氨基酸和肽课件

2.氨基酸和肽所有的蛋白质（生物界：1010~1012种）主要由20种氨基酸构成，这20种氨基酸是生物界通用的或标准的氨基酸。氨基酸是蛋白质的构件分子。2.氨基酸和肽所有的蛋白质（生物界：1010~1012种1L-氨基酸的基本结构CHH2NCOOHRα碳原子,不对称碳原子侧链二十种氨基酸除Gly外全是L-型。Pro呢？残基：在肽链中每个氨基酸都脱去一个水分子，脱水后的残余部分叫残基（residue),因此蛋白质肽链中的氨基酸统统是残基形式。自然选择了L-型氨基酸，D-型没有营养价值，仅存在于缬氨霉素、短杆菌肽等极少数寡肽之中，没有在蛋白质中发现。

L-氨基酸的基本结构CHH2NCOOHRα碳原子,不对称碳原2D：dextro

右；

L：

levo

左D：dextro右；L：levo3

表2.1二十种常见蛋白质氨基酸名称与符号

英文名称中文名称三字母缩写单字母符号alanine 丙氨酸 Ala Aarginine 精氨酸 Arg Rasparagine 天冬酰胺

AsnAsx Nasparticacid 天冬氨酸 AspAsx Dcystine 半胱氨酸 Cys Cglutamine 谷氨酰胺 GlnGlx Qglutamicacid 谷氨酸 GluGlx Eglycine 甘氨酸 Gly Ghistidine 组氨酸 His Hisoleucine 异亮氨酸 Ile Ileucine 亮氨酸 Leu Llysine 赖氨酸 Lys Kmethionine 甲硫氨酸 Met Mphenylalanine 苯丙氨酸 Phe Fproline 脯氨酸 Pro Pserine 丝氨酸 Ser Sthreonine 苏氨酸 Thr Ttryptophan 色氨酸 Trp Wtyrosine 酪氨酸 Tyr Yvaline 缬氨酸 Val V表2.1二十种常见蛋白质氨基酸名称与符号

42.1.2二十种氨基酸的分类据营养学分类

必需ＡＡ非必需ＡＡ据R基团化学结构分类

脂肪族ＡA（中性、含羟基或巯基、酸性、碱性）芳香族ＡA(Phe、Tyr、Trp)杂环ＡＡ(His、Pro)据R基团极性分类极性R基团AA非极性R基团AA（9种）不带电荷（6种）据氨基、羧基数分类一氨基一羧基ＡＡ一氨基二羧基ＡＡ(Glu、Asp)二氨基一羧基ＡＡ(Lys、His、Arg)

人必需氨基酸TrpIlePheMetThrValHis

ArgLysLeu

带电荷：正电荷（３种）负电荷（２种）2.1.2二十种氨基酸的分类据营养学分类必需ＡＡ非必5甘氨酸（Gly,G）丙氨酸（Ala,A）缬氨酸（Val,V）亮氨酸（Leu,L）异亮氨酸（Ile,I）中性脂肪族氨基酸p11含羟基（醇类）和含硫脂肪族氨基酸p11丝氨酸（Ser,S）苏氨酸（Thr,T）半胱氨酸（Cys,C）甲硫氨酸（Met,M）甘氨酸（Gly,G）丙氨酸（Ala,A）6酸性氨基酸及酰胺p11天冬氨酸（Asp,D）谷氨酸（Glu,E）天冬酰胺（Asn,N）谷氨酰胺（Gln,Q）酸性氨基酸及酰胺p11天冬氨酸（Asp,D）谷氨酸7碱性氨基酸p11

赖氨酸（Lys,K）精氨酸（Arg,R）组氨酸（His,H）杂环氨基酸碱性氨基酸p11

赖氨酸（Lys,K）精氨酸8杂环氨基酸p127

组氨酸(咪唑基)

（His,H）脯氨酸（Pro,P）杂环氨基酸p127

组氨酸(咪唑基)脯氨酸（P9芳香族氨基酸p12

苯丙氨酸（Phe,F）酪氨酸（Tyr,Y）色氨酸(吲哚基)（Trp,W）芳香族氨基酸p12

苯丙氨酸（Phe,F）酪氨酸10Trp,Tyr和Phe的紫外吸收Trp,Tyr和Phe的紫外吸收11紫外吸收色氨酸、酪氨酸的最大吸收峰在280nm

附近。大多数蛋白质含有这两种氨基酸残基，所以测定蛋白质溶液280nm的光吸收值是分析溶液中蛋白质含量的快速简便的方法。芳香族氨基酸的紫外吸收紫外吸收12几种特殊氨基酸

脯氨酸（亚氨基酸）几种特殊氨基酸脯氨酸13

半胱氨酸+胱氨酸二硫键-HH半胱氨酸+胱氨酸二硫键-HH14同一个氨基酸分子上可以即有正电荷又有负电荷，故称为两性电解质。在水溶液中，氨基和羧基在不同的pH条件下表现出不同的解离状态，在特定的pH条件下会呈电荷中性，这时的pH称为等电点（isoelectricpoint),以符号pI

来表示。PI是氨基酸的重要常数之一，它的意义在于，物质在PI处的溶解度最小，是分离纯化物质的重要手段。

2.2氨基酸的酸碱特性

氨基酸为两性电解质

同一个氨基酸分子上可以即有正电荷又有负电荷，故称为两性电解质15氨基酸的酸碱滴定氨基酸的酸碱滴定16当溶液的PH值>PI时，aa带电为+/-？

当溶液的PH值<PI时，aa带电为+/-？当溶液的PH值>PI时，aa带电为+/-？17氨基酸和肽课件18对于所有的R基团不解离的氨基酸而言（即解离只发生在α-羧基和α-氨基上），计算起来非常简单：

PI＝（PK1’+PK2’）/2

若是碰到R基团也解离的，氨基酸就有了多级解离，这个公式就不好用了，比如Lys、Glu、Cys等。

氨基酸等电点的计算对于所有的R基团不解离的氨基酸而言（即解离只发生在α-羧基和19在这种情况下可以按下面的步骤来计算：

<1>由PK’值判断解离顺序，总是PK1’<PK2’<PK3’<…，即谁的PK’值小，谁就先解离。

<2>按照解离顺序正确写出解离方程式：简式，注意解离基团的正确写法。

<3>找出呈电中性的物质，其左右PK’值的平均值就是氨基酸的等电点：PI＝（PK左’+PK右’）/2在这种情况下可以按下面的步骤来计算：

<1>由PK’值判断20THANKYOUSUCCESS2022/12/1121可编辑THANKYOUSUCCESS2022/12/11●氨基的化学反应:◆与茚三酮

(ninhydrin)的反应定量定性测定◆与2,4-二硝基氟苯

(DNBF)的反应

（sanger反应）用于蛋白质N-端测定

◆与二甲基氨基萘磺酰氯

(DNS-Cl)的反应测序

◆与Edman试剂(苯异硫氰酸酯PITC)和测序

有色Edman试剂的反应

（Edman反应） 用于蛋白N-端测定， 蛋白质顺序测定仪设计原理的依据2.3氨基酸的特征化学反应●氨基的化学反应:2.3氨基酸的特征化学反应22紫色物质，用于α－氨基酸的比色测定和纸层析显色与水含茚三酮的反应：紫色物质，用于α－氨基酸与水含茚三酮的反应：23氨基酸与2,4一二硝基氟苯(DNFB)的反应

（sanger反应）DNFB（dinitrofluorobenzene）DNP-AA(黄色)++HF弱硷中氨基酸氨基酸与2,4一二硝基氟苯(DNFB)的反应

（sanger24氨基酸与苯异硫氰酯（PITC）的反应

（Edman反应）PITC（phenylisothiocyanate）+苯乙内酰硫脲衍生物(PTH-AA)（phenylisothiohydantion-AA）弱碱中(400

C)(硝基甲烷400C)H+氨基酸与苯异硫氰酯（PITC）的反应

（Edman反应）PI25Edman水解：

异硫睛酸苯酯（）Edman水解：262.4肽*肽键(peptidebond)是由一个氨基酸的-羧基与另一个氨基酸的-氨基脱水缩合而形成的化学键。（一）肽(peptide)2.4肽*肽键(peptidebond)是由一个氨基27+-HOH甘氨酰甘氨酸肽键+-HOH甘氨酰甘氨酸肽键28*肽是由氨基酸通过肽键缩合而形成的化合物。*两分子氨基酸缩合形成二肽，三分子氨基酸缩合则形成三肽……*

肽链中的氨基酸分子因为脱水缩合而基团不全，被称为氨基酸残基(residue)。*由十个以内氨基酸相连而成的肽称为寡肽(oligopeptide)，由更多的氨基酸相连形成的肽称多肽(polypeptide)。*肽是由氨基酸通过肽键缩合而形成的化合物。*两分子氨基酸29肽(peptide)是氨基酸的线性聚合物，因此也常称肽链(peptidechain)。

寡肽：3-10，无构象，谷胱甘肽是3肽

多肽：10-50，介于之间，胰高血糖素是29肽

蛋白质：50以上，有特定的构象，胰岛素是51肽。 是由一条或多条多肽链构成的大分子。肽的种类肽(peptide)是氨基酸的线性聚合物，因此也常称肽链(30肽的表示法N端、C端的概念：肽链的两个端点

N端的氨基酸残基的α-氨基未参与肽键的形成，C端的氨基酸残基的α-羧基未参与肽键的形成。写法和读法： 规定书写方法为N端→C端，例如：Ala-Gly-Phe，读作：丙氨酰甘氨酰苯丙氨酸。

注意有时会看到一些奇怪的写法，比如：NH2-Ala-Gly-Phe-COOH，或H-Ala-Gly-Phe-OH，均属于画蛇添足，但Ala-Gly-Phe-NH2则表示C端被酰胺化了。

若有必要从C端→N端写，则必须标明， 如（C）Phe-Gly–Ala（N）

肽的表示法N端、C端的概念：肽链的两个端点31N末端C末端牛核糖核酸酶N末端C末端牛核糖核酸酶322.5天然存在的活性肽类别：激素、抗菌素、辅助因子实例：1.谷胱甘肽（结构见后）2.催产素和加压素：9肽或环8肽，都是脑垂体后叶激素，都有升血压、抗利尿、刺激子宫收缩、排乳的作用，催产素促进遗忘，加压素增强记忆。3.短杆菌肽（见后）和放线菌素4.促甲状腺素释放因子：TRF，是个三肽5.胰高血糖素：29肽，升高血糖，作用同肾上腺素。

2.5天然存在的活性肽类别：激素、抗菌素、辅助因子331.谷胱甘肽(glutathione,GSH)1.谷胱甘肽(glutathione,GSH)34GSH过氧化物酶H2O22GSH2H2OGSSGGSH还原酶NADPH+H+NADP+GSH过氧化物酶H2O22GSH2H2OGSS35习题参考答案1.3側链p23a.含有一个羟基：SerThrTyrb.含有一个氨基：Lysc.含有一个具有芳香性质的基团：PheTyrTrpd.含有分支的芳脂肪族烃链：LeuIleVale.含有硫：CysMet习题参考答案361.4b

在pH1，4，8，12时组氨酸的净电荷分别是多少？

pK1=1.82pK2=6.0pK3=9.17His++←—→His++-←—→His+-←—→His-Henderson-Hasselbalch公式：

1=1.82+lg([His++-]/[His++])lg([His++-]/[His++])=-0.82lg(1/100.82)=lg(1/6.6)His++-=13%His++=87%

所以在pH=1时，组氨酸的净电荷数为+1.87

8=9.17+lg([His-]/[His+-])lg([His-]/[His+-])=-1.17

lg(1/101.17)=lg(1/14.8)His-=6%His+-=94%

所以在pH=8时，组氨酸的净电荷数为-0.06pI=7.591.4b在pH1，4，8，12时组氨酸的净电荷分别是多37P49第2题头发生长速度15cm~20cm/年

0.15mX109/365X24X60X60=0.15mX109/3.154X107=4.756nm/sor=0.20mX109/3.154X107=6.341nm/s

每个aa的伸展长度：

0.54nm/3.6=0.15nm4.756/0.15=31.7/sor6.341/0.15=42.3/sP49第2题38P49第4题

A=εCLTrpε=3400/mol.cmA=0.1代入得C=2.94x10-5mol

已知此蛋白的MW为1x105,且含有3个Trp.

所以该溶液的蛋白质浓度为：

2.941x10-5x1x105/3=0.98mg/mlP49第4题39P65第7题1由酸水解得

Ala,Arg,Leu,Met,Phe,Thr,2Val

这说明了肽链的aa组成。2Sanger试剂处理得：DNP-Ala

这说明了肽链的N端是Ala3胰蛋白酶处理得一个三肽：Ala,Arg,Thr和一个五肽Leu,Met,Phe,2Val

由于胰蛋白酶只能催化Lys、Arg的羧基侧的肽键的水解，故三肽的排列为：

Ala-Thr-ArgP65第7题40当以Sanger试剂处理得DNP-Ala和DNP-ValAla是三肽的N端，Val是五肽的N端

Ala-Thr-Arg-Val(Leu,Val,Met,Phe)4溴化氢处理得一个六肽：Ala,Arg,高丝氨酸内酯,Thr,Val和一个二肽：Leu和Phe，当用Sanger试剂处理得DNP-Ala和DNP-LeuSanger试剂处理说明，二肽的排列是：

Leu-Phe

溴化氢处理说明，六肽的C端是Met

总的拼接是：

Ala-Thr-Arg-Val-Val-Met-Leu-Phe当以Sanger试剂处理得DNP-Ala和DNP-Val4142写在最后成功的基础在于好的学习习惯Thefoundationofsuccessliesingoodhabits42写在最后成功的基础在于好的学习习惯谢谢大家荣幸这一路，与你同行It'SAnHonorToWalkWithYouAllTheWay讲师：XXXXXXXX年XX月XX日

谢谢大家讲师：XXXXXX432.氨基酸和肽所有的蛋白质（生物界：1010~1012种）主要由20种氨基酸构成，这20种氨基酸是生物界通用的或标准的氨基酸。氨基酸是蛋白质的构件分子。2.氨基酸和肽所有的蛋白质（生物界：1010~1012种44L-氨基酸的基本结构CHH2NCOOHRα碳原子,不对称碳原子侧链二十种氨基酸除Gly外全是L-型。Pro呢？残基：在肽链中每个氨基酸都脱去一个水分子，脱水后的残余部分叫残基（residue),因此蛋白质肽链中的氨基酸统统是残基形式。自然选择了L-型氨基酸，D-型没有营养价值，仅存在于缬氨霉素、短杆菌肽等极少数寡肽之中，没有在蛋白质中发现。

L-氨基酸的基本结构CHH2NCOOHRα碳原子,不对称碳原45D：dextro

右；

L：

levo

左D：dextro右；L：levo46

表2.1二十种常见蛋白质氨基酸名称与符号

英文名称中文名称三字母缩写单字母符号alanine 丙氨酸 Ala Aarginine 精氨酸 Arg Rasparagine 天冬酰胺

AsnAsx Nasparticacid 天冬氨酸 AspAsx Dcystine 半胱氨酸 Cys Cglutamine 谷氨酰胺 GlnGlx Qglutamicacid 谷氨酸 GluGlx Eglycine 甘氨酸 Gly Ghistidine 组氨酸 His Hisoleucine 异亮氨酸 Ile Ileucine 亮氨酸 Leu Llysine 赖氨酸 Lys Kmethionine 甲硫氨酸 Met Mphenylalanine 苯丙氨酸 Phe Fproline 脯氨酸 Pro Pserine 丝氨酸 Ser Sthreonine 苏氨酸 Thr Ttryptophan 色氨酸 Trp Wtyrosine 酪氨酸 Tyr Yvaline 缬氨酸 Val V表2.1二十种常见蛋白质氨基酸名称与符号

472.1.2二十种氨基酸的分类据营养学分类

必需ＡＡ非必需ＡＡ据R基团化学结构分类

脂肪族ＡA（中性、含羟基或巯基、酸性、碱性）芳香族ＡA(Phe、Tyr、Trp)杂环ＡＡ(His、Pro)据R基团极性分类极性R基团AA非极性R基团AA（9种）不带电荷（6种）据氨基、羧基数分类一氨基一羧基ＡＡ一氨基二羧基ＡＡ(Glu、Asp)二氨基一羧基ＡＡ(Lys、His、Arg)

人必需氨基酸TrpIlePheMetThrValHis

ArgLysLeu

带电荷：正电荷（３种）负电荷（２种）2.1.2二十种氨基酸的分类据营养学分类必需ＡＡ非必48甘氨酸（Gly,G）丙氨酸（Ala,A）缬氨酸（Val,V）亮氨酸（Leu,L）异亮氨酸（Ile,I）中性脂肪族氨基酸p11含羟基（醇类）和含硫脂肪族氨基酸p11丝氨酸（Ser,S）苏氨酸（Thr,T）半胱氨酸（Cys,C）甲硫氨酸（Met,M）甘氨酸（Gly,G）丙氨酸（Ala,A）49酸性氨基酸及酰胺p11天冬氨酸（Asp,D）谷氨酸（Glu,E）天冬酰胺（Asn,N）谷氨酰胺（Gln,Q）酸性氨基酸及酰胺p11天冬氨酸（Asp,D）谷氨酸50碱性氨基酸p11

赖氨酸（Lys,K）精氨酸（Arg,R）组氨酸（His,H）杂环氨基酸碱性氨基酸p11

赖氨酸（Lys,K）精氨酸51杂环氨基酸p127

组氨酸(咪唑基)

（His,H）脯氨酸（Pro,P）杂环氨基酸p127

组氨酸(咪唑基)脯氨酸（P52芳香族氨基酸p12

苯丙氨酸（Phe,F）酪氨酸（Tyr,Y）色氨酸(吲哚基)（Trp,W）芳香族氨基酸p12

苯丙氨酸（Phe,F）酪氨酸53Trp,Tyr和Phe的紫外吸收Trp,Tyr和Phe的紫外吸收54紫外吸收色氨酸、酪氨酸的最大吸收峰在280nm

附近。大多数蛋白质含有这两种氨基酸残基，所以测定蛋白质溶液280nm的光吸收值是分析溶液中蛋白质含量的快速简便的方法。芳香族氨基酸的紫外吸收紫外吸收55几种特殊氨基酸

脯氨酸（亚氨基酸）几种特殊氨基酸脯氨酸56

半胱氨酸+胱氨酸二硫键-HH半胱氨酸+胱氨酸二硫键-HH57同一个氨基酸分子上可以即有正电荷又有负电荷，故称为两性电解质。在水溶液中，氨基和羧基在不同的pH条件下表现出不同的解离状态，在特定的pH条件下会呈电荷中性，这时的pH称为等电点（isoelectricpoint),以符号pI

来表示。PI是氨基酸的重要常数之一，它的意义在于，物质在PI处的溶解度最小，是分离纯化物质的重要手段。

2.2氨基酸的酸碱特性

氨基酸为两性电解质

同一个氨基酸分子上可以即有正电荷又有负电荷，故称为两性电解质58氨基酸的酸碱滴定氨基酸的酸碱滴定59当溶液的PH值>PI时，aa带电为+/-？

当溶液的PH值<PI时，aa带电为+/-？当溶液的PH值>PI时，aa带电为+/-？60氨基酸和肽课件61对于所有的R基团不解离的氨基酸而言（即解离只发生在α-羧基和α-氨基上），计算起来非常简单：

PI＝（PK1’+PK2’）/2

若是碰到R基团也解离的，氨基酸就有了多级解离，这个公式就不好用了，比如Lys、Glu、Cys等。

氨基酸等电点的计算对于所有的R基团不解离的氨基酸而言（即解离只发生在α-羧基和62在这种情况下可以按下面的步骤来计算：

<1>由PK’值判断解离顺序，总是PK1’<PK2’<PK3’<…，即谁的PK’值小，谁就先解离。

<2>按照解离顺序正确写出解离方程式：简式，注意解离基团的正确写法。

<3>找出呈电中性的物质，其左右PK’值的平均值就是氨基酸的等电点：PI＝（PK左’+PK右’）/2在这种情况下可以按下面的步骤来计算：

<1>由PK’值判断63THANKYOUSUCCESS2022/12/1164可编辑THANKYOUSUCCESS2022/12/11●氨基的化学反应:◆与茚三酮

(ninhydrin)的反应定量定性测定◆与2,4-二硝基氟苯

(DNBF)的反应

（sanger反应）用于蛋白质N-端测定

◆与二甲基氨基萘磺酰氯

(DNS-Cl)的反应测序

◆与Edman试剂(苯异硫氰酸酯PITC)和测序

有色Edman试剂的反应

（Edman反应） 用于蛋白N-端测定， 蛋白质顺序测定仪设计原理的依据2.3氨基酸的特征化学反应●氨基的化学反应:2.3氨基酸的特征化学反应65紫色物质，用于α－氨基酸的比色测定和纸层析显色与水含茚三酮的反应：紫色物质，用于α－氨基酸与水含茚三酮的反应：66氨基酸与2,4一二硝基氟苯(DNFB)的反应

（sanger反应）DNFB（dinitrofluorobenzene）DNP-AA(黄色)++HF弱硷中氨基酸氨基酸与2,4一二硝基氟苯(DNFB)的反应

（sanger67氨基酸与苯异硫氰酯（PITC）的反应

（Edman反应）PITC（phenylisothiocyanate）+苯乙内酰硫脲衍生物(PTH-AA)（phenylisothiohydantion-AA）弱碱中(400

C)(硝基甲烷400C)H+氨基酸与苯异硫氰酯（PITC）的反应

（Edman反应）PI68Edman水解：

异硫睛酸苯酯（）Edman水解：692.4肽*肽键(peptidebond)是由一个氨基酸的-羧基与另一个氨基酸的-氨基脱水缩合而形成的化学键。（一）肽(peptide)2.4肽*肽键(peptidebond)是由一个氨基70+-HOH甘氨酰甘氨酸肽键+-HOH甘氨酰甘氨酸肽键71*肽是由氨基酸通过肽键缩合而形成的化合物。*两分子氨基酸缩合形成二肽，三分子氨基酸缩合则形成三肽……*

肽链中的氨基酸分子因为脱水缩合而基团不全，被称为氨基酸残基(residue)。*由十个以内氨基酸相连而成的肽称为寡肽(oligopeptide)，由更多的氨基酸相连形成的肽称多肽(polypeptide)。*肽是由氨基酸通过肽键缩合而形成的化合物。*两分子氨基酸72肽(peptide)是氨基酸的线性聚合物，因此也常称肽链(peptidechain)。

寡肽：3-10，无构象，谷胱甘肽是3肽

多肽：10-50，介于之间，胰高血糖素是29肽

蛋白质：50以上，有特定的构象，胰岛素是51肽。 是由一条或多条多肽链构成的大分子。肽的种类肽(peptide)是氨基酸的线性聚合物，因此也常称肽链(73肽的表示法N端、C端的概念：肽链的两个端点

N端的氨基酸残基的α-氨基未参与肽键的形成，C端的氨基酸残基的α-羧基未参与肽键的形成。写法和读法： 规定书写方法为N端→C端，例如：Ala-Gly-Phe，读作：丙氨酰甘氨酰苯丙氨酸。

注意有时会看到一些奇怪的写法，比如：NH2-Ala-Gly-Phe-COOH，或H-Ala-Gly-Phe-OH，均属于画蛇添足，但Ala-Gly-Phe-NH2则表示C端被酰胺化了。

若有必要从C端→N端写，则必须标明， 如（C）Phe-Gly–Ala（N）

肽的表示法N端、C端的概念：肽链的两个端点74N末端C末端牛核糖核酸酶N末端C末端牛核糖核酸酶752.5天然存在的活性肽类别：激素、抗菌素、辅助因子实例：1.谷胱甘肽（结构见后）2.催产素和加压素：9肽或环8肽，都是脑垂体后叶激素，都有升血压、抗利尿、刺激子宫收缩、排乳的作用，催产素促进遗忘，加压素增强记忆。3.短杆菌肽（见后）和放线菌素4.促甲状腺素释放因子：TRF，是个三肽5.胰高血糖素：29肽，升高血糖，作用同肾上腺素。

2.5天然存在的活性肽类别：激素、抗菌素、辅助因子761.谷胱甘肽(glutathione,GSH)1.谷胱甘肽(glutathione,GSH)77GSH过氧化物酶H2O22GSH2H2OGSSGGSH还原酶NADPH+H+NADP+GSH过氧化物酶H2O22GSH2H2OGSS78习题参考答案1.3側链p23a.含有一个羟基：SerThrTyrb.含有一个氨基：Lysc.含有一个具有芳香性质的基团：PheTyrTrpd.含有分支的芳脂肪族烃链：LeuIleVale.含有硫：CysMet习题参考答案791.4b

在pH1，4，8，12时组氨酸的净电荷分别是多少？

pK1=1.82pK2=6.0pK3=9.17His++←—→His++-←—→His+-←—→His-Henderson-Hasselbalch公式：

1=1.82+lg([His++-]/[His++])lg([His++-]/[His++])=-0.82lg(1/100.82)=lg(1/6.6)His++-=13%His++=87%

所以在pH=1时，组氨酸的净电荷数为+1.87

8=9.17+lg([Hi