中药新药临床前毒理学评价

中药新药临床前

毒理学评价主要内容定义任务及目的毒性作用类别相关测定数据新药临床前毒理学毒理学定义毒理学：是研究毒性物质对机体的有害作用及其发生、机制、结果以及危害因素的科学。主要用于对外源性物质的安全性评价和危险性评估。早期毒理学：研究不同毒物的使用，着重毒物对机体的急性危害或致死作用现代毒理学：研究在特定情况下，生命有机体接触化学、生物或物理物质产生有害作用（毒性）的科学。药物毒理学：是研究药物对生命有机体有害作用的科学，用于新药临床前安全性评价、临床试验及临床合理用药。

任务及目的药物毒理学的任务：包括临床毒理学、新药临床试验、药物流行病学研究的任务。药物毒理学的基本目的：•认识并掌握药物的毒性作用，为临床安全用药提供科学依据；•以在用药过程中避免或减轻这些有毒作用的发生。毒性作用类别药物不良反应（adversereaction)：凡是不符合用药目的并为病人带来不适或痛苦的有害反应统称为药物不良反应。包括：副反应、后遗效应、停药反应、毒性反应、变态反应、特异质反应、致癌性、致畸性、致突变性；毒性作用类别药物不良反应副反应后遗效应停药反应毒性反应变态反应特异质反应毒性作用致癌性致畸性致突变性药源性疾病毒性作用类别1、毒性反应(toxicreaction)在治疗剂量下不出现，仅在剂量过大、用药时间过长或体内药物蓄积过多时才出现的反应。2、变态反应(allergicreaction)机体对药物的不正常免疫反应，非肽类药物作为半抗原与机体蛋白结合后，经过敏化过程而发生的反应。

特点：因药因人而异，与药物效应及剂量无关，用药理拮抗药解救无效。毒性作用类别3、特异质反应（idiosyncrasy）

用药者有先天性遗传异常，对某些药物反应特别敏感，出现的反应性质可能与常人不同。药理遗传异常所致。

特点：与药物的固有药理作用基本一致、严重程度与剂量成比例。4、致癌性（carcinogenesis）

属于长期用药产生的毒性，包括遗传毒性致癌物、非遗传毒性致癌物。（可以是迟发效应）毒性作用类别5、生殖毒性和发育毒性（(reproductiveanddevelopmentaltoxicity）生殖毒性：针对育龄人群，用药后对生殖系统及与生育相关的神经或内分泌系统产生的毒性。发育毒性：关注药物对胚胎的影响，特别是药物的致畸毒性。多代生殖毒性评价：涉及药物对子代生殖系统的影响。毒性作用类别6、致突变与遗传毒性(mutagenesisandgenetictoxicity)

药物损伤遗传物质而发生突变作用，产生对人类本身（致癌毒性）及后代的影响（致畸毒性）。相关关测测定定数数据据量效效关关系系：药药物物的的毒毒性性效效应应与与剂剂量量在在一一定定范范围围内内成成比比例例，，称称为为量量效效关关系系。。量反反应应：毒毒性性效效应应的的强强弱弱呈呈连连续续增增减减的的量量变变，，称称为为量量反反应应。。例例：：心心率率快快慢慢等等。。质反应：毒性效效应以全全或无、、阴性或或阳性等等表示，，称为质质反应。。例：死死亡与生生存、惊惊厥与不不惊厥。。相关测定定数据最大无毒毒性反应应剂量（noobservedadverseeffectlevel,NOAEL)：指受受试物在在一定时时间内，，按一定定方式与与机体接接触，用用灵敏的的现代检检测方法法和观察察指标未未发现损损害作用用的最高高剂量最小毒性性反应剂剂量：出现毒毒性反应应的最小小剂量最大耐受受量（maximaltolerancedose，MTD）：不引引起受试试动物死死亡的最最高剂量量相关测定定数据最小致死死剂量（minimallethaldose，MLD）：引起起个别受受试动物物出现死死亡的剂剂量半数有效效量（medianeffectivedose,ED50）：能引引起50%的动物或或实验标标本产生生反应的的浓度或或剂量。。半数致死死量（medianlethaldose,LD50）：能能引起50%的动物死死亡的浓浓度或剂剂量。相关测定定数据治疗指数数：TI=LD50/ED50药物实验验动物的的LD50和ED50的比值称称为治疗疗指数（（therapeuticindex,TI），用以以表示药药物的安安全性。。安全范围围（marginofsafety）：ED99~LD1（或ED95~LD5）之间的的距离。。值越大大越安全全。有效量曲曲线和致致死量曲曲线的斜斜率不一一样时，，以TI评价药物物的安全全性并不不可靠。。新药临床床前毒理理学涉及全身身毒性和和局部毒毒性研究究。是为为新药临临床用药药的安全全性提供供试验依依据，并并为临床床毒副反反应监测测提供重重要信息息。新药临床床前毒理理学目的意义局限性申报资料料评价程序序新药临床床前毒理理学研究究目的毒性剂量量ToxicDose安全剂量量范围Safetymargin毒性反应应Toxicreaction:性质、程程度、量量毒关系系、产生生、达峰峰、持续续时间及及反复产产生毒性性反应时时间、迟迟发性、、蓄积性性、耐受受性寻找毒性性反应靶靶器官TargetOrgan毒性反应应是否可可逆Reversibility解毒或解救救措施Antidote确保临床用用药安全(重点监测指指标)新药临床前前毒理学研研究意义（1）通过动物物实验以确确立：出现现毒性反应应的症状、、程度、剂剂量、时间间、靶器官官以及损伤伤的可逆性性；安全剂剂量及安全全范围。（2）通过上述述资料的获获得，达到到预测人类类临床用药药的可能毒毒性，并制制定防治措措施；同时时推算临床床研究的安安全参考剂剂量和安全全范围的目目的。新药临床前前评价局限限性1、种属差异异：假阳性性或假阴性性2、实验动物物数量有限限3、健康状态态不同4、研究方法法的局限药理毒理研研究申报资资料药理毒理研研究资料综综述，主要要药效学试试验，一般般药理试验验，急性毒毒性试验，，长期毒性性试验，过过敏性、溶溶血性、刺刺激性等特特殊安全性性研究，复复方制剂中中多成分的的相互影响响试验、致致突变试验验，生殖毒毒性试验，，致癌试验验，依赖性性试验，动动物药代动动力学试验验。药物毒性临临床前评价价程序1、急性毒性性试验(acute)2、长期毒性性试验(chronic)3、特殊毒性性试验(遗传、生殖殖、致癌)4、其它毒性性试验(过敏、刺激激etc.)急性毒性试试验1、阐明药物物毒性作用用及强度、、计算相对对毒性参数数相对毒性参参数：治疗指数TI=LD50/ED50越小越有效效安全系数SF=LD5/ED95可靠或确实实安全系数数CSF=LD1/ED99安全范围SM=(LD1/ED99-1)X100%越大越安全全LD5基本无害量量ED95基本有效量量LD1肯定无害量量ED99肯定有效量量急性毒性试试验2、了解毒性性靶器官3、为长毒、、特殊毒性性试验剂量量设计：很很多实验参参考LD50,主要药效学学剂量限度度、一般药药理学和药药动学剂量量设计也要要参考急性性毒性的LD50;短期致癌试试验高剂量量=MTD4、为Ⅰ期临临床试验起起始剂量选选择：细胞胞毒类抗癌癌药，I期临床起始始剂量=1/10LD505、为临床毒毒副反应监监护提供参参考：中毒毒症状,起始、持续续、恢复时时间；中毒毒靶器官；；对抗试验验为临床急急救提供依依据急性毒性试试验基本原则:执行GLP具体问题具具体分析随机、对照照、重复动物:获得尽量多多信息前提提下，使用用尽量少动动物啮齿类---小鼠或大鼠鼠非啮齿齿类---犬或猴二种动物(啮齿类及非非啮齿类)小鼠18-22g;大鼠120-150g;犬用成年犬犬初始体重不不应超过或或低于平均均体重的20%♀♂各半急性毒性试试验受试物:工艺稳稳定、、符合临临床用用质量量标准准标明名名称、、来源源、批批号、、含量量（或或规格格）、、保存存条件件及配配制方方法等等，附附质检检报告告辅料、、溶剂剂、试试剂等等应标标明批批号、、规格格和生生产厂厂家，，符合合试验验要求求例如：：原料药药临床拟拟用剂剂型复方制制剂：：复方方+拆方(增毒？？新毒毒？)易降解解：含含降解解产物物量最最高的的受试试物进进行急急毒试试验，，并与与临床床样品品的急急毒试试验结结果比比较急性毒毒性试试验给药途途径：：临床拟拟用途途径+原型药药物较较完全全进入入循环环途径径（如如静脉脉注射射）啮齿类类ig给药前前应禁禁食12h，不禁禁水剂量和和分组组给药剂剂量：：未见见毒性性量严重毒毒性量量设空白白和/或溶媒媒（辅辅料））对照照小动物物4-6个剂量量组,组距0.65-0.85,求LD50大动物物可用用50%等量递递升法法(近似致致死剂剂量法法),求出ALD和MTD，不必必达到到致死死量急性毒毒性试试验给药容容积：不等浓浓度等等容量量给药药动物给药途径给药量小鼠ig0.2-1.0ml/10giv、ip、sc0.1-0.5ml/10g大鼠ig1.0-2.0ml/100giv、ip、sc0.5-1.0ml/100g静脉注注射(iv)；腹腔腔注射射(ip)；口服服(po)；皮下下注射射(sc)；灌胃胃(ig)急性毒毒性试试验观察指指标及及时间间药后4h内详观观,后每天天上下下午各各一,观察≥≥14d记录毒毒性反反应、、死亡亡情况况,中毒症症状、、发生生时间间、持持续时时间、、严重重程度度、恢恢复期期及动动物最最短、、最长长死亡亡时间间其它指指标：：一般般指标标、体体重变变化等等急性毒毒性试试验急性毒毒性研研究的的一般般观察察和指指征观察可能涉及的器官、组织、系统Ⅰ.鼻孔呼吸阻塞，呼吸频率和深度改变，体表颜色改变CNS，感官，神经肌肉等Ⅱ.运动功能：运动频率和特点的改变CNS，感官，神经肌肉等Ⅲ.惊厥(抽搐)：随意肌明显的无意识收缩或惊厥性收缩CNS,呼吸衰竭,神经肌肉,自主神经Ⅳ.反射感官，神经肌肉Ⅴ.眼检指征自主神经；出血，感染Ⅵ.心血管指征自主神经,CNS,心输出量降低等Ⅶ.唾液分泌自主神经Ⅷ.竖毛自主神经Ⅸ.痛觉丧失感官，CNSⅩ.肌张力自主神经等Ⅺ.胃肠指征自主神经，胃肠动力等Ⅻ.皮肤刺激性，炎症，过敏等急性毒毒性试试验结果处理理：实验资料料用Bliss法计算LD50。必要时时求不同同性别LD50剂量－反反应、时时间－反反应关系系反应可能能涉及组组织、器器官或系系统肉眼病变变和组织织病检，，初步判判断毒性性靶器官官病检报告告应附：：病检者者签名+单位盖章章+病理照片片确定NOAEL、MTD、ALDetc，初步判判断受试试物的安安全范围围急性毒性性试验综合评价价判断反应应与药物物作用相相关性：：时间、发发生率、、剂量-反应关系系动物种属属及背景景数据病理学检检查结果果同类药物物特点安全范围围、毒性性严重程程度及可可恢复性性毒性作用用靶器官官毒性可能能涉及部部位大体解剖剖和组织织病理学学检查结结果长期毒性性试验第一阶段段（1）两种品品系、35天染毒、、毒性量量效曲线线，推荐荐临床使使用途径径；（2）器官毒毒性试验验、死亡亡情况、、体重变变化、血血液学、、临床生生化学、、组织学学检查；；（3）致突变变活性第第二阶段段筛选；；（4）生殖毒毒性试验验；（5）受试动动物的药药代动力力学研究究；（6）行为试试验；（7）协同、、增效、、拮抗作作用。长期毒性性试验第二阶段段（1）动物长长期毒性性试验（（半年以以上）；；（2）哺乳类类动物致致突变试试验；（3）啮齿类类动物2年至癌试试验；（4）人类药药代动力力学试验验；（5）人类临临床试验验；（6）短期和和长期用用药的流流行病学学资料。。长期毒性性试验基本原则则执行GLP整体性研究结果果与其它它药理毒毒理试验验互为印印证、说说明和补补充具体问题题具体分分析随机、对对照、重重复长期毒性性试验动物invitro体系筛选选实验动动物种属属或品系系理想动物物对受试物物生物转转化与人人体相近近对受试物物敏感已有大量量历史对对照数据据二种动物物，啮齿齿类首选选大鼠，，非啮齿齿类用Beagle犬,必要时用用猴、猪猪等符合等级级要求来源、品品系、遗遗传背景景清楚，，有动物物质量合合格证大鼠6-9w，Beagle犬6-12m,体重CV≤20％♂♀各半半必要时，，可用疾疾病模型型动物进进行试验验Duration≥≥6m,naturaldeath(rat:1y-15%,1.5y-50%,2y-70-80%)长期毒性性试验给药途径径与临床用用药途径径一致临床iv,大鼠给药药＞1月，ip代替im或sc应变换注注射部位位必要时改改变给药药途径但但应说明明原因分组三个给药药组,单位：mg(ml,IU)/kg或/m2不等浓度度等容量量给药低剂量组组－高于于有效剂剂量，不不出现毒毒性中剂量组组－轻微微或中等等度毒性性高剂量组组－明显显/严重毒性性，或个个别动物物死亡空白对照照－溶媒媒或赋形形剂溶媒或赋赋形剂有有毒性时时则增加加正常对对照组阳性对照照长期毒性试试验测试次数能反映动态态变化一般行为、、食量每天天观察记录录大鼠体重每每周一次大动物生理理指标每半半月一次大动物ECGⅡ导联，给给药前、给给药期间、、停药及恢恢复期均要要检测发现有阳性性指标应加加大观察密密度综合评价长长毒结果结合药学，，药理学、、PK、TK和其它毒理理学研究(+临床研究)，综合评价价找到：不良良反应(T&D&R)、毒性靶器器官(O)、安全范围围(S)、临床需重重点检测指指标()及临床监护护或解救措措施(A)特殊毒性试试验研究是否会会引起畸胎胎、肿瘤，，对遗传物物质是否有有损伤等；；特殊毒性性试验存在在着种属差差异性致突变试验验(遗传毒性试试验)生殖毒性试试验致癌试验特殊毒性试试验致突变试验验微生物回复复试验(Ames试验）哺乳动物培培养细胞基基因突变试试验果蝇伴性隐隐性致死试试验染色体畸变变试验啮齿动物显显性致死试试验精原细胞染染色体畸变变试验动物微核试试验程序外DNA合成(UDS)试验SOS显色试验特殊毒性试试验生殖毒性试试验一般生殖毒毒性试验致畸敏感期期毒性试验验围产期毒性性试验致癌试验短期致癌试试验哺乳动物培培养细胞恶恶性转化试试验小鼠肺肿瘤瘤诱发短期期试验长期致癌试试验特殊毒性试试验其他试验