生化基础知识-比色法_第1页
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文档简介

比色法原理(分光光度法)第一页，共二十五页。多么美丽五彩斑斓的春天啊第二页，共二十五页。为什么上述溶液呈现不同的颜色？第三页，共二十五页。自然光-赤橙黄绿青蓝紫第四页，共二十五页。波长决定颜色第五页，共二十五页。光谱-连续不同波长光的集合第六页，共二十五页。物质对不同波长光的选择性吸收第七页，共二十五页。由于物质对不同波长光的选择性吸收而引起，物质呈现的是被吸收颜色的互补色。单色光互补光复色光第八页，共二十五页。现在知道她的秘密了吗？第九页，共二十五页。脑筋急转弯1、红光照射红色溶液，看透过什么色？2、红光照射绿色溶液，看透过什么色？第十页，共二十五页。透光度（透射比）Transmittance透光度定义：T取值为0.0%~100.0%全部吸收T=0.0%全部透过T=100.0%吸光度定义：第十一页，共二十五页。T、A与颜色的关系－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－透光率（T）吸光度（A）－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－10.0000.750.1250.50.3010.250.6020.170.7700.11.0000.051.3010.012.0000.0013.000－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－？第十二页，共二十五页。测量物质光吸收的装置-比色计第十三页，共二十五页。比色计或分光光度计第十四页，共二十五页。物质的光吸收曲线-定性分析第十五页，共二十五页。吸光度与光径的关系第十六页，共二十五页。吸光度与浓度的关系第十七页，共二十五页。朗伯-比尔定律：A=-lgT=KCL第十八页，共二十五页。透光度（transmittance，T，透射率）T＝It/I0吸光度（absorbance，A）光密度（opticaldensity，D或OD）A＝-lgT＝lgI0/ItLamb-beer定律：A＝KCLK为吸光系数，C为浓度，L为光径cm摩尔吸光系数ε:当C＝1mol/L，L＝1cm，A=ε第十九页，共二十五页。比色定量——与标准浓度物质溶液比较第二十页，共二十五页。目视比色法观察方向空白c1c2c3c4第二十一页，共二十五页。比色计或分光光度计第二十二页，共二十五页。比色法成立的基础有色或有吸收单色光第二十三页，共二十五页。比色法郎伯-比尔定律物质的选择性光吸收光美丽的大自然第二十四页，共二十五页。内容梗概比色法原理。由于物质对不同波长光的选择性吸收而引起，物质呈现的是被吸收颜色的互补色。透光度（透射比）Transmittance。T取值为0.0%~100.0%。T=100.0%。－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－。10.000。0.11.000。0.012.000。0.0013.000。朗伯-比尔定律：A=-lgT=KCL。透光度（transmittance，T，透

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