药本免疫球蛋白课件

免疫球蛋白

1890年，Behring和北里在德国Koch实验室从豚鼠体内发现了第一种抗体：白喉抗毒素，从而挽救了成千上万的白喉患儿，使死亡率从60%降到26%。获1901年的第一届诺贝尔奖。抗体的发现免疫球蛋白的发现ImmuneseraNormalsera

免疫球蛋白的分子结构——***基本结构

Ig的基本结构是“Y”形四肽链

两条相同轻链二硫键连接两条相同重链

即Ig单体（一）重链和轻链重链（heavychain,H）：450～550个氨基酸残基

***分为：γ、α、μ、δ和ε链，对应的五类Ig分别为IgG、IgA、IgM、IgD、IgE。轻链（lightchain,L）：210个氨基酸残基

***分为κ、λ链，将Ig分为两型：κ、λ型

一个天然Ig的L链型别总是相同的，同一个体存在

L链是κ或λ链的抗体分子。免疫球蛋白的基本结构（二）**可变区和恒定区可变区（Variableregion，V）

VH：H链近N端1/4～1/5

VL：L链近N端1/2恒定区（constantregions，C）

CH：H链C端3/4～4/5包括CH1～CH4CL：L链C端1/2

高变区（hypervaribleregion，HVR）或互补决定区(complementarydeterminingregion,CDR)：即VH和VL各含有3个氨基酸组成和排列顺序高度可变的区域。组成Ig的抗原结合位点，识别并结合抗原。骨架区（Frameworkregion，FR)CDR以外的区域，维持高变区的空间构型。

FR1CDR1FR2CDR2FR3CDR3

FR4V区**高变区和骨架区高变区抗体的特异性（Theantibody,amoleculewithmanyfaces）（三）*铰链区（Hingeregion）

位置：CH1和CH2之间特点：富含脯氨酸，易伸展弯曲，改变两臂间距离

存在于IgD、IgG、IgA功能：①有利于Ab与Ag的结合；②有利于Ab与补体的结合（四）***结构域（domain）或功能区概念：Ig分子的H链和L链通过链内二硫键折叠成的环形结构。每个结构域一般具有相应的功能。VH+VL结合抗原CH1+CL同种异型的遗传标记(IgG)CH2(IgM)CH3补体的结合位点(IgG)CH3结合FcR(M、中性粒细胞、NK)(IgE)CH2+CH3结合FcR(肥大细胞，嗜碱性粒细胞)与抗原结合的部位同种异型遗传标记补体结合位点结合FcRIgG、IgA和IgD有四个功能区；IgM和IgE有五个功能区VH、CH1、CH2、CH3CH42.*分泌片（SecretoryPiece，SP)来源：黏膜上皮细胞合成分泌化学组成：糖肽链。作用：只存在于sIgA中a.帮助sIgA穿越黏膜b.保护sIgA免受蛋白酶的水解作用JchainSPSIgA二、其他成分——J链和分泌片2.胃蛋白酶（pepsin）水解片段水解部位：重链链间二硫键近C端水解片段：1个F(ab’)2片段：结合Ag（双价）pFc’片段：无生物学活性胃蛋白酶pFc’F(ab´)22价三、***水解片段二、内源因素所致的异质性免疫球蛋白既可结合抗原，又可作为抗原，激发机体的免疫应答，因而也是一类抗原物质。利用血清学方法测定和分析免疫球蛋白抗原性予以分类，称为免疫球蛋白的血清型。Ag1Ab1（Ag2）Ab21.同种型（isotype）同一种属所有个体的Ig分子共有的抗原表位，为非遗传性标志。表位存在于Ig的C区，表现在Ig的类、亚类，型和亚型上。类：在同一种属所有个体内，根据重链C区抗原特异性将Ig分为五类。亚类：同一类Ig中，根据重链抗原特异性及二硫键数目和位置不同分为亚类；IgA有2个；IgG有4个；IgM有2个。型：在同一种属所有个体内，根据IgL链C区抗原特异性不同，分为两型：κ型、λ型。亚型：同一型Ig中，根据轻链C区N端氨基酸排列的差异又分为亚型。免疫球蛋白的分类3.独特型（idiotype，Id）指每个Ig分子所特有的抗原特异性标志，其表位又称为独特位。表位存在于V区。

***免疫球蛋白的生物学功能V区特异性识别、结合抗原（中和作用；阻止细菌黏附）

C区激活补体经典途径和旁路途径细胞亲嗜性：调理作用；介导ADCC；介导Ⅰ型超敏反应介导穿越胎盘和黏膜：IgG；SIgAIgV区的功能：特异性识别、结合抗原中和作用IgC区的功能——激活补体细胞亲嗜性调理作用：指抗体促进吞噬细胞吞噬细菌等颗粒性抗原的作用。抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用（antibodyDependentcell-mediatedcytotoxicity，ADCC）

是指表达FcR的细胞通过与抗体的Fc段结合直接杀伤被抗体包被的靶细胞。介导Ⅰ型超敏反应：参与抗体为IgEIgG含量最高，半衰期最长是抗菌、抗病毒、抗毒素的主要抗体是再次体液免疫应答产生的主要抗体。唯一能通过胎盘的抗体。激活补体、调理作用、ADCC作用***各类Ig的主要特性和作用IgM

分泌型为五聚体，分子量最大。是个体发育中最早合成的抗体。是体液免疫应答中最早产生的抗体经典途径激活补体的能力最强天然血型抗体为IgM

单体IgM是BCR之一IgA血清型：单体，主要存在于血清中分泌型（SIgA）：二聚体，主要存在于乳汁、唾液、泪液以及呼吸道、消化道和泌尿生殖道黏膜表面。是粘膜局部抗感染的主要抗体。婴儿可从母乳中获得sIgA，是重要的自然被动免疫IgD膜型IgD（

mIgD）是B细胞成熟的标志mIgMmIgD成熟B细胞活化B细胞未成熟B细胞IgE血清中含量最低，半衰期最短参与Ⅰ型超敏反应参与抗寄生虫免疫**人工制备抗体1.多克隆抗体（polyclonalantibody）天然抗原具有多种表位，每一种表位都可激活一个B细胞克隆，由其产生针对该表位的抗体。因而天然抗原进入机体，刺激机体产生的抗体是针对不同表位的混合抗体。优点：来源广泛，制备简单缺点：特异性不高，常出现交叉反应；同时不易大量制备。

带有多个表位抗原针对不同表位的B细胞克隆增殖多种抗体的混合物（多克隆抗体）刺激小鼠2.单克隆抗体（monoclonalantibody，mAb）

Kohler和Milstein于1975年建立体外细胞融合技术，获得针对单一抗原表位的高特异性抗体。GeoregesKohler(1946-1995)CesarMilstein(1927-2002)

2.单克隆抗体概念：由单一B细胞克隆所产生的，只作用于某一特定抗原表位的均一抗体。优点：结构和组成高度均一；抗原特异性及同种型一致；易于大量制备和纯化；纯度高，特异性强，效价高，少或无交叉反应。缺点：需要一定技术，杂交瘤技术和单克隆抗体技术；均为鼠源性抗体。应用：作为诊断试剂用于血清学检查；治疗自身免疫病和抑制移植排斥反应；治疗肿瘤的生物导弹。3.基因工程抗体(geneticengineering

antibody)应用DNA重组技术和蛋白质工程技术，按人类意愿在基