生化分析-2气相色谱分析法

第二相色谱gas ysis第一 气相色谱gaschromatographic一、气相色谱仪gaschromatographic岛津新气相色谱仪系统gc-2002 化学分开子发三出维了结用构来的确核定磁溶共发明了对生物大分子进行质谱分析方 振技术大agilent安捷伦6820气相色谱GC-MS气质联用二、气相色谱结构流processofgas1-载气钢瓶2-减压阀3-净化干燥管4-针形阀5-流量计6-压力表7-气化室8-色谱柱9-检测器10-放大器11-温度控制器12-记录气相色谱由以下几个主要部分构成记录系检记录系检测系分离系进样系气路系温控系三、气相色谱仪mainassemblyofgas气路系常用的载气有氢气、氮气、氦气、氩气，一般由相应的高压钢瓶供给；载载气的作用：作为动力，驱动样品在色谱柱中流动，并分离后的各组分推进检测净化干燥管（净化器提高载气纯度的装置。载气的净化要求主要取决于所用的色谱柱、检测器和分析项目。水分会影响气固色谱吸附剂的活性和 ，也会影响部分气液色谱固定液的分离效率，所以要将水分从载气中除；影响检测器灵敏度的杂质如微量烃类、氧通常是一根金属或塑料制成的管子，串联在气路里，管内装有不同的净化剂，如：硅胶、分子筛可除去水分；活性炭除去烃类杂质；N2、Ar中微量氧用脱氧剂除去。载气流速控进样系统：包括进样器及气化室作用：转移到色谱柱中，以便进行分离。进样液体试样的进样，一般都采用微量注射器，常用规格：1μL，5μL，10μL，50μL等。不同规格的注射器，填充柱色谱常用10L；毛细管色谱常用器，、润冲、取样、进样、换样等过程自动完成，一次可放置数气体试样的进样，常采用色谱仪本身配置的六通阀进样。该法进样重现性好，体积相对误差小。试样首先充满定量管，切入后，载气携带定量管中的试样气体进入分离柱。试样首先充满定量管，切入后，载气携带定量管中的试样气体进入分离柱。六通阀进样器是色谱系统中最理想的进样器，它是由圆形密封垫(转子)和固定底座(定子)组成。当在充样(Load)位置时，从进样孔充样进定量环，多余样品从放空孔排出；转动至进样(Inject)位置（2）气化室（样品注射室而不分解，避免气化过而不分解，避免气化过程长而影响色谱峰形。要求密封性好、体积小、热容分离系分离系统包括色谱柱和色谱炉（柱箱，混合物中各组分的分离在这里完成，是(1作用：分离,色谱仪 部件色谱柱主要有两类：色谱填充由不锈钢、铜或玻璃材料制成，内装固定相，一般内径2~4，长1~10。形状有型和螺旋型两种。螺旋直径与柱内径之比一般为15：1到25：1。毛细管又叫空心柱，是在内壁涂一层固定液，或涂一层已有固定液的载体（约m厚），内径00m，长0，由不锈钢或玻璃制成。总体上讲，空心毛细管柱渗透性好，分离效率高，分析速度快。但柱容量低，进样量小（不到μL），要求检测器灵敏度高。检测系作用：测量的电信号。随时间的变化，转化成相应电信号，经放大后记录和显示，给出色谱图；理想检测器：响应快、灵敏度高、噪声低、线性范围宽，对各种物质均有响应，对流速和温度变化不敏感。温度控制系温度是色谱分离条件的重要选择参数气化室、色谱炉、检测器三部分在色谱仪操作时均需控制和测量温度；度比柱温高10~50。检测器温度：保证被分度比柱温高10~50。检测器温度：保证被分离后的组分通过时不在此冷凝，控温精度要优0.1程序升温：适用于沸点范围很宽的混合物，指在一个分析周期内柱温随时间由低到高作线性或非线性变化，以使沸点不同的组分分别在其最佳柱温出，从而改善分离效果，缩短分析记录系作用：自动记录由检测器输出的电信号。配备微处理机的色谱仪还可以自动控制色谱仪操作过程。第二气相色谱固定stationaryphasesingas

一、气固色谱固定stationaryphasesGas-solid二、气液色谱固定stationaryphasesgas-liquid一、气固色谱固定相-固体吸附 常用固体吸附--活性炭：有较大的比表面积，吸附性较活性氧化铝：有较大的极性。适用于常温下O2、N2、CO、CH4、C2H6、C2H4等气体的相互分离。CO2能被活性氧化铝硅胶：与活性氧化铝大致相同的分离性能，除能分析上述物分子筛：碱及碱土金属的硅铝酸盐（沸石），多孔性。除了广泛用于H2、O2、N2、CH4、CO等的分离外，还能够测定、Ne、Ar、NO、N2O人工合成固体吸附如国内的X型高分子多孔微球，国外oapak系列等。以苯乙烯或乙基苯乙烯为单体，二乙烯基苯为交联剂共聚而成，其孔径大小及表面性质可控。特点可直接作为固定相使用，也可作为载体在表面涂渍固定液使色谱柱容易填充均在直接用作固定相时，无液膜存在，也就没有流失问题、腈类、胺类分固体吸附气固色谱固定相的特性能 和活化条件有很大关系同一种固定相，不同厂家或不同活化条件，分离效果差异较大；种类有使用方二、气液色谱固stationaryphasesingas-liquid气液色谱固定相[固定液+载体（担体、支持体）]就是将固定液均匀地涂到载体上而构成的载体为固定液提供大的惰性表面，以承担固定液，使其形成薄而均匀的液膜，以加大与流动相接触的表面积。1载体的一般要求比表面积大，孔径分布均匀化学惰性，表面 附性或吸附性很弱，与被分离组份颗粒大小均匀、适度。一般常用60~80目、80~100载体种类及性：：由于表面难以润，这类担体常用于特殊的分析应用范围不如硅藻土类担体广泛硅藻硅藻土载体的预处硅藻土载体的预处理方固定液---高沸点难挥发的有机化对固定液的要在使用温度下为液体，热稳定性及化学稳定性，好不与被分离组分发生不可逆的化学反应；粘度和凝固点低，以便在载体表面均匀分布低于“最高使用温度”，高于“最低使用温度”；组分有足够的分离能力。把具有相同官能团的固定液排在一起，然后按官能团类型不同分类，便于按组分与固定液“结构相似”原则，选择固定液时参考。在各种色谱手册中，一般将固定液按有机化合物的分类方法分为：脂肪烃、芳烃、醇、酯、聚酯、胺、聚硅氧烷等。按固定液的相对极性分规定：非极性固定液角鲨烷（异三十烷）的相对极性强极性固定液β,β’-氧二丙腈的相对极性相对保留值，根据它们的对应关系

100 s非弱 第三气相色谱条件的selectionofoperating

谱柱及使用条件chromatographicandchoiceofoperating二、其它操作条件的选choiceofother谱柱及使用条件的选固定液的选择---“相似相溶物质溶解性能的规律，即溶质和溶剂性质相似时，易于相互溶解。是选择固定液的基本原则。C中指被分离组分与固定液之间有某些相似性（极性、官能团、化学性质等），则组分分子与固定液分子间作用力强，组分在固定液中溶解度大，分配系数大，保留时间长，易于相互分离。反之，则分子间作用力小，溶解度小，分配系数小，不利于相互分离。②分离极性组分时②分离极性组分时，一般选用极性固定液。各组分按极①分离非极性组分（烃类）时③分离非极性和极性的混合物，一般选用极性固定液。④对于组成复杂、较难分离的试样当各组分的沸点差别大时，选非极性固定液，低沸点先出当各组分间极性差别大时，选极性固定液，极性小固定液配比（涂渍量）配比：固定液在担体上的涂渍量，一般指的是固定液与担体的百分比，配比通常在5%～25%之间配比越低，担体上形成的液膜越薄，传质阻力越小，柱效越高，分析速度也越快。分析工作中通常倾向于使用较低的配比。配比较低时，固定相的负载量低，允许的进样量较小。柱长和柱内径的选柱长的选用原则是在能满足分离目的的前提下，尽可能选。增加色谱柱内径，可以增加分离的试样量，但由于纵向扩散路径的增加，会使柱效降低。在一般分析工作中，色谱柱内径常为36。柱温的确相和液相中的传质过程，减小传质阻力，提高柱效。但提高柱温也加剧了分子的纵向扩散，又会导致柱效降低。应使柱温控制在固定液的最高使用温度和最低使用温度范围之内。柱温一般选择在接近或略低于组分平均沸点时的温柱温一般选择在接近或略低于组分平均沸点时的温度对于沸程宽的多组分混合物，可用程序升温法柱温宜高。既要高的分离度，又要缩短分析时间，在实际作中常采用较低的固定液配比与较低柱温相结若分离是主程序升它操作条件的选choiceofotheroperating进样方式和进样量的选液体试样采用色谱微量进样器进样，规格有1µL,5µL,10µL等。测范围内。一般液体试样约0.1~5mL,气体试样0.1~10mL,进样要求动作快、时间短。气体试样应采用气体进样阀进样气化温度的选完全气化，又不引起样品分解。气化室温度一般比柱温高30～70或比样品组分中最高沸点高～。第四气相色谱应用技applicationtechnologyofgaschromatograph

一、裂解气相色谱技与应applicationandtechnologyofpyrolysisgaschromatograph二、顶空气相色谱技与应applicationsandtechnologyofheadspacegas一、裂解气相色谱的原理与应裂解气相色谱（pyrolysisgas——热裂解和气相色谱一些分子量较大、结构复杂、难挥发、难溶解的物分析鉴定方法。热裂解+气相色谱+质谱（红外、核磁）技术——研究高分子化合物的有力工具在高分子、生物医学、环境科学、考古学、地球化学、矿物 、 等领域有广泛应用。基本原理及方基本原理在一定条件下，高分子及非挥发性有机化合物遵循一定的裂解规律，即特定的样品能够产生特征性的裂解产物及产物分布，采用气相色谱分析、鉴定裂解产物，据此可对原样品进行表征。方法样品置于裂解器中，在严格控制的条件下，快速加热，使之迅速分解成为可挥发的小分子产物，然后直接将裂解产物送入色谱柱中进行分离，获得定性定量数据。特点分离效率高灵敏度高，样品用量少分析速度快信息量裂解机理、热稳定性、相关的反应动力学研究适合于各种形态样品，且一般不需预处粘稠液体、粉末、薄膜、纤维及弹性体， 树脂、涂设备简对裂解器的要裂解反应控裂解温度的精确控制(裂解温度不同，裂解产物不同)；可重复进行；裂解温度范围可不同物质需要不同的裂解温度400-1500裂解器与接口的体积减小死体积对裂解反应无催化反二、顶空气相色谱的技术与应appl