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文档简介
实验八
蛙心灌流(perfusionoffrog’sheart)【复习理论内容】1.心脏的生理特性?2.心肌收缩的特点?3.心脏的神经支配及作用?【实验原理】
心脏的自动节律性活动,需要有一个合适的理化环境。蛙心脏离体后,用任氏液灌流,心脏在一定时间内可保持节律性收缩与舒张。改变灌流液的成分,心脏跳动的频率和幅度会随之发生改变。【实验对象】BL-420S生物机能实验系统张力换能器、蛙心夹蛙心插管、试管夹缝合线、双凹夹万能支台蛙类手术器械滴管两只【实验器材和药品】任氏液0.65%NaCll%KCl3%CaC12l:10,000El:10,000ACh3%乳酸2.5%NaHCO3【实验步骤】
一、离体牛蛙心脏制备
1.取蟾蜍一只,破坏脑和脊髓。2.打开胸腔,暴露心脏。(腹面)
(背面)♦在主A干下穿一线打一松结;在左主A下再穿一线结扎。♦在A圆锥、左主A根部剪口,将蛙心插管插入心室内。插管插入心室标志见血液涌入插管内,并随心跳上下波动。
3.蛙心插管二、连接实验装置换能器1.用试管夹将蛙心插管固定在万能支台上2.把张力换能器固定在万能支台上,在心室舒张期将与换能器相连的蛙心夹夹在心尖上。*换能器的连线应与插管中轴在同一直线上,即与地面垂直启动BL-420S生物机能实验系统“循环实验”“实验项目”“蛙心灌流”描记蛙心收缩曲线顺序观察项目药量心肌(率、力)变化任氏液灌流0.65%NaCl灌流3%CaCl21~2滴1~2滴1%KCl1:10000E1:10000Ach3%乳酸2.5%NaHCO31滴1滴2~4滴1~2滴(二)离子和药物的影响*【注意事项】♦当每种化学药物作用已明显时,应立即将蛙心插管内液体吸出而换上任氏液数次,以免心肌受损。♦须待心跳恢复正常后,才能进行下一实验项目。♦每次换液时,蛙心插管内液面应保持相同高度。♦吸管使用要分开,不可混淆。顺序观察项目药量心肌(率、力)变化任氏液灌流0.65%NaCl灌流3%CaCl22~4滴2~4滴1%KCl1:10000E1:10000Ach5%NaCl2~4滴2-4滴正常力↓力↑,舒张不完全力↓心率↑力↑,心率↑力↓,心率↓2~4滴【实验结果】【实验结果】【结果分析】任氏液:正常对照2.0.65%NaCl灌流0.65%NaCl灌流→Ca2+内流↓兴奋-收缩耦联↓收缩力↓[Ca2+]i↓【结果分析】任氏液:正常对照4.1%KCl(1滴)AP平台期缩短
Ca2+内流↓兴奋-收缩耦联↓收缩力↓【结果分析】任氏液:正常对照5.1:10000E(1~2滴)Ca2+内流↑肌浆网释放Ca2+↑E-C耦联↑收缩力↑与心肌β1受体结合cAMP4期If、ICaT通道↑4期自动去极速度↑自律性↑心率↑
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