系统性红斑狼疮的治疗IL-6课件

系统性红斑狼疮的治疗一.立项依据研究背景国内外研究现状二.研究方案研究目标研究内容拟解决的关键问题三.实验特色和创新流程一、研究背景二、研究目标三、研究方法及结果四、拟解决的关键问题六、实验意义与展望目录五、实验特色与创新IL-6是一种由单核/巨噬细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞、角质细胞、Th2细胞和B细胞产生的细胞因子。主要生物学活性包括：促进B细胞增殖分化和产生抗体；促进CTL、NK的分化并增强杀瘤活性；促进肝合成急性期蛋白；作为内源性致热源，参与炎症反应。

IL-6简介：IL-6异常与系统性红斑狼疮：SLE病人的B细胞可自发产生大量IL-6，而正常人的B细胞几乎不产生IL-6。在SLE病人中，B细胞主要由IL-6刺激分化与增殖。SLE病人B细胞同时表达IL-6高亲和力受体（IL-6Receptor,IL-6R），组成一个自分泌刺激环，促使B细胞多克隆活化。IL-6还能诱导SLE病人B细胞产生抗DNA抗体，这是SLE的特征抗体之一[1]。IL-6的简要致病机理如下图：IL-6与系统性红斑狼疮B细胞抗DNA抗体反转录病毒（Retrovirus）

反转录病毒的病毒特衞其基因组是双组+RNA,病毒含有RNA-DNA聚合酶亦即反转录酶作为复制之用。近年来，科学家已设计构建成一些缺陷型病毒（defectivevirus），使逆转录病毒成为有用的基因载体，成功地把抗药性基因转入了人体造血前体细胞，并在细胞中表达。科学家选用了缺失编码病毒外壳蛋白基因的逆转录病毒，因此不能合成自身的外壳，但它有识别外壳蛋白进行包装的信号（一段尚未鉴定的DNA顺序）。用这种缺陷的逆转录病毒去感染某种细胞株，这种细胞株包含有辅助病毒（helpervirus）。辅助病毒能合成蛋白外壳，但缺失了识别蛋白外壳进行包装的信号，因此它不能包装成病毒颗粒。当用逆转录病毒感染细胞株后，逆转录病毒的RNA进入辅助病毒的外壳蛋白，成为病毒颗粒。这时把受感染的细胞同骨髓细胞一起培养，包装在辅助病毒外壳蛋白中的逆转录病毒RNA，进入骨髓细胞，病毒DNA插入宿主细胞基因组，基因的活性得到表达。这时，由于骨髓细胞里面没有辅助病毒，所以整合进宿主基因组的逆转录病毒，不再有外壳蛋白可供包装，因此也就无法增殖，而只能被“陷”在宿主基因组中，通过细胞分裂而传给下一代子细胞。三、研究方法与结论技术路线：（1）将抑制IL-6基因表达的反式作用因子的基因转入腺相关病毒中。（2）用病毒感染SLE的浆细胞，检测转录是否成功。（3）检测被感染细胞IL-6的表达，验证实验是否成功。SLE血清中的IL-6对造血干细胞向DCs分化、发育及DCs功能的活化可能起促进作用。通过向靶细胞转染逆转录病毒si-RNA，可使靶细胞中IL-6基因的表达受到干扰，从而抑制IL-6基因的表达，有望达到预期目标，提高系统性红斑狼疮患者的治愈率。实验结论：四、拟解决的关键问题1.如何通过体外制备获得大量的针对性强的siRNA。2.siRNA在靶细胞体内的功能是否会受抑制。五、实验特色与创新

本方案从基因层次上对系统性红斑狼疮进行治疗，克服了药物治疗对人体其他正常细胞的损害。本实验利用siRNA使IL-6基因沉默，以兼性逆转录病毒为载体，将所获得的siRNA转染靶细胞，针对性治疗系统性红斑狼疮。

六、实验意义与展望随着人类对疾病认识的逐渐深入，越来越多的疾病可以归因为基因异常。针对特定基因进行基因治疗，既可以避免传统药物特异性差、副作用大的缺点，又可以解决传统药物设计周期过长、蛋白质药物（如利妥昔单抗等细胞因子）成本过高普及困难的问题。

SLE是一类严重危害人类健康的自身免疫病，且疾病高发人群往往是年轻女性，目前以糖皮质激素为主导的药物治疗方案有效性固然毋庸置疑，但糖皮质激素副作用大（发胖、导致骨质疏松、增加高血脂心脏病患病风险），细胞毒性药物特异性差，本病对患者生存质量的影响依旧不可忽