以为毒素定型。第十二页，共十三页。内容(nèiróng)总结肉毒梭状芽孢杆菌检验技术。肉毒杆菌是一种生长在缺氧环境下的细菌，在。消毒检测增菌、产毒培养30度5天。增菌产毒培养