化学药物结构确证的技术要求与案例王玉成

化学药物结构确证研究的技术要求与案例分析

王玉成

中国医学科学院

医药生物技术研究所目录(一)结构确证研究的一般原则和要求(二)对不同类别药品结构确证的要求(三)对特殊化学结构药品结构确证的要求(四)各项波谱和测试的技术要求(案例)

1.结构确证研究的主要对象

2.结构确证研究的基本方法

3.结构确证研究的主要内容

4.结构确证研究的一般要求(一)结构确证研究的一般原则

和要求1.结构确证研究的主要对象

经化学全合成或半合成、微生物发酵以及从动、植物中提取的原料药,包括新药、进口药和已有国家标准的药品.按来源：

化学合成、半合成、天然产物中提取、发酵等;按组分：

单一组分、多组分混合物;按分子量：

小分子化合物、大分子化合物;按结构特点：

成盐化合物和非成盐化合物、手性化合物和非手性化合物、含结晶水/溶剂和不含结晶水/溶剂等;2.结构确证研究的基本方法

①化学方法：理化分析、元素分析、化学关联等②物理方法：波谱方法、衍射技术

a.射频波、微波与物质的相互作用：核磁共振、电子顺磁共振等(ESP根据谱图中吸收峰的位置、谱线的积分强度、谱线的宽度及超精细结构等信息可以鉴定自由基和过滤金属离子等顺磁粒子的结构状态，检测它们的浓度（可检测到10-14摩/升）。)b.红外、可见、紫外光与物质的相互作用：红外光谱、紫外光谱、拉曼光谱等

c.X－射线与物质的相互作用：X－射线衍射等

d.电子与物质的相互作用：质谱、电镜等

e.其他：热分析、原子吸收、原子发射等3.结构确证研究的主要内容

①骨架（平面）结构：

分子中各原子之间的连接顺序和方式;②构型：

分子中各原子之间的空间相对位置;③结晶水/结晶溶剂：

与水、有机溶剂通过氢键等结合;④晶型：

分子（或原子）在晶体中的排列方式;

骨架（平面）结构

例：氟吗西尼骨架（平面）结构的研究方法:a.单晶X－射线衍射;b.常规方法，如元素分析（或高分辨质谱）、UV、IR、NMR（包括二维谱）、MS等组合;

应根据化合物骨架结构的特点及其复杂程度、有无对照品及参考文献，合理选用测试项目。

构型：

几何构型:双键、环状化合物，常用顺－反（cis－trans）或Z－E表示

例：西尼地平（±）-3-（2-甲氧基乙基）-5-[3-苯基-2（E）-丙烯基]-2,6-二甲基-4-（3-硝基苯基）-1,4-二氢-3,5-吡啶二甲酸酯例：：拉拉米米夫夫定定(2R-顺式式)-4-氨基基-1-(2-羟甲甲基基-1，3-氧硫硫杂杂环环戊戊-5-基)-1H-嘧啶啶-2-酮几何何构构型型的的研研究究：理化化性性质质差差别别明明显显a.理化化常常数数，，例例如如熔熔点点等等;b.氢谱谱、、碳碳谱谱;c.红外外光光谱谱、、紫紫外外光光谱谱等等;光学学异异构构：：由由于于分分子子的的不不对对称称性性引引起起，，常用用D-L或R-S表示示。。例：：那格格列列奈奈（－－））－－N-（反反-4-异丙丙基基环环基基甲甲酰酰基基））-D-苯丙丙氨氨酸酸例：：前前列列腺腺素素E1（1R，2R，3R）-3-羟基基-2-[（E）-（3S）-3-羟基基-1-辛烯烯基基]-5-氧代代环环戊戊烷烷庚庚酸酸光学学异异构构的的研研究究：：a.比旋旋度度测测定定b.手性性柱柱色色谱谱（（HPLC、GC）c.核磁磁共共振振（（NMR）d.单晶晶X—射线线衍衍射射（（SXRD）e.旋光光光光谱谱（（ORD）(1.决定定化化合合物物之之绝绝对对立立体体构构造造。。2.决定定蛋蛋白白质质2级与与3级构构造造。。)f.圆二色谱谱（CD）g.其他方法法对照品法法——根据对照照品的构构型推定定化学关联联法——利用合成成工艺分分析例如，左左旋西西替利嗪嗪的构型型确证：：手性柱色色谱定位位（与对对照品对对比)、比旋旋度数据据、光学学纯度分分析晶型的研研究:晶型是化合物物一个重重要特性性;对于多晶晶型药物物,因晶格结结构不同同,某些理化化性质(如熔点、、溶解度度、稳定定性)可能不同同;而且在不不同条件件下,同一化合合物的各各晶型之之间可能能会发生生相互转转化。对对于难溶溶性固体体口服制制剂,其原料药药晶型可可能影响响药物的的溶解度度、稳定定性、药药代动力力学性质质进而可可能影响响药效。。所以对对于已有有文献报报道的多多晶型化化合物应应明确其其晶型,晶型的一一致性;对于创新新药也应应注意积积累相关关研究资资料观察察有无多多晶型现现象。晶型的研研究:a.粉末X-射线衍射射法b.红外光谱谱法、拉拉曼光谱谱法c.熔点法d.热分析e.光学显微微镜法无对照品品和文献献报道：：考察不同同结晶条条件下（（溶剂、、温度、、结晶速速率等））制备样样品的熔熔点、红红外光谱谱、粉末末X－射线衍衍射等;有对照品品:对比自制制药物与与已上市市药物的的熔点、、红外光光谱图、、粉末X－射线衍衍射图谱谱等;有文献报报道:对文献资资料进行行分析，，选取能能够准确确反映产产品晶型型的测试试项目;结晶水/结晶溶剂剂的研究究:药物分子子通过氢氢键等和和水、有有机溶剂剂结合形形成水合合物/溶剂化物物,含有不同同数量结结晶水/结晶溶剂剂的化合合物可能能具有不不同的物物理性质质,进而可能能影响药药物的生生物利用用度,因此对于于原料药药应明确确其所含含的结晶晶水/溶剂的情情况。结晶水/结晶溶剂剂的研究究:a.元素分析析b.热分析c.干燥失重重、水分分检查d.单晶X-射线衍射射创新药：：在干燥失失重、水水分测定定研究的的基础上上，通过过热分析析、元素素分析等等确证样样品分子子中结晶晶水/结晶溶剂剂的数量量;已上市的的药品：：采取合适适的分析析方法对对样品进进行分析析，以确确证其结结晶水/结晶溶剂剂的情况况与已上上市产品品一致;小结：在审评过过程中专专家评价价的关注注点一般般包括:结构确证证方案设设计的合合理性,是否对化化合物所所有要素素进行了了考虑;研究内容容设置的的全面性性,所有的结结构特征征是否已已被确证证;分析方法法选择的的正确性性,所用方法法能否针针对性地地解决结结构问题题。研发者在在进行结结构确证证研究时时,测试项目目的选择择要依据据化合物物结构特特点、需需要解决决的结构构问题、、各种方方法所能能解决的的结构问问题等综综合考虑虑。①对测试样样品和对对照样品品的要求求：测试样品品:a.精制方法法测试样品品要采用用和原料料药制备备工艺中中相同的的精制方方法、工工艺条件件进行精精制；对对于进行行晶型分分析、结结晶水/结晶溶剂剂分析时时尤其需需要注意意，因为为不同的的精制方方法和工工艺条件件可能产产生不同同的晶型型、结晶晶水/溶剂。b.纯度要求求大于99.0%，杂质含含量应小小于0.5%；对于于手性药药物，应应增加对对对映体体、非对对映体纯纯度要求求，一般般不低低于99.5%。注意点：：仿制药物物：相关关物质大大于或等等于0.1%，要进行行结构确确证（注注意响应应因子））创新药物物：除了了与仿制制药物一一样之外外，尽可可能多的的罗列所所有可能能杂质，，要与中中间体关关联，特特别注意意手性问问题！对照品:a.合法来源源证明购得的标标准品(已有国家家标准的的药品)市售原料料药市售制剂剂中提取取得到的的原料药药从正规试试剂公司司购得的的试剂等等（有的申报报资料中中，未选选择上市市原料药药或其他他合法对对照品，，而是采采用自己己单位精精制的产产品，这这种“自自身”对对照的数数据和图图谱对于于结构确确证没有有任何帮帮助。）b.精制方法法：对于用于于晶型、、结晶水水等信息息确证的的对照品品，不应应采用处处理后原原料药或或制剂中中提取物物作为对对照品，，因为原原料药和和制剂在在不同溶溶媒处理理后，会会对样品品真实的的晶型和和结晶水水产生影影响，造造成误判判。c.纯度检查查：对照品的的纯度检检查：申申报资料料中应提提供对照照品的纯纯度检查查结果。。一般来来说，对对照品纯纯度应不不低于精精制品纯纯度，以以保证对对照品对对药物结结构确证证的支持持力度。。4.结构确证证研究的的一般要要求②对图谱、、数据的的要求附图应为为原图的的复印件件或照片片;图谱及图图谱上的的标记、、数据应应清晰，，并有完完整的检检测日期期、各项项参数、、测试条条件、仪仪器型号号及样品品编号等等记录。。各项检测测数据应应按规定定列表说说明，注注明其顺顺序。有有对照品品的应将将测试品品和对照照品同一一波谱的的数据在在一个表表中对比比列出。。如有可可作参照照的文献献数据，，也可列列在同一一表中。。质谱应应附离子子裂解图图。(二)对不同类类别药品品结构确确证的要要求未知结构构的化合合物：推推论结构构已知结构构的化合合物：验验证结构构①未在国内内外上市市销售的的原料药药按全新化化学单体体要求：：推论结结构a.完成必要要的各项项测试;b.应提供充充分的试试验图谱谱和数据据;c.按新化合合物要求求进行图图谱解析析和综合合解析;如有参考考文献资资料，可可提供作作参考。。②已在国外外上市销销售但尚尚未在国国内销售售的原料料药或已已有国家家标准的的原料药药按已知化化学结构构的药物物：验证证结构可以使用用对照品品可以参考考文献a.有合格对照照品的化合合物：提供测试样样品和对照照品在完全全相同条件件和同一仪仪器上测得得的各项图图谱和数据据，完成所所需的各项项目测试，，若二者完完全相同，，并对重要要的波谱讯讯号和测试试数据进行行了正确解解析，即可可得出二者者化学结构构一致的结结论。b.有详细文献献数据的化化合物：可对结构确确证研究的的内容、方方法提供线线索，并为为解析提供供参考，但但是不能作作为结构确确证研究的的充分证据据，仍需要要进行较为为详尽的图图谱解析和和综合解析析。c.无对照品和和文献数据据的化合物物：除了目标化化合物的结结构外，缺缺乏其他支支持性资料料，因此原原则上应按按全新化学学单体要求求进行全面面的研究，，提供充分分的试验图图谱和数据据，可结合合其它研究究工作（例例如合成工工艺路线的的确定）以以进一步推推论化合物物的结构。。(三)对特殊化学学结构药品品结构确证证的要求1.立体异构体体药物立体异构体体：①光学异异构体a.对映异构体体b.非对映异构构体②几何异异构体（顺顺、反异构构体）手性药物----绝对构型和和相对构型型a.单一对映体体----绝对构型比旋度测定定手性柱色谱谱(手性HPLC和GC)核磁共振单晶X-衍射圆二色谱旋光光谱b.消旋体----有多个手性性中心时要要求确定相相对构型;c.立体异构混混合物----确定异构体体的组成和和比例;“手性药物申申报资料及及审评要点点”(药审中心)①应注意确证证产品的立立体构型。。可根据手手性中心的的多少、文文献数据是是否充足、、对照品的的有无来选选择合适的的确证的方方法，必要要时可采用用单晶X－射线衍射射进行确证证。②比旋度度是必须的的检测项目目之一，已已知的起始始原料的构构型和化学学合成方法法的立体选选择性也可可作为依据据之一。2.具有多晶型型的药物晶型:是指结晶物物质晶格内内分子的排排列形式。。多晶型物质质晶格内部部分子间力力的差异可可能引起药药物各种理理化性质的的变化，主主要对熔熔点、溶解解度及溶出出速率、稳稳定性、有有效性的影影响。重点：以适宜的方方法获得药药物晶型的的数据。常用方法：：粉末X-衍射法红外吸收光光谱法熔点热分析光学显微镜镜①创新药物a.不同结晶条条件下（溶溶剂、温度度、结晶速速率等）晶晶型的一致致性；b.不同晶型是是否影响药药物活性和和毒性等;②结构已知的的仿制药品品a.力求与被仿仿制品保持持一致；特别是被仿仿制药为晶晶型选择性性药物，且且各晶型的的理化性质质及生物药药剂学性质质有明显差差异的仿制制药品，要要重点确定定与被仿制制品种晶型型的完全一一致性（熔熔点、红外外吸收光谱谱、粉末X—射线衍射图图等)。b.重点关注难难溶性固体体口服制剂剂晶型的研研究；3.合成多肽类类药物氨基酸分析析（证明多肽肽的组成是是否正确））；质谱测定（（提供相对分分子质量及及序列的信信息）；序列分析以以及肽图测测绘等；紫外：对具有生色色团结构的的小肽有一一定的测试试意义；红外：适用于小肽肽（含三个个氨基酸的的肽）、拟拟肽等；核磁共振：：可对小肽的的结构提供供部分信息息；其他方法：：HPLC、比旋度测测定等。药物结构中中有半胱氨氨酸，应明明确其状态态（氧化态态或还原态态）；药物结构构中存在在二硫键键，应明明确二硫硫键的正正确连接接点；结合合成成工艺对对中间体体的研究究，对终终产品的的结构进进行确证证。4.多糖类药药物多糖结构构的描述述包括:①多糖的分分子量范范围；②多糖的的单糖组组分；③单糖的的连接点点类型；；④单糖和和糖苷键键的构型型；⑤重复单单位;确证方法法：单糖的分分离、鉴鉴定：纸色谱法法、TLC、HPLC、气-质联用技技术等；；多糖的相相对分子子量及分分子量分分布测定定：凝胶色谱谱法；糖苷键的的连接方方式及糖糖苷键的的位置：：红外、核核磁共振振、化学学反应后后产物的的分析等等；5.多组分药药物明确各组组分的组组成比例例，对影影响药效效和毒性性的主要成分分进行结构构确证。。可使用经经典的提提取方法法或其它它分离技技术，如如制备色色谱（TLC，HPLC），分离离得到主主要药效效成分单单体，按按单体项项目要求求进行化化学结构构确证。。在组分多多，含量量少，难难于得到到单体时时，可使使用联机机分析技技术，如如气一质质联用（（GC—MS），液—质联用（（LC—MS），气—付利叶红红外联用用（GC—FTIR），质—质联用（（MS—MS），辅助助组分结结构的验验证及定定量分析析。6.不含金属属元素的的有机盐盐类或复复合物物应同时提提供成盐前后后的两套波波谱和试试验数据据。对于某些些波谱测测定有困困难或不不易说明明其结构构的盐或或复合物物，可测测定药物物酸根或或碱基的的波谱，，并结合合其他试试验项目目进行确确证。7.金属盐类类和络合合物除通常要要求的各各项测试试外，还还应提供供确证分分子中金金属元素素的种类类、存在在形式和和含量的的有关图图谱和分分析数据据。不适于或或不能测测试金属属盐本身身的项目目，可以以用成盐盐前的酸酸分子或或配位体体的相应应测试结结果进行行佐证。。8.半合成化化合物分子母核核的结构构为已知知并可以以确证其其原分子子母核结结构在合合成过程程中未发发生改变变的，可可适当简简化对母母核部分分结构的的确证工工作。重重点对新引入基基团进行结构构确证，，可以结结合原料料结构和和合成路路线进行行论证和和说明。。如涉及构构型确证证，若母母核手性性中心构构型没有有改变时时，重点点在于侧侧链和取取代基中中新引入入手性中中心的构构型确定定。综合解析析举例FABMS22muM+HM+Na1236457891011121314151236457891011121314CHCH2OCH3123645789101112131412a2b34591011131478612a2b34591011131478612a386452b971110141312364578910111213141512a2b345910111314786申报资料料的格式式和内容容一.新药的化化学结构构式、分分子式及及分子量量二.供确认化化学结构构用供试试品的纯纯度及检检查纯度度的方法法三.确证化学学结构的的方法理化常数数元素分析析四.各项波谱谱和测试试的技术术要求紫外吸收收光谱红外吸收收光谱核磁共振振氢谱核磁共振振碳谱质谱差热分析析X-射线衍射射谱综合解析析五.参考文献献一.新药的化化学结构构式、分分子式及及分子量量二.供确认化化学结构构用供试试品的纯纯度及检检查纯度度的方法法三.确证化学学结构的的方法2元素分析析①主要应用用：确定元素素组成、、分子式式;除氧元素素外，其其余各种种元素一一般均能能准确测测定其含含量。可以反映映结晶水水/结晶溶剂剂、成盐盐化合物物的酸根根和碱基基等。C、H、N元素可采采用自动动元素分分析仪测测定，其其他元素素可采用用适宜的的物理或或化学方方法测定定。②技术要求求：a.应详细说说明使用用仪器、、测定方方法及条条件。特特别是对对测试样样品的预预处理方方法、条条件。b.同一样品品测定两两次，两两次实验验数据同同时列出出，不取取平均值值。c.应给出计计算理论论值所依依据的分分子式，，包括结结晶水（（或结晶晶溶剂)。列表比较实测测值与理理论值（（一般要要求误差差不超过过0.3％），初初步判定定供试品品与目标标化合物物的分子子组成是是否一致致。d.附测试报报告单的的复印件件。仪器型号号与测定定条件仪器：Carlo-Erba1106元素分析析仪(意大利)测定条件件：1050℃催化燃烧烧载载气：N2氧瓶法测测定测定结果果与解析析测定结果果：样品品测定结结果与对对照品测测定结果果见附表表1。结果解析析：样品品与对照照品的实实测值同同理论计计算值基基本相符符，C、H、N、的误差差均在千千分之五五以内，，同含5个结晶水水的盐酸酸大观霉霉素分子子式C14H24ClN2O7•2HCl•5H2O符合。。表1样品（（020708）与对对照品品（DJS）的元元素分分析数数据CHN样品（020708）(%)33.667.285.6433.767.375.67对照品（DJS）(%)33.657.305.6733.627.295.68理论计算值(%)33.957.335.66(四)各项波波谱和和测试试的技技术要要求1.红外吸吸收光光谱(IR)①基本原原理：：分子中中化学学键振振动能能级的的跃迁迁。②主要要应用用：a.鉴定化化合物物的结结构——有对照照品、、标准准图谱谱b.推测化化合物物的结结构——确定特特征官官能团团、区区分晶晶型等等③技术要要求：：a.按药典典规定定方法法校正正和检检定仪仪器；；b.正确选选择测测试方方法和和条件件固体样样品首首选溴溴化钾钾压片片法；；离子交交换-----氯化钾钾压片片；晶型变变化-----糊法；；c.准确、、合理理、充充分的的图谱谱解析析;d.按要求求格式式列表表和撰撰写资资料;仪器型型号与与测试试仪器器：：NicoletImpact-400型红红外外分分光光光光度度计计仪器器测测试试：：用用聚聚苯苯乙乙烯烯膜膜仪器器的的测测定定条条件件测定定条条件件：：样样品品测测定定用用溴溴化化钾钾压压片片法法测定定图图谱谱：：图图1、2附图图3：聚聚苯苯乙乙烯烯膜膜红红外外吸吸收收光光谱谱。④资料料撰撰写写格格式式仪器器测试试条条件件仪器器校校正正和和检检定定数据据表表解析析吸收峰(cm-1)

强度振动类型基团2.紫外外吸吸收收光光谱谱(UV)①基本本原原理理：：电电子子跃跃迁迁②主主要要应应用用：：推推测测共共轭轭体体系系的的骨骨架架结结构构（（发发色色团团、、助助色色团团））紫外外光光谱谱———定性性吸收收系系数数———定量量③技术术要要求求a.按药药典典规规定定方方法法校校正正和和检检定定仪仪器器；；b.通常常要要求求三三种种溶溶剂剂：：中中性性、、0.1NHCl、0.1NNaOH；c.要求求定定量量，，准准确确计计算算摩摩尔尔吸吸收收系系数数；；d.归属属主主要要吸吸收收谱谱带带；；e.数据据列列表表说说明明；；④资料料撰撰写写格格式式仪器器测试试条条件件仪器器校校正正和和检检定定数据据表表解析析

溶剂λmax

ε值基团和吸收带溶剂λmaxnmAbs水194.80200.00210,002.06232.28060.82090.1mol/L盐酸200.00204.00210.002.05892.26251.2121三乙胺198.00203.00210.002.00952.27111.33163.核磁磁共共振振氢氢谱谱(1H-NMR)①基本本原原理理：：利用用原原子子核核的的核核自自旋旋现现象象，，通通过过一一定定振振动动频频率率的的电电磁磁波波照照射射时时，，原原子子核核吸吸收收电电磁磁波波从从低低能能态态向向高高能能态态跃跃迁迁，，即即核核磁磁共共振振。。②主主要要应应用用可提提供供供供试试品品中中氢氢原原子子数数目目、、周周围围化化学学环境境、、相相互互间间关关系系、、空空间间排排列列等等信信息息。。③技术术要要求求a.应使使用用200MHz以上上高高分分辨辨NMR仪。。b.对各各项项测测试试条条件件应应有有明明确确、、详详尽尽的的说说明明，，如如仪仪器器型型号号、、规规格格、、溶溶剂剂、、内内标标。。c.对分分子子中中全全部部H原子子均均要要有有明明确确的的解解析析和和归归属属。。d.对复复杂杂结结构构化化合合物物，，应应考考虑虑采采用用合合适适的的其其它它技技术术加加以以佐佐证证。。④资料料撰撰写写格格式式仪器器溶剂剂、、内内标标给出出原原子子编编号号的的分分子子结结构构式式数据据表表(如有有对对照照品品或或文文献献数数据据可可以以对对比比列列入入表表中中)解析析原子序号化学位移质子数多重性J值相应质子4.核磁磁共共振振碳碳谱谱(13C-NMR)①基本原理：利用原子核核的核自旋旋现象，通通过一定振振动频率率的电磁波波照射时，，原子核吸吸收电磁波从低能能态向高能能态跃迁，，即核磁共共振。②主要应用用:可提供供试试品中碳原原子的数目目、所处的的不同化学环环境信息。。③技术要求a.对各项测试试条件应有有明确、详详尽的说明明，如仪器器型号、规规格、溶剂剂、内标。。b.在图谱复杂杂时，应使使用质子噪噪声去偶或或偏共振去去偶技术，，使图谱简简化。c.对分子中全全部C原子均要有有明确的解解析和归属属。d.对复杂结构构化合物，，可与类似似结构化合合物的化学学位移进行行计算比较较，确定合合理结构。。④资料撰写格格式仪器溶剂给出碳原子子编号的分分子结构式式数据表(如有对照品品或文献数数据可以对对比列入表表中)解析

碳原子序号

化学位移

碳原子类型5.其他核磁共共振谱DEPT谱:可区分碳原原子的类型型;1H－1Hcosy:可以显示相相隔2～3键相互之间间存在偶合合的质子对对信息;C-Hcosy(HMQC,异核多量子子相关谱):可以了解分分子中C-H联结情况;HSQC(异核单量子子相关谱):用于测定1H-13C相关信息，，可以直接接明确C、H之间的连接接关系;HMBC(异核多重键键相关谱):可以显示1H、13C之间远程偶偶合的信息息，即相隔隔二键和三三键的1H、13C之间相关信信号;解析化合物物中存在的的结构单元元，推测化化合物中各各官能团、、结构单元元之间的连连接关系;19F、31P等:可提供相应应元素的种种类及数目目、在分子子中所处的的化学环境境等信息;常用的二维维核磁共振振测试包括括H-Hcosy（H-HCorrelatedspectroscopy）、HMBC（1H-detectedmultiple-bondheteronuclearmultiple-quantumcoherence）、HMQC（1H-detectedheteronuclearmultiple-quantumcoherence）等，对于于结构复杂杂或用一般般NMR方法难以进进行结构确确证的化合合物，进行行二维谱测测试可更有有效地确证证药物的结结构。碳谱注意点点：1.碳信号数目目比实际的的少，原因因可能为信信号重叠，，或有些季季碳信号弱弱，或隐藏藏在溶剂信信号内；2.碳信号数目目比实际的的多，原因因可能是某某些化合物物存在构象象异构。分子式：C44H69NO12.H2O结构式为C44H69NO12，在其13C全去偶谱中中应显示44个峰，但实实际显示多多达83个峰，这是是因为在溶溶剂中有两两种构像,一种为优势势一种为劣劣势，（文文献报道在在氯仿中比比例为3:1）6.质谱(MS)①基本原理：：将气体分子子经电子流流轰击,使分子中的的电子成为为带正电荷荷的分子离离子,而后裂解成成一系列的的碎片离子子,再通过磁场场使不同质质荷比的正正离子分离离并记录其其相对强度度,画出质谱图图。②主要应用：：提供分子离离子峰、碎碎片峰、丰丰度等信息息，可以确确定分子量量、分子式式以及推测测部分结构构单元。对含有同位位素元素(如Cl、Br等)的药物,利用同位素素簇的丰度度比，可推推断药物中中部分元素素的种类、、数量，乃乃至分子式式、裂解方方式等。③技术要求:a.应尽量设法法获得化合合物分子离离子峰。当当用EI法不能出现现分子离子子峰时，可可试用其它它电离源，，如CI，FAB，FI，FD，ESI等。b.所获数据按按规定列表表，并对重重要的碎片片离子峰的的产生进行行解释，提提供离子裂裂解图。c.高分辨质谱谱不能反映映药品的纯纯度和结晶晶水，结晶晶溶剂，残残留溶剂的的情况。④资料撰写格格式仪器测试条件数据表裂解图解析M/Z

相对丰度

碎片离子7.热分析①基本原理：：采用程序控控温下，精精确记录待待测物质理理化性质与与温度的关关系，研究究其受热过过程中晶型型转变、熔熔融、升华华等物理变变化和脱水水、热分解解、氧化、、还原等化化学变化。。②主要应用：：