样品的采集运输保存-沈向红课件

样品的采集运输保存浙江省疾病预防控制中心一、突发公共卫生事件定义突然发生或者可能发生的,直接影响到公众健康和社会安全，需要紧急应对的公共卫生事件．包括1)生物2)化学

3)核和辐射恐怖袭击事件4)重大传染病5)群体不明原因疾病6)严重中毒和污染事件7)放射性危害事件8)影响公众健康的自然灾害（水灾风灾）9)其他严重影响公众健康的事件（医源性感染实验室感染免疫接种反应）二、化学性公共卫生应急事件疾病预防控制中心经常遇到的化学性突发公共卫生事件主要有：化学性食物中毒和食物污染化学性水中毒和环境污染作业场所的急性化学性中毒化学性食物中毒和污染事件由化学物质引起的食物中毒和污染事件在各类中毒事件中占有相当的比重。据卫生部通报全国重大食物中毒事件中：2004年一季度中化学性食物中毒为占其发生数57.53%；中毒人数占总人数的38.49%；死亡人数占总死亡数83.1%。2004年四季度化学性中毒，分别占报告总起数和死亡总人数的34.9%和61.1%；2005年4季度重大食物中毒54起。化学性食物中毒的死亡人数最多，占总死亡人数的41.0%。毒死亡的主要原因是毒鼠强、亚硝酸盐、有机磷农药化学性食物中毒和污染事件2001年浙江“瘦肉精”中毒事件。如浙江省桐庐县发生一起因食用含有“瘦肉精”的猪肉和猪内脏180余人集体中毒事件。

2002年9月14日南京发生重大食物投毒引起的中毒事件，鼠药“毒鼠强”造成300多人中毒，42人死亡。2004年5月广州假酒事件造成40人中毒，14人重症，9人死亡。污染事件:毒米毒瓜子2004年因食物原因造成人体疾病,如假奶粉造成婴儿营养不良事件2.化学性水中毒和环境污染泥沙等高浊度微生物污染工业污染农药污染放射性污染灾害、突发卫生事件发生确定饮用水源---检毒---水质净化饮水消毒有效成分检验居民生活饮水饮水水源消毒剂运入1984年12月3日，位于印度中部中央邦的博帕尔市（Bhopal）的美国联合碳化物公司所属的农药厂，因生产事故使430吨剧毒异氰酸甲酯泄露于外环境，使在其周围居住的，尤其是在下风向居住的6400人中毒死亡。13.5万人受到伤害，20多万人被迫迁移。这是一起特大的突发性环境污染事故。美国联合碳化物公司支付36亿美元救济金作为对受害人员暂时安置的费用。但是无论如何，化学污染的后遗症还将继续存在相当长的时间。1.化学性水中毒,水及环境污染3.工作场所化学性急性中毒中国石油四川石油管理局所属的罗家16#井突然喷出含有大量硫化氢气体的天然气；含有高浓度硫化氢的天然气从井口喷出30余米高矿井周围有2个村落，最近的住户距井口不到100米；事件造成65000人撤离疏散、10000人到医院就诊、2142人住院治疗、243人死亡；四、化学性公共卫生应急事件特点

（1）突发性：突发事件往往是在人们意想不到的时间、地点突然发生，较难预测，有的甚至不可预测，常常使人措手不及，难以防范。（2）公众性：饮水突发事件往往同时波及多人甚至整个工作或生活群体。（３）复杂性：化学性突发事件中化学性毒物种类繁多，存在状态复杂，（４）危害性：化学性突发事件发生危害性和破坏性很大，极大威胁或损失，往往引起社会恐慌不安。五化学性应急事件样品的特点

1.典型性2.适时性3.不确定性4.异变性5.复杂性1)典型性

公共卫生突发事件现场样品的采集，与日常工作中样品采集有所不同。对突发事件的样品采集主要是发现病原，强调采集污染部分和可疑污染物污染部分，带有主观性，所采集的是总体样品中的某一特殊部份，样品具有典型性。有的应急样品在采样时一般不考虑其代表性、随机性等重要的采样技术要求，而是需要采集与事件有关的样品。如呕吐物，剩余食物等.2)适时性由于化学应急中毒事件发生急，对人群的危害大，需要及时对中毒应急样品进行定性和定量分析，以达到帮助确定中毒性质及其危害程度目的，为善后处理提供科学依据。3)不确定性由于有的应急公共卫生突发事件因潜伏期、症状不典型，及一些技术如流行病学调查不及时等原因，无法确定引起事件发生的样品、毒物种类，常常会将样品多采，或采样对象搞错。或采不到样。应急样品的特点5)复杂性随着人类对物质世界的认识深入；二次世界大战后，化学品生产进入了加速阶段期；化学品种类繁多,毒物品种也多多，增添快，特别是工业原料，大多为未知物。到2004年10月11日，登记的化学物总数为24,337,063种；其中8,153,842实现商业用途全球化学品的产量从1930年的一百万吨增加到今天的约15亿吨。2002年，我国农药原药产量为75万吨，居世界第二农药品种771种；产品16000种：六、化学性公共卫生应急事件样品分类公共卫生突发事件的检测样品按检测对象可分为：生物样品：包括人或动物的胎胚、器官、组织、血液、分泌物、尿液、粪便、内容物和呕吐物等，产生毒素的浮游生物；外环境样品：是指从自然环境中所采集的各种物品，包括各类生活饮用水、空气等。产品样品：是指所采集的人工生产的物品，包括各种食品、化工产品等。

强调化学毒物检测能否成功，很大程度上取决于流行病学的调查、采样准确性、运送的及时性、样品的储存条件等。如果采样不当或送检不适合时，无论检验操作如何仔细，仪器如何先进，高级，也不会得到准确的结果，会耽误疾病的救治。举例七.样品采集运输和保存

1.采集原则典型性可根据流行病学调查初步结果采集与中毒可能有关的样品；即典型样品。

适时性

采集样品要有时间概念，发生应急事件时在接到报告的第一时间赶到现场，采集怀疑样品。

样品采集运输和保存3.采样容器和采样工具采样容器和采样工具的材质不能干扰测定，容器以清洁玻璃器皿或无色的聚乙烯与聚四氟乙烯容器为宜，或专用采样用容器；容器壁不应吸收或吸附待测组分；一般不主张使用金属或陶土器皿.样品应密封、避光、根据所采样品的性质进行不同的保存和运输.样品容器应贴上唯一性标识，同时附上载明样品名称来源、数量、采集时间与地点、温度、气压、采集人对样品有无作过处理(如加过抗凝剂、防腐剂)等相关信息。

样品采集运输和保存4.未知原因事件中样本采集对于毒物的种类难以肯定时，应采集与中毒可能有关的所有样品，采集足够的样品量；此外，采样容器和采样工具的材质不能含有干扰物质；采样操作要防止交叉污染；样品运输和保存中要确保不发生降解、泄漏和变质。采样时应注意个人防护样品采集运输和保存5.样品保存方法种类：密闭保存法：将采集的样品存放在干净的容器中，加盖封口，以防止氧气、水、二氧化碳等对样品的作用。防止挥发。冷藏保存法：易挥发、变质的样品应冷藏或冷冻保存。化学保存法：在样品中加入一定的酸、碱或其它调节剂、八.样品采集方法应急样品的采集应根据样品或对象的不同情况采用不同的方法。下面根据样品的种类——食品、水、空气分别进行讨论。1.食物中毒样品的采集采样器材和资料1.采样工具钳子、镊子、剪刀、不锈钢调羹、注射器、试管、勺子、夹子、手术刀等。2采样容器：洁净的广口瓶、试管、塑料袋、样品冷藏箱等。3防护用品工作衣或隔离衣、口罩、帽子、手套等。4记录用具：蜡笔、园珠笔、胶布、记录本、采样记录单、各种登记表，便于编号、登记、标识等。5参考资料相关标准、法规，有关专业技术参考资料等。食物中毒的样品1.呕吐物、胃内容物(200g以上)：是食物中毒的重要检材；中毒病因往往从这类样品中检出的可能性较大。因此要尽可能多采集典型标本，放在适宜容积密闭的玻璃容器中，需防止运输过程中破碎。2.可疑食物的剩余部分、半成品和原料3.生产设备上的残留物(200g以上)4.食品加工工具及有关盛器以上样品要尽可能多的采集食物，放在适宜容积的密闭洁净的玻璃容器中或聚乙烯袋。要防止运输过程中容器破碎、挤压；如为器皿须用食品袋密封。食物中毒样品的采集（2）5.粪便、血液、尿液(30—50mL)、尸体上的脏器10—20g血清：取5-20ml放入2个10ml具塞试管，全血：2个10ml筛选过的具塞试管（大多数分析样品加肝素抗凝剂）样品量为5-20ml。尿液标本是检测非挥发性毒物的重要检材；尿样要用筛选过的具塞玻璃瓶装，取样为50-100ml。注：氟乙酰胺中毒后，尿中往往最有可能检出的是氟乙酸，而非氟乙酰胺。毒鼠强中毒后几个月的血样仍有检测价值；（冷藏保存）食物中毒样品的采集（3）在无法确定最佳采样方案时，原则上应留取中毒患者的血、尿、呕吐物、洗胃液，透析液及死者的血、尿、胃内容物、肝、肾组织。肝、肾是分析急性金属中毒的较好检材2.水样的采集

水质分析数据的质量，首先取决于样品采集的质量。所采集的样品应具代表性，而且要采取一切预防措施，保证从采样到分析期间，样品各组分的浓度不发生改变。许多水体随时间和空间发生很大的变化，要采集具有代表性的样品，则较为复杂。为了保证有高质量的分析数据，除采样的质量外，还要注意水样的保存与分析操作两个方面，避免组分浓度在分析前发生改变。采样设备采样设备必需对水样的组分不产生影响，且每次用后易洗涤，一免污染后面的采样，应特别注意，橡胶管和乳胶管可能引起金属严重污染。水样的采集河水：水体在采样点应充分混合的。河水由于受到流速、湍流等的影响，以及支流进入后横向扩散迟缓，特别当支流和主流存在温差时，更是难于混合均匀。根据不同情况选择采样方法不同规模河流的采样点(断面)

年平均流量(m3/s)分类名称采样点数＜5小溪流25-150小河4150-1000河流6＞1000大河至少6个点，按流量增大适当增加

注：离岸边一定距离，在河底上采样时不要搅动底层。

河流不同深度的采样点(垂直)水深(m)采样点数说明≤5距水面0.2~0.5m水深不足1m时，在1/2水深处5～10距水面0.5m河底以上0.5m河流封冻时,在冰下0.5m处＞10水面下0.5m，1/2深处,河底以上0.5m若有充分数据证明垂线上水质均匀，可减少采样点数水样的采集湖水（水库水）：湖水水质受时间空间而变化的因素与河水不同，湖水的成分除了受水的输入和输出平衡的影响外，还受到水体和底质之间物质交换的影响，由于生物的活动还会产生有机物质。另外，由于藻类等植物的生长，湖水还存在营养化的问题，氮、磷、溶解氧等组分的浓度有改变。湖水的分层和混合受气温的影响。在入口、出口及湖水中心，特别在饮用水取水的地方采样,一般在入口、出口及湖中心采样，深度一般在水下0.5米处。按湖水深度在垂直方向参考河水的要求采样。地下水：根据水质与地质结构的关系设置采样点，可利用现有水井，或根据与地下水相联系的征候，在泉水的涌水点采样。采集井水时，须先用泵充分抽水，以保证样品真正代表地下水源的实况。

水样的采集自来水：采集自来水时，应注意采样的时间。夜间可能析出管道附着物质，早晨取样，悬浮物及一些组分的含量较高，应开启龙头，适当放水数分钟后再取样。管道材料、水龙头等也可造成沾污。自来水以及其它水样在实验室放置，组分有可能改变，如铁盐等（未加酸保存）可能析出。水样的保存

水样用容器

容器要求：应使用无色硬质玻璃,如硼硅玻璃瓶或聚乙烯塑料瓶，取样前先用洗液（10%盐酸、肥皂水、洗涤剂等任一种将玻璃瓶洗净），必须能够用塞或盖紧紧密封。瓶塞最好是磨口的，也可以用橡皮塞（先用必须用10%碳酸钠溶液、1+5盐酸、水分别煮过，用蒸馏水洗净），禁止用木料、纸团和金属材料制的塞子。玻璃瓶容易洗涤和可校验体积，也可加热消毒。聚乙烯瓶不易破碎和冻坏，便于运送。容器不能是新的污染源；不吸附,不吸收待测组分,不于组分反应。

水样的保存通常将水样充满容器并密封，以减少水样在运输途中的振荡，避免空气中的氧、二氧化碳对容器内样品的影响。但对冷藏保存的水样不应充满容器。水样保存方法：可采用控制pH值、加入化学剂、冷藏或冷冻或根据具体组分选定适宜的保存方法。避免分解，减少挥发与容器的吸附损失。水样的保存冷藏：样品采集后放在暗处大约4℃保存。加入保存剂：经常使用的保存剂有各种酸、碱及杀菌剂，加入量和种类因需要而异。所加入的保存剂应不干扰待测组分的测定为原则。如检测金属时加少量硝酸。一般加入保存剂的体积很小，其影响可以忽略。但某些试剂中所含的金属杂质对微量分析是有影响的，应注意减除空白值。存放水样的容器和保存方法项目容器保存方法及可保存时间色度、臭、味G冷藏，24h内测定浑浊度G，P冷藏，24h内测定pHG，P最好现场测定，冷藏，6h内测定总硬度P，G加硝酸至pH<2，可保存6个月P：聚乙烯瓶G：硼硅硬质玻璃保存P(A)或G(A)；硝酸溶液(1+1)浸泡；G(S)：有机溶剂洗涤；冷藏指在暗处，4℃；用于离子色谱分析的水样，不能加酸项目容器保存方法及可保存时间硫化物G每100mL水样，加4滴乙酸锌溶液（220g/L）及1mL氢氧化钠溶液(40g/L)，暗处可保存7天一般金属P(A)，G(A)加硝酸至pH<2，可保存6个月六价铬G(A)(内壁无磨损)加氢氧化钠至pH7～9，尽快测定汞G(A)加硝酸溶液(1+9,含重铬酸钾50g/L)至pH<2,可保存1月银G(A)(棕色)加硝酸至pH<2砷G(A)，P(A)加硫酸至pH<2，可保存7天硒G(A)，P(A)冷藏有机氯农药(六六六、滴滴涕)G(S)衬聚四氟乙烯盖冷藏，可保存7天。如有游离余氯，每升水样加100mg抗坏血酸。现场萃取，冷藏，可保存较长时间。卤代烃类(CHCl3、CCl4)G现场处理后冷藏，4h内测定项目容器保存方法及可保存时间硼P无要求，28天余氯G现场测定氨氮、硝酸盐氮G，P每升水样加0.8mL硫酸(ρ20=1.84g/mL),冷藏,24h内测定耗氧量G每升水样加0.8mL硫酸(ρ20=1.84g/mL)，24h内测定亚硝酸盐氮G，P冷藏，尽快测定氟化物P无要求，28天氯化物、硫酸盐G，P冷藏，28天碘化物G24h内测定氰化物、挥发酚类G加氢氧化钠至pH＞12,冷藏,24h内测定；如有游离余氯，加亚砷酸钠除去项目容器保存方法及可保存时间碘化物G24h内测定氰化物、挥发酚类G加氢氧化钠至pH＞12,冷藏,24h内测定；如有游离余氯，加亚砷酸钠除去石油G（有机溶剂洗涤）现场萃取，24h测定硫化物G每升水样加8滴乙酸锌(220g/L及1mL氢氧化钠（40g/L),暗处放置7天甲醛乙醛丙烯醛G每升水样加1mL硫酸，冷藏，24小时内测定苯及笨烯物，有机磷G冷藏，24小时内测定取水样时的注意事项取水体积：取决于分析项目，通常应超过各项测定所需水体积的20-30%。取样前至少用水样洗涤3次，取样时应将水缓缓加入瓶中，不要起泡，不要用力搅动水源，不要将沙石浮土颗粒或植物杂质进入瓶中。取水样时，不要太满,留2cm高度的空间，以防止因水温或气温的改变将瓶塞挤掉。水样采集注意事项所有采样及现场测定项目的各种设备，必须保持清洁，防止污染和变质。送往实验室的水样不得用作现场测定，样品瓶必须专瓶专用，切不可用实验室盛装过浓溶液的瓶作采样瓶。分析有机化合物的水样，应使用有机溶剂荡洗过的尼龙塞或铝箔衬里。人手和手套不得与样品瓶内壁或瓶塞接触，样品瓶和过滤设备等须置于清洁环境内，远离灰尘、烟雾。水样根据推荐的方法加保存剂，按需要避光保存，或贮放在暗处或冰箱保存。

3.有害气体的采样2004年国家颁布了GBZ159-2004《工作场所空气中有害物质监测的采样规范》规范修改合并了WS1-1996《车间空气中有毒物质监测采样规范》和WS/T16-1996《作业场所空气中金属样品采集方法》，含盖了有毒物质和粉尘监测的采集方法，适用于时间加权平均浓度、短时间接触浓度、最高浓度的监测。

采样中的术语个体采样：将空气收集器佩带在采样对象的前胸上部，其进气口尽量接近呼吸带所进行的采样定点采样：指将空气收集器放置在选定的采样点，劳动者的呼吸带进行采样采样时段：指在一个检测周期（日、周、年）中，选定的采样时段。采样时间：指从采样开始到结束所持续的时间短时间采样：采样时间一般不超过15min的采样长时间采样：指采样时间一般在1h以上的采样。采样流量：采集空气样品时每分钟通过空气收集器的体积。标准采样体积：气温20℃，大气压101.3kPa时的采集空气样品时的体积急性职业中毒的毒物类别1.刺激性气体:盐酸、氟化氢、溴光气2.窒息性气体:COCO2H2S3.金属和类金属及其化合物:四乙基铅、砷及化合物等4.高分子化合物生产中的有害物质:聚氯乙烯在160—170℃时分解出氯化氢气体四氟乙烯5.有机溶剂及其他:正己烷6.农药作业场所毒物的特征毒物的种类多品种、状态、产生的环节、毒性、浓度、挥发性等空气中毒物浓度变化大空气的流动性；空间大小及它的通风状况、毒物发射源的数量和布局气象因素对空气样品的影响大气温、气压、风向、风速、湿度有毒物质在空气中的存在状态气态和蒸气气溶胶：以微细的液体或固体颗粒分散于空气中的分散体系。雾：液态粒径>10um

烟：固态粒径<1um

尘：固态粒径1-10um采样要求要有采样记录：易燃、易爆场地应用防爆型空气采样器注意监测类型；不同的类型有不同的采样要求监测类型：评价监测日常监测监督监测事故性监测

样品基本要求1.要有3个满足：应满足工作场所有害物质接触限值、卫生评价、环境条件对采样的要求2.同时作空白对照3.注意污染：空气收集器的污染4.样品的体积一般要求：＜5℃和＞35℃＜98.8kPa和＞103.4kPa时需将采样体积换算成标准采样体积

V0=Vt×293/(273+t)×P/101.3

Vt:：采样时的体积

P：采样时的大气压评价监测：危害因素预评价、危害因素控制效果评价、危害因素现状评价（连续采3天）STEL或CMAC：选择一个工作日空气中有害物质浓度最高的时段采样,TWA:有害物质浓度最高的工作日。日常监测：日常定期监测TWA：选择有害物质浓度最高的工作日采样STEL或CMAC：选择一个工作日气中有害物质浓度最高的空时段采样。监督检测：监督部门进行的监测。事故性监测：发生职业危害事故时进行的监测。根据现场情况确定采样点，监测至空气中有害物质浓度低于短时间接触允许浓度（PC-STEL）或最高允许浓度（MAC）。采样前的准备1).现场调查（原辅料、工艺、产品、副产品、劳动者的工作状况、有害物质存在状况、环境等）。2).采样仪器的准备：1.检查仪器性能和规格符合所采样要求；2.检查空气收集器的空白、采样效率和解吸效率或洗脱效率.3.校正空气采样器的采样流量。4.使用定时装置控制采样时间。5.各种收集器应进行气密性检查。

6.其他需要的物品，如规范、标准、采样单、记录表等。气体采样方法（1）采样方法包括：

1.直接采样法也称集气法：(CO、CO2、O3)

2.浓缩采样法（富集采样法）

a.液体吸收管采样(NH3、NO2、SO2、甲醛、O3)b.固体吸附剂采样(苯、甲苯、二甲苯、TVOC)c.静电沉降法采样（用于采集气溶胶）

d.个体计量器法采样

3.无动力采样气体采样方法（2）直接采样法:用于空气中被测组分浓度较高或分析方法灵敏度高，直接进样能满足检测要求时，采样工具主要是注射器、塑料袋、真空瓶。反映现场的瞬间浓度。浓缩采样法：当空气中被测物质浓度较低，或分析方法不能直接测定待测组分时采用。采样器由收集器、流量计、抽气动力组成。根据收集器的不同分为：气体采样方法（3）1.液体吸收管采样：主要吸收气态、蒸气、和气溶胶物质。如水、酸溶液、碱溶液2.固体吸附剂采样：主要用于气态和蒸气态污染物的采集。固体吸附剂有（1）颗粒状吸附剂如硅胶、活性炭、高分子多孔微球。（2）纤维状滤料（3）微孔状滤料：微孔滤膜用于金属性气溶胶采样点的数量选择有代表性的地点，应包括有害物质浓度最高，接触时间最长的地点。同一车间、同一有毒物质、同一工种、同类设备或相同操作，至少设一个采样点。1-3台1个采样点,4-10台设2个,10台以上至少设3个.同一车间、同一有毒物质、不同工种、2台设备以上、不同工序，应在有毒物质浓度大的地点设采样点。同一车间、不同有毒物质，采样点须设在逸散待测有害物质的设备的地点.劳动者在多个各种点工作时,在每个工作点设1个采样点.劳动者流动时,在流动范围内10M1个采样点.气体采样位子采样点高度考虑污染物对人体的影响,采样点高度设在呼吸带,即距离地面0.5-1.5m采样点应避开不能代表空间总体的特殊位置,如空调进风口、门窗缝隙，距离墙壁0.5m，采样器不能被阳光直射测定有害物质最高浓度（CMAC）的采样

用定点的短时间采样方法进行采样.选择有代表性的地点，空气中有害物质浓度最高的地点为重点采样点。将空气收集器进气口放在尽量放在劳动者的呼吸带。在空气中有害物质浓度最高的时段采样采样时间一般不超过15min，实际接触时间不到15min时，按实际接触时间采样。测定短时间接触浓度（STEL）的有害物质的采样

用定点的短时间采样方法进行采样.选择有代表性的地点，空气中有害物质浓度最高的地点为重点采样点。将空气收集器进气口放在尽量放在劳动者的呼吸带。在空气中有害物质浓度最高的时段采样采样时间一般为15min，采样时间不足15min时，可进行1次以上的采样空气中有害物质以15min时间加权平均浓度计算计算：采样时间为15min时：STEL=C×V/F×15采样时间不足15min时，进行1次以上采样

STEL=(C1T1+C2T2….+CnTn)/15劳动者不足15min，以15min时间加权平均浓度计算STEL=C×T/15测定时间加权平均浓度（TWA）的有害物质的采样可根据有害物质的存在状况或仪