灭菌效率低课件

【灭菌目的】

杀死或除去药剂中的微生物繁殖体和芽胞，最大限度地提高药物制剂的安全性，保护制剂的稳定性

【灭菌方法选择原则】

既要达到灭菌目的，又不能破坏药物的稳定性和有效性

灭菌目的与灭菌方法选择原则【灭菌目的】1常用灭菌方法物理灭菌法化学灭菌法干热灭菌法湿热灭菌法射线灭菌法滤过除菌法气体灭菌法化学药品消毒法灭菌方法分类常用灭菌方法物理灭菌法化学灭菌法干热灭菌法气体灭菌法灭菌方法2【D值】

微生物受高温等作用被杀灭时，在一定温度范围内其死亡速度符合一级动力学过程，即：验证灭菌可靠性的参数或式中，N0为原有微生物数；Nt为灭菌时间为t时残存的微生物数；k为灭菌速率常数。

所以上式可变为【D值】验证灭菌可靠性的参数或式中，N0为原有3对于静止空气采用灭菌方法。是在常压下（不密闭容器）使用100℃器蒸气加热杀灭适用于消毒及不耐高热的制剂(安瓿）或不耐压容器与器械物理灭菌法把待灭菌物品放入沸水中加热灭菌的方法杀死或除去药剂中的微生物繁殖体和芽胞，最大限度地提高药物制剂的安全性，保护制剂的稳定性【灭菌气体必须具备的条件】①在室温时能形成气体或蒸气；是在热压灭菌器内，利用高压饱和蒸气杀灭微生物的方法。⑥其它（聚碳酸酯膜、聚砜膜、聚氯乙烯膜、聚丙烯膜等）酸性不利于细菌的发育。微生物受高温等作用被杀灭时，在一定温度范围内其死亡速度符合一级动力学过程，即：利用蛋白质与核酸具有遇热、射线不稳定的特性，采用加热、射线和滤过方法，杀灭或除去微生物的技术称为物理灭菌法或物理灭菌技术指用化学药品直接作用于微生物而将其杀灭的方法湿饱和蒸气：带有水分，热含量较低，穿透力差，验证灭菌可靠性的参数【D值定义】

D值系指在一定温度下，杀灭90%微生物（或残存率为10%）所需的灭菌时间。根据D的定义则有：对于静止空气采用灭菌方法。验证灭菌可靠性的参数【4验证灭菌可靠性的参数【Z值】

Z值为降低一个lgD值所需升高的温度，即灭菌时间减少到原来的1/10所需升高的温度或在相同灭菌时间内，杀灭99%的微生物所需提高的温度，可用公式表示为：Z值为10℃，意思是当灭菌时间减少到原来灭菌时间的10%时［如从10min变为1min，即降低1个1gD或1gD１10－1gD２1＝１］，需具有相同的灭菌效果，所需升高的灭菌温度为10℃。验证灭菌可靠性的参数【Z值】Z值为降低5和灭菌时间；微生物数量愈少，所需灭菌时间愈短指用放射性同位素（60Co和137Cs）放射的γ射线杀菌的方法。深层滤过效果好，适用于大生产深层滤过效果好，适用于大生产相当于干热灭菌，不宜用本法。①在室温时能形成气体或蒸气；易脱砂，对药液有较强的吸附性，有时可改变药液的丙二醇、过氧乙酸熏蒸法，紫外线空气灭菌法等。原理是紫外线可使核酸、蛋白变性，且能使空气中氧气产生微量臭氧，而达到共同杀菌作用4）无腐蚀性、爆炸性及刺激性；无菌操作法⑥其它（聚碳酸酯膜、聚砜膜、聚氯乙烯膜、聚丙烯膜等）注意：烤箱内温度是否均匀，辅层宜薄。耐热、耐压的次序为：芽胞>繁殖体>衰老体【F值】验证灭菌可靠性的参数

F值系指在一定灭菌温度（T）下，给定的Z值所产生的灭菌效果与在参比温度（T0）下给定的Z值所产生的灭菌效果相同时所相当的时间，以min为单位。和灭菌时间；【F值】验证灭菌可靠性的参数6验证灭菌可靠性的参数【F0值】

F0值系指在一定灭菌温度(T)下、Z值为10℃所产生的灭菌效果与121℃、Z值为10℃所产生的灭菌效果相同时所相当的时间（min）。

F0值可认为是将在一定温度（如115℃）和一定时间（如30min）下灭菌的效果，折算为在121℃下灭菌的效果相同时所需要的时间.

一般规定F0值≥8min.为增加安全系数，实际控制时应增加，以F0=8～12min为宜

验证灭菌可靠性的参数【F0值】F0值系指7物理灭菌法【定义】

利用蛋白质与核酸具有遇热、射线不稳定的特性，采用加热、射线和滤过方法，杀灭或除去微生物的技术称为物理灭菌法或物理灭菌技术物理灭菌法干热灭菌法湿热灭菌法射线灭菌法滤过除菌法物理灭菌法【定义】物理灭菌8物理灭菌法【一、干热灭菌法】

【原理】高热破坏蛋白质和核酸中的氢键，使酶失去活性

干热空气灭菌法

火焰灭菌法干热灭菌法物理灭菌法【一、干热灭菌法9物理灭菌法Ⅰ.火焰灭菌法直接在火焰中烧灼灭菌的方法。灭菌迅速、可靠、简便。【特点】【适用】耐火焰材质的物品，如金属、玻璃及瓷器等用具的灭菌，不适用于药品的灭菌。【方法】酒精火焰，通过火焰3次，每次数秒。注意利用外部氧化焰。燃烧在器壁的酒精不能灭菌。物理灭菌法Ⅰ.火焰灭菌法10Ⅱ.干热空气灭菌法物理灭菌法在高温（160-170℃）干热空气中灭菌的方法。【特点】【适用】耐高温的玻璃制品、金属制品、不允许湿气穿透的油脂类、耐高温的粉末材料Ⅱ.干热空气灭菌法物理灭11【缺点】穿透力弱，温度不易均匀，而且灭菌温度较高，灭菌时间较长，不适于橡胶、塑料及大部分药品。【方法】140℃3小时；160-170℃2小时；热原250℃，30min，或200℃以上45min

注意：烤箱内温度是否均匀，辅层宜薄。【缺点】穿透力弱，温度不易均匀，而且灭菌温度较高，【方法】112物理灭菌法【二、湿热灭菌法】

【含义】是在饱和蒸气或沸水或流通蒸气中进行灭菌的方法。【原理与特点】由于蒸气潜热大，穿透力强，容易使蛋白质变性或凝固，具有很强的灭菌效果，灭菌可靠，操作简单．是在制剂生产中应用最广泛的一种灭菌方法。【缺点】不适用于对湿热敏感的药物物理灭菌法【二、湿热灭菌法13煮沸灭菌法热压灭菌法流通蒸汽灭菌法低温间歇灭菌法湿热灭菌法物理灭菌法煮沸灭菌法热压灭菌法流通蒸汽灭菌法低温间歇灭菌法湿热灭菌法14微生物的种类与性质蒸汽性质药品性质和灭菌时间介质的性质物理灭菌法【影响湿热灭菌的因素】

影响因素微生物的种类与性质蒸汽性质药品性质和灭菌时间介质的性质15物理灭菌法【微生物的种类与性质】

不同细菌，同一细菌的不同发育阶段对热的抵抗力有所不同耐热、耐压的次序为：芽胞>繁殖体>衰老体微生物数量愈少，所需灭菌时间愈短物理灭菌法【微生物的种类与16【蒸汽性质】

物理灭菌法饱和蒸气：热含量较高，热的穿透力较大，灭菌效力高。湿饱和蒸气：带有水分，热含量较低，穿透力差，灭菌效力较低。过热蒸气：温度高于饱和蒸气，但穿透力差，灭菌效率低。

【蒸汽性质】物理灭菌法17【药品性质和灭菌时间】

物理灭菌法灭菌时间与灭菌温度相关，高温灭菌即可缩短灭菌时间，但温度越高，药物的分解速度加快；低温长时间灭菌，也增加药物的分解量。因此，应在达到有效灭菌的前提下适当选择灭菌温度和灭菌时间；

【药品性质和灭菌时间】物理18指整个操作过程控制在无菌条件下进行的一种操作方法饱和蒸气：热含量较高，热的穿透力较大，灭菌效力高。【灭菌气体必须具备的条件】115℃(67kPa)，30min；物理灭菌法物理灭菌法化学灭菌法是通过微波照射产生的热能杀死微生物和芽胞的方法如果灭菌器内有空气存在，则压力表上的压力是蒸气验证灭菌可靠性的参数将其中的细胞繁殖体杀死，然后在室温中放置24h，让其物理灭菌法指用放射性同位素（60Co和137Cs）放射的γ射线杀菌的方法。是通过微波照射产生的热能杀死微生物和芽胞的方法无菌操作法【介质的性质】

物理灭菌法制剂中含有营养物质，如糖类、蛋白质等，增强细菌的抗热性。细菌的生活能力也受介质PH值的影响：一般中性环境的耐热性最好，碱性次之，酸性不利于细菌的发育。

指整个操作过程控制在无菌条件下进行的一种操作方法【介质的性质19物理灭菌法Ⅰ.热压灭菌法【含义与特点】

是在热压灭菌器内，利用高压饱和蒸气杀灭微生物的方法。公认最可靠的方法．所需的温度（蒸气表压）与时间的关系如下：115℃(67kPa)，30min；121℃(97kPa)，20min；126℃(139kPa)，15min。【适用】

耐高压蒸气的药物制剂、玻璃容器、金属容器、瓷器、橡胶塞、膜过滤器等物理灭菌法Ⅰ.热压灭菌法20物理灭菌法卧式热压灭菌柜（最常用）立式热压灭菌柜手提式热压灭菌器热压灭菌器物理灭菌法卧式热压灭菌柜（21物理灭菌法【卧式热压灭菌柜结构】

物理灭菌法【卧式热压灭菌柜22物理灭菌法【卧式热压灭菌柜操作方法】

准备阶段灭菌阶段后处理阶段物理灭菌法【卧式热压灭菌柜23物理灭菌法【卧式热压灭菌柜操作注意事项】

①检查灭菌品，必须使用饱和蒸气；②必须将灭菌器内的空气排除。如果灭菌器内有空气存在，则压力表上的压力是蒸气与空气二者的总压，并非纯蒸气压，温度达不到规定值。③灭菌时间必须由全部药液温度真正达到所要求的温度时算起；④灭菌完毕后停止加热，必须使压力逐渐降到0，才能放出锅内蒸气，使锅内压力和大气压相等后，稍稍打开灭菌锅，待10min～15min，再全部打开。以避免锅内外压差太大、温差太大而使物品冲出和使玻璃瓶炸裂。⑤装封于密封容器内的干燥固体药物或辅料因无湿热穿透，相当于干热灭菌，不宜用本法。物理灭菌法【卧式热压灭菌柜24Ⅱ.流通蒸汽灭菌法物理灭菌法【含义及特点】

是在常压下（不密闭容器）使用100℃器蒸气加热杀灭微生物的方法。通常灭菌时间为30min～60min。本法不能保证杀灭所有的芽胞，系非可靠的灭菌法.

【适用】

适用于消毒及不耐高热的制剂(安瓿）或不耐压容器与器械的灭菌。注意：必须到达100度后再计时，包件不宜过大Ⅱ.流通蒸汽灭菌法物理灭25物理灭菌法Ⅲ.煮沸灭菌法【含义及特点】

把待灭菌物品放入沸水中加热灭菌的方法通常煮沸30min～60min本法灭菌效果差【适用】

注射器、注射针等器皿的消毒。必要时加入适当的抑菌剂，如甲酚、氯甲酚、苯酚、三氯叔丁醇等，可杀死芽胞菌。物理灭菌法Ⅲ.煮沸灭菌法26物理灭菌法Ⅳ.低温间歇灭菌法【含义及特点】

将待灭菌的物品，用60℃～80℃水或流通蒸气加热1h，将其中的细胞繁殖体杀死，然后在室温中放置24h，让其中的芽胞发育成为繁殖体，再次加热灭菌、放置，反复进行3～5次，直至消灭芽胞为止。【适用】

必须用加热法灭茵而又不耐较高温度的制剂与药品。【缺点】费时、工效低、灭菌效果差添加适量抑菌剂。物理灭菌法Ⅳ.低温间歇灭27【三、射线灭菌法】

物理灭菌法【含义】指采用辐射、微波和紫外线杀灭微生物和芽胞的方法【三、射线灭菌法】物理灭菌28指用放射性同位素（60Co和137Cs）放射的γ射线杀菌的方法。射线可使微生物的分子直接发生电离而产生能破坏微生物正常代谢的自由基，最终使微生物遭到破坏指用紫外线照射杀灭微生物和芽胞的方法原理是紫外线可使核酸、蛋白变性，且能使空气中氧气产生微量臭氧，而达到共同杀菌作用是通过微波照射产生的热能杀死微生物和芽胞的方法射线灭菌法

辐射灭菌法

紫外线灭菌法

微波灭菌法物理灭菌法指用放射性同位素（60Co和137Cs）放射的γ射线杀菌的方29【四、过滤除菌法】

物理灭菌法【含义】

指使药液通过无菌的滤器除去活的或死的微生物的方法，属于机械除菌方法【适用】

对热不稳定的低粘度药物（生化药物）溶液、气体、水等的除菌。要求无菌操作。可减少热原，但不能滤除它。【四、过滤除菌法】物理灭菌30【滤器要求和种类】

有较高的滤过效率，能有效地除尽物料中的微生物，滤材与滤液中的成分不发生相互交换，滤器易清洗，操作方便细菌芽胞大小：0.5－1μm.砂滤棒垂熔玻璃滤器微孔薄膜滤器物理灭菌法【滤器要求和种类】有较高的滤过效率，能有效地除尽物料中的微生31Ⅰ.砂滤棒物理灭菌法a.硅藻土滤棒，规格：粗号，中号，细号（3-4μm）。细号可除部分菌。b.素瓷滤棒:分八级，三级以上为孔径为2.5-1.3μm,1.3μm可除菌.深层滤过效果好，适用于大生产易脱砂，对药液有较强的吸附性，有时可改变药液的pH值，使用后要进行处理沙滤棒主要用于除杂质与预滤，较少直接应用于除菌【常用类型】

【特点】

Ⅰ.砂滤棒物理灭菌法深层32Ⅱ.垂熔玻璃滤器【含义】

是用硬质玻璃细粉，高温烧结在一起制成孔隙均匀的多孔性滤板，再固定在玻璃器皿上而制成的漏斗状、球状或棒状的滤器。【类型】

垂熔玻璃漏斗垂熔玻璃滤球垂熔玻璃滤棒物理灭菌法Ⅱ.垂熔玻璃滤器【含义】是用硬质玻璃细粉，高温烧结在一起制33【特点】

性质稳定，对药物溶液不吸附，不影响药液的PH，常用于除杂质和除菌。除菌用规格：6号，Ｇ６，ＩＧ６号垂熔玻璃滤器。

物理灭菌法【特点】性质稳定，对药物溶液不吸附，不影响药液的PH，34Ⅲ.微孔薄膜过滤器物理灭菌法【微孔滤膜】

是用高分子材料制成的薄膜滤过介质，在薄膜上分布有大量的微孔【微孔滤膜膜材种类】

①醋酸纤维素膜②硝酸纤维素膜③醋酸纤维素与硝酸纤维素混合酯膜④聚酰胺（尼龙）膜⑤聚四氟乙烯膜⑥其它（聚碳酸酯膜、聚砜膜、聚氯乙烯膜、聚丙烯膜等）膜的孔径：除菌用0.22um以下Ⅲ.微孔薄膜过滤器物理灭35化学灭菌法【含义及特点】

指用化学药品直接作用于微生物而将其杀灭的方法仅对微生物繁殖体有效，不能杀灭芽胞目的在于减少微生物的数目，以控制一定的无菌状态化学灭菌法气体灭菌法化学药品消毒法化学灭菌法【含义及特点】指36【一、气体灭菌法】

化学灭菌法指采用化学品的气体或蒸汽（如环氧乙烷、甲醛、丙二醇、甘油和过氧乙酸蒸汽等）进行灭菌的方法【含义】

【适用】

药物的混悬液、粉末和固体药物易被热破坏，不能加热，又不能滤过，可用本法【一、气体灭菌法】化学灭菌37【灭菌气体必须具备的条件】

1）室温形成气体或蒸汽；2）穿透力强．并易于除去；3）作用快，毒性低，4）无腐蚀性、爆炸性及刺激性；5）价格低廉。来源丰富。①在室温时能形成气体或蒸气；②穿透力强，并容易自被灭菌物上移除；③灭菌快，毒性低，在低浓度时具有杀菌作用；④无腐蚀性、爆炸性及刺激性。【灭菌气体必须具备的条件】1）室温形成气体或蒸汽；①在室温时38【二、化学药品消毒法】

化学灭菌法【含义及特点】

指采用杀菌剂溶液进行灭菌的方法主要作为其他灭菌法的辅助措施，用于物体表面，如皮肤、无菌器具和设备、无菌室的地面、台面等的消毒常用消毒液有75%乙醇、1%聚维酮碘溶液、0.1%～0.2%苯扎溴铵（新洁尔灭）溶液、约2%的酚或煤酚皂溶液等【二、化学药品消毒法】化学39无菌操作法【含义与特点】

指整个操作过程控制在无菌条件下进行的一种操作方法【适用】

热敏性成分。药品加热灭菌后发生变质、变色或含时降低、效价降低者．用于注射剂、滴眼剂、海绵剂、蜜丸等。按无菌操作法制备的产品，一般不再灭菌无菌操作须在无菌操作室或无菌操作柜内进行无菌操作法【含义与特点】指40无菌操作法【无菌操作室的灭菌】

无菌室的灭菌多采用灭菌和除菌相结合的方式实施。对于流动空气采用过滤介质除菌法；丙二醇、过氧乙酸熏蒸法，紫外线空气灭菌法等。对于静止空气采用灭菌方法。常用空气灭菌法有甲醛溶液，除此外，定期采用药液消毒法灭菌，在室内喷洒或擦拭墙壁、地面、用具等无菌操作法【无菌操作室的灭41无菌操作法【无菌操作】

无菌操作室外有准备室，更衣室、浴室、缓冲间和传送柜，操作人员进入前先洗澡、更换专用工作服和清洁的鞋帽．不使头发、内衣露出。人流和物流要严格分离，以避免交叉污染无菌操作法【无菌操作】无菌42无菌检查法证明是否有活菌。可区分无菌产品与非无菌产品。【意义】

有直接接种法与薄膜过滤法，以后者较好

【方法】

无菌检查法证明是否有活菌。43物理灭菌法【定义】

利用蛋白质与核酸具有遇热、射线不稳定的特性，采用加热、射线和滤过方法，杀灭或除去微生物的技术称为物理灭菌法或物理灭菌技术物理灭菌法干热灭菌法湿热灭菌法射线灭菌法滤过除菌法物理灭菌法【定义】物理灭菌44【缺点】穿透力弱，温度不易均匀，而且灭菌温度较高，灭菌时间较长，不适于橡胶、塑料及大部分药品。【方法】140℃3小时；160-170℃2小时；热原250℃，30min，或200℃以上45min

注意：烤箱内温度是否均匀，辅层宜薄。【缺点】穿透力弱，温度不易均匀，而且灭菌温度较高，【方法】145耐火焰材质的物品，如金属、玻璃及瓷器素瓷滤棒:分八级，三级以上为孔径为2.以避免锅内外压差太大、性质稳定，对药物溶液不吸附，不影响药液的PH，但温度越高，药物的分解速度加快；深层滤过效果好，适用于大生产如果灭菌器内有空气存在，则压力表上的压力是蒸气化学灭菌法③醋酸纤维素与硝酸纤维素混合酯膜【微生物的种类与性质】素瓷滤棒:分八级，三级以上为孔径为2.物理灭菌法注意：烤箱内温度是否均匀，辅层宜薄。温差太大而使物品冲出和使玻璃瓶炸裂。通常煮沸30min～60min物理灭菌法【微生物的种类与性质】

不同细菌，同一细菌的不同发育阶段对热的抵抗力有所不同耐热、耐压的次序为：芽胞>繁殖体>衰老体微生物数量愈少，所需灭菌时间愈短耐火焰材质的物品，如金属、玻璃及瓷器46指用放射性同位素（60Co和137Cs）放射的γ射线杀菌的方法。射线可使微生物的分子直接发生电离而产生能破坏微生物正常代谢的自由基，最终使微生物遭到破坏指用紫外线照射杀灭微生物和芽胞的方法原理是紫外线可使核酸、蛋白变性，且能使空气中氧气产生微量臭氧，而达到共同杀菌作用是通过微波照射产生的热能杀死微生物和芽胞的方法射线灭菌法

辐射灭菌法

紫外线灭菌法

微波灭菌法物理灭菌法指用放射性同位素（60Co和137Cs）放射的γ射线杀菌的方47【特点】

性质稳定，对药物溶液不吸附，不影响药液的PH，常用于除杂质和除菌。除菌用规格：6号，Ｇ６，ＩＧ６号垂熔玻璃滤器。

物理灭菌法【特点】性质稳定，对药物溶液不吸附，不影响药液的PH，48Ⅲ.微孔薄膜过滤器物理灭菌法【微孔滤膜】

是用高分子材料制成的薄膜滤过介质，在薄膜上分布有大量的微孔【微孔滤膜膜材种类】

①醋酸纤维素膜②硝酸纤维素膜③醋酸纤维素与硝酸纤维素混合酯膜④聚酰胺（尼龙）膜⑤聚四氟乙烯膜⑥其它（聚碳酸酯膜、聚砜膜、聚氯乙烯膜、聚丙烯膜等）膜的孔径：除菌用0.22um以下Ⅲ.微孔薄膜过滤器物理灭49【灭菌气体必须具备的条件】

1）室温形成气体或蒸汽；2）穿透力强．并易于除去；3）作用快，毒性低，4）无腐蚀性、爆炸性及刺激性；5）价格低廉。来源丰富。①在室温时能形成气体或蒸气；②穿透力强，并容易自被灭菌物上移除；③灭菌快，毒性低，在低浓度时具有杀菌作用；④无腐蚀性、爆炸性及刺激性。【灭菌气体必须具备的条件】1）室温形成气体或蒸汽；①在室温时50无菌操作法【无菌操作室的灭菌】

无菌室的灭菌多采用灭菌和除菌相结合的方式实施。对于流动空气采用过滤介质除菌法；丙二醇、过氧乙酸熏蒸法，紫外线空气灭菌法等。对于静止空气采用灭菌方法。常用空气灭菌法有甲醛溶液，除此外，定期采用药液消毒法灭菌，在室内喷洒或擦拭墙壁、地面、用具等无菌操作法【无菌操作室的灭51

【灭菌目的】

杀死或除去药剂中的微生物繁殖体和芽胞，最大限度地提高药物制剂的安全性，保护制剂的稳定性

【灭菌方法选择原则】

既要达到灭菌目的，又不能破坏药物的稳定性和有效性

灭菌目的与灭菌方法选择原则【灭菌目的】52常用灭菌方法物理灭菌法化学灭菌法干热灭菌法湿热灭菌法射线灭菌法滤过除菌法气体灭菌法化学药品消毒法灭菌方法分类常用灭菌方法物理灭菌法化学灭菌法干热灭菌法气体灭菌法灭菌方法53【D值】

微生物受高温等作用被杀灭时，在一定温度范围内其死亡速度符合一级动力学过程，即：验证灭菌可靠性的参数或式中，N0为原有微生物数；Nt为灭菌时间为t时残存的微生物数；k为灭菌速率常数。

所以上式可变为【D值】验证灭菌可靠性的参数或式中，N0为原有54对于静止空气采用灭菌方法。是在常压下（不密闭容器）使用100℃器蒸气加热杀灭适用于消毒及不耐高热的制剂(安瓿）或不耐压容器与器械物理灭菌法把待灭菌物品放入沸水中加热灭菌的方法杀死或除去药剂中的微生物繁殖体和芽胞，最大限度地提高药物制剂的安全性，保护制剂的稳定性【灭菌气体必须具备的条件】①在室温时能形成气体或蒸气；是在热压灭菌器内，利用高压饱和蒸气杀灭微生物的方法。⑥其它（聚碳酸酯膜、聚砜膜、聚氯乙烯膜、聚丙烯膜等）酸性不利于细菌的发育。微生物受高温等作用被杀灭时，在一定温度范围内其死亡速度符合一级动力学过程，即：利用蛋白质与核酸具有遇热、射线不稳定的特性，采用加热、射线和滤过方法，杀灭或除去微生物的技术称为物理灭菌法或物理灭菌技术指用化学药品直接作用于微生物而将其杀灭的方法湿饱和蒸气：带有水分，热含量较低，穿透力差，验证灭菌可靠性的参数【D值定义】

D值系指在一定温度下，杀灭90%微生物（或残存率为10%）所需的灭菌时间。根据D的定义则有：对于静止空气采用灭菌方法。验证灭菌可靠性的参数【55验证灭菌可靠性的参数【Z值】

Z值为降低一个lgD值所需升高的温度，即灭菌时间减少到原来的1/10所需升高的温度或在相同灭菌时间内，杀灭99%的微生物所需提高的温度，可用公式表示为：Z值为10℃，意思是当灭菌时间减少到原来灭菌时间的10%时［如从10min变为1min，即降低1个1gD或1gD１10－1gD２1＝１］，需具有相同的灭菌效果，所需升高的灭菌温度为10℃。验证灭菌可靠性的参数【Z值】Z值为降低56和灭菌时间；微生物数量愈少，所需灭菌时间愈短指用放射性同位素（60Co和137Cs）放射的γ射线杀菌的方法。深层滤过效果好，适用于大生产深层滤过效果好，适用于大生产相当于干热灭菌，不宜用本法。①在室温时能形成气体或蒸气；易脱砂，对药液有较强的吸附性，有时可改变药液的丙二醇、过氧乙酸熏蒸法，紫外线空气灭菌法等。原理是紫外线可使核酸、蛋白变性，且能使空气中氧气产生微量臭氧，而达到共同杀菌作用4）无腐蚀性、爆炸性及刺激性；无菌操作法⑥其它（聚碳酸酯膜、聚砜膜、聚氯乙烯膜、聚丙烯膜等）注意：烤箱内温度是否均匀，辅层宜薄。耐热、耐压的次序为：芽胞>繁殖体>衰老体【F值】验证灭菌可靠性的参数

F值系指在一定灭菌温度（T）下，给定的Z值所产生的灭菌效果与在参比温度（T0）下给定的Z值所产生的灭菌效果相同时所相当的时间，以min为单位。和灭菌时间；【F值】验证灭菌可靠性的参数57验证灭菌可靠性的参数【F0值】

F0值系指在一定灭菌温度(T)下、Z值为10℃所产生的灭菌效果与121℃、Z值为10℃所产生的灭菌效果相同时所相当的时间（min）。

F0值可认为是将在一定温度（如115℃）和一定时间（如30min）下灭菌的效果，折算为在121℃下灭菌的效果相同时所需要的时间.

一般规定F0值≥8min.为增加安全系数，实际控制时应增加，以F0=8～12min为宜

验证灭菌可靠性的参数【F0值】F0值系指58物理灭菌法【定义】

利用蛋白质与核酸具有遇热、射线不稳定的特性，采用加热、射线和滤过方法，杀灭或除去微生物的技术称为物理灭菌法或物理灭菌技术物理灭菌法干热灭菌法湿热灭菌法射线灭菌法滤过除菌法物理灭菌法【定义】物理灭菌59物理灭菌法【一、干热灭菌法】

【原理】高热破坏蛋白质和核酸中的氢键，使酶失去活性

干热空气灭菌法

火焰灭菌法干热灭菌法物理灭菌法【一、干热灭菌法60物理灭菌法Ⅰ.火焰灭菌法直接在火焰中烧灼灭菌的方法。灭菌迅速、可靠、简便。【特点】【适用】耐火焰材质的物品，如金属、玻璃及瓷器等用具的灭菌，不适用于药品的灭菌。【方法】酒精火焰，通过火焰3次，每次数秒。注意利用外部氧化焰。燃烧在器壁的酒精不能灭菌。物理灭菌法Ⅰ.火焰灭菌法61Ⅱ.干热空气灭菌法物理灭菌法在高温（160-170℃）干热空气中灭菌的方法。【特点】【适用】耐高温的玻璃制品、金属制品、不允许湿气穿透的油脂类、耐高温的粉末材料Ⅱ.干热空气灭菌法物理灭62【缺点】穿透力弱，温度不易均匀，而且灭菌温度较高，灭菌时间较长，不适于橡胶、塑料及大部分药品。【方法】140℃3小时；160-170℃2小时；热原250℃，30min，或200℃以上45min

注意：烤箱内温度是否均匀，辅层宜薄。【缺点】穿透力弱，温度不易均匀，而且灭菌温度较高，【方法】163物理灭菌法【二、湿热灭菌法】

【含义】是在饱和蒸气或沸水或流通蒸气中进行灭菌的方法。【原理与特点】由于蒸气潜热大，穿透力强，容易使蛋白质变性或凝固，具有很强的灭菌效果，灭菌可靠，操作简单．是在制剂生产中应用最广泛的一种灭菌方法。【缺点】不适用于对湿热敏感的药物物理灭菌法【二、湿热灭菌法64煮沸灭菌法热压灭菌法流通蒸汽灭菌法低温间歇灭菌法湿热灭菌法物理灭菌法煮沸灭菌法热压灭菌法流通蒸汽灭菌法低温间歇灭菌法湿热灭菌法65微生物的种类与性质蒸汽性质药品性质和灭菌时间介质的性质物理灭菌法【影响湿热灭菌的因素】

影响因素微生物的种类与性质蒸汽性质药品性质和灭菌时间介质的性质66物理灭菌法【微生物的种类与性质】

不同细菌，同一细菌的不同发育阶段对热的抵抗力有所不同耐热、耐压的次序为：芽胞>繁殖体>衰老体微生物数量愈少，所需灭菌时间愈短物理灭菌法【微生物的种类与67【蒸汽性质】

物理灭菌法饱和蒸气：热含量较高，热的穿透力较大，灭菌效力高。湿饱和蒸气：带有水分，热含量较低，穿透力差，灭菌效力较低。过热蒸气：温度高于饱和蒸气，但穿透力差，灭菌效率低。

【蒸汽性质】物理灭菌法68【药品性质和灭菌时间】

物理灭菌法灭菌时间与灭菌温度相关，高温灭菌即可缩短灭菌时间，但温度越高，药物的分解速度加快；低温长时间灭菌，也增加药物的分解量。因此，应在达到有效灭菌的前提下适当选择灭菌温度和灭菌时间；

【药品性质和灭菌时间】物理69指整个操作过程控制在无菌条件下进行的一种操作方法饱和蒸气：热含量较高，热的穿透力较大，灭菌效力高。【灭菌气体必须具备的条件】115℃(67kPa)，30min；物理灭菌法物理灭菌法化学灭菌法是通过微波照射产生的热能杀死微生物和芽胞的方法如果灭菌器内有空气存在，则压力表上的压力是蒸气验证灭菌可靠性的参数将其中的细胞繁殖体杀死，然后在室温中放置24h，让其物理灭菌法指用放射性同位素（60Co和137Cs）放射的γ射线杀菌的方法。是通过微波照射产生的热能杀死微生物和芽胞的方法无菌操作法【介质的性质】

物理灭菌法制剂中含有营养物质，如糖类、蛋白质等，增强细菌的抗热性。细菌的生活能力也受介质PH值的影响：一般中性环境的耐热性最好，碱性次之，酸性不利于细菌的发育。

指整个操作过程控制在无菌条件下进行的一种操作方法【介质的性质70物理灭菌法Ⅰ.热压灭菌法【含义与特点】

是在热压灭菌器内，利用高压饱和蒸气杀灭微生物的方法。公认最可靠的方法．所需的温度（蒸气表压）与时间的关系如下：115℃(67kPa)，30min；121℃(97kPa)，20min；126℃(139kPa)，15min。【适用】

耐高压蒸气的药物制剂、玻璃容器、金属容器、瓷器、橡胶塞、膜过滤器等物理灭菌法Ⅰ.热压灭菌法71物理灭菌法卧式热压灭菌柜（最常用）立式热压灭菌柜手提式热压灭菌器热压灭菌器物理灭菌法卧式热压灭菌柜（72物理灭菌法【卧式热压灭菌柜结构】

物理灭菌法【卧式热压灭菌柜73物理灭菌法【卧式热压灭菌柜操作方法】

准备阶段灭菌阶段后处理阶段物理灭菌法【卧式热压灭菌柜74物理灭菌法【卧式热压灭菌柜操作注意事项】

①检查灭菌品，必须使用饱和蒸气；②必须将灭菌器内的空气排除。如果灭菌器内有空气存在，则压力表上的压力是蒸气与空气二者的总压，并非纯蒸气压，温度达不到规定值。③灭菌时间必须由全部药液温度真正达到所要求的温度时算起；④灭菌完毕后停止加热，必须使压力逐渐降到0，才能放出锅内蒸气，使锅内压力和大气压相等后，稍稍打开灭菌锅，待10min～15min，再全部打开。以避免锅内外压差太大、温差太大而使物品冲出和使玻璃瓶炸裂。⑤装封于密封容器内的干燥固体药物或辅料因无湿热穿透，相当于干热灭菌，不宜用本法。物理灭菌法【卧式热压灭菌柜75Ⅱ.流通蒸汽灭菌法物理灭菌法【含义及特点】

是在常压下（不密闭容器）使用100℃器蒸气加热杀灭微生物的方法。通常灭菌时间为30min～60min。本法不能保证杀灭所有的芽胞，系非可靠的灭菌法.

【适用】

适用于消毒及不耐高热的制剂(安瓿）或不耐压容器与器械的灭菌。注意：必须到达100度后再计时，包件不宜过大Ⅱ.流通蒸汽灭菌法物理灭76物理灭菌法Ⅲ.煮沸灭菌法【含义及特点】

把待灭菌物品放入沸水中加热灭菌的方法通常煮沸30min～60min本法灭菌效果差【适用】

注射器、注射针等器皿的消毒。必要时加入适当的抑菌剂，如甲酚、氯甲酚、苯酚、三氯叔丁醇等，可杀死芽胞菌。物理灭菌法Ⅲ.煮沸灭菌法77物理灭菌法Ⅳ.低温间歇灭菌法【含义及特点】

将待灭菌的物品，用60℃～80℃水或流通蒸气加热1h，将其中的细胞繁殖体杀死，然后在室温中放置24h，让其中的芽胞发育成为繁殖体，再次加热灭菌、放置，反复进行3～5次，直至消灭芽胞为止。【适用】

必须用加热法灭茵而又不耐较高温度的制剂与药品。【缺点】费时、工效低、灭菌效果差添加适量抑菌剂。物理灭菌法Ⅳ.低温间歇灭78【三、射线灭菌法】

物理灭菌法【含义】指采用辐射、微波和紫外线杀灭微生物和芽胞的方法【三、射线灭菌法】物理灭菌79指用放射性同位素（60Co和137Cs）放射的γ射线杀菌的方法。射线可使微生物的分子直接发生电离而产生能破坏微生物正常代谢的自由基，最终使微生物遭到破坏指用紫外线照射杀灭微生物和芽胞的方法原理是紫外线可使核酸、蛋白变性，且能使空气中氧气产生微量臭氧，而达到共同杀菌作用是通过微波照射产生的热能杀死微生物和芽胞的方法射线灭菌法

辐射灭菌法

紫外线灭菌法

微波灭菌法物理灭菌法指用放射性同位素（60Co和137Cs）放射的γ射线杀菌的方80【四、过滤除菌法】

物理灭菌法【含义】

指使药液通过无菌的滤器除去活的或死的微生物的方法，属于机械除菌方法【适用】

对热不稳定的低粘度药物（生化药物）溶液、气体、水等的除菌。要求无菌操作。可减少热原，但不能滤除它。【四、过滤除菌法】物理灭菌81【滤器要求和种类】

有较高的滤过效率，能有效地除尽物料中的微生物，滤材与滤液中的成分不发生相互交换，滤器易清洗，操作方便细菌芽胞大小：0.5－1μm.砂滤棒垂熔玻璃滤器微孔薄膜滤器物理灭菌法【滤器要求和种类】有较高的滤过效率，能有效地除尽物料中的微生82Ⅰ.砂滤棒物理灭菌法a.硅藻土滤棒，规格：粗号，中号，细号（3-4μm）。细号可除部分菌。b.素瓷滤棒:分八级，三级以上为孔径为2.5-1.3μm,1.3μm可除菌.深层滤过效果好，适用于大生产易脱砂，对药液有较强的吸附性，有时可改变药液的pH值，使用后要进行处理沙滤棒主要用于除杂质与预滤，较少直接应用于除菌【常用类型】

【特点】

Ⅰ.砂滤棒物理灭菌法深层83Ⅱ.垂熔玻璃滤器【含义】

是用硬质玻璃细粉，高温烧结在一起制成孔隙均匀的多孔性滤板，再固定在玻璃器皿上而制成的漏斗状、球状或棒状的滤器。【类型】

垂熔玻璃漏斗垂熔玻璃滤球垂熔玻璃滤棒物理灭菌法Ⅱ.垂熔玻璃滤器【含义】是用硬质玻璃细粉，高温烧结在一起制84【特点】

性质稳定，对药物溶液不吸附，不影响药液的PH，常用于除杂质和除菌。除菌用规格：6号，Ｇ６，ＩＧ６号垂熔玻璃滤器。

物理灭菌法【特点】性质稳定，对药物溶液不吸附，不影响药液的PH，85Ⅲ.微孔薄膜过滤器物理灭菌法【微孔滤膜】

是用高分子材料制成的薄膜滤过介质，在薄膜上分布有大量的微孔【微孔滤膜膜材种类】

①醋酸纤维素膜②硝酸纤维素膜③醋酸纤维素与硝酸纤维素混合酯膜④聚酰胺（尼龙）膜⑤聚四氟乙烯膜⑥其它（聚碳酸酯膜、聚砜膜、聚氯乙烯膜、聚丙烯膜等）膜的孔径：除菌用0.22um以下Ⅲ.微孔薄膜过滤器物理灭86化学灭菌法【含义及特点】

指用化学药品直接作用于微生物而将其杀灭的方法仅对微生物繁殖体有效，不能杀灭芽胞目的在于减少微生物的数目，以控制一定的无菌状态化学灭菌法气体灭菌法化学药品消毒法化学灭菌法【含义及特点】指87【一、气体灭菌法】

化学灭菌法指采用化学品的气体或蒸汽（如环氧乙烷、甲醛、丙二醇、甘油和过氧乙酸蒸汽等）进行灭菌的方法【含义】

【适用】

药物的混悬液、粉末和固体药物易被热破坏，不能加热，又不能滤过，可用本法【一、气体灭菌法】化学灭菌88【灭菌气体必须具备的条件】

1）室温形成气体或蒸汽；2）穿透力强．并易于除去；3）作用快，毒性低，4）无腐蚀性、爆炸性及刺激性；5）价格低廉。来源丰富。①在室温时能形成气体或蒸气；②穿透力强，并容易自被灭菌物上移除；③灭菌快，毒性低，在低浓度时具有杀菌作用；④无腐蚀性、爆炸性及刺激性。【灭菌气体必须具备的条件】1）室温形成气体或蒸汽；①在室温时89【二、化学药品消毒法】

化学灭菌法【含义及特点】

指采用杀菌剂溶液进行灭菌的方法主要作为其他灭菌法的辅助措施，用于物体表面，如皮肤、无菌器具和设备、无菌室的地面、台面等的消毒常用消毒液有75%乙醇、1%聚维酮碘溶液、0.1%～0.2%苯扎溴铵（新洁尔灭）溶液、约2%的酚或煤酚皂溶液等【二、化学药品消毒法】化学90无菌操作法【含义与特点】

指整个操作过程控制在无菌条件下进行的一种操作方法【适用】

热敏性成分。药品加热灭菌后发生变质、变色或含时降低、效价降低者．用于注射剂、滴眼剂、海绵剂、蜜丸等。按无菌操作法制备的产品，一般不再灭菌无菌操作须在无菌操作室或无菌操作柜内进行无菌操作法【含义与特点】指91无菌操作法【无菌操作室的灭菌】

无菌室的灭菌多采用灭菌和除菌相结合的方式实施。对于流动空气采用过滤介质除菌法；丙二醇、过氧乙酸熏蒸法，紫外线空气灭菌法等。对于静止空气采用灭菌方法。常用空气灭菌法有甲醛溶液，除此外，定期采用药液消毒法灭菌，在室内喷洒或擦拭墙壁、地面