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利用基因工程技术生产重组蛋白利用基因工程技术生产1从基因到蛋白的复制、转录和翻译过程TranscriptionmRNAtRNATRNApolymeraseproteinsAnticodon工RNA2.TranslationbcodonProteinsvnthesis从基因到蛋白的复制、转录和翻译过程2什么是基因工程基因工程(GeneticEngineering))原称遗传工程。是指在分子水平上将一种或多种生物体(供体的DNA片断(目的基因)与载体DNA分子(如质粒、病毒等)在体外进行拼接重组,产生新的自然界从未有过的重组DNA分子,然后转入另一种生物体受体)内,使之按照人们的意愿遗传并表达出新的性状的技术。基因工程有时也称为重组DNA技术(DNARecombination)或分子克隆技术MolecularCloning).什么是基因工程3什么是重组蛋白重组蛋白是指将一种或多种生物体(供体)的基因导入另一种生物体(受体)内使之按照人们的意愿遗传并表达出的蛋白质产物什么是重组蛋白4■应用基因工程技术构建重组细胞并通过重组细胞培养,令其超量合成其它生物体内含量极微但却具有极高经济价值重组蛋白是现代生物技术中最活跃的研究方向之一,广泛应用于生产药用蛋白质及代谢工程等领域。■已经投放市场并正在研制开发的重组蛋白药物几乎触及到医药的各个领域,包括各种抗病毒剂、抗癌因子、抗ADS药物、新型抗生素、重组疫苗、重组生长激素、重组干扰素、重组抗体、免疫辅助剂、抗衰老保健品、心脑血管防护急救药、生长因子以及诊断试剂等■应用基因工程技术构建重组细胞并通过重组细胞培5表一几种重要的重组蛋白产物重组蛋白产品2000年销量主要生产公司(单位10亿美元)人胰岛素4.0EliLily,NovoNordiskHoechst,YhiG-因子2.5Elilily,NovoNordiskGenentech,Pharmacia人血因子5.5Amgen,J&J,SankyoChugai,Sandoz0.5J&j,cytogen表一几种重要的重组蛋白产物6重组蛋白的生产包括上游技术和下游技术两大组成部分。上游技术指的是外源基因重组、克隆和表达载体以及基因工程菌(细胞)的设计与构建;而下游技术则涉及到含有重组外源基因的生物细胞(基因工程菌或细胞)的大规模培养以及外源基因表达的重蛋白的分离纯化过程。重组蛋白的生产包括上游技术和下游技7外DN重组蛋白生产外基因基本流程图受体细形转化与扩增重粗转化子定与表达工程画或细相↓重组产物分向纯化外DN8重组蛋白的整个过程由工程菌(细胞)的设计构建(上游技术)和基因产物(重组蛋白)的生产(下游技术)两大部分组成,前者的单元操作过程如下:(1)从供体细胞中分离出基因组DNA,用限制性核酸内切酶分别将外源DNA包括外源基因或目的基因和载体分子切开(简称切);(2)用DNA连接酶将含有外源基因的DNA片段接到载体分子形成DNA重组分子(简称接)(3)借助于细胞转化手段将DNA重组分子导入受体细胞中(简称转)4)短时间培养转化细胞,以扩增DNA重组分子或使其整合到受体细胞的基因组中(简称增);(5)筛选和鉴定转化细胞,获得使外源基因高效稳定表达的基因工程菌或细胞(简称检)由此可见,基因工程的上游操作过程可简化为切、接、转、增、检重组蛋白的整个过程由工程菌(细胞)的设计构建(上游技9ThedNAcontainingthegenemustbeisolatedawayfromitsgenomiccontextThatshouldbesimple-buttherearebigproblemsGeneofInterestThedNAcontainingthegenemu10基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件11基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件12基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件13基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件14基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件15基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件16基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件17基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件18基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件19基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件20基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件21基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件22基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件23基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件24基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件25基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件26基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件27基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件28基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件29基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件30基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件31基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件32基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件33基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件34基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件35基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件36基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件37基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件38基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件39基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件40基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件41基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件42基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件43基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件44基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件45基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件46基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件47基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件48基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件49基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件50基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件51利用基因工程技术生产重组蛋白利用基因工程技术生产52从基因到蛋白的复制、转录和翻译过程TranscriptionmRNAtRNATRNApolymeraseproteinsAnticodon工RNA2.TranslationbcodonProteinsvnthesis从基因到蛋白的复制、转录和翻译过程53什么是基因工程基因工程(GeneticEngineering))原称遗传工程。是指在分子水平上将一种或多种生物体(供体的DNA片断(目的基因)与载体DNA分子(如质粒、病毒等)在体外进行拼接重组,产生新的自然界从未有过的重组DNA分子,然后转入另一种生物体受体)内,使之按照人们的意愿遗传并表达出新的性状的技术。基因工程有时也称为重组DNA技术(DNARecombination)或分子克隆技术MolecularCloning).什么是基因工程54什么是重组蛋白重组蛋白是指将一种或多种生物体(供体)的基因导入另一种生物体(受体)内使之按照人们的意愿遗传并表达出的蛋白质产物什么是重组蛋白55■应用基因工程技术构建重组细胞并通过重组细胞培养,令其超量合成其它生物体内含量极微但却具有极高经济价值重组蛋白是现代生物技术中最活跃的研究方向之一,广泛应用于生产药用蛋白质及代谢工程等领域。■已经投放市场并正在研制开发的重组蛋白药物几乎触及到医药的各个领域,包括各种抗病毒剂、抗癌因子、抗ADS药物、新型抗生素、重组疫苗、重组生长激素、重组干扰素、重组抗体、免疫辅助剂、抗衰老保健品、心脑血管防护急救药、生长因子以及诊断试剂等■应用基因工程技术构建重组细胞并通过重组细胞培56表一几种重要的重组蛋白产物重组蛋白产品2000年销量主要生产公司(单位10亿美元)人胰岛素4.0EliLily,NovoNordiskHoechst,YhiG-因子2.5Elilily,NovoNordiskGenentech,Pharmacia人血因子5.5Amgen,J&J,SankyoChugai,Sandoz0.5J&j,cytogen表一几种重要的重组蛋白产物57重组蛋白的生产包括上游技术和下游技术两大组成部分。上游技术指的是外源基因重组、克隆和表达载体以及基因工程菌(细胞)的设计与构建;而下游技术则涉及到含有重组外源基因的生物细胞(基因工程菌或细胞)的大规模培养以及外源基因表达的重蛋白的分离纯化过程。重组蛋白的生产包括上游技术和下游技58外DN重组蛋白生产外基因基本流程图受体细形转化与扩增重粗转化子定与表达工程画或细相↓重组产物分向纯化外DN59重组蛋白的整个过程由工程菌(细胞)的设计构建(上游技术)和基因产物(重组蛋白)的生产(下游技术)两大部分组成,前者的单元操作过程如下:(1)从供体细胞中分离出基因组DNA,用限制性核酸内切酶分别将外源DNA包括外源基因或目的基因和载体分子切开(简称切);(2)用DNA连接酶将含有外源基因的DNA片段接到载体分子形成DNA重组分子(简称接)(3)借助于细胞转化手段将DNA重组分子导入受体细胞中(简称转)4)短时间培养转化细胞,以扩增DNA重组分子或使其整合到受体细胞的基因组中(简称增);(5)筛选和鉴定转化细胞,获得使外源基因高效稳定表达的基因工程菌或细胞(简称检)由此可见,基因工程的上游操作过程可简化为切、接、转、增、检重组蛋白的整个过程由工程菌(细胞)的设计构建(上游技60ThedNAcontainingthegenemustbeisolatedawayfromitsgenomiccontextThatshouldbesimple-buttherearebigproblemsGeneofInterestThedNAcontainingthegenemu61基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件62基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件63基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件64基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件65基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件66基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件67基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件68基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件69基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件70基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件71基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件72基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件73基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件74基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件75基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件76基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件77基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件78基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件79基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件80基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件81基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件82基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件83基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件84基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件85基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件86基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件87基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件88基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件89基因工程技术生产重组蛋白教案资料课件90基因工程技
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