高中生物专题一基因工程详细知识点人教版选修

.1.基因工程（DNA重组技术/基因拼接技术）基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等精品文档放心下载技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生精品文档放心下载物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做DNA重精品文档放心下载组技术或基因拼接技术。2.DNA重组技术的基本工具①、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）谢谢阅读ADNA精品文档放心下载使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开谢谢阅读B、限制性内切酶的切割方式：①在中心轴线两侧将DNA切开，切口是黏性末端。谢谢阅读②沿着中心轴线切开DNA，切口是平末端。大肠杆菌的一种限制酶（EcoRⅠ)能识别GAATTC序列，SmaI识别CCCGGG序列:谢谢阅读他们识别的核苷酸序列不同,但是切点都是在G↓C之间。精品文档放心下载C、比较有关的DNA酶（1DNA水解酶：能够将DNA水解成四种脱氧核苷酸，彻底水解成膦酸、脱氧核糖精品文档放心下载和含氮碱基（2DNA解旋酶：能够将DNA或DNA的某一段解成两条长链，作用的部位是碱基和精品文档放心下载碱基之间的氢键。注意：使DNA解成两条长链的方法除用解旋酶以外，在适当的高谢谢阅读温（如94℃）、重金属盐的作用下，也可使DNA解旋。谢谢阅读（3）DNA聚合酶：能将单个的核苷酸通过磷酸二酯键连接成DNA长链。谢谢阅读word范文.（4DNA连接酶：是通过磷酸二酯键连接双链DNA的缺口。注意比较DNA聚合酶和精品文档放心下载DNA连接酶的异同点。②.DNA连接酶——“分子缝合针”（1）DNA连接酶的分类：E.coliDNA（大肠杆菌）连接酶和T4DNA（T4噬菌体）连感谢阅读接酶。（2）作用及作用部位：E.coliDNA连接酶作用于黏性末端被切开的磷酸二酯键，精品文档放心下载T4DNA谢谢阅读③.基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”（1谢谢阅读较小的环状的裸露的DNA分子，独立于拟核之外。②病毒：常用的病毒有噬菌体、精品文档放心下载动植物病毒等。（2）运载体使用的目的：①是用它做运载工具，将目的基因转运到宿主细胞中去。谢谢阅读②是利用它在受体细胞内对目的基因进行大量复制。（3）作为运载体必须具备的条件：①在宿主细胞中保存下来并大量复制②有多谢谢阅读个限制性内切酶切点③有一定的标志基因，便于筛选3.基因工程的基本操作程序目的基因的获取→基因表达载体的构建→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检感谢阅读测与鉴定一、基因的结构：基因是有遗传效应的DNA片段(注：RNA病毒为RNA)，分为编码区和非编码区。精品文档放心下载非编码区编码区非编码区编码区上游编码区下游编码区：能转录出mRNA，原核生物中也就是能编码蛋白质的区段谢谢阅读非编码区：不能转录出mRNA，也不能编码蛋白质的区段精品文档放心下载（１）原核细胞基因的结构word范文.非编码区编码区非编码区启动子终止子非编码区中存在调控遗传信息表达的核苷酸序列:①编码区上游的RNA聚合酶结合位点，即启动子，可控制RNARNA感谢阅读DNA转录为RNA感谢阅读②编码区下游有终止子，可控制RNA聚合酶的停止、脱落。谢谢阅读（2）真核细胞基因的结构非编码区编码区非编码区启动子编码区下游外显子内含子(能编码蛋白质)(不能编码蛋白质)调控遗传信息的表达(调控序列)二基因工程的基本操作程序1、目的基因的获取：A目的基因主要是指编码蛋白质的结构基因，目前被广泛提取使用的目的基因有：感谢阅读苏云金杆菌抗虫基因、植物抗病基因（抗病毒、抗细菌)、人胰岛素基因等。谢谢阅读B获得目的基因的方法（1）从基因文库中获取目的基因：基本概念的理解：①将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入受体菌的群体中储存，各个受体感谢阅读菌分别含有这种生物的不同的基因，称为基因文库。word范文.②将某种生物体内的DNA全部提取出来，选用适当的限制酶，将DNA切成一定范围谢谢阅读大小的DNA感谢阅读每个受体菌都含有了一段不同的DNA片段。这个群体包含了这种生物的所有基因。精品文档放心下载这种基因文库叫基因组文库。③有些基因文库比较小，只包含了一种生物的一部分基因，这种基因文库叫做部分谢谢阅读基因文库，如cDNA文库（用某种生物发育的某个时期的mRNA反转录产生的多种互感谢阅读补DNA（也叫cDNA）片段，与载体连接后储存在一个受体菌群中，这个受体菌群体谢谢阅读叫做这种生物cDNA怎样提取：根据目的基因有关信息，例如，根据基因的核苷酸序列，基因的功能，基因在染色谢谢阅读体的位置，基因的转录产物mRNA以及基因的表达产物蛋白质等特性来获取目的基感谢阅读因。⑵利用PCR技术扩增目的基因：原理：DNA双链复制的基本原理前提：一段已知目的基因的核苷酸序列，根据这一序列合成引物。感谢阅读条件：a..四种脱氧核苷酸b.DNA的两条链为模板c.热稳定DNA聚合酶(Taq酶）d.一对引物（一小段单链DNA或RNA，一般～30个碱基，能与DNA母链的谢谢阅读一段碱基序列互补配对）e.温度控制和缓冲液PCR技术扩增过程:a、DNA变性（90℃-95DNA模板在热作用下，氢键断裂，形成单链DNA精品文档放心下载b、复性（55℃-60DNA模板结合，形成局部双链精品文档放心下载c、延伸（70℃-75Taq酶的作用下，合成与模板互补的DNA链精品文档放心下载⑶人工合成:①反转录法：以目的基因转录成的信使RNA为模板，反转录成互补的单链DNA，然精品文档放心下载后在酶的作用下合成双链DNA，从而获得所需的基因。精品文档放心下载word范文.目的基因转录成的mRNA单链DNA双链DNA（目的基谢谢阅读因）②根据已知的氨基酸序列合成DNA法:蛋白质中氨基酸的序列mRNA中的碱基序列DNA碱基序列目的基因精品文档放心下载目的基因2.基因表达载体的构建:→基因工程的核心⑴．目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在；可以遗传给下一代；使目的基因能感谢阅读够表达和发挥作用。：⑵．基因表达载体的构成：目的基因启动子：位于基因首端，RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动转录基因精品文档放心下载终止子：位于基因尾端，使转录在所需要的地方停下来标记基因：鉴别受体细胞中是否含有目的基因⑶．方法：同种限制酶分别切割载体和目的基因，再用DNA连接酶把两者连接。谢谢阅读目的基因与运载体结合（以质粒为运载体）word范文.⑷．条件：同种限制酶、DNA连接酶、目的基因、启动子、终止子、标记基因谢谢阅读3.将目的基因导入受体细胞：（1）将目的基因导入受体细胞的原理：借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。谢谢阅读（2精品文档放心下载等（3）方法：4.目的基因的检测与鉴定：word范文.-基因工程的应用：1.动物基因工程：动物感受器