葡聚糖气相红外分析

葡聚糖分析1单糖组成分析1.1薄层色谱法分析本品为灰树花倍他葡聚糖，样品经酸水解后可采用薄层色谱法进行单糖组成分析。照《中华人民共和国药典》（2005年版二部）附录VIB薄层色谱法进行测定，具体分析条件如下：少量水溶解备用。样品制备：取样品2mg溶于6mol/L的盐酸2mL中，装于安瓿瓶中封管，置于105^恒温水解1h，经浓缩后，冻十，少量水溶解备用。薄层板：Silicagel60F254plate2.4展开剂：正丙醇：水：氨水=60：30：2.4显色剂：苯胺一二苯胺甘露糖和木糖标准品对照品：半乳糖，阿拉伯糖，葡萄糖、甘露糖和木糖标准品上样：取水解液10uL用微量移液器进行点样本品的薄层色谱分析结果如下图3所示：图5图5：灰树花倍他葡聚糖的薄层色谱（No.1〜8分别为：半乳糖，阿拉伯糖，葡萄糖，样品1样品2，样品3，甘露糖，木糖）测定结果：灰树花倍他葡聚糖经水解后，用TLC法检查，只在葡萄糖标准品位置上出现一个斑点，表明本品只含有葡萄糖。1.2气相色谱法分析本品为灰树花倍他葡聚糖，样品经衍生化处理后可采用气相色谱法进行单糖

组成分析。照《中华人民共和国药典》（2005年版二部）附录VE气相色谱法进行测定，具体分析条件如下：仪器：HP5890II型气相色谱仪，美国安捷伦公司。样品制备：采用糖腈乙酸脂法进行衍生化，取水解干燥后的样品5mg，加入10mg盐酸羟胺和5mg肌醇，加入0.5mL毗啶，封口后于90°C下加热反应30min，间或振荡。取出后冷却全室温，加入0.5mL醋酸酎，90C下继续反应30min，反应产物直接进气相色谱分析。色谱条件：色谱柱为AC225（30mX0.25um）柱温215C，进样口温度270C，检测器温度270C。本品的气相色谱分析结果如下图6所示：mV-80.00-LJD72.00-64.00-56.00-4S.00-40.00-3结果J显示:为葡聚糖。24.00-图6：6-葡糖糖中单糖组本品的气相色谱图上只检测到单一的葡萄糖峰，可以确定本品2红外光谱（成气相色谱定糖苷键定向及多勾象又对多糖活性的发挥起着IR3结果J显示:为葡聚糖。24.00-图6：6-葡糖糖中单糖组本品的气相色谱图上只检测到单一的葡萄糖峰，可以确定本品2红外光谱（成气相色谱定糖苷键定向及多勾象又对多糖活性的发挥起着IR)多糖的a或6构型是糖空间构象的重要因素之一，而多分重要的作用。通过红卜光谱可以区分糖的空间彳葡聚糖的a或6构型。在红外光谱上，6端基C-H的变角振动吸收峰约在895cm-1处，，而a-毗喃构型葡聚糖的特征吸收约在8叫成芽处沽品的红外光谱分析条件如下:仪器型号：用NicoletNexus470FT-IR型付立叶红外光谱仪进行测定。仪器校正：参考2000年中华人民共和国药典二部附录IVC（附录27页）方法进行。

样品制备：样品为固体，米用KBr压片法，取0.5〜2mg样品研细后，加入100〜200mg干燥KBr粉末，研细，在7〜10吨/cm2压力下，压成透明薄片进彳亍测试。本品的红外光谱如图8所示：25ZS80L8S.9Z0L25ZS80L8S.9Z0L4000300020001000Wavenumbers(cm-1)图8：灰树花倍他葡聚糖的红外光谱从本品的红外光谱图中可以看出，本品在895cm-1波数附近有弱的特征吸收峰，表明本品为灰树花倍他葡聚糖。本品的红外光谱图各吸收峰解析如下：糖类分子中含有大量-OH基，O-H伸缩振动多在3200-3600cm-1之间出现强而宽吸收峰，本品在3410cm-1有强吸收，为灰树花倍他葡聚糖O-H伸缩振动峰；糖环中C-H吸收较弱，一般在3000-2800cm-1以及在1400cm-1左右出现C-H变角振动弱吸收峰，本品在2889cm-1和1412cm-1出现弱吸收，分别为灰树花倍他葡聚糖C-H伸缩振动峰和变角振动吸收；多糖类物质有时在1600-1650cm-1附近出现吸收，该吸收属于分子含有P-糖苷键以及微量水分缔合羟基吸收造成，本品在1633cm-1出现吸收，为样品中6-糖苷键吸收以及微量水中缔合-OH吸收。O-H变角振动在1040-1160cm-1之间出现强吸收峰，本品在1043，1076和1159cm-1有三个吸收峰，为毗喃葡聚糖中O-H变角振动特征吸收峰(吠喃糖环此区域只有2个吸收)；多糖分子中a-和6-差向异构体中C-H变